导读:本文包含了型流感嗜血杆菌荚膜多糖论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:b型流感嗜血杆菌,荚膜多糖,定量~1H-NMR法,二甲基砜
型流感嗜血杆菌荚膜多糖论文文献综述
许美凤,毛琦琦,赵丹,陈苏京,李亚南[1](2019)在《b型流感嗜血杆菌荚膜多糖定量~1H-NMR法的建立及验证》一文中研究指出目的建立测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖绝对含量的定量~1H核磁共振法(nuclear magnetic resonance,NMR,即~1H-NMR法),并进行验证。方法精密称取Hib荚膜多糖粉末,重水溶解,配制一定浓度的供试品多糖溶液;采用Bruker Avance-600型超导核磁共振波谱仪,设置NMR实验参数条件,以重水为溶剂,二甲基砜为内标物建立定量~1H-NMR法进行多糖含量测定;对该方法进行专属性、准确度、线性、精密度及耐用性验证;应用建立的定量~1H-NMR法及化学法测定5批Hib荚膜多糖含量。结果经~1H-NMR谱、~(13)C-NMR谱、~1H-~1H COSY谱及~1H-13C HSQC谱归属显示,Hib荚膜多糖的定量峰(δ_(H)5. 06)及内标物二甲基砜的定量峰(δ_(H)3. 14)分离良好,互不干扰,且不受样品内其他谱峰的干扰,方法专属性良好;供试品溶液加入100、150及200μL国际标准品,加标回收率在101%~102%;Hib多糖质量浓度在1~20 mg/mL范围,线性方程为y=0. 234 3 x-0. 002 6(R~2=1. 000 0);供试品溶液6次重复性及中间精密度测定的定量峰积分面积比值的RSD分别为0. 78%及0. 60%,精密度良好;5 mg/mL的供试品溶液在不同脉冲角度及不同延迟时间定量峰积分面积比的RSD分别为0. 07%及0. 13%,耐用性良好。5批荚膜多糖经定量~1H-NMR法及化学法检测,核糖含量均在《中国药典》叁部(2015版)规定合格范围内(320~410 mg/g)。结论成功建立了测定Hib荚膜多糖含量的定量~1H-NMR法,该方法具有良好的专属性、准确度、线性、精密度及耐用性,为Hib疫苗的质量控制研究奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年09期)
普元倩,朱文勇,吴雅楠,靳玮华,李卫东[2](2018)在《利用核磁共振(~(31)P-NMR)测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中磷含量的新方法研究》一文中研究指出目的:利用~(31)P-NMR核磁共振定量法(QNMR)测定b型流感嗜血杆菌(Hib)荚膜多糖中的磷含量,建立QNMR的质控方法。方法:采用Bruker AVANCEⅡ400核磁共振谱仪,以六甲基磷酰叁胺为内标,采集一维定量~(31)PNMR谱对不同浓度的磷酸二氢钾进行定量分析,采用传统方法验证该新方法的精密度及准确度,并对2种方法进行比较研究。结果:QNMR定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.7%,相对误差为2.1%~3%,不同浓度样品回收率为97.0%~98.1%;传统的化学法定量结果 RSD为1.2%~3.2%,相对误差为5%~7%,不同浓度样品回收率为93.0%~94.9%;2种方法检测的3批Hib荚膜多糖中磷含量无明显差别,均符合《中国药典》叁部(2010版)规定的68~90 mg/g。结论:~(31)P-NMR定量方法操作简单,耗时短,重现性好,精密度和准确度高,且不破坏多糖成分,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的磷定量。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2018年06期)
廉添添,孙强,马矜烁,陶娟,石晓卫[3](2018)在《b型流感嗜血杆菌荚膜多糖发酵培养基的优化》一文中研究指出探明b型流感嗜血杆菌荚膜多糖发酵的最适培养基及接种量,为降低其疫苗荚膜多糖制备成本提供理论依据,设计6种培养基进行摇瓶培养,检测发酵上清液中的菌体量,筛选最适培养基,并在此基础上优化接种浓度及氯化血红素、辅酶I添加量进行发酵罐培养,测定荚膜多糖含量,评估培养效果。结果表明:接种后OD600值为0.1的接种量较为适宜b型流感嗜血杆菌生长;3号改良培养基(选择性大豆蛋胨、酵母浸粉、酸水解酪蛋白、K2HPO4、氯化钠、葡萄糖、氯化血红素、辅酶I分别为1%、1%、0.50%、0.25%、0.50%、0.70%、25mg/L和20mg/L)对b型流感嗜血杆菌液体进行发酵罐发酵可获得大量菌体且稳定,荚膜多糖含量为(105.6±13.2)mg/L。(本文来源于《贵州农业科学》期刊2018年05期)
李亚南,李红,石刚,贺鹏飞,唐静[4](2016)在《我国部分地区儿童b型流感嗜血杆菌荚膜多糖抗体水平的调查》一文中研究指出目的调查我国部分地区儿童b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖的组分多聚核糖基-核糖醇-磷酸盐(polyribosylribitol phosphate,PRP)的抗体(抗-PRP)水平。方法采用ELISA法对2007~2014年间来自我国广西壮族自治区、江苏省、河南省的13 799份2月龄~5岁健康儿童的血清标本进行抗-PRP自然抗体水平的检测。结果 2007~2014年间我国2月龄~5岁儿童抗-PRP自然抗体阳性率、抗体浓度达到长期保护水平的比例及抗体几何平均浓度(GMC)呈逐年升高的趋势,其中2~11月龄儿童的抗-PRP自然抗体阳性率较低;不同地区儿童抗-PRP自然抗体水平差异不大,且不同性别间抗体水平分布较均衡。结论我国2~11月龄儿童仍是Hib的易感人群,是需进行Hib结合疫苗预防接种的重点人群。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2016年11期)
韦鹏翀,魏茂琪,常亚军,靳伟华,岳俊[5](2016)在《Triton X-114萃取法纯化b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的应用》一文中研究指出采用Triton X-114替代高腐蚀性的苯酚,以探索b型流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzaetype b,Hib)荚膜多糖的纯化新方法。将Hib粗制荚膜多糖溶于不同浓度的Triton X-114溶液中,加入(NH_4)_2SO_4,搅拌后,离心分层后,取下层溶液。重复多次,最后用100 k D膜进行超滤。结果,加入Triton X-114的质量分数为15%,(NH_4)_2SO_4的质量分数为30%,抽提次数为3次时,对蛋白杂质的去除效果较好。采用Triton X-114萃取法连续纯化3批Hib荚膜精制多糖,其各项检测指标均符合《中国药典》2015版(叁部)规定。研究表明Triton X-114萃取法可应用于Hib粗制荚膜多糖的纯化,且纯化效果良好。(本文来源于《药物生物技术》期刊2016年04期)
罗树权,赵志强,房明,杨英英,杜送田[6](2015)在《高压液相分子相排阻层析-十八角激光散射仪联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子量的方法的验证》一文中研究指出目的对高压液相分子排阻层析-十八角激光散射仪(high performance size exclusion chromatography-Multiangle laser-light scattering,HPSEC-MALLS)联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖重均分子量(weight-average molecular weight,Mw)及其分布的方法进行验证。方法用已知Mw的普鲁兰多糖标准品对方法的准确性、精密度进行验证。采用该方法对15批b型流感嗜血杆菌荚膜多糖进行Mw及分子量分布的测定,并分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子大小指标分配系数(KD)与Mw的相关性。结果普鲁兰多糖标准品的Mw检测值与Mw标示值的相对偏差均小于5%(除P-20外);精密性相对标准偏差(relative standard clevia-tion,RSD)均小于0.5%,且色谱峰及分子量分布趋势完全重迭。15批b型流感嗜血杆菌荚膜多糖Mw(3次检测的平均值)为2.681×105~6.488×105 g/mol,与KD值无明显相关性。结论 HPSEC-MALLS法具有良好的准确性与精密度,可更直观、真实地反映样品的分子量分布,本实验为多糖及结合疫苗质量控制方法的优化提供了参考。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2015年07期)
吴雅楠,王明清,朱文勇,代小虎,宋少辉[7](2014)在《通过CDAP活化多糖制备b型流感嗜血杆菌荚膜多糖-D蛋白疫苗初探》一文中研究指出目的用CDAP活化b型流感嗜血杆菌(Hib)荚膜多糖,制备b型流感嗜血杆菌荚膜多糖及D蛋白疫苗。方法采用CDAP法在不同p H值条件下活化Hib荚膜多糖,再通过乙二酰肼(ADH)与D蛋白共价结合,制备Hib荚膜多糖与其D蛋白结合物原液,并对叁批结合物原液的各项指标进行检测。获得的结合物原液免疫BALB/c小鼠,应用ELISA法检测血清中的Ig G抗体水平,评价其免疫原性。结果叁批结合物原液以上检测指标均符合药典要求,衍生物中ADH含量对结合物的免疫原性有重要影响。结论用CDAP活化工艺制备的Hib荚膜多糖-D蛋白结合物适宜制备结合疫苗,为以D蛋白为载体的Hib结合疫苗的制备及五价联苗的研制奠定实验基础。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2014年12期)
普元倩,朱文勇,寸怡娜,代小虎,张新文[8](2014)在《核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量》一文中研究指出目的建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法。方法利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较。结果 NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0%,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4%外,其余浓度均在1%~3%之间,不同浓度的样品回收率在97.2%~107%之间;化学法定量结果 RSD在0.6%~7.9%之间,相对误差在3%~6.5%之间,不同浓度样品回收率在93.5%~105.3%之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》叁部(2010版)规定的320~410 mg/g之间。结论 1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2014年08期)
张文佳[9](2011)在《B型流感嗜血杆菌的荚膜多糖抗体水平及基因分型研究》一文中研究指出目的:本研究旨在关注引发小儿严重侵袭性疾病病原体B型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib),以动物为模型,评价Hib特异性荚膜多糖的免疫原性及其与抗体水平之间的剂量关系,评估PCR技术在检测小儿呼吸道疾病中Hib的应用价值,探讨与荚膜剂量对应的基因分型在反映菌株侵袭力方面的应用潜力及可行性,指导儿童临床用药及接种疫苗,为研发新疫苗提供一定的实验基础。方法:1.以SD大鼠为模型,分别给予不同剂量荚膜多糖的B型流感嗜血杆菌PRP-T结合疫苗免疫大鼠,设生理盐水为对照,ELISA法测定血清中Hib多糖抗体浓度,用SAS 8.1统计软件处理数据,分析其Hib荚膜多糖的免疫原性及剂量效应。2.搜集2009-2010年重庆儿童医院呼吸道感染患儿深部痰标本分离的流感嗜血杆菌菌株159份。针对Hib荚膜基因合成型特异性引物及编码转运荚膜多糖基因的引物,应用PCR技术对临床分离菌株进行Hib检测及亚型鉴定,对阳性标本进行PCR产物序列测定分析。结果:1.末次免疫后给予不同剂量荚膜多糖Hib结合疫苗的各实验组诱导产生PRP IgG抗体平均浓度均高于0.15μg/ml。免疫后1、2、4周各实验组内PRP IgG抗体水平逐渐升高,其差异有显着性统计学意义(P<0.01)。2.给予不同剂量荚膜多糖的Hib结合疫苗各实验组诱导大鼠产生抗PRP IgG抗体水平随着荚膜多糖剂量的升高而升高。将免疫前及免疫后1、2、4周同一时间点的各实验组平均抗体水平进行组间比较,免疫前各实验组组间无显着性差异(p>0.01)。免疫后1周0.8μg多糖组与2.5μg多糖组差异无统计学意义(P>0.01),其余各实验组组间抗体水平差异有统计学意义(p<0.01)。3.159株流感嗜血杆菌中,肺炎患儿中分离Hi 90株,占56.6%;支气管炎患儿39株,占24.5%。4.应用bex A基因特异性扩增159株流感嗜血杆菌,4株阳性。其中69号临床分离菌株经Hi-b、HiHcsA-I特异性编码基因扩增阳性,PCR产物序列测定结果与GenBank数据库内基因序列进行比对分析,一致性分别为98.5%、99%。5.159株流感嗜血杆菌中有4株bex A基因扩增阳性,为荚膜型流感嗜血杆菌,占流感嗜血杆菌2.52%,不可分型流感嗜血杆菌占97.48%;69号临床菌株Hi-b及HiHcsA-I基因扩增条带阳性,经基因序列比对分析鉴定为B型流感嗜血杆菌I型。结论:1.Hib结合疫苗中荚膜多糖能诱导大鼠产生较好的免疫应答,其抗体水平随时间及荚膜多糖含量的升高而升高,有良好的剂量效应。2. Hi是引起小儿呼吸道疾病的主要病原体之一,应用PCR技术对临床菌株进行Hib检测及分型具有较高灵敏度及特异性。针对HiHcsA基因的Hib分型可能反映临床菌株的侵袭力。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2011-05-01)
尹珊珊,李贵凡,刘学龙,郑海发[10](2009)在《b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化方法的优化》一文中研究指出对b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化工艺中冷酚抽提次数、沉淀核酸的乙醇浓度、沉淀糖精的乙醇浓度进行研究。结果表明,最佳纯化工艺为冷酚抽提4次,300 mL/L的乙醇沉淀核酸,650 mL/L的乙醇沉淀糖。所建立的提取纯化工艺提取的荚膜多糖纯度高,各项指标能够达到WHO的规程要求。(本文来源于《动物医学进展》期刊2009年01期)
型流感嗜血杆菌荚膜多糖论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:利用~(31)P-NMR核磁共振定量法(QNMR)测定b型流感嗜血杆菌(Hib)荚膜多糖中的磷含量,建立QNMR的质控方法。方法:采用Bruker AVANCEⅡ400核磁共振谱仪,以六甲基磷酰叁胺为内标,采集一维定量~(31)PNMR谱对不同浓度的磷酸二氢钾进行定量分析,采用传统方法验证该新方法的精密度及准确度,并对2种方法进行比较研究。结果:QNMR定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.7%,相对误差为2.1%~3%,不同浓度样品回收率为97.0%~98.1%;传统的化学法定量结果 RSD为1.2%~3.2%,相对误差为5%~7%,不同浓度样品回收率为93.0%~94.9%;2种方法检测的3批Hib荚膜多糖中磷含量无明显差别,均符合《中国药典》叁部(2010版)规定的68~90 mg/g。结论:~(31)P-NMR定量方法操作简单,耗时短,重现性好,精密度和准确度高,且不破坏多糖成分,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的磷定量。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
型流感嗜血杆菌荚膜多糖论文参考文献
[1].许美凤,毛琦琦,赵丹,陈苏京,李亚南.b型流感嗜血杆菌荚膜多糖定量~1H-NMR法的建立及验证[J].中国生物制品学杂志.2019
[2].普元倩,朱文勇,吴雅楠,靳玮华,李卫东.利用核磁共振(~(31)P-NMR)测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中磷含量的新方法研究[J].生物技术通讯.2018
[3].廉添添,孙强,马矜烁,陶娟,石晓卫.b型流感嗜血杆菌荚膜多糖发酵培养基的优化[J].贵州农业科学.2018
[4].李亚南,李红,石刚,贺鹏飞,唐静.我国部分地区儿童b型流感嗜血杆菌荚膜多糖抗体水平的调查[J].中国生物制品学杂志.2016
[5].韦鹏翀,魏茂琪,常亚军,靳伟华,岳俊.TritonX-114萃取法纯化b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的应用[J].药物生物技术.2016
[6].罗树权,赵志强,房明,杨英英,杜送田.高压液相分子相排阻层析-十八角激光散射仪联用技术分析b型流感嗜血杆菌荚膜多糖分子量的方法的验证[J].中国生物制品学杂志.2015
[7].吴雅楠,王明清,朱文勇,代小虎,宋少辉.通过CDAP活化多糖制备b型流感嗜血杆菌荚膜多糖-D蛋白疫苗初探[J].医学研究杂志.2014
[8].普元倩,朱文勇,寸怡娜,代小虎,张新文.核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量[J].中国生物制品学杂志.2014
[9].张文佳.B型流感嗜血杆菌的荚膜多糖抗体水平及基因分型研究[D].重庆医科大学.2011
[10].尹珊珊,李贵凡,刘学龙,郑海发.b型流感嗜血杆菌荚膜多糖纯化方法的优化[J].动物医学进展.2009
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