导读:本文包含了人胎肺成纤维细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:成纤维细胞,人端粒酶逆转录酶,端粒酶
人胎肺成纤维细胞论文文献综述
程永波,郭丽萍,王磊,房殿春[1]（2015）在《人胎胃成纤维细胞hTERT和端粒酶的表达》一文中研究指出目的检测人胎胃成纤维细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)和端粒酶表达。方法分离培养人胎胃成纤维细胞,细胞角蛋白(CK)-18免疫染色排除上皮细胞;免疫细胞化学方法检测hTERT表达;端粒重复序列扩增法(TRAP)检测端粒酶活性,成人胃成纤维细胞作阳性对照。结果分离的人胎胃成纤维细胞CK-18免疫染色阴性;原位监测其胞质和胞核中均可见细颗粒状免疫荧光;端粒酶延伸片断长度约为170bp,稍长于成人胃成纤维细胞。结论人胎胃成纤维细胞表达hTERT和端粒酶。(本文来源于《重庆医学》期刊2015年32期）
孙中帅[2]（2012）在《人Sox2和Nanog基因克隆及其对胎肺成纤维细胞分化的影响》一文中研究指出人Sox2和Nanog基因作为维持胚胎干细胞自我更新与全能性的关键基因,一直是科学研究工作的热点。克隆人Sox2和Nanog基因,研究其分子生物学功能是本实验的重点,得到目的序列与载体质粒pSG连接,在大肠杆菌中扩增来获得重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog,为下一步转染实验做好准备。本实验选取胎儿肺间质成纤维细胞作为宿主细胞,将测序成功的重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog转染上述宿主细胞,观察干细胞相关基因Sox2和Nanog对于终末分化的体细胞形态及功能是否产生影响。目的1克隆人Sox2、Nanog基因编码序列,构建pSG5-Sox2及pSG5-Nanog真核表达重组质粒。2原代培养胎肺间质成纤维细胞并传代作为宿主细胞,转染重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog后检测目的基因表达,观察并鉴定宿主细胞分化方向。方法1应用RT-PCR方法分别从4-6周龄流产胎儿脑组织和膀胱癌细胞中扩增出Sox2及Nanog基因编码全序列,琼脂糖凝胶电泳鉴定。2目的基因片段Sox2及Nanog双酶切纯化后将其分别连接到pSG5表达载体,构成重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog,转化、扩增后进行菌落PCR和双酶切鉴定后测序及序列比对。3原代培养胎肺成纤维细胞并传代,实验组将重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog用FuGENE HD转染试剂转染胎肺成纤维细胞,以空质粒pSG5用上述方法转染细胞作为空白对照,未转染细胞加入等量的低糖DMEM培养基作为阴性对照,倒置显微镜观察转染前后的细胞形态学变化。4转染48h后,将3组胎肺成纤维细胞在六孔板中进行爬片,采用RT-PCR方法,免疫细胞化学检测Sox2及Nanog基因表达情况。过表达重组质粒,15-30d后进行角蛋白(广谱),巢蛋白,胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶免疫细胞化学染色,利用免疫反应对细胞中相应蛋白的表达进行定位。结果1琼脂糖凝胶电泳表明获得人Sox2基因编码序列(约1kb)和Nanog基因编码序列(约1kb)。重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog菌落PCR产物电泳分别约1kb,双酶切获得质粒片段pSG5(约4.1kb)及Sox2基因片段(约1kb)、Nanog基因片段(约lkb),与理论值人Sox2基因编码序列(957bp),人Nanog基因编码序列(934bp)及质粒pSG5(4076bp)相符。重组质粒测序后,在NCBI中BLAST比对相似性均达到99%,表明所插入的目的片段正确。2获得稳定传代的胎肺成纤维细胞,RT-PCR方法,免疫细胞化学检测实验组Sox2、Nanog阳性表达,而空白对照组和阴性对照组中未检测到相应基因表达。3倒置显微镜下观察转染前胎肺成纤维细胞呈典型的栅栏、漩涡状生长。过表达重组质粒转染pSG5-Sox2、pSG5-Nanog8d后实验组细胞形态学先呈现干细胞样变化,15d后进而分化为上皮样细胞,排列紧密,呈扁平多角形,免疫细胞化学角蛋白(广谱)染色阳性；转染20-30d后有向神经细胞分化的趋势,轴突明显,部分细胞呈蜘蛛样,胞质突细长,免疫细胞化学巢蛋白、胶质酸性纤维蛋白、神经元特异性烯醇化酶染色阳性。空白对照和阴性对照组未观察有上述形态学改变,相关免疫细胞化学染色阴性。结论本研究克隆了人Sox2、Nanog基因,构建重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog,转染胎肺成纤维细胞并检测到基因阳性表达,过表达重组质粒后胎肺间质成纤维细胞呈干细胞样生长并有向上皮及神经样细胞分化的趋势,为进一步研究Sox2和Nanog基因功能及重编程细胞分化奠定了基础。(本文来源于《天津医科大学》期刊2012-05-01）
孙中帅,雷建园,广茜茜,畅继武[3]（2011）在《人Sox2和Nanog基因的克隆及其对胎肺成纤维细胞分化的影响》一文中研究指出目的克隆人Sox2、Nanog基因编码序列,构建pSG5-Sox2及pSG5-Nanog真核表达重组质粒,转染胎肺间质成纤维细胞,观察Sox2、Nanog基因表达并鉴定其功能。方法应用RT-PCR方法分别从4～6周龄流产胎儿脑组织和膀胱癌细胞中扩增出Sox2及Nanog基因编码全序列,将其连接至pSG5表达载体。经测序比对后,将重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog转染胎肺成纤维细胞,采用免疫细胞化学法检测Sox2及Nanog基因表达情况,倒置显微镜观察转染前后细胞的形态学变化。结果人Sox2基因和Nanog基因编码序列全长957bp和934bp,重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog测序成功,BLAST比对成功,转染胎肺成纤维细胞后,免疫细胞化学检测到Sox2、Nanog阳性表达。转染后胎肺成纤维细胞形态学先呈现干细胞样变化,进而分化为上皮样细胞,CK(广谱)染色阳性,并有向神经细胞分化的趋势,巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶染色阳性。结论克隆了人Sox2、Nanog基因,成功转染胎肺成纤维细胞并检测到基因阳性表达,胎肺间质成纤维细胞呈干细胞样生长并有向上皮及神经样细胞分化的趋势,为进一步研究Sox2和Nanog基因功能及重编程细胞分化奠定了基础。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2011年11期）
李小平,邱丹,黄毅,贺刚,李沁[4]（2011）在《TGF-β_1诱导人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子以及布地奈德的调控作用》一文中研究指出目的应用转化生长因子(TGF-β1)刺激人胎肺成纤维细胞(HFL-1)检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并观察布地奈德(Budesonide)对HFL-1分泌VEGF的干预作用。方法采用体外培养细胞法,实验组加入不同浓度TGF-β1刺激,孵育72 h后收集细胞培养上清液,经EIA法检测VEGF含量;同时在0.5 ng/ml TGF-β1刺激下,观察应用不同浓度布地奈德对VEGF的调控。结果低浓度TGF-β1上调VEGF的表达,但与对照组比较无显着性差异;随着TGF-β1刺激浓度加大,VEGF含量也逐渐增加,当TGF-β1浓度为0.5 ng/ml时,VEGF相对含量与空白对照组相比具有明显差异(P<0.01)。10-7mol/L布地奈德不仅能明显阻断内源性VEGF的表达,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),还可明显下调TGF-β1诱导的VEGF分泌增加效应,与相同浓度单独TGF-β1刺激组比较,VEGF含量明显下降,二者比较具有统计学意义(P<0.01)。结论 TGF-β1能够诱导HFL-1增殖及VEGF分泌增加,具有浓度依赖效应。提示TGF-β1诱导VEGF分泌增加可能是纤维化形成的重要原因之一;抑制VEGF生成及血管新生可能是布地奈德发挥抗纤维化作用的重要分子机制。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2011年14期）
韩晓芳,官黄涛,李红钢,熊承良[5]（2011）在《人胎肺成纤维细胞对小鼠胚胎干细胞生长支持作用的研究》一文中研究指出目的探讨人胎肺成纤维细胞(hELF)作为饲养层支持小鼠胚胎干细胞(ES)的生长及维持ES细胞的未分化状态。方法采用生长状态良好的hELF,经一定浓度的丝裂霉素C处理后,制备hELF饲养层,将ES细胞接种到该饲养层进行传代培养。观察ES细胞的形态学特征,测定ES细胞表面碱性磷酸酶(AKP)活性、干细胞标志物Oct-4的表达。结果 hELF细胞经丝裂霉素C处理后不再增殖,保持较好的细胞功能和形态学特征。ES细胞克隆在饲养层呈现集落状隆起生长,边缘清楚,结构致密,与周围的饲养层细胞界限清楚。ES细胞仍然保持未分化状态,高度表达AKP及胚胎干细胞转录因子Oct-4。结论 hELF作为饲养层可以较好的维持胚胎干细胞的生长及其未分化状态。hELF源自人工流产组织,取材来源较丰富,为hELF饲养层应用于人胚胎干细胞的培养奠定了基础。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2011年03期）
王铭杰,罗自强,吕梅,周京林,曹传顶[6]（2010）在《NMDA受体激活介导人胎肺成纤维细胞胶原分泌与降解》一文中研究指出肺纤维化是急性肺损伤治疗后主要的慢性肺部疾病,严重影响各类急性肺损伤患者的预后。肺成纤维细胞是肺纤维化进程中细胞外基质分泌的主要细胞,但是肺成纤维细胞在肺损伤中的激活机制尚不清楚。NMDA受体是谷氨酸受体的重要亚型,其过度激活可导致神经细胞的损伤。近年来发现在外周肺组织同样存在NMDA受体的表达,并参与急性肺损伤及弥漫性肺泡炎症反应。但是肺成纤维细胞是否存在NMDA受体并发挥重要生理功能尚未见研究。本实验目的即研究NMDA受体在人胎肺成纤维细胞胶原分泌及降解中的作用。方法:(1)实时定量PCR方法(Real Time PCR)检测人胎肺成纤维细胞NR1和NR2A,NR2B、NR2C和NR2D受体亚单位mRNA表达。(2)检测NMDA对人胎肺成纤维细胞培养上清液中羟脯氨酸(HYP)含量的影响。(3)ELISA法检测NMDA对人胎肺成纤维细胞培养上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1、TMP-1分泌的影响。结果:(1)正常人胎肺成纤维细胞上存在NMDARs mRNA表达,并且五种受体表达程度并不相同,以NMDAR2A及NMDAR2D表达最强,随后依次为NMDAR2C、NMDA2B和NMDAR1。(2)1 mmol/L NMDA可显着增高人胎肺成纤维细胞上清液中羟脯氨酸含量,NMDAR抑制剂MK-801可以抑制NMDA诱导的HYP的升高。(3)NMDA可显着促进人胎肺成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ型胶原及TIMP-1分泌,对MMP-1分泌无显着影响。MK-801可以显着抑制NMDA诱导的Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TIMP-1分泌的增加。结论:人胎肺成纤维细胞存在NMDA受体表达,NMDA受体激活可以促进人胎肺成纤维细胞胶原分泌增加和自身降解的减少。(本文来源于《中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集》期刊2010-10-18）
呙恒娟[7]（2007）在《布地奈德协同TGF-β诱导人支气管上皮细胞和胎肺成纤维细胞中纤维粘连蛋白表达》一文中研究指出目的探讨布地奈德对转化生长因子(TGF-β)诱导人胎肺成纤维细胞(HFL-1)、人支气管上皮细胞(HBEC)中细胞外基质成分纤维粘连蛋白(FN)的表达的影响。方法经原代培养传代获得的人支气管上皮细胞和胎肺成纤维细胞培养，在5％CO2或95％空气，37℃的孵箱中，在100mm的组织培养皿中，经酶解消化后以1×10~5的细胞接种于12孔板，细胞融合后，用无血清、无生长因子的培养基冲洗2-3遍，饥饿24小时。培养人胎肺成纤维细胞在实验前新鲜无血清培养液中加入及不同浓度的布地奈德同时加入TGF-β2、TGF-β3后共同孵育48小时。培养的人支气管上皮细胞在实验前，新鲜的无生长因子培养基中加入TGF-β的亚型TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、布地奈德或同时加入布地奈德与TGF-β共同孵育24小时。到规定的时间，回收上清液，储存在-80℃，计数各孔细胞，ELISA法检测上清夜中纤维粘连蛋白。结果①人胎肺成纤维细胞与不同浓度的布地奈德孵育48小时，随剂量的增加，纤维粘连蛋白的表达增加，是基础分泌量的5-6倍，呈剂量依赖性。②TGF-β2、TGF-β3诱导人胎肺成纤维细胞释放纤维粘连蛋白，在不同浓度的布地奈德分别和TGF-β2、TGF-β3与共同孵育48小时后，随布地奈德剂量的增加TGF-β2、TGF-β3能诱导释放的纤维粘连蛋白进一步显着增加。与单用TGF-β组相比p＜0.05。③布地奈德、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3与人支气管上皮细胞共同孵育24小时后，布地奈德和TGF-βs均能显着增加纤维粘连蛋白的释放，④布地奈德与TGF-β联用后，纤维粘连蛋白的释放进一步增加(p＜0.05)。结论①布地奈德能增加人胎肺成纤维细胞纤维粘连蛋白的分泌，并呈剂量依赖性。布地奈德协同TGF-β2、TGF-β3诱导人胎肺成纤维细胞中纤维粘连蛋白的分泌并呈剂量依赖性。②TGF-βs、布地奈德均促进人支气管上皮细胞中纤维粘连蛋白的合成，同时布地奈德进一步促进TGF-βs诱导人支气管上皮细胞纤维粘连蛋白的合成。③布地奈德协同TGF-βs诱导的人胎肺成纤维细胞、人支气管上皮细胞纤维粘连蛋白的释放。揭示了糖皮质激素在肺纤维化和气道重塑中疗效受限的可能新机制。(本文来源于《四川大学》期刊2007-04-20）
陈亚娟[8]（2007）在《TGF-β1诱导人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子以及布地奈德的调控作用》一文中研究指出目的气道重构及肺纤维化形成是引起呼吸系统疾病致残率和死亡率上升的主要原因，亦是疾病防治的重点及难点。许多研究证实，炎症损伤及组织修复失衡是导致支气管肺部纤维化的主要成因，其中可能涉及血管新生及相应生长因子。本实验通过应用转化生长因子(transforming growth factor-β1，TGF-β1)刺激人胎肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblast-1，HFL-1)，检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)在其中的表达，以及观察布地奈德(Budesonide，Bud)对HFL-1分泌VEGF的干预作用。方法本实验采用细胞培养法，分叁个部分：第一部分探讨TGF-β诱导HFL-1分泌VEGF的时间依赖效应，实验组加入0.25ng/ml TGF-β1刺激，分别在12、24、48、72小时收集细胞培养上清液，经酶联免疫分析法(enzyme immunoassay，EIa)检测VEGF含量，同时进行细胞计数；第二部分探讨TGF-β1诱导HFL-1分泌VEGF的浓度依赖效应，实验组加入不同浓度(0、0.025、0.05、0.25、0.5、2.5、5ng/mL)TGF-β1刺激，孵育72小时后收集细胞培养上清液，经EIA检测VEGF含量；第叁部分探讨布地奈德对HFL-1分泌内源性和外源性VEGF的影响，实验组随机分为对照组、不同浓度(10~(-11)M、10~(-9)M、10~(-7)M)布地奈德干预组、0.5ng/mlTGF-β1+不同浓度(10~(-11)M、10~(-9)M、10~(-7)M)布地奈德干预组，孵育72小时后检测上清液VEGF含量。结果在第一部分实验中，随着细胞孵育时间延长，TGF-β1刺激组成纤维细胞生长加快，细胞生长密度增加；VEGF分泌水平也增加，在72小时点达到分泌高峰，并且各时间点VEGF相对含量均高于对照组，两组比较有统计学差异(P＜0.05)。在第二部分实验中，低浓度TGF-β1(≤0.5ng/ml)上调VEGF的表达量与对照组比较差异无显着性(P＞0.05)；随着TGF-β1刺激浓度加大，VGEF含量也逐渐增加，当TGF-β1浓度为5ng/ml时，VEGF相对含量与空白对照组相比增加了近七倍，两组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。在第叁部分实验中，低浓度(10~(-11)M)Bud刺激内源性VEGF分泌轻微增加，但与空白对照组比较无明显差异(P＞0.05)；而高浓度(10~(-7)M)Bud不仅能明显阻断内源性VEGF的表达，与空白对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01)，还可明显下调TGF-β1诱导的VEGF分泌增加的效应，与同时相相同浓度单独TGF-β1刺激组比较，VEGF含量下降明显，二者比较具有统计学意义(P＜0.01)。结论人胎肺成纤维细胞自身可分泌内源性VEGF，TGF-β1能够诱导HFL-1增殖及VEGF分泌增加，并具有时间和浓度依赖效应。提示成纤维细胞是支气管肺部纤维化病中主要的功能细胞，TGF-β1诱导VEGF分泌增加可能是纤维化形成新的重要原因之一。高浓度(10~(-9)M，10~(-7)M)布地奈德不仅能够抑制HFL-1自身分泌VEGF，还能阻断TGF-β1诱导VEGF水平上调的效应，而低浓度(10~(-11)M)布地奈德没有抑制VEGF分泌的作用。提示抑制VEGF生成及血管新生可能是布地奈德发挥抗纤维化作用中新的重要分子机制。(本文来源于《四川大学》期刊2007-04-18）
贾炜,余家康,邹焱,王凤华,唐志贤[9]（2006）在《成纤维细胞生长因子-7在除草醚诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达》一文中研究指出目的研究成纤维细胞生长因子-7(FGF-7)在先天性膈疝(CDH)胎肺中的表达及探讨其在CDH肺发育不良中的作用。方法采用免疫组织化学和图像分析方法半定量地检测FGF-7在胎肺中的表达部位及表达相对含量。结果CDH肺发育不良,处于假腺体期。FGF-7在对照组显示强表达于支气管和细支气管上皮细胞,在除草醚(nitrofen)组中表达微弱,其表达的相对含量显着低于对照组,Nitrofen组中CDH组和noCDH组间差异没有显着性意义。FGF-7的表达与肺泡面积呈显着正相关性,与肺泡间隔呈显着负相关性。结论FGF-7在CDH胎肺中表达降低,且降低具有组织特异性；FGF-7可作为提示CDH胎肺成熟度的重要指标；FGF-7表达降低可能是CDH肺发育不良形成机制之一。(本文来源于《中华小儿外科杂志》期刊2006年10期）
陈亚娟[10]（2006）在《布地奈德调节转化生长因子β_1刺激人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子》一文中研究指出将体外培养HFL-1细胞按照一般贴壁细胞培养方法传代,接种到12孔板用于试验。待细胞铺满 70％时,换用无血清DMEM培养液孵育,后加入浓度0．5 ng／ml转化生长因子β1(TGF-β1)和布地奈德的无血清培养基孵育24 h,收集细胞培养上清液。经酶联免疫吸附法测血管内皮生长因子(VEGF)浓度。结果:布地奈德不仅能阻断HFL-1自身分泌VEGF,还抑制TGF-β1诱导的VEGF分泌,并有浓度依赖效(本文来源于《中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编》期刊2006-09-01）
人胎肺成纤维细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
人Sox2和Nanog基因作为维持胚胎干细胞自我更新与全能性的关键基因,一直是科学研究工作的热点。克隆人Sox2和Nanog基因,研究其分子生物学功能是本实验的重点,得到目的序列与载体质粒pSG连接,在大肠杆菌中扩增来获得重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog,为下一步转染实验做好准备。本实验选取胎儿肺间质成纤维细胞作为宿主细胞,将测序成功的重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog转染上述宿主细胞,观察干细胞相关基因Sox2和Nanog对于终末分化的体细胞形态及功能是否产生影响。目的1克隆人Sox2、Nanog基因编码序列,构建pSG5-Sox2及pSG5-Nanog真核表达重组质粒。2原代培养胎肺间质成纤维细胞并传代作为宿主细胞,转染重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog后检测目的基因表达,观察并鉴定宿主细胞分化方向。方法1应用RT-PCR方法分别从4-6周龄流产胎儿脑组织和膀胱癌细胞中扩增出Sox2及Nanog基因编码全序列,琼脂糖凝胶电泳鉴定。2目的基因片段Sox2及Nanog双酶切纯化后将其分别连接到pSG5表达载体,构成重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog,转化、扩增后进行菌落PCR和双酶切鉴定后测序及序列比对。3原代培养胎肺成纤维细胞并传代,实验组将重组质粒pSG5-Sox2及pSG5-Nanog用FuGENE HD转染试剂转染胎肺成纤维细胞,以空质粒pSG5用上述方法转染细胞作为空白对照,未转染细胞加入等量的低糖DMEM培养基作为阴性对照,倒置显微镜观察转染前后的细胞形态学变化。4转染48h后,将3组胎肺成纤维细胞在六孔板中进行爬片,采用RT-PCR方法,免疫细胞化学检测Sox2及Nanog基因表达情况。过表达重组质粒,15-30d后进行角蛋白(广谱),巢蛋白,胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶免疫细胞化学染色,利用免疫反应对细胞中相应蛋白的表达进行定位。结果1琼脂糖凝胶电泳表明获得人Sox2基因编码序列(约1kb)和Nanog基因编码序列(约1kb)。重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog菌落PCR产物电泳分别约1kb,双酶切获得质粒片段pSG5(约4.1kb)及Sox2基因片段(约1kb)、Nanog基因片段(约lkb),与理论值人Sox2基因编码序列(957bp),人Nanog基因编码序列(934bp)及质粒pSG5(4076bp)相符。重组质粒测序后,在NCBI中BLAST比对相似性均达到99%,表明所插入的目的片段正确。2获得稳定传代的胎肺成纤维细胞,RT-PCR方法,免疫细胞化学检测实验组Sox2、Nanog阳性表达,而空白对照组和阴性对照组中未检测到相应基因表达。3倒置显微镜下观察转染前胎肺成纤维细胞呈典型的栅栏、漩涡状生长。过表达重组质粒转染pSG5-Sox2、pSG5-Nanog8d后实验组细胞形态学先呈现干细胞样变化,15d后进而分化为上皮样细胞,排列紧密,呈扁平多角形,免疫细胞化学角蛋白(广谱)染色阳性；转染20-30d后有向神经细胞分化的趋势,轴突明显,部分细胞呈蜘蛛样,胞质突细长,免疫细胞化学巢蛋白、胶质酸性纤维蛋白、神经元特异性烯醇化酶染色阳性。空白对照和阴性对照组未观察有上述形态学改变,相关免疫细胞化学染色阴性。结论本研究克隆了人Sox2、Nanog基因,构建重组质粒pSG5-Sox2、pSG5-Nanog,转染胎肺成纤维细胞并检测到基因阳性表达,过表达重组质粒后胎肺间质成纤维细胞呈干细胞样生长并有向上皮及神经样细胞分化的趋势,为进一步研究Sox2和Nanog基因功能及重编程细胞分化奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人胎肺成纤维细胞论文参考文献
[1].程永波,郭丽萍,王磊,房殿春.人胎胃成纤维细胞hTERT和端粒酶的表达[J].重庆医学.2015
[2].孙中帅.人Sox2和Nanog基因克隆及其对胎肺成纤维细胞分化的影响[D].天津医科大学.2012
[3].孙中帅,雷建园,广茜茜,畅继武.人Sox2和Nanog基因的克隆及其对胎肺成纤维细胞分化的影响[J].解放军医学杂志.2011
[4].李小平,邱丹,黄毅,贺刚,李沁.TGF-β_1诱导人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子以及布地奈德的调控作用[J].中国老年学杂志.2011
[5].韩晓芳,官黄涛,李红钢,熊承良.人胎肺成纤维细胞对小鼠胚胎干细胞生长支持作用的研究[J].生殖医学杂志.2011
[6].王铭杰,罗自强,吕梅,周京林,曹传顶.NMDA受体激活介导人胎肺成纤维细胞胶原分泌与降解[C].中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集.2010
[7].呙恒娟.布地奈德协同TGF-β诱导人支气管上皮细胞和胎肺成纤维细胞中纤维粘连蛋白表达[D].四川大学.2007
[8].陈亚娟.TGF-β1诱导人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子以及布地奈德的调控作用[D].四川大学.2007
[9].贾炜,余家康,邹焱,王凤华,唐志贤.成纤维细胞生长因子-7在除草醚诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达[J].中华小儿外科杂志.2006
[10].陈亚娟.布地奈德调节转化生长因子β_1刺激人胎肺成纤维细胞分泌血管内皮生长因子[C].中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编.2006