导读:本文包含了苯丙氨酸解胺酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:油橄榄,苯丙氨酸解氨酶,查尔酮合酶,查尔酮异构酶
苯丙氨酸解胺酶基因论文文献综述
陈文拴[1]（2015）在《油橄榄黄酮合成途径中叁个关键酶基因的克隆及苯丙氨酸解氨酶基因的表达研究》一文中研究指出油橄榄(Olea europaea L.)属于木犀科(Oleaceae),是世界上一种重要的优质木本油料树种。油橄榄果实经压榨所得的橄榄油是目前世界上公认的最为健康的食用油,具有极佳的天然保健功效与美容功效,被誉为“液体黄金”、“植物油皇后”。油橄榄中富含的黄酮是一类多酚化合物,在植物生命活动中发挥着重要的生理功能,此外还可以作为药物具有多种药理作用,因此具有十分重要的开发潜力和研究价值。黄酮类化合物是植物苯丙烷代谢途径中的次生代谢物,苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase, PAL)、查尔酮合酶(chalcone synthase, CHS)和查尔酮异构酶(chalcone isomerase, CHI)是黄酮合成代谢途径中的叁个关键酶,对植物中黄酮类物质的积累有重要的作用。本实验综合运用同源克隆、反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)、融合引物嵌套PCR (fusion primer and nested integrated PCR, FPNI-PCR)与3'-cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end, RACE)等分子生物学技术,分别从油橄榄中克隆到PAL、 CHS、CHI的全长DNA与cDNA,并进行了相关的生物信息学分析,叁个基因分别命名为OePAL、OeCHS、 OeCHI。此外,还对克隆到的OePAL在毕赤酵母X33中进行了诱导表达,且进行了相关的酶学性质研究。得到如下主要研究结果。1. OePAL的DNA全长2970 bp,含有一个内含子(393～1220 bp),全长cDNA有2142 bp,开放阅读框编码713个氨基酸,且与其他植物有较高的同源性。氨基酸序列分析显示,OePAL属于稳定性蛋白,分子式为C3424H5490N944O1052S25,等电点为5.83,不含信号肽序列；所编码的多肽链中有4个脱氨位点(L20、V204、L25、A254)和11个催化活性位点(N257、G258、N379、D380、N381、H393、H483、N484、Q485、 D486、V487),且包含56.52%的a-螺旋、5.61%的β-转角和30.86%的无规则卷曲。利用该基因构建的重组质粒pPICZa A-OePAL成功地在毕赤酵母X33中进行了表达。SDS-PAGE检测显示该重组酶的分子量在77.5 kD左右,纯化后的比活力为196.3U/mg。酶学性质研究表明：该重组酶的最适反应条件为40℃,pH 8.8；在50℃以下,pH 7.7～9.2保温半小时酶活力可以保持相对稳定；在供试范围内Cu2+与Na+可以提高该酶活性；以L-苯丙氨酸为底物,在最适条件下该酶的Km为4.89×104 mol/L。2. OeCHS有3个外显子,且包含1个1173 bp的开放阅读框,编码390个氨基酸,其氨基酸序列与葡萄和番茄全长CHS氨基酸序列的相似性在90%左右。氨基酸序列分析显示,OeCHS的相对分子量为43.0445 kD, 分子式为C1915H3053N519O568S19,等电点为6.24,不含信号肽,属于不稳定性蛋白,活性中心由4个高度保守的氨基酸残基(C164、H303、N336、F215)构成,空间结构中有44.36%的α-螺旋、6.92%的β-转角和33.08%的无规则卷曲。3. OeCHI的全长DNA包含有4个外显子和3个内含子,全长cDNA包含有一个编码249个氨基酸多肽链的完整ORF,该ORF序列与梨和樱桃的相似度最高,但也仅为68.84%和67.81%,其编码的氨基酸序列与金银花CHI的相似度最高为65.87%。OeCHI中有4个重要的催化位点(T50、Y108、N115、S192)和7个底物结合位点(R38、G39、L40、F49、I52、K111、V112),属于细胞质中的一种不稳定性蛋白,其分子式为C1202H1890N306O368S4,相对分子量为26.64 kD,等电点为6.01,在二级结构中有42.57%的α-螺旋、8.03%的β-转角和32.53%的无规则卷曲。(本文来源于《四川农业大学》期刊2015-05-01）
廖玉才,李和平,Ｒａｉｎｅｒ,Ｆｉｓｃｈｅｒ[2]（1997）在《小麦苯丙氨酸解氨酶基因和几丁质酶基因转录起始点的鉴定》一文中研究指出本文应用改良的引物延伸法，鉴定了一个小麦的苯丙氨酸解氨酶和几丁质酶基因的转录起始点。这种方法只需少量同位素，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱和严格的杂交条件。利用两种基因的特定引物及总ＲＮＡ进行的引物延伸反应产物在电泳的凝胶上均呈现一条十分清楚的带，表明这两种多拷贝小麦基因的转录分别起始于一个核苷酸。小麦苯丙氨酸解氨酶基因的转录起始点为５′－ＣＴＧＣＣＧＡＧＴ－３′序列中的第２个Ｃ；而小麦几丁质酶基因转录起始点为５′－ＡＴＣＡＣＣＡＧＣ－３′序列中的第２个Ａ。它们都分别位于各自基因ＴＡＴＡ盒的下游。(本文来源于《遗传》期刊1997年05期）
苯丙氨酸解胺酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文应用改良的引物延伸法，鉴定了一个小麦的苯丙氨酸解氨酶和几丁质酶基因的转录起始点。这种方法只需少量同位素，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱和严格的杂交条件。利用两种基因的特定引物及总ＲＮＡ进行的引物延伸反应产物在电泳的凝胶上均呈现一条十分清楚的带，表明这两种多拷贝小麦基因的转录分别起始于一个核苷酸。小麦苯丙氨酸解氨酶基因的转录起始点为５′－ＣＴＧＣＣＧＡＧＴ－３′序列中的第２个Ｃ；而小麦几丁质酶基因转录起始点为５′－ＡＴＣＡＣＣＡＧＣ－３′序列中的第２个Ａ。它们都分别位于各自基因ＴＡＴＡ盒的下游。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
苯丙氨酸解胺酶基因论文参考文献
[1].陈文拴.油橄榄黄酮合成途径中叁个关键酶基因的克隆及苯丙氨酸解氨酶基因的表达研究[D].四川农业大学.2015
[2].廖玉才,李和平,Ｒａｉｎｅｒ,Ｆｉｓｃｈｅｒ.小麦苯丙氨酸解氨酶基因和几丁质酶基因转录起始点的鉴定[J].遗传.1997