重组乳酸乳球菌论文-得丽扎尔·热合曼,刘丹,孙素荣,李轶杰

重组乳酸乳球菌论文-得丽扎尔·热合曼,刘丹,孙素荣,李轶杰

导读:本文包含了重组乳酸乳球菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:乳酸乳球菌,人乳头瘤病毒,RNA干涉技术,shRNA

重组乳酸乳球菌论文文献综述

得丽扎尔·热合曼,刘丹,孙素荣,李轶杰[1](2019)在《重组乳酸乳球菌不同途径发送shRNA抗肿瘤的研究》一文中研究指出[目的]比较重组乳酸乳球菌不同途径发送HPV16E7 shRNA的抗肿瘤效果。[方法]通过实时定量PCR技术筛选出抑制Si Ha细胞中E7基因表达的shRNA片段并构建至乳酸乳球菌质粒p MG36e-RFP中。PCR鉴定获得重组乳酸乳球菌正确后分别通过滴鼻、静脉注射和瘤内注射途径发送到C57BL/6小鼠体内后,检测荷瘤小鼠的生存周期及体内肿瘤的生长大小。[结果]成功构建针对HPV16E7的shRNA干扰表达的重组乳酸乳球菌,肿瘤注射后32 d,鼻腔发送途径组小鼠肿瘤大小约为6. 49±1. 60 cm3,静脉注射组肿瘤大小为4. 49±1. 16 cm3,瘤内注射组肿瘤大小为1. 89±0. 52 cm3,至肿瘤注射60d时,瘤内注射组有3只存活。[结论]瘤内和静脉注射表达shRNA重组乳酸乳球菌均能抑制小鼠体内肿瘤的生长,其中瘤内途径优于静脉注射。(本文来源于《生物技术》期刊2019年05期)

崔国贤[2](2019)在《一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株的实验分析》一文中研究指出研究背景概述本文通过实验研制乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株,期望可以有效的治愈我国糖尿病患者。根据针对糖尿病中的免疫功能紊乱以及自由基毒素等致病因子对人体进行作用,从而降低人体机能中的胰岛素抵抗力以及胰岛功能,最终形成蛋白质、电解质以及脂肪等系列性代谢紊乱症状的分析。提出了(本文来源于《食品界》期刊2019年04期)

张园,王文骞,宋雨心,王婷婷,刘琳琳[3](2019)在《正交试验法在优化重组乳酸乳球菌诱导表达中的应用研究》一文中研究指出为提高重组乳酸菌NICE诱导表达系统表达外源蛋白的能力,研究选取Nisin加入量、OD值、诱导温度和诱导时间这4个主要影响表达的因素,每个因素设置3个水平,设计4因素3水平(43)正交试验。通过优化Nisin加入量、OD值、诱导温度和诱导时间,从而确定重组乳酸菌表达外源蛋白最佳条件。结果显示:当Nisin的量为1 ng/mL、OD值为0.3、诱导温度为30℃、诱导时间为7 h时,其重组乳酸菌表达外源蛋白的量最高。研究结果为由Nisin控制表达基因系统的重组乳酸乳球菌疫苗开发奠定了基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年05期)

宋子杰,商纪娟,盖春云,解倩倩,张洪亮[4](2018)在《表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌对仔猪安全性及免疫效力研究》一文中研究指出为了检验青岛农业大学预防兽医学重点实验室构建的能够表达猪传染性胃肠炎SLN基因的乳酸乳球菌对仔猪的安全性及免疫效力,试验以口服的方式给试验猪免疫重组菌,监测免疫接种后试验猪体重、临床症状及肠道内正常菌群的变化;给小鼠等非靶标性动物口服该重组菌,检验其安全性,同时利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法监测仔猪体内特异性IgG抗体的变化情况。结果表明:试验仔猪口服免疫重组菌后体重与肠道内正常菌群不受影响,重组菌对仔猪及非靶动物没有致病性,且不会向环境微生物转移; ELISA检测该重组菌免疫仔猪后特异性IgG抗体与免疫前相比有明显差异。说明重组SLN基因的乳酸乳球菌对于预防猪传染性胃肠炎是安全有效的。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年24期)

Katja,Skrlec,Rudolf,Rucman,Eva,Jarc,白海,武如娟[5](2018)在《工程重组乳酸乳球菌作为有抗氧化活性的BPC-157小肽的递送载体的研究》一文中研究指出乳酸菌(LAB)因其可表达异源性蛋白而成为广受人们欢迎的宿主菌种,它可以通过基因工程设计从而在粘膜表面递送治疗性的蛋白和多肽。稳定的胃十五肽BPC 157可通过减少活性氧(ROS)的产量而抑制和治疗胃肠炎。本实验中,我们使用乳酸乳球菌做为载体,通过表面展示、胰蛋白酶脱落或分泌到生长液来递送BPC-157。BPC-157表面展示是通过与碱性膜蛋白(BmpA)或肽聚糖结合域AcmA和Uslp45分泌信号蛋白相融合而得到的。当BmpA融合蛋白的表达量高于AcmA/Usp45融合蛋白的表达量时,BPC-157的表面展示能力是AcmA/Usp45融合蛋白的15倍。从菌体表面或胰蛋白酶消化后分离融合蛋白后释放的BPC-157,通过抗BPC-157抗体或质谱得到验证。通过表面展示AcmA/Usp45融合物得到的BPC-157的浓度是30 ng/ml。而通过Usp45信号介导的分泌量达到117 ng/ml,使得后者成为乳球菌表达BPC-157最有效的方法。分泌得到的BPC-157可显着降低149BR成纤维细胞ROS的生成量,这说明其对于治疗肠道炎症有潜在的作用。此外,在本实验中通过不同模式来比较乳酸菌递送小肽的效果,将有助于乳酸乳球菌作为肽递送载体的未来使用。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十叁次全国学术研讨会论文集》期刊2018-11-16)

梅晨,李淑芳,孙爱华,龚玉梅,王宏俊[6](2018)在《表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性研究》一文中研究指出为构建表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌,本试验按照乳酸乳球菌表达的偏好性,优化合成副鸡禽杆菌外膜蛋白p9的编码碱基序列,将其接入表达载体pNZ8149的多克隆位点并导入食品级乳酸乳球菌NZ3900。将重组乳酸乳球菌灭活后经肌肉注射免疫SPF鸡,免疫后攻毒测定乳酸乳球菌的保护效果,检测血清中Ig G抗体和鼻黏膜sIgA抗体水平并检验免疫效果。PCR结果显示,成功构建了含p9片段的重组乳酸乳球菌,Western-blot检测显示,p9片段可在重组乳酸乳球菌内表达。重组菌最佳诱导表达条件:Nisin浓度为20 ng/m L、诱导时间为4 h。鸡肌肉注射免疫后可产生p9蛋白特异性的血清Ig G和鼻黏膜sIgA抗体。乳酸乳球菌重组疫苗免疫鸡对副鸡禽杆菌攻毒的保护率为60%~80%。结果表明,本研究成功构建了重组乳酸乳球菌pNZ8149-p9/NZ3900,该重组菌作为免疫原免疫鸡,对副鸡禽杆菌攻毒具有较好的免疫保护作用。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2018年11期)

武国松,李杉[7](2018)在《抗艰难梭菌毒素纳米抗体在乳酸乳球菌中重组表达及其功能分析》一文中研究指出本研究旨在构建表达抗艰难梭菌毒素的纳米抗体重组乳酸乳球菌。所述的抗体为免疫羊驼后从外周血中分离的天然缺失轻链的纳米抗体(分别命名为E3、AA6)。构建重组质粒pNZ8148-E3-AA6,转化乳酸乳球菌NZ9000后诱导表达,SDSPAGE及Western blot检测到32 kD的目的蛋白。利用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白E3-AA6,BCA试剂盒测定其浓度。通过细胞变圆实验以及CCK8实验鉴定其功能,E3-AA6能够抑制艰难梭菌毒素TcdB的毒性。本实验成功构建了重组表达载体pNZ8148-E3-AA6,通过NICE系统实现了二价抗体的表达,为治疗艰难梭菌引发的感染提供了新的治疗途径。(本文来源于《生物技术通报》期刊2018年10期)

田开仁[8](2018)在《重组乳酸乳球菌耐酸机制挖掘及基因功能分析》一文中研究指出乳酸链球菌素(Nisin)是一种无毒副作用的绿色食物防腐剂,已经在全球范围内广泛用于肉类、乳制品等的保藏。然而在工业发酵时乳酸菌会分泌乳酸使发酵液酸化从而影响菌体正常生长及nisin产量。为了探讨乳酸乳球菌酸耐受机制,本文利用全基因组测序及比较基因组学分析genome shuffling重组菌株G423与原始菌株F44的基因组差异,并利用RNA-seq和qRT-PCR筛选鉴定差异基因,构建sRNA过表达菌株对其表型进行研究,对其中耐酸性较好的sRNA进行靶标预测及可能的耐酸机制分析,与此同时构建并验证乳酸乳球菌的CRISPR/dCas9系统,以期加快基因筛选及基因功能研究的进程。为进一步挖掘重组菌株耐酸机制,将耐酸菌株G423的DNA进行片段化、构建文库、上机测序、组装、注释,并获得了重组菌株G423的全基因组序列图谱。全基因组比对发现G423基因组中有6个大片段插入以及1个仅改变基因拷贝数并未丢失基因功能的大片段丢失。COG分类比较发现在G423中有18个COG簇扩展,这些COG簇涉及细胞膜、壁的合成及H~+转运。根据差异表达基因的COG分类发现细胞壁和细胞膜对于乳酸菌适应酸性环境具有重要作用。转录本重构发现四个新的非编码转录本在G423中存在而在F44中不存在。而RT-PCR验证结果显示pH3.0应激处理1h后,NC-1和NC-4的转录量分别上调2.2倍和1.8倍。对sRNA过表达或者表达的基因工程菌株进行酸应激检测和发酵发现NC-1可以提高F44和G423的酸耐受性,而且对nisin产量的提高有一定作用。生物信息学分析NC-1二级结构及靶标,发现其可能与能量代谢有关。与此同时成功构建了用来调控乳酸菌基因转录的CRISPR/dCas9系统。本研究发现sRNA NC-1对重组菌株G423酸耐受性有重要作用,但未能彻底解析重组菌株高耐酸的全部原因。由于乳酸菌酸耐受机制的复杂性及插入基因数量多,需利用构建好的CRISPRi系统进一步解析重组菌株耐酸机制。(本文来源于《天津大学》期刊2018-06-01)

宋子杰,商纪娟,盖春云,解倩倩,张洪亮[9](2018)在《表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性的研究》一文中研究指出为探究表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌口服免疫动物诱导的特异性免疫应答,本研究构建了p MG36e-SLN重组质粒并将其电转化至乳酸乳球菌感受态细胞MG1363中,制备表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌,经SDS-PAGE、Western-blot分析鉴定目的基因表达,并将重组菌口服免疫新西兰大白兔,利用间接ELISA方法测定家兔小肠黏膜和血清中抗SLN蛋白特异性Ig G和Ig A。结果显示,表达重组SLN蛋白的重组菌经口服能够有效引起动物体产生较高水平抗SLN蛋白Ig G和一定量的抗SLN蛋白Ig A,表明该重组菌表达系统能刺激动物免疫系统产生应答,具有作为口服疫苗的潜在应用价值。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2018年07期)

周建波,胡莉萍,黄河,马宁宁,董雯雯[10](2018)在《重组羊奇异变形杆菌ompA乳酸乳球菌的构建及其在小鼠体内的定植规律检测》一文中研究指出构建了含羊奇异变形杆菌外膜蛋白A(ompA)编码基因的重组载体pNZ8149-ompA,并将其电转入乳酸乳球菌NZ3900中。利用Westen blot检测目的蛋白的表达,流式细胞仪及间接免疫荧光技术检测目的蛋白在乳酸乳球菌中的定位。将重组乳酸乳球菌灌胃BALB/c小鼠,分别于口服后1,2,3,4,5,6,7d取其十二指肠、空肠、回肠、盲肠的肠道冲洗液,通过平板菌落计数法检测乳酸乳球菌在肠道的定植情况。Western blot检测到目的蛋白于49 000处出现特异性条带;流式细胞仪检测到重组乳酸乳球菌表面荧光强度明显强于空质粒对照组;间接免疫荧光试验检测到重组乳酸乳球菌菌体表面出现绿色荧光。灌服小鼠后,重组乳酸乳球菌在小鼠各肠段的定植比例不同,定植能力于口服后6d达到高峰,7d后在重组菌在十二指肠、空肠、回肠和盲肠的定植率分别占第1d的15.23%,24.19%,48.57%,40.07%。本试验证明羊奇异变形杆菌ompA能够稳定表达于乳酸乳球菌表面,且重组乳酸乳球菌在小鼠肠道内具有良好的定植能力,其定植能力为回肠>盲肠>空肠>十二指肠。这为研究乳酸乳球菌作为羊奇异变形杆菌口服疫苗抗原递送载体提供了试验基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年01期)

重组乳酸乳球菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

研究背景概述本文通过实验研制乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株,期望可以有效的治愈我国糖尿病患者。根据针对糖尿病中的免疫功能紊乱以及自由基毒素等致病因子对人体进行作用,从而降低人体机能中的胰岛素抵抗力以及胰岛功能,最终形成蛋白质、电解质以及脂肪等系列性代谢紊乱症状的分析。提出了

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

重组乳酸乳球菌论文参考文献

[1].得丽扎尔·热合曼,刘丹,孙素荣,李轶杰.重组乳酸乳球菌不同途径发送shRNA抗肿瘤的研究[J].生物技术.2019

[2].崔国贤.一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株的实验分析[J].食品界.2019

[3].张园,王文骞,宋雨心,王婷婷,刘琳琳.正交试验法在优化重组乳酸乳球菌诱导表达中的应用研究[J].中国家禽.2019

[4].宋子杰,商纪娟,盖春云,解倩倩,张洪亮.表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌对仔猪安全性及免疫效力研究[J].黑龙江畜牧兽医.2018

[5].Katja,Skrlec,Rudolf,Rucman,Eva,Jarc,白海,武如娟.工程重组乳酸乳球菌作为有抗氧化活性的BPC-157小肽的递送载体的研究[C].中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十叁次全国学术研讨会论文集.2018

[6].梅晨,李淑芳,孙爱华,龚玉梅,王宏俊.表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性研究[J].中国兽医科学.2018

[7].武国松,李杉.抗艰难梭菌毒素纳米抗体在乳酸乳球菌中重组表达及其功能分析[J].生物技术通报.2018

[8].田开仁.重组乳酸乳球菌耐酸机制挖掘及基因功能分析[D].天津大学.2018

[9].宋子杰,商纪娟,盖春云,解倩倩,张洪亮.表达猪传染性胃肠炎病毒SLN基因的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性的研究[J].中国兽医科学.2018

[10].周建波,胡莉萍,黄河,马宁宁,董雯雯.重组羊奇异变形杆菌ompA乳酸乳球菌的构建及其在小鼠体内的定植规律检测[J].中国兽医学报.2018

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