导读:本文包含了白斑病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:对虾白斑综合征病毒,抗原表位,重组蛋白,抗原性
白斑病毒论文文献综述
董慧芹,刘金宝,张国华[1]（2019）在《对虾白斑病毒多抗原决定簇重组蛋白的抗原性分析》一文中研究指出为研究重组多表位蛋白制备疫苗的方法的可行性,研究通过利用目前有研究证实与对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染与致病力相关的重要决定因子囊膜蛋白VP28、VP19和被膜蛋白VP26,从这叁种蛋白基因中筛选表位基因,将这些筛选到的抗原表位通过最优化的方式组合以及密码子优化,组成新的表位基因序列,命名为Y1798G,长度为509 bp。将该基因克隆到p ET-32a原核表达载体,生产抗原表位蛋白。将纯化的抗原蛋白注射到小白鼠体内,获得抗体;并通过蛋白免疫印迹(western blot)实验验证获得的抗体能否识别结合WSSV。结果表明所构建的抗原表位重组蛋白对WSSV具有特异抗原性,可见此种制备对虾白斑病毒疫苗的策略具有可行性。(本文来源于《科学技术与工程》期刊2019年10期）
邓泽森,欧江涛,王资生[2]（2018）在《白斑病毒感染罗氏沼虾的MicroRNA转录组分析》一文中研究指出罗氏沼虾是目前世界上养殖量最多的叁大虾种之一,也是我国沿海地区甲壳动物重要的经济产业。但是,随着行业的大规模发展,水产病毒频繁发生,给水产养殖业带来了重大的经济损失。白斑病毒的传播途径主要有水平传播、垂直传播,主要感染对象为对虾,但它对甲壳纲十足类动物都具有致病性,感染力很强,危害大,罗氏沼虾被感染后,3个小时到10个小时内会全部死亡,给罗氏沼虾养殖业带来巨大的损失。MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的长度大概为20-25个核苷酸一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,参与各种各样的调节途径,包含发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。其作用机制又叫转录后基因沉默的机制,由抑制靶mRNA翻译或降解靶mRNA这两种方式来调制基因表达,并在免疫系统中起重要作用。无脊椎动物由于缺少真正的抗体和特异性的免疫细胞,其自然免疫由非特异的先天免疫结构,即体液免疫与细胞免疫共同完成。在固有免疫应答中,miRNA可调控Toll样受体的表达,从而达到对初始阶段对整个免疫应答的领域与强弱。在适应性免疫应答如免疫细胞的激活、增值分化及抗原转承,在病毒感染免疫中对病毒的生命周期、病毒对宿主组织的选择嗜亲性与病毒相关疾病等都具有影响。罗氏沼虾作为重要的养殖产业之一,其抗病防病的分子机制研究尤为重要。所以探讨罗氏沼虾中免疫相关的miRNA很有必要和意义。本研究中采用注射白斑病毒的方式感染罗氏沼虾,以注射培养基的罗氏沼虾为对照,以其肝胰腺细胞为研究材料,按照美国LC Sciences公司的TRK-1002型动物组织RNA纯化试剂盒对罗氏沼虾中进行总RNA的提取,然后利用感染和未感染样品的总RNA构建的2个RNA pool构建2个用于miRNA高通量测序的cDNA文库,此过程使用Illumina Truseq Small RNA Preparation kit完成。构建的miRNA文库经纯化后在Illumina的聚簇机上生成cluster(s簇群)后上机(Illumina GAIIx instrument,40 nt)进行miRNA高通量测序。测序数据在去除冗余后,采用miRBase数据库的21.0版(miRBase v21.0)进行分析,最后获得的可比对测序序列(Mappable Reads)。通过比较和分析不同处理中小RNA的序列和表达水平,来筛选和鉴定罗氏沼虾免疫相关miRNA,以此探讨免疫相关的miRNA与罗氏沼虾非特异性免疫力的关系,从而进一步了解罗氏沼虾的发病和抗病机制。我们使用高通量illumina/Solexa的深度测序技术研究正常和感染状况的罗氏沼虾的两个miRNA文库。对于正常和感染的肝胰腺组织测序分别得到了约5005587和10083687的原始读数,去冗余后获得了4032389和5079907的高质量可比对数据。通过生物信息学分析鉴定出304个的miRNAs,包括32个保守型,226个PC型,46个PN型。为了确定两个肝胰腺组织样品之间的miRNA基因表达的临床意义,我们利用ideg6程序进行在线分析,经过Bonferroni校正多重比较且P值<0.0001,表明在miRNA计数方面Chi-squared 2×2测试和Fisher精确查验的结果具备重要的统计学意义。在两种肝胰腺组织样本中通过衡量测序频率来提供miRNAs表达的重要信息,我们运用IDEG6软件分析得到的测序数据表明了有79个miRNAs在正常与感染的样品中显着差异性表达(P值<0.0001),其中36个显着上调(病毒特有的有11个显着上调),43个显着下调(正常特有的有10个显着下调)。本研究从分子水平上,丰富了白斑病毒与甲壳类动物宿主的相互作用机制的研究内容,为脊椎动物的免疫机理的深入研究奠定了良好的基础,也为无脊椎动物的抗病机制提供新的依据,有助于开发一种有效的抗该病毒感染甲壳动物的免疫保护新策略。(本文来源于《中国生物工程学会第十二届学术年会暨2018年全国生物技术大会论文集》期刊2018-11-09）
[3]（2017）在《澳大利亚养殖对虾发现白斑病毒》一文中研究指出据FiS 2016年12月5日报道:在经过检测确认后,确定位于布里斯班南部的对虾养殖场内发现白斑综合征(WSD)。农业部部长Bill Byrne要求昆士兰生物部门对对虾养殖场进行检测,并将标本送至吉朗的澳大利亚动物健康实验室分析,结果表明并证实该养殖场因缺乏有效管理,致使对虾感染白斑病毒。(本文来源于《水产养殖》期刊2017年01期）
吴庆东,冷忠业,车向庆,张刚[4]（2015）在《南美白对虾白斑病毒病救治实例》一文中研究指出我地区南美白对虾白斑病毒病发病时间多在8月初,恰是高温阴雨季节;发病的虾多是放养早、规格大(8厘米)的虾,而放养晚、规格小(6厘米)的虾同时期发病较少。现就在2014年对淡水养殖南美白对虾白斑病毒病的救治实例介绍如下。一、发病情况发病虾活力下降,在池边水面上漫游或伏卧,游泳无力,反应迟钝,不摄食,空胃,附肢或前端变成红色。病虾的头胸甲易剥开,腹部容易揭开而不连真皮。病虾甲壳上有白色圆点,以头胸甲处最为显着,(本文来源于《科学养鱼》期刊2015年01期）
吴思思,金立方,余招锋[5]（2012）在《南美白对虾桃拉病毒和白斑病毒多重PCR检测体系的建立》一文中研究指出养殖对虾可混合感染多种病毒,桃拉病毒(Taura syndrome virus,TSV)和白斑病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是南美白对虾感染的主要病原体,建立TSV和WSSV的多重聚合酶链式反应(PCR)技术可有效防制疫病的爆发。根据GenBank公布的TSV和WSSV全基因组序列,分别设计TSV和WSSV的特异性引物,并在四种不同的PCR系统中扩增筛选,在同一电泳道内得到与预期结果相符的、可明显区分的2条特异条带,PCR扩增产物测序显示分别与TSV和WSSV基因序列吻合,本体系的建立为生产鉴别和诊断混合感染病毒奠定基础。(本文来源于《农业与技术》期刊2012年10期）
吴文林,杨培峰,陈宇,陈曦[6]（2012）在《对虾白斑病毒核糖核苷酸还原酶基因原核表达载体的构建及蛋白表达、纯化》一文中研究指出采用PCR方法扩增对虾白斑病毒核糖核苷酸还原酶基因,插入到pGEX-4T-2表达载体上构建出带有目的基因的重组质粒pGEX-4T-2RR,然后将重组质粒转化大肠杆菌.转化菌经IPTG诱导后大量表达重组蛋白,通过降低诱导温度获得可溶性表达的重组蛋白,采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化,获得了高纯度的目的蛋白.(本文来源于《泉州师范学院学报》期刊2012年02期）
王专伟,黄建华,杨其彬,周发林,朱彩艳[7]（2011）在《15个斑节对虾家系生长及抗白斑病毒分析》一文中研究指出为研究斑节对虾生长速度和抗病性的关系,按照1尾雌虾对1尾雄虾的比例建立15个全同胞家系,通过这15个斑节对虾全同胞家系生长、抗白斑病毒(WSSW)试验,选出具有生长优势的家系394,053,抗病性强的家系242,007,480。对抗病免疫相关因子超氧化物岐化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)的分析中,强抗病组家系平均SOD活力显着高于中等抗病组(P<0.05),极显着高于较差抗病组(P<0.01)。强抗病组ACP活力显着高于较差抗病组(P<0.05)。AKP活力在3个家系组中没有显着性差异,但是强抗病组的AKP酶活力仍高于中等抗病组和较差抗病组。SOD活力与家系抗病存活时间极显着相关(P<0.01),相关系数r=0.936,ACP与家系抗病存活时间显着相关(P<0.05),相关系数r=0.826。(本文来源于《海洋科学进展》期刊2011年04期）
李咏梅,黎铭,陈晓汉,兰宗宝,彭金霞[8]（2010）在《RNA干扰南美白对虾白斑病毒VP28基因的体外研究》一文中研究指出为方便筛选VP28特异性siRNAs,通过构建真核表达载体pEGFP-VP28,然后将设计的siRNA与pEGFP-VP28共转染BHK细胞,并采用Western blotting检测GFP-VP28融合蛋白的表达情况以及半定量RT-PCR检验siRNA抑制VP28转录的效果,建立了体外RNA干扰法筛选系统。结果表明,pEGFP-VP28能在BHK细胞正常表达,设计的3对siRNA对VP28的mRNA转录均有不同程度的干扰效果,其中siRNA2的干扰效果最为显着。研究结论为开展RNA干扰在对虾体内抑制WSSV的研究建立基础。(本文来源于《西南农业学报》期刊2010年06期）
黎铭,陈晓汉,马春霞,蒋伟明,马宁[9]（2010）在《对虾白斑病毒VP15基因的RNA干扰体外研究》一文中研究指出VP15是南美白对虾WSSV病毒的一个核衣壳蛋白基因。采用体外干扰实验筛选对VP15具有针对性的siRNA。实验构建了真核表达载体pEGFP-VP15,并将设计的siRNA以及pEGFP-VP15共转染BHK细胞。采用Western blot方法检测GFP-VP15融合蛋白的表达,半定量RT-PCR方法检验siRNA抑制VP15基因转录的效果。实验结果表明,pEGFP-VP15在PK细胞正常表达,设计的3对siRNA对GFP-VP15的mRNA转录均有不同程度的干扰效果;其中,siRNA1的干扰效果最为显着。实验结果为下一步对虾体内干扰WSSV病毒复制研究以及筛选更多的特异siRNA建立基础。(本文来源于《水生态学杂志》期刊2010年05期）
刘梅,付亚萍,王雷,孙姝娟,刘文真[10]（2008）在《利用水稻生物反应器表达对虾白斑病毒囊膜蛋白基因防治对虾白斑综合症的研究》一文中研究指出对虾白斑综合症(WSS)是危害全球对虾养殖业的毁灭性病害,迄今为止尚无有效的治疗方法。探讨对虾白斑综合症病毒的致病机理以及有效的防治方法一直是国内外学者研究的热点。尽管目前对于无脊椎动物免疫学的研究结果显示无脊椎动物不存在获得性免疫,但是很多研究结果显示饲喂或者注射灭活的WSSV或其囊膜蛋白可以提高对虾的抗病性。同时,利用转基因技术生产动物口服疫苗是是植物基因工程与免疫学相结合而发展起来的新研究方向。迄今为止,在植物中成功表达的动物和人类疫苗有几十种,包括犬细小病毒抗原(CPV-CP-VP2)、水貂肠炎病毒抗原(MEV-VP2)、口蹄疫病毒抗原(FMDV-VP1)等。植物抗原引起免疫反应的机制还在研究中,但显然植物细胞中表达的抗原在植物细胞壁的保护下可以相对安全的通过胃液的消化而到达肠道,激活机体的粘膜免疫。植物生物反应器以其成本低廉、技术成熟、安全性高、保真性强等优势,逐步成为生产动物口服疫苗的新方式。本研究结合植物基因工程与对虾白斑综合症研究的最新进展,尝试利用水稻生物反应器表达WSSV囊膜蛋白,通过饲喂含有WSSV囊膜蛋白的免疫制剂达到防治对虾白斑综合症的目的。(本文来源于《第六届世界华人虾蟹类养殖研讨会论文摘要集》期刊2008-12-01）
白斑病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
罗氏沼虾是目前世界上养殖量最多的叁大虾种之一,也是我国沿海地区甲壳动物重要的经济产业。但是,随着行业的大规模发展,水产病毒频繁发生,给水产养殖业带来了重大的经济损失。白斑病毒的传播途径主要有水平传播、垂直传播,主要感染对象为对虾,但它对甲壳纲十足类动物都具有致病性,感染力很强,危害大,罗氏沼虾被感染后,3个小时到10个小时内会全部死亡,给罗氏沼虾养殖业带来巨大的损失。MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的长度大概为20-25个核苷酸一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,参与各种各样的调节途径,包含发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。其作用机制又叫转录后基因沉默的机制,由抑制靶mRNA翻译或降解靶mRNA这两种方式来调制基因表达,并在免疫系统中起重要作用。无脊椎动物由于缺少真正的抗体和特异性的免疫细胞,其自然免疫由非特异的先天免疫结构,即体液免疫与细胞免疫共同完成。在固有免疫应答中,miRNA可调控Toll样受体的表达,从而达到对初始阶段对整个免疫应答的领域与强弱。在适应性免疫应答如免疫细胞的激活、增值分化及抗原转承,在病毒感染免疫中对病毒的生命周期、病毒对宿主组织的选择嗜亲性与病毒相关疾病等都具有影响。罗氏沼虾作为重要的养殖产业之一,其抗病防病的分子机制研究尤为重要。所以探讨罗氏沼虾中免疫相关的miRNA很有必要和意义。本研究中采用注射白斑病毒的方式感染罗氏沼虾,以注射培养基的罗氏沼虾为对照,以其肝胰腺细胞为研究材料,按照美国LC Sciences公司的TRK-1002型动物组织RNA纯化试剂盒对罗氏沼虾中进行总RNA的提取,然后利用感染和未感染样品的总RNA构建的2个RNA pool构建2个用于miRNA高通量测序的cDNA文库,此过程使用Illumina Truseq Small RNA Preparation kit完成。构建的miRNA文库经纯化后在Illumina的聚簇机上生成cluster(s簇群)后上机(Illumina GAIIx instrument,40 nt)进行miRNA高通量测序。测序数据在去除冗余后,采用miRBase数据库的21.0版(miRBase v21.0)进行分析,最后获得的可比对测序序列(Mappable Reads)。通过比较和分析不同处理中小RNA的序列和表达水平,来筛选和鉴定罗氏沼虾免疫相关miRNA,以此探讨免疫相关的miRNA与罗氏沼虾非特异性免疫力的关系,从而进一步了解罗氏沼虾的发病和抗病机制。我们使用高通量illumina/Solexa的深度测序技术研究正常和感染状况的罗氏沼虾的两个miRNA文库。对于正常和感染的肝胰腺组织测序分别得到了约5005587和10083687的原始读数,去冗余后获得了4032389和5079907的高质量可比对数据。通过生物信息学分析鉴定出304个的miRNAs,包括32个保守型,226个PC型,46个PN型。为了确定两个肝胰腺组织样品之间的miRNA基因表达的临床意义,我们利用ideg6程序进行在线分析,经过Bonferroni校正多重比较且P值<0.0001,表明在miRNA计数方面Chi-squared 2×2测试和Fisher精确查验的结果具备重要的统计学意义。在两种肝胰腺组织样本中通过衡量测序频率来提供miRNAs表达的重要信息,我们运用IDEG6软件分析得到的测序数据表明了有79个miRNAs在正常与感染的样品中显着差异性表达(P值<0.0001),其中36个显着上调(病毒特有的有11个显着上调),43个显着下调(正常特有的有10个显着下调)。本研究从分子水平上,丰富了白斑病毒与甲壳类动物宿主的相互作用机制的研究内容,为脊椎动物的免疫机理的深入研究奠定了良好的基础,也为无脊椎动物的抗病机制提供新的依据,有助于开发一种有效的抗该病毒感染甲壳动物的免疫保护新策略。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白斑病毒论文参考文献
[1].董慧芹,刘金宝,张国华.对虾白斑病毒多抗原决定簇重组蛋白的抗原性分析[J].科学技术与工程.2019
[2].邓泽森,欧江涛,王资生.白斑病毒感染罗氏沼虾的MicroRNA转录组分析[C].中国生物工程学会第十二届学术年会暨2018年全国生物技术大会论文集.2018
[3]..澳大利亚养殖对虾发现白斑病毒[J].水产养殖.2017
[4].吴庆东,冷忠业,车向庆,张刚.南美白对虾白斑病毒病救治实例[J].科学养鱼.2015
[5].吴思思,金立方,余招锋.南美白对虾桃拉病毒和白斑病毒多重PCR检测体系的建立[J].农业与技术.2012
[6].吴文林,杨培峰,陈宇,陈曦.对虾白斑病毒核糖核苷酸还原酶基因原核表达载体的构建及蛋白表达、纯化[J].泉州师范学院学报.2012
[7].王专伟,黄建华,杨其彬,周发林,朱彩艳.15个斑节对虾家系生长及抗白斑病毒分析[J].海洋科学进展.2011
[8].李咏梅,黎铭,陈晓汉,兰宗宝,彭金霞.RNA干扰南美白对虾白斑病毒VP28基因的体外研究[J].西南农业学报.2010
[9].黎铭,陈晓汉,马春霞,蒋伟明,马宁.对虾白斑病毒VP15基因的RNA干扰体外研究[J].水生态学杂志.2010
[10].刘梅,付亚萍,王雷,孙姝娟,刘文真.利用水稻生物反应器表达对虾白斑病毒囊膜蛋白基因防治对虾白斑综合症的研究[C].第六届世界华人虾蟹类养殖研讨会论文摘要集.2008