导读:本文包含了甲基化沉默论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:前列腺癌,DNA甲基转移酶1,谷胱甘肽S转移酶P1,矮小同源盒基因2
甲基化沉默论文文献综述
邢红宇,朱明月,郑俊,吴翔,郑才玲[1]（2019）在《DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响》一文中研究指出目的探讨siRNA技术沉默DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因表达对前列腺癌细胞(LNCap)增殖、凋亡的影响,初步分析其对谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、矮小同源盒基因2(SHOX2)、凋亡相关蛋白激酶(DAPK)甲基化状态的影响。方法体外培养人前列腺癌细胞LNCap、正常前列腺上皮细胞RWPE-1,采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)及蛋白印迹(WB)检测细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平。实验分为3组:空白对照组(未经任何处理LNCap细胞); si-NC组(转染DNMT1阴性对照质粒的LNCap细胞); si-SH2B1组(转染si-DNMT1的LNCap细胞)。采用CCK-8法检测叁组细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平。采用甲基化特异性PCR (MSP)检测GSTP1、SHOX2、DAPK基因甲基化状态; qRT-PCR与WB法分别检测各组LNCap细胞DNMT1、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达情况。结果与正常组细胞相比,前列腺癌组细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显着升高(P <0. 05);si-DNMT1组DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显着低于空白对照组、si-NC组(P <0. 05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组LNCap细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达水平均显着升高(P<0. 05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组GSTP1、DAPK、SHOX2基因甲基化水平均显着降低(P <0. 05)。结论沉默DNMT1基因后可明显抑制LNCap细胞增殖并促使其凋亡,其可能通过逆转GSTP1、DAPK、SHOX2甲基化状态并上调其表达而发挥作用。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年10期）
苏全武,胡波[2]（2018）在《补气通络解毒方对胰腺癌模型小鼠肿瘤高甲基化基因1、沉默信息调节因子、Shh蛋白浓度的影响》一文中研究指出目的观察补气通络解毒方对胰腺癌模型小鼠肿瘤高甲基化基因1(HIC1)、沉默信息调节因子(SIRT_1)、Shh蛋白浓度的影响。方法将30只裸鼠随机分为3组各10只,采用癌细胞种移植法造模。造模成功后,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组给予补气通络解毒方灌胃,连续14 d。治疗结束后,处死裸鼠,取出瘤组织,以WB法检测各组标本的HIC1、SIRT_1、Shh蛋白浓度。结果 3组HIC 1、SIRT 1、Shh蛋白浓度比较有显着差异(P<0.05)。结论补气通络解毒方对模型小鼠HIC1、SIRT_1、Shh蛋白浓度有调节的作用。(本文来源于《实用临床医药杂志》期刊2018年17期）
于孟飞,王文璐,易建明[3]（2018）在《siRNA沉默DNA甲基化转移酶1基因干扰胎牛成纤维细胞增殖和凋亡（英文）》一文中研究指出为阐明Dnmt1-siRNA对胎牛成纤维细胞(FBFCs)的影响,设计了3种针对Dnmt1的siRNA来转染FBFCs.结果显示:Dnmt1-siRNA3转染FBFCs 24,48,72 h后,Dnmt1 mRNA表达水平显着降低(P<0.01).在转染后48 h,siRNA3对Dnmt1抑制效率达到近80%,Dnmt1-siRNA3处理的FBFCs增殖也受到显着影响,FBFC细胞活力下降、处于G0/G1过渡期细胞数量增多(P<0.05).但Dnmt1-siRNA3组FBFC细胞的凋亡率也显着增加(P<0.05).说明通过Dnmt1特异性siRNA能够有效地敲低FBFC中的Dnmt1 mRNA表达量,由于细胞周期分布变化,siRNA处理后FBFC作为核供体能提高SCNT的效率.(本文来源于《中南民族大学学报(自然科学版)》期刊2018年02期）
伍刚[4]（2017）在《乙肝病毒X蛋白通过DNA甲基化沉默肝癌中miR-338表达》一文中研究指出目的将HBx相关的DNA甲基化和非编码RNA异常变化联系起来,研究二者是否存在相互作用.方法利用高通量芯片及qRT-PCR证实HBx在肝癌细胞和组织内下调miR-338表达.通过系列蛋白/mRNA/表达分析,启动子甲基化检测来研究HBx下调miR-338的机制.结果芯片及qRT-PCR显示HBx在肝癌细胞和组织内下调miR-338的表达.HBx在HepG2肝癌细胞内显着上调DNMT 1和DNMT 3A的表达.HBV阳性肝癌组织中miR-338启动子甲基化程度显着高于癌旁正常组织,去甲基化处理能挽救肝癌细胞中miR-338表达.结论HBx在体内外显着抑制肝癌中miR-338表达并上调肝癌细胞中DNMT 1和DNMT 3A表达.miR-338启动子过甲基化是其沉默的内在机制.(本文来源于《昆明医科大学学报》期刊2017年11期）
李亚林[5]（2017）在《探讨siRNA沉默DNMT1、DNMT3b对前列腺癌NDRG1基因甲基化及表达的影响》一文中研究指出目的探讨siRNA沉默DNMT1、DNMT3b对前列腺癌NDRG1基因甲基化及表达的影响。方法以脂质体Lipofectamine 2000为载体,分别转染DNMT1-siRNA、DNMT3b-siRNA、DNMT1-siRNA+DNMT3b-siRNA至DU145细胞,通过基因测序检测各组细胞中NDRG1基因CpG岛的甲基化程度,使用qPCR、Westernblot、CCK8增殖实验、Annexin V细胞凋亡检测、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验等方法,检测DNMT1、DNMT3b和NDRG1基因的表达情况及细胞生物学行为的改变。结果与空白组和NC组相比,siRNA显着抑制了DNMT1和DNMT3b表达,降低了NDRG1基因CpG岛的甲基化程度,上调了NDRG1基因表达,抑制了DU145细胞增殖,促进了细胞凋亡,减弱了细胞迁移及侵袭能力,其中DNMT1-siRNA组效果最显着,联合转染未见显着协同效应。结论siRNA可显着抑制DNMT1和DNMT3b基因表达。抑制DNMTs可降低NDRG1基因CpG岛的甲基化程度,上调NDRG1表达,进而抑制DU145细胞增殖,促进细胞凋亡,减弱细胞迁移及侵袭能力,表明DNMT1和DNMT3b通过调节NDRG1基因甲基化在前列腺癌发生发展过程中发挥作用,其中DNMT1发挥主要作用。(本文来源于《第十二次全国中西医结合男科学术大会暨全国中西医结合男科诊疗技术研修班暨2017上海市中西医结合学会上海市中医药学会泌尿男科专业委员会学术年会讲义论文资料汇编》期刊2017-09-01）
赖俊忠[6]（2016）在《通过沉默DNMTs研究胃癌中RPRMDNA甲基化与基因表达的关系》一文中研究指出DNA甲基化是主要的表观遗传修饰之一,DNA异常甲基化导致疾病甚至是癌症的发生。因此对癌基因组学和表观遗传学的综合研究,是癌症相关机制研究的必然趋势。已有报道称在多种恶性肿瘤包括胃癌中都检测到RPRM启动子甲基化,而在胃癌血浆样本中也频繁检测到RPRM启动子甲基化。因此RPRM有可能成为早期胃癌检测的标志分子。另外,RPRM的功能我们还不是特别了解,而有报道称DNA甲基化是调控RPRM表达的可能机制。本课题在先前工作的基础上,优化了亚硫酸氢钠转化方法,并建立了完整的RPRM启动子甲基化检测方法。同时利用RT-PCR和qRT-PCR的方法检测了在不同样本中RPRM的mRNA表达情况。经过甲基化测序后的结果表明,相对于正常个体,胃癌病人的组织和血浆中都有着较高程度的RPRM启动子甲基化。与此同时,RPRM启动子甲基化程度高的样本RPRM不表达或者低表达,而甲基化程度低或者未检测到甲基化的的样本则有较高的RPRM表达。因此,实验结果表明RPRM启动子甲基化在胃癌中有着较高的特异性,RPRM的表达受DNA甲基化的调控。在确认了RPRM的表达受DNA甲基化的调控之后,运用去甲基化小分子药物也就是 DNMT(DNA methyltransferase)抑制剂 zebularine 处理 AGS 和 SGC-7901两种胃癌细胞系,以此来反向验证RPRM表达与DNA甲基化的关系,并了解zebularine对胃癌细胞的影响以及它对RPRM表达的影响。结果表明AGS和SGC-7901两种细胞系在一定浓度和时间的zebularine处理下,其RPRM启动子的甲基化程度明显降低,RPRM的表达显着提高。而zebularine不能抑制所有的DNA甲基转移酶,因此利用RNA干扰技术沉默了 DNMT1,D DNMT3A和DNMT3B来探究RPRM的表达情况与DNA甲基转移酶的相关性。研究发现,各种DNA甲基转移酶的低表达可以增强RPRM在AGS和SGC-7901两个细胞系中的表达,尤其是,DNMT3B表达的缺失会导致RPRM的高表达。(本文来源于《福建师范大学》期刊2016-06-05）
张弦[7]（2016）在《稳定沉默HPV16E6基因对宫颈癌SiHa细胞中E-cadherin高甲基化的影响》一文中研究指出目的:宫颈癌是我国最常见的妇科恶性肿瘤,不断威胁着女性的生命健康。人乳头瘤病毒16型(HPV16)被认为是宫颈癌最主要的外源性致病因素,其中E6癌基因在抑制细胞凋亡,干扰染色体稳定性,影响信号通路,以及免疫逃逸等方面起重要作用。E-钙黏蛋白(E-cadherin)是上皮细胞间粘附连接的重要分子,该基因表达沉默会引起上皮细胞表型和侵袭能力的改变。本课题组前期实验已证实,宫颈鳞癌组织中HPV16E6蛋白高表达与E-cadherin基因启动子区CpG岛高甲基化及E-cadherin蛋白表达下调有关。那么,HPV引起宫颈癌的发生发展是否通过E-cadherin基因启动子区甲基化的调节而致病仍有待研究。本实验通过构建HPV16E6基因shRNA慢病毒载体,感染宫颈癌SiHa细胞,筛选建立稳定细胞系,观察基因沉默后E-cadherin表达及基因启动子甲基化的情况,观察其细胞生物学功能。初步研究分析HPV16E6对E-cadherin基因高甲基化的作用机制,为宫颈癌的基因治疗寻找有效靶点。方法1、培养宫颈癌SiHa细胞系,构建HPV16E6基因shRNA慢病毒沉默载体质粒,转入感受态细胞获取阳性克隆,进行PCR扩增测序。将病毒载体共转染到293T细胞进行包装,测定病毒滴度,用嘌呤霉素筛选建立沉默稳转细胞系。2、设置shRNA E6沉默组、空载体组、空白对照组。RT-q PCR检测HPV16E6、E-cadherin mRNA表达情况,Western Blot检测HPV16E6基因沉默后蛋白表达情况,CCK-8法及划痕实验检测SiHa细胞增殖迁移能力,甲基化特异性PCR(MSP)检测E-cadherin基因启动子区CpG岛甲基化情况。结果1、测序结果证明已成功构建HPV16E6 shRNA慢病毒沉默质粒,荧光显微镜下观察可见绿色荧光,检测包装纯化后的慢病毒滴度为5×108TU/ml,经嘌呤霉素稳筛后shRNA E6组HPV16E6 mRNA水平较另两组明显下降(P<0.01),提示已成功筛选出稳转细胞系。2、shRNA E6组的E-cadherin mRNA及蛋白表达水平较另两组显着上调(P<0.01),而空载体组及空白组间差异无统计学意义,同时shRNA E6组SiHa细胞的增殖及迁移能力均较另两组明显减弱(P<0.05)。3、shRNA E6组SiHa细胞中的E-cadherin基因非甲基化扩增呈阳性,甲基化扩增产物强度较空载体组及空白对照组明显减弱,而空载体组及空白对照组SiHa细胞中的E-cadherin呈完全甲基化状态。结论1、成功构建的shRNA慢病毒沉默载体能够有效沉默HPV16E6基因表达。2、沉默HPV16E6基因上调宫颈癌SiHa细胞E-cadherin的表达水平,降低了SiHa细胞的增殖及迁移能力,同时下调E-cadherin基因启动子区甲基化水平,该甲基化状态的改变导致了E-cadherin重新表达。(本文来源于《南华大学》期刊2016-05-01）
涂艳阳,徐晓珊,张永生,成迎端[8]（2016）在《胶质瘤中甲基化沉默肿瘤抑制因子的研究进展》一文中研究指出肿瘤抑制基因(tumor suppressor genes,TSGs)的表观遗传沉默对胶质瘤的发生和发展至关重要.越来越多的与细胞周期、增殖、凋亡、迁移、浸润、DNA修复和信号通路密切相关的且被甲基化调控的TSGs被鉴定出来.TSGs在胶质瘤里特异性的甲基化表明其既可以作为分子诊断的标记物,也可能成为治疗胶质瘤的一个靶标.本研究对人脑胶质瘤中被甲基化沉默的TSGs进行了总结,这为理解胶质瘤发展过程中表观遗传学修饰的紊乱提供了依据.(本文来源于《转化医学电子杂志》期刊2016年02期）
Zhaobo,Lang,Mingguang,Lei,Xingang,Wang,Kai,Tang,Daisuke,Miki[9]（2016）在《甲基化结合蛋白MBD7促进DNA主动去甲基化防止基因沉默》一文中研究指出文章简介DNA甲基化是一种保守的表观遗传学标记,在多个生理过程中发挥着重要作用。DNA主动去甲基化酶ROS1可以去除特定区域的甲基化,维持一定的基因组甲基化模式。然而调控去甲基化特异性的分子机制并不清楚。本研究发现了植物中一个参与DNA主动去甲基化的抗沉默蛋白复合体。其中,甲基化结合蛋白MBD7可以识别基因组中高度CG甲基化区域,通过和两个小热休克类蛋白IDM2和IDM3相互作用,募集组蛋白乙酰转移酶IDM1。IDM1乙酰化组蛋白,形成一个有利于ROS1发挥功能的染色质环境。(本文来源于《科学新闻》期刊2016年01期）
黄海燕,高玮,陈雯,庄志雄,刘建军[10]（2015）在《PARG基因沉默在苯并芘诱导细胞甲基化水平改变中的作用》一文中研究指出【目的】探讨聚-ADP-核糖水解酶(PARG)基因沉默在苯并芘(BaP)诱导细胞甲基化水平改变中的作用及可能机制,为化学致癌的防治提供新的思路。【材料和方法】利用PARG基因缺陷人支气管上皮细胞(16HBE细胞)作为研究对象,通过检测BaP诱导人正常16HBE细胞及其PARG缺陷细胞(shPARG细胞)恶性转化过程中细胞基因组DNA整体甲基化水平、DNA甲基化酶的表达等指标的变化,比较两种细胞在BaP作用后DNA甲基化水平变化的差异,分析PARG基因沉默对DNA甲基化水平的影响;并进一步利用MeDIP-sequence技术筛选和分析特异甲基化基因,从分子水平上探讨PARG基因沉默在BaP致癌过程中的作用及可能机制。【结果】1、正常16HBE细胞经BaP梯度染毒处理1w,9w,15w后,荧光强度逐渐减弱,且随着染毒剂量的增加,染毒时间的延长,这种趋势更加明显;而BaP染毒处理的shPARG细胞中荧光强度变化不明显。高效毛细管电泳技术(HPCE)定量分析0、10、20、40μM BaP染毒15w后两种细胞的基因组DNA整体甲基化水平,结果发现各组甲基化率的变化趋势基本与免疫荧光分析一致。其中:正常16HBE细胞中,0、10、20、40μM剂量组甲基化率分别为43.10±0.13%、42.5±0.10%、29.91±0.10%;而shPARG细胞分别为45.23±0.27%、53.70±0.15%、57.08±0.07%。2、正常16HBE细胞中,DNMT1随着BaP染毒剂量的增加和染毒时间的延长呈现表达逐渐降低的趋势;在BaP处理1w、9w时,两种细胞内均未见MBD2、DNMT3b酶的表达改变;BaP染毒处理15w时,shPARG细胞中DNMT3b、MBD2的表达随着BaP染毒剂量的增加而逐渐增高,但正常16HBE细胞未见明显变化。3、通过分析两种细胞的MeDIP测序数据,发现基因EGFR、EGF、SOS1、UBA3、MAPK10、WNT2b、WNT5b可能参与BaP致癌,它们涉及的关键通路有:EGF受体信号通路、MAPK信号通路、Wnt信号通路以及泛素化介导的蛋白水解。【结论】BaP诱导16HBE细胞发生恶性转化过程中,EGF受体信号通路及Wnt信号通路可能发生活化,促进肿瘤的发生;而PARG基因沉默可通过调节泛素化水解过程,抑制EGF受体信号通路及Wnt信号通路的活化,抑制BaP的致癌过程。(本文来源于《中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛论文集》期刊2015-10-25）
甲基化沉默论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察补气通络解毒方对胰腺癌模型小鼠肿瘤高甲基化基因1(HIC1)、沉默信息调节因子(SIRT_1)、Shh蛋白浓度的影响。方法将30只裸鼠随机分为3组各10只,采用癌细胞种移植法造模。造模成功后,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组给予补气通络解毒方灌胃,连续14 d。治疗结束后,处死裸鼠,取出瘤组织,以WB法检测各组标本的HIC1、SIRT_1、Shh蛋白浓度。结果 3组HIC 1、SIRT 1、Shh蛋白浓度比较有显着差异(P<0.05)。结论补气通络解毒方对模型小鼠HIC1、SIRT_1、Shh蛋白浓度有调节的作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲基化沉默论文参考文献
[1].邢红宇,朱明月,郑俊,吴翔,郑才玲.DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响[J].临床和实验医学杂志.2019
[2].苏全武,胡波.补气通络解毒方对胰腺癌模型小鼠肿瘤高甲基化基因1、沉默信息调节因子、Shh蛋白浓度的影响[J].实用临床医药杂志.2018
[3].于孟飞,王文璐,易建明.siRNA沉默DNA甲基化转移酶1基因干扰胎牛成纤维细胞增殖和凋亡（英文）[J].中南民族大学学报(自然科学版).2018
[4].伍刚.乙肝病毒X蛋白通过DNA甲基化沉默肝癌中miR-338表达[J].昆明医科大学学报.2017
[5].李亚林.探讨siRNA沉默DNMT1、DNMT3b对前列腺癌NDRG1基因甲基化及表达的影响[C].第十二次全国中西医结合男科学术大会暨全国中西医结合男科诊疗技术研修班暨2017上海市中西医结合学会上海市中医药学会泌尿男科专业委员会学术年会讲义论文资料汇编.2017
[6].赖俊忠.通过沉默DNMTs研究胃癌中RPRMDNA甲基化与基因表达的关系[D].福建师范大学.2016
[7].张弦.稳定沉默HPV16E6基因对宫颈癌SiHa细胞中E-cadherin高甲基化的影响[D].南华大学.2016
[8].涂艳阳,徐晓珊,张永生,成迎端.胶质瘤中甲基化沉默肿瘤抑制因子的研究进展[J].转化医学电子杂志.2016
[9].Zhaobo,Lang,Mingguang,Lei,Xingang,Wang,Kai,Tang,Daisuke,Miki.甲基化结合蛋白MBD7促进DNA主动去甲基化防止基因沉默[J].科学新闻.2016
[10].黄海燕,高玮,陈雯,庄志雄,刘建军.PARG基因沉默在苯并芘诱导细胞甲基化水平改变中的作用[C].中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛论文集.2015
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