导读:本文包含了脂肪酶家族论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:脂肪酶家族,斑马鱼,表达模式,禁食
脂肪酶家族论文文献综述
冯东[1]（2014）在《斑马鱼脂肪酶家族基因的表达模式、功能与进化研究》一文中研究指出脂肪是生物体重要的储能物质，在其分解之后得到的产物—脂肪酸又是生物体重要的结构物质和活性物质，对生物体的正常生命活动起重要作用。脂肪酶是一种能够水解甘油叁酯、磷脂等脂类物质的水溶性酶类，对于生物体脂类物质的代谢以及与脂代谢相关的机体重要生理调控起重要的作用。已发现的脂肪酶家族成员主要包括脂蛋白脂肪酶（LPL）、肝脂肪酶（LIPC）、胰脂肪酶（PL）、内皮脂肪酶（EL）、丝氨酸磷脂酶（PLA1A）、H型脂肪酶（LH）、胰脂肪酶相关蛋白1（PLRP1）和胰脂肪酶相关蛋白2（PLRP2）等。目前对脂肪酶家族成员的研究主要见于哺乳动物中，而对鱼类中相关成员的存在及功能的研究还很欠缺。本文选取鱼类中的模式生物斑马鱼作为研究对象，系统地阐明了斑马鱼脂肪酶家族基因的表达模式及其功能，并对它们的系统进化关系进行了分析。本文首先运用半定量RT-PCR和Real-time PCR技术对斑马鱼的脂蛋白脂肪酶（LPL）、肝脂肪酶（LIPC）、内皮脂肪酶（EL）、丝氨酸磷脂酶（PLA1A）和H型脂肪酶（LH）基因的组织表达进行了分析。LPL基因在斑马鱼各个组织中呈泛表达的特点，但在肝脏中的表达量远远大于其他组织，这与哺乳动物中的表达特征明显不同；LIPC基因在肝组织特异表达，与哺乳动物中的表达特征完全一致；而EL、PLA1A和LH基因在各个组织中均广泛表达。基于此，我们选取LPL和LIPC进行深入研究。在胚胎发育时期，半定量RT-PCR和Real-time PCR检测显示，LPL基因随着发育的进行表达逐渐升高；胚胎整体原位杂交结果显示，在胚胎发育早期，LPL基因呈广泛表达，随着发育的进行，表达逐渐变化为特异表达，主要分布于腮弓、侧线神经簇、胸鳍以及头部区域。而LIPC基因在胚胎发育时期只在肝脏开始发育时才开始表达。另外，我们发现禁食可诱导LPL基因表达显着升高，暗示LPL在摄食调控中发挥作用。为了阐明脂肪酶基因的进化，我们又选用文昌鱼为研究对象，首先进行了完善的系统进化分析，然后成功的对文昌鱼的一个类脂肪酶基因进行了克隆；我们又对该类脂肪酶基因进行了体外原核表达和组织分布的研究，为进一步研究其功能与进化奠定了基础。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2014-05-28）
郝晓云,蔡永智,钱雯婕,袁哈利,李榕[2]（2013）在《植物GDSL脂肪酶家族研究进展》一文中研究指出GDSL脂肪酶是一种新的脂肪酶家族成员,由于对其研究起步较晚,尤其是对植物GDSL脂肪酶的研究较少,因此对它们的很多功能和特点的研究还不够深入。近年来的研究表明,GDSL脂肪酶催化位点非常灵活,在与底物结合后其构象会改变,因此,该类酶具有多种潜在的功能。目前,已经克隆和鉴定了部分植物GDSL脂肪酶基因,分析并鉴定了一些基因的功能。对植物中GDSL脂肪酶的功能方面研究较多的是其参与植物生长发育、油脂代谢和抗逆性反应等。文章介绍了植物中的GDSL脂肪酶在结构和生理功能等方面的研究进展。(本文来源于《植物生理学报》期刊2013年12期）
曾饶琼,周国彬,宋亚攀[3]（2013）在《动物脂肪酶基因超家族分子进化和系统发育关系研究》一文中研究指出研究对动物脂肪酶基因超家族的5个成员蛋白家族43条mRNA序列做进化分析,利用MEGA4.0计算5个成员蛋白家族的组间和组内遗传距离,在脂肪酶超家族之间,LPL蛋白家族与EL、HL蛋白家族之间是有差别不大的遗传间隔,是为0.3867和0.5243。LPL蛋白宗族与PL、PLA1蛋白宗族之间是有很大的遗传间隔,是为0.9786和0.8791。(本文来源于《北京农业》期刊2013年21期）
赵鹤云[4]（2012）在《解脂耶氏酵母脂肪酶家族的研究及新型表达系统的构建》一文中研究指出解脂耶氏酵母是一种非常规酵母,被认为是GRAS (generally regarded as safe),其自身能利用众多廉价底物而分泌多种具有工业应用价值的代谢物,故从二十世纪六十年代后期就开始广泛应用于多种不同的工业领域。其蛋白表达系统具有以下优势：外源基因易于整合到酵母基因组、外源蛋白表达量高、所表达的蛋白质能进行翻译后加工、重组菌可进行高密度发酵,以及所表达蛋白质的低糖基化等。该酵母在分类学和分子生物学上的独特性质及其表达系统的优势使其成为最具研究价值和应用潜力的酵母之一,但其基础性研究的欠缺和现有蛋白表达系统的不完善性阻碍了其进一步应用。解脂耶氏酵母脂肪酶家族的特异性是它的众多独特性质之一,针对该家族的系统性研究为阐明其独特的分类学地位奠定基础。此外,对现有解脂耶氏酵母表达系统的改进能使其更广泛的应用于工业化生产。本实验室从中国科学院微生物研究所马延和研究员处获赠一株解脂耶氏酵母菌株CGMCC 2.1405,从其中克隆得到其脂肪酶Lip1, Lip3, Lip4及Lip5的cDNA序列,将它们进行表达后分别开展了酶学性质研究,并证实Lipl和Lip3为酯酶而非脂肪酶,修正了人们对该脂肪酶家族成员的认识。为寻找该酵母脂肪酶新基因,本文利用生物信息学分析了解脂耶氏酵母基因组中可能的脂肪酶基因,利用大肠杆菌表达系统构建小型基因库,最终采用功能筛选获得一个脂肪酶新基因(lip9),进行表达后对其酶学性质进行了研究。同时成功建立了基因克隆新方法。本文构建了解脂耶氏酵母蛋白质定位载体用于研究其脂肪酶的定位,研究发现,除Lip8为细胞壁结合脂肪酶外(Lip2之前已证实为胞外酶),其它均定位于胞内行使某种功能。本论文还构建了能利用蔗糖和酪氨酸酶作为筛选标记,且能直接应用于野生型解脂耶氏酵母株的两种新型蛋白表达系统,结果证实两种质粒稳定性好,且能用于高等真核生物蛋白质的表达。此外,上述两种表达系统为消除环境污染、扩展解脂耶氏酵母在工业上的应用范围奠定了技术基础。本论文的主要工作及创新点如下：(1)利用反转录PCR克隆了脂肪酶Lipl, Lip3, Lip4, Lip5的cDNA序列,将其在毕赤酵母中成功进行了活性表达,经Ni-NTA层析柱纯化后得到单一蛋白并研究了它们的酶学性质,首次从功能上证实Lip4, Lip5为脂肪酶,Lip1, Lip3为羧酸酯酶。(2)根据已经测得的解脂耶氏酵母基因组序列,利用生物信息学的方法,预测并扩增到18个可能的脂肪酶基因序列,用SignalP3.0对其基因结构进行分析后,在大肠杆菌表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达,利用对硝基苯酚棕榈酸酯筛选得到一脂肪酶新基因,为更深入验证其脂肪酶功能并研究其酶学性质,将其克隆入毕赤酵母中表达,经过Ni-NTA柱纯化后研究表明,其偏好水解长链酯,具有水解橄榄油的活性,进一步证实其有脂肪酶活性,将其定名为Lip9。同时建立了基因克隆的新方法。(3)扩增得到酿酒酵母蔗糖基因suc2做为营养缺陷型筛选标记,构建得到解脂耶氏酵母新的胞内和胞外表达载体pINA1297-a-TS和pINA1297-TS,通过比较证实了同源启动子pTEF更适合于工业应用。同时利用该表达系统将人源基因rho进行了成功表达。(4)在构建的新表达载体pINA1297-a-TS的基础上,利用增强型荧光蛋白EGFP构建解脂耶氏酵母蛋白质定位载体,首次对解脂耶氏酵母脂肪酶成员进行定位研究。研究表明,除Lip8外其余均定位于细胞中,Lip8结合于细胞壁上,经缓冲液洗10次后荧光湮灭,证实Lip8是非共价结合于细胞壁。(5)本文首次将编码酪氨酸酶的基因mel应用于酵母表达系统构建。经组装PCR自主合成基因mel后,再利用重迭PCR将其置于启动子pTEF和信号肽XPR2pre的下游,终止区LIP2t的上游,构建得到利用黑色素效应进行筛选的新型解脂耶氏酵母胞内及胞外表达载体pINA1297-a-MS和pINA1297-MS,两者能稳定存在于重组酵母菌基因组中,证实该表达系统构建成功。(本文来源于《华中科技大学》期刊2012-02-01）
脂肪酶家族论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
GDSL脂肪酶是一种新的脂肪酶家族成员,由于对其研究起步较晚,尤其是对植物GDSL脂肪酶的研究较少,因此对它们的很多功能和特点的研究还不够深入。近年来的研究表明,GDSL脂肪酶催化位点非常灵活,在与底物结合后其构象会改变,因此,该类酶具有多种潜在的功能。目前,已经克隆和鉴定了部分植物GDSL脂肪酶基因,分析并鉴定了一些基因的功能。对植物中GDSL脂肪酶的功能方面研究较多的是其参与植物生长发育、油脂代谢和抗逆性反应等。文章介绍了植物中的GDSL脂肪酶在结构和生理功能等方面的研究进展。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂肪酶家族论文参考文献
[1].冯东.斑马鱼脂肪酶家族基因的表达模式、功能与进化研究[D].中国海洋大学.2014
[2].郝晓云,蔡永智,钱雯婕,袁哈利,李榕.植物GDSL脂肪酶家族研究进展[J].植物生理学报.2013
[3].曾饶琼,周国彬,宋亚攀.动物脂肪酶基因超家族分子进化和系统发育关系研究[J].北京农业.2013
[4].赵鹤云.解脂耶氏酵母脂肪酶家族的研究及新型表达系统的构建[D].华中科技大学.2012