王韬:壳聚糖纳米粒水凝胶的制备及其对皮肤伤口修复的研究论文

王韬:壳聚糖纳米粒水凝胶的制备及其对皮肤伤口修复的研究论文

本文主要研究内容

作者王韬(2019)在《壳聚糖纳米粒水凝胶的制备及其对皮肤伤口修复的研究》一文中研究指出:目的临床上创面感染大多采用抗生素,抗菌药物,造成感染难以控制,并且没有促进伤口愈合的功能,而一般用于伤口愈合的敷料并不具备抗菌能力,所以一种具备优良抗菌效果的促伤口愈合敷料显得尤为重要。本课题的目的是以壳聚糖纳米粒(CS NPs)和海藻酸钠为原料制备一种促进伤口愈合的抗菌敷料。通过抗菌实验、细胞学实验以及药效学实验对此敷料的抗菌以及促进伤口愈合效果和机制进行研究。方法以壳聚糖、多聚磷酸钠为原料,采用离子交联法制备壳聚糖纳米粒,以海藻酸钠、壳聚糖纳米粒、氯化钙为原料,制备壳聚糖纳米粒水凝胶(CS NPs loaded CaAlg hydrogel),并根据壳聚糖纳米粒释放情况进行处方优化。采用扫描电镜、红外光谱扫描,流变学分析、溶胀率,对其表面形貌、结构、流变学性能进行表征,通过细菌实验,探究该敷料的抗菌效果及机制。在细胞学评价中,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)考察壳聚糖纳米粒水凝胶对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,简称HUVECs)增殖的影响;检测壳聚糖纳米粒水凝胶以及加入活性氧抑制剂后对HUVECs中活性氧含量的变化;划痕实验和Transwell实验探究壳聚糖纳米粒水凝胶对HUVECs迁移能力的影响;通过血管生成实验,探究壳聚糖纳米粒水凝胶对血管生成的影响;最后通过Western Blot实验检测壳聚糖纳米粒水凝胶对细胞内蛋白表达水平的影响,包括炎症因子白介素-6(IL-6),血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,简称VEGF),金属基质蛋白酶(MMP-2),凋亡蛋白(Bcl-2)等。在药效学实验中,采用大鼠皮肤创伤模型,观察不同给药组的伤口愈合情况,并对伤口组织进行H&E染色,对伤口愈合质量进行评价。结果本文建立了荧光分光光度法对壳聚糖纳米粒含量进行了分析,线性、精密度、回收率等均符合方法学要求。根据壳聚糖纳米粒从水凝胶中的释放情况对处方进行优化,最终获得的壳聚糖纳米粒水凝胶表面孔隙率低,成膜状,壳聚糖纳米粒均匀分散于水凝胶中,最优处方制备的壳聚糖纳米粒水凝胶12小时累积释放率达90%。壳聚糖纳米粒平均粒径为208.4±15.7 nm,Zeta电位为24.2±3.9 mV,凝胶呈现剪切变稀特性,凝胶粘度均随剪切速率的增大而减小,水凝胶溶胀率随时间变化而增大,且随pH值升高而增大。在抑菌实验中,水凝胶中壳聚糖纳米粒浓度越高杀菌效果越好,壳聚糖纳米粒水凝胶组胞外核酸量均明显高于壳聚糖水凝胶(CS-CaAlg hydrogel)组,且随着纳米粒浓度增加,胞外核酸量也增加,细菌涂板实验直观显示随着壳聚糖纳米粒浓度的增加,细菌减少,壳聚糖纳米粒水凝胶组抑菌效果明显强于壳聚糖水凝胶。细胞实验中,通过MTT法测定壳聚糖纳米粒水凝胶对HUVECs没有细胞毒性,但增殖效果并不明显,壳聚糖纳米粒水凝胶能促进HUVECs活性氧的产生,并能促进其迁移以及血管生成,且加入活性氧抑制剂后,迁移以及血管生成作用显著降低。接着我们通过Western Blot考察了壳聚糖纳米粒水凝胶对细胞蛋白表达水平的影响,结果显示,在12 h时,能促进炎症因子IL-6的表达水平从而引起急性炎症在伤口部位募集各种伤口愈合相关细胞,在48 h时IL-6表达水平降低,的起到抗炎作用。在48 h,VEGF和MMP-2的表达,Bcl-2无显著差异。在体内实验中,相比对照组和壳聚糖水凝胶组,壳聚糖纳米粒水凝胶提高了伤口愈合速度和质量。结论壳聚糖纳米粒具有合适的粒径和良好的好稳定性,壳聚糖纳米粒水凝胶孔隙率低成膜状,纳米粒均匀分散在水凝胶中,能够完整地从水凝胶中释放。具有良好的抗菌效果,对HUVECs无细胞毒性,通过调节ROS,促进细胞的迁移以及血管生成。从机制上通过调节IL-6,VEGF和MMP-2等促进细胞的迁移以及血管生成。药效实验证实了壳聚糖纳米粒水凝胶能加速伤口愈合,并提高伤口愈合质量。

Abstract

mu de lin chuang shang chuang mian gan ran da duo cai yong kang sheng su ,kang jun yao wu ,zao cheng gan ran nan yi kong zhi ,bing ju mei you cu jin shang kou yu ge de gong neng ,er yi ban yong yu shang kou yu ge de fu liao bing bu ju bei kang jun neng li ,suo yi yi chong ju bei you liang kang jun xiao guo de cu shang kou yu ge fu liao xian de you wei chong yao 。ben ke ti de mu de shi yi ke ju tang na mi li (CS NPs)he hai zao suan na wei yuan liao zhi bei yi chong cu jin shang kou yu ge de kang jun fu liao 。tong guo kang jun shi yan 、xi bao xue shi yan yi ji yao xiao xue shi yan dui ci fu liao de kang jun yi ji cu jin shang kou yu ge xiao guo he ji zhi jin hang yan jiu 。fang fa yi ke ju tang 、duo ju lin suan na wei yuan liao ,cai yong li zi jiao lian fa zhi bei ke ju tang na mi li ,yi hai zao suan na 、ke ju tang na mi li 、lv hua gai wei yuan liao ,zhi bei ke ju tang na mi li shui ning jiao (CS NPs loaded CaAlg hydrogel),bing gen ju ke ju tang na mi li shi fang qing kuang jin hang chu fang you hua 。cai yong sao miao dian jing 、gong wai guang pu sao miao ,liu bian xue fen xi 、rong zhang lv ,dui ji biao mian xing mao 、jie gou 、liu bian xue xing neng jin hang biao zheng ,tong guo xi jun shi yan ,tan jiu gai fu liao de kang jun xiao guo ji ji zhi 。zai xi bao xue ping jia zhong ,tong guo si jia ji ou dan zuo yan wei liang mei fan ying bi se fa (MTTfa )kao cha ke ju tang na mi li shui ning jiao dui ren qi jing mai nei pi xi bao (Human umbilical vein endothelial cells,jian chen HUVECs)zeng shi de ying xiang ;jian ce ke ju tang na mi li shui ning jiao yi ji jia ru huo xing yang yi zhi ji hou dui HUVECszhong huo xing yang han liang de bian hua ;hua hen shi yan he Transwellshi yan tan jiu ke ju tang na mi li shui ning jiao dui HUVECsqian yi neng li de ying xiang ;tong guo xie guan sheng cheng shi yan ,tan jiu ke ju tang na mi li shui ning jiao dui xie guan sheng cheng de ying xiang ;zui hou tong guo Western Blotshi yan jian ce ke ju tang na mi li shui ning jiao dui xi bao nei dan bai biao da shui ping de ying xiang ,bao gua yan zheng yin zi bai jie su -6(IL-6),xie guan nei pi sheng chang yin zi (Vascular endothelial growth factor,jian chen VEGF),jin shu ji zhi dan bai mei (MMP-2),diao wang dan bai (Bcl-2)deng 。zai yao xiao xue shi yan zhong ,cai yong da shu pi fu chuang shang mo xing ,guan cha bu tong gei yao zu de shang kou yu ge qing kuang ,bing dui shang kou zu zhi jin hang H&Eran se ,dui shang kou yu ge zhi liang jin hang ping jia 。jie guo ben wen jian li le ying guang fen guang guang du fa dui ke ju tang na mi li han liang jin hang le fen xi ,xian xing 、jing mi du 、hui shou lv deng jun fu ge fang fa xue yao qiu 。gen ju ke ju tang na mi li cong shui ning jiao zhong de shi fang qing kuang dui chu fang jin hang you hua ,zui zhong huo de de ke ju tang na mi li shui ning jiao biao mian kong xi lv di ,cheng mo zhuang ,ke ju tang na mi li jun yun fen san yu shui ning jiao zhong ,zui you chu fang zhi bei de ke ju tang na mi li shui ning jiao 12xiao shi lei ji shi fang lv da 90%。ke ju tang na mi li ping jun li jing wei 208.4±15.7 nm,Zetadian wei wei 24.2±3.9 mV,ning jiao cheng xian jian qie bian xi te xing ,ning jiao nian du jun sui jian qie su lv de zeng da er jian xiao ,shui ning jiao rong zhang lv sui shi jian bian hua er zeng da ,ju sui pHzhi sheng gao er zeng da 。zai yi jun shi yan zhong ,shui ning jiao zhong ke ju tang na mi li nong du yue gao sha jun xiao guo yue hao ,ke ju tang na mi li shui ning jiao zu bao wai he suan liang jun ming xian gao yu ke ju tang shui ning jiao (CS-CaAlg hydrogel)zu ,ju sui zhao na mi li nong du zeng jia ,bao wai he suan liang ye zeng jia ,xi jun tu ban shi yan zhi guan xian shi sui zhao ke ju tang na mi li nong du de zeng jia ,xi jun jian shao ,ke ju tang na mi li shui ning jiao zu yi jun xiao guo ming xian jiang yu ke ju tang shui ning jiao 。xi bao shi yan zhong ,tong guo MTTfa ce ding ke ju tang na mi li shui ning jiao dui HUVECsmei you xi bao du xing ,dan zeng shi xiao guo bing bu ming xian ,ke ju tang na mi li shui ning jiao neng cu jin HUVECshuo xing yang de chan sheng ,bing neng cu jin ji qian yi yi ji xie guan sheng cheng ,ju jia ru huo xing yang yi zhi ji hou ,qian yi yi ji xie guan sheng cheng zuo yong xian zhe jiang di 。jie zhao wo men tong guo Western Blotkao cha le ke ju tang na mi li shui ning jiao dui xi bao dan bai biao da shui ping de ying xiang ,jie guo xian shi ,zai 12 hshi ,neng cu jin yan zheng yin zi IL-6de biao da shui ping cong er yin qi ji xing yan zheng zai shang kou bu wei mu ji ge chong shang kou yu ge xiang guan xi bao ,zai 48 hshi IL-6biao da shui ping jiang di ,de qi dao kang yan zuo yong 。zai 48 h,VEGFhe MMP-2de biao da ,Bcl-2mo xian zhe cha yi 。zai ti nei shi yan zhong ,xiang bi dui zhao zu he ke ju tang shui ning jiao zu ,ke ju tang na mi li shui ning jiao di gao le shang kou yu ge su du he zhi liang 。jie lun ke ju tang na mi li ju you ge kuo de li jing he liang hao de hao wen ding xing ,ke ju tang na mi li shui ning jiao kong xi lv di cheng mo zhuang ,na mi li jun yun fen san zai shui ning jiao zhong ,neng gou wan zheng de cong shui ning jiao zhong shi fang 。ju you liang hao de kang jun xiao guo ,dui HUVECsmo xi bao du xing ,tong guo diao jie ROS,cu jin xi bao de qian yi yi ji xie guan sheng cheng 。cong ji zhi shang tong guo diao jie IL-6,VEGFhe MMP-2deng cu jin xi bao de qian yi yi ji xie guan sheng cheng 。yao xiao shi yan zheng shi le ke ju tang na mi li shui ning jiao neng jia su shang kou yu ge ,bing di gao shang kou yu ge zhi liang 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自锦州医科大学的王韬,发表于刊物锦州医科大学2019-08-06论文,是一篇关于壳聚糖纳米粒论文,水凝胶论文,活性氧论文,抗菌论文,伤口愈合论文,锦州医科大学2019-08-06论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自锦州医科大学2019-08-06论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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