区的基因沉默论文-张秀义

区的基因沉默论文-张秀义

导读:本文包含了区的基因沉默论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:血管内皮生长因子激酶功能区受体,小干扰RNA,肺癌,A549细胞

区的基因沉默论文文献综述

张秀义[1](2015)在《血管内皮生长因子激酶功能区受体基因沉默抑制肺癌A549细胞增殖并增强其对多西他赛的敏感性》一文中研究指出目的研究沉默血管内皮生长因子激酶功能区受体(kinase.domain insert containing receptor,KDR)基因对人肺癌A549细胞增殖以及对化疗药物多西他赛敏感性的影响。方法设计合成:KDR的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列,Lipofectamine~(TM)2000转染入A549细胞。通过反转录-聚合酶链反应和Western Blot检测KDR基因沉默后KDR mRNA及蛋白的表达情况,利用流式细胞仪检测A549细胞的周期变化。采用四甲基偶氮唑盐比色法及细胞克隆形成实验观察,沉默KDR基因后A549细胞对多西他赛的敏感性。结果KDR基因经48 h沉默后,A549细胞的KDR基因和蛋白的表达出现较明显的下降(P<0.05)。A549细胞的周期在G0/G1期阻滞,S期细胞数目减低(P<0.05)。在KDR基因沉默组,A549细胞对多西他赛的敏感性有明显的增强(P<0.05)。结论KDR-siRNA能够明显沉默A549细胞KDR基因和蛋白的表达,并能抑制A549细胞的增殖,增强其对多西他赛的敏感性。(本文来源于《转化医学杂志》期刊2015年03期)

卓娅[2](2014)在《组蛋白H2B突变体影响亚端粒区的基因沉默及染色质结构的分子机制研究》一文中研究指出组蛋白是染色质基本结构单位核小体的核心组成成分。研究发现,核心组蛋白翻译后修饰可以调节许多重要的细胞过程,包括基因转录、沉默和DNA损伤修复等。端粒是真核生物染色体中基因表达调控的一个特殊位点,位于端粒附近的基因转录活性常常受到抑制,称为Telomere Postiton Effect(TPE)。本论文选取了酵母4种核心组蛋白每一个氨基酸位点分别突变为丙氨酸的突变体文库,系统地研究组蛋白H2B每一个突变位点对于亚端粒基因沉默的影响。本实验先选取位于IX号染色体亚端粒处的YIR042c作为报告基因,通过实时定量PCR的方法检测了H2B 111个突变体中报告基因的mRNA水平,发现27个影响IX号染色体亚端粒基因转录的突变体。进一步选取vI染色体上的报告基因YFR057w对上述筛选得到的突变位点同样通过qRT-PCR的方法进行验证,最终得到6个突变位点1057A、N070A、T122A、K123A、S125A和S126A,它们均能上调亚端粒基因的表达。酿酒酵母中,组蛋白去乙酰化酶Sir蛋白家族是维持亚端粒基因沉默的重要因子。本实验通过ChIP qRT-PCR的方法研究了H2B突变体中4种沉默信息因子在32条亚端粒处的结合。结果表明:N070A、T122A、S125A和S126A并不影响Sir2的结合,可能是通过其他的机制调控亚端粒基因的沉默。H2B K123A突变体中,Sir2、Sir3、Sir4和Rap1在绝大多数亚端粒处的结合量明显减少。I057A突变体中,Sir2在近一半的亚端粒区降低了结合量,大多数亚端粒区Sir4的结合量减少,约叁分之一的亚端粒处Sir3和Rap1的结合量反而增加。基因的转录活性与染色质结构相关,转录活跃的常染色质通常结构松散,而沉默状态的异染色质结构紧密。本实验从突变体中制备核小体并下一代高通量测序。结果表明,突变体中亚端粒区染色质的结构与野生型相比变得更加紧密,报告基因YFR057w的染色质结构在突变体中变得松散,而YIR042c的染色质在H2B 1057A中变得紧密,在H2B K123A突变体中并没有发生明显的变化。(本文来源于《2014年第七届中国模式真菌研讨会论文摘要集》期刊2014-05-30)

李文珠,余圣炜,薛钰,李丹丹,靳全文[3](2012)在《热激蛋白Hsp90在调控裂殖酵母异染色质区基因沉默中的功能》一文中研究指出鉴于高等生物中Hsp90与Argonaute蛋白的功能相关性,研究了裂殖酵母中Hsp90/Swo1与Ago1蛋白之间的相互关系以及对异染色质区基因沉默的影响。结果表明,裂殖酵母中Swo1蛋白通过与Ago1蛋白的相互作用,可以稳定Ago1蛋白,并且这种相互作用依赖于Swo1的N端和中央结构域以及Ago1的N端和PAZ结构域。在着丝粒的otr区和imr区,swo1+基因的突变会引起区域内基因沉默的解除,并且与RNAi组分双突变后(ago1Δ或dcr1Δ),基因沉默解除的效果加强。在交配型区,swo1+基因突变后也会引起显着的基因沉默解除现象。当swo1+基因突变后,依赖于Tas3的人工异染色质区基因沉默解除。研究发现了裂殖酵母中热激蛋白Hsp90的新功能,即参与异染色质区的基因沉默调控。(本文来源于《中国科技论文》期刊2012年03期)

ADAMOU,SALISSOU,ZAKARY[4](2009)在《裂繁殖酵母中集缩素和核仁蛋白在调控rDNA区基因沉默中的功能研究》一文中研究指出核仁是真核生物核糖体RNA(rRNA)合成、加工和核糖体亚单位装配的场所,这一亚核空间在成簇排列的串联重复rDNA基因周围形成。在模式生物裂殖酵母(fission yeast,Schizosaccharomyces pombe)基因组中,100-200拷贝的rDNA基因分布在Ⅲ号染色体左右两端的末端附近。rDNA区的完整性对于细胞生长和存活是至关重要的。理论上rDNA作为一种长重复序列,相当不稳定,彼此之间很容易发生同源重组,姐妹染色体间发生不均等交换,导致rDNA簇越来越短,影响细胞生长和其它功能。然而,真核生物细胞在进化过程中,产生了保护rDNA重复序列稳定性和完整性的内在机制,可能是通过抑制同源重组和外源基因启动子的转录来实现的。本研究中,我们主要采用遗传学方法和工具,研究了集缩素和一些核仁蛋白在调控裂殖酵母rDNA基因沉默中的潜在功能。我们的结果显示,含有5个亚单位的集缩素复合体除了其在染色体集缩和分离过程中发挥作用外,对于rDNA区的基因沉默也是必要的,尽管它并不参与着丝粒区的基因沉默。与这一结果相一致,影响集缩素在有丝分裂中期富集在rDNA区的蛋白因子也参与rDNA区的基因沉默。我们还发现,一些核仁蛋白,如Dnt1,Rrn5和Nuc1也参与rDNA区的基因沉默的调控,有可能是通过调控集缩素在核仁中的定位来实现的。与我们的预期相反,由于nuc1+和rrn5+两个基因的突变造成的核仁结构的破坏尽管可以引起集缩素离开核仁而在着丝粒区富集,但却并不能引起着丝粒区的基因沉默的加强。已有的研究发现,芽殖酵母的两个核仁蛋白Csm1和Lrs4影响rDNA区的基因沉默,但是我们的遗传学分析发现,csm1和Lrs4在裂殖酵母中的两个同源蛋白(分别被称作Pcs1和Mde4)并不参与rDNA区的基因沉默调控,因而它们的这一功能并不是保守的。我们的遗传学分析还暗示,集缩素所行使的其在rDNA区的基因沉默中的调控功能可能是通过与裂殖酵母中的RNA干扰(RNAi)途径共同协作来完成的。(本文来源于《厦门大学》期刊2009-07-01)

王天云,袁保梅,薛乐勋[5](2004)在《核基质结合区与转基因沉默》一文中研究指出核基质结合区(matrixattachmentregion,MAR)又叫支架附着区(scafFoldattachmentregion,SAR)是染色质被限制酶消化后仍与核基质或核骨架结合的DNA序列。转基因沉默主要发生在两个水平上,一是转录水平,二是在转录后水平。位置效应是引起转录水平基因沉默的重要因素。研究发现,用MAR构建的载体能够提高转基因的表达水平,能在一定程度上克服基因沉默,降低转基因在不同转基因系间的表达差异,增强外源基因表达的稳定性。(本文来源于《生物学通报》期刊2004年12期)

区的基因沉默论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

组蛋白是染色质基本结构单位核小体的核心组成成分。研究发现,核心组蛋白翻译后修饰可以调节许多重要的细胞过程,包括基因转录、沉默和DNA损伤修复等。端粒是真核生物染色体中基因表达调控的一个特殊位点,位于端粒附近的基因转录活性常常受到抑制,称为Telomere Postiton Effect(TPE)。本论文选取了酵母4种核心组蛋白每一个氨基酸位点分别突变为丙氨酸的突变体文库,系统地研究组蛋白H2B每一个突变位点对于亚端粒基因沉默的影响。本实验先选取位于IX号染色体亚端粒处的YIR042c作为报告基因,通过实时定量PCR的方法检测了H2B 111个突变体中报告基因的mRNA水平,发现27个影响IX号染色体亚端粒基因转录的突变体。进一步选取vI染色体上的报告基因YFR057w对上述筛选得到的突变位点同样通过qRT-PCR的方法进行验证,最终得到6个突变位点1057A、N070A、T122A、K123A、S125A和S126A,它们均能上调亚端粒基因的表达。酿酒酵母中,组蛋白去乙酰化酶Sir蛋白家族是维持亚端粒基因沉默的重要因子。本实验通过ChIP qRT-PCR的方法研究了H2B突变体中4种沉默信息因子在32条亚端粒处的结合。结果表明:N070A、T122A、S125A和S126A并不影响Sir2的结合,可能是通过其他的机制调控亚端粒基因的沉默。H2B K123A突变体中,Sir2、Sir3、Sir4和Rap1在绝大多数亚端粒处的结合量明显减少。I057A突变体中,Sir2在近一半的亚端粒区降低了结合量,大多数亚端粒区Sir4的结合量减少,约叁分之一的亚端粒处Sir3和Rap1的结合量反而增加。基因的转录活性与染色质结构相关,转录活跃的常染色质通常结构松散,而沉默状态的异染色质结构紧密。本实验从突变体中制备核小体并下一代高通量测序。结果表明,突变体中亚端粒区染色质的结构与野生型相比变得更加紧密,报告基因YFR057w的染色质结构在突变体中变得松散,而YIR042c的染色质在H2B 1057A中变得紧密,在H2B K123A突变体中并没有发生明显的变化。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

区的基因沉默论文参考文献

[1].张秀义.血管内皮生长因子激酶功能区受体基因沉默抑制肺癌A549细胞增殖并增强其对多西他赛的敏感性[J].转化医学杂志.2015

[2].卓娅.组蛋白H2B突变体影响亚端粒区的基因沉默及染色质结构的分子机制研究[C].2014年第七届中国模式真菌研讨会论文摘要集.2014

[3].李文珠,余圣炜,薛钰,李丹丹,靳全文.热激蛋白Hsp90在调控裂殖酵母异染色质区基因沉默中的功能[J].中国科技论文.2012

[4].ADAMOU,SALISSOU,ZAKARY.裂繁殖酵母中集缩素和核仁蛋白在调控rDNA区基因沉默中的功能研究[D].厦门大学.2009

[5].王天云,袁保梅,薛乐勋.核基质结合区与转基因沉默[J].生物学通报.2004

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