咸阳市疾病预防控制中心陕西712000
摘要：目的了解咸阳市城乡活禽市场环境中禽流感病毒的分布情况，为人禽流感防控提供参考依据。方法用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法（RealtimeRT-PCR）检测环境标本禽流感病毒。结果采集的125份环境标本中，禽流感FluA阳性24份（19.20%），均为H9亚型。2014-2015年检出率逐渐升高，且每年三、四季度均高于一、二季度，禽类粪便未检出阳性。结论咸阳市城乡活禽市场环境中存在H9污染，每年三、四季度尤为严重，应当加大对活禽市场的监测力度。
关键词：城乡活禽市场；禽流感病毒；监测
SurveillanceofavianinfluenzainalivepoultrymarketsinurbanandruralareasinXianyangfrom2014to2015
CHENBin,ZHANGJun-jun,QINLong,WANGYing-ying,YANGNan,WANGLi-juan
XianyangCityCenterforDiseaseControlandPrevention,Shanxi712000,China
Abstract:ObjectiveTounderstandthecirculationofavianinfluenzavirus(AIV)inalivepoultrymarketsinurbanandruralareasinXianyang,andprovideevidenceforthepreventionandcontrolofhumaninfectionwithAIV.MethodsReal-timeFluorescentQuantitativePCRwasappliedtodetectavianinfluenzavirusintheexternalenvironmentsamples.ResultsCollectionof125environmentsampleshave24werepositivewithapositiverate19.20%（TheresultsareH9）.Detectionrateincreasedyearbyyear,andthethirdandfourthquarterthanthefirstandsecondquarters.Nopositiveresultsweredetectedinscalelivestockfarmsuptopresent.ConclusionThereexistH9pollutioninthelivepoultrymarketsenvironmentofXianyang,especiallyinthethirdquarterandfourthquarter.Intensifiedmonitoringoflivepoultrymarketisneededtopreventhumanavianinfluenza.
Keywords:alivepoultrymarketinurbanandruralareas;avianinfluenzavirus;Surveillance
人禽流感是由人类感染禽流感病毒（AvianInfluenzaVirus,AIV）引起的人禽共患传染病，该病毒属于甲型流感病毒，其传播途径以禽—人、环境—人和母—婴垂直传播为主[1-2]。世界卫生组织（WHO）指出，环境中存在禽流感病毒，会引发新的人禽流感病毒流行。活禽市场暴露是3个独立的危险因素之一，向妮娟等[3]研究发现，城市人感染禽流感病例以暴露于活禽市场为主。因此，禽流感病毒的监测对预防人禽流感具有重要意义。
咸阳市活禽市场普遍存在活禽宰杀现象，且活禽种类繁多、市场环境较差、人员卫生意识薄弱。为评估咸阳市人禽流感发生风险，以便采取有针对性的防控措施，现对2014-2015年该市城乡活禽市场环境中禽流感病毒H5、H7、H9亚型的分布状况进行监测分析。
1材料与方法
1.1标本收集
选取咸阳市禽类养殖场所较为集中的泾阳县为监测点，将该县活禽市场及规模化家禽养殖户列为监测对象，依照《陕西省职业暴露人群高致病性禽流感监测方案（2011年版）》进行采样监测。在各采样点内采集禽类粪便、笼具物表擦拭物、禽类饮用水及禽肉宰杀或摆放案板擦拭物等外环境标本。2014-2015年，每月从各采样点采集至少5份标本。标本存放于装有3mlHank's保存液的螺口管中，经一式三份分装后送至咸阳市疾病预防控制中心（CDC）国家流感/禽流感监测网络实验室，-80℃冰柜冻存备检。累计收集标本125份。
1.2标本检测
由环境标本中提取禽流感病毒RNA后，以实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法（RealtimeRT-PCR）进行禽流感病毒FluA核酸检测，FluA阳性的标本进一步检测H5、H7和H9亚型核酸。病毒RNA提取试剂盒（AM1836磁珠法核酸提取试剂）购自ABI公司，禽流感病毒FluA型通用及H5、H7、H9亚型荧光定量分型试剂购自江苏硕世生物科技有限公司。
1.3数据分析
采用SPSS13.0软件进行数据统计分析，并用Origin9.0软件作图。
2结果与分析
2.1时间分布
图12014-2015年不同季度禽流感病毒FluA核酸检测结果
2014-2015年咸阳市城乡活禽市场外环境各季度禽流感病毒FluA核酸检测结果见图1。由图可知咸阳市城乡活禽市场外环境中禽流感病毒FluA自2014年第二季度后各季度均有检出，且都为H9亚型禽流感病毒。检出率均在三、四季度升高，并随着时间的推移逐渐上升，2015年第四季度检出率达到53.33%，较当年一、二季度上升了33.33%，高于湖北省十堰市的47.62%[4]、武汉市的34.00%[5]。以上研究表明咸阳市城乡活禽市场外环境存在禽流感病毒H9亚型污染，且三、四季度污染较严重，这可能与活禽市场活禽种类繁多、禽类交易频繁、环境卫生差、市场人员防护意识薄弱等有关。因此，为降低人禽流感发生的风险，应加强对活禽市场病死禽的监管，注重交易市场与屠宰场所的清扫及消毒，强化交易人员的防护意识与防护措施。
2.2标本分布
2014-2015年咸阳市城乡活禽市场外环境不同种类标本禽流感病毒FluA核酸结果见表1。由表可知禽类粪便2个标本均为阴性，禽肉宰杀或摆放案板擦拭物和禽饮用水1个标本为阳性H9亚型。笼具物表擦拭标本和禽类饮用水标本数分别为55个和66个。禽流感病毒FluA核酸和H9亚型检出率最高的为禽类饮用水（24.24%），最低的为笼具表面擦拭标本（12.73%），平均检出率达18.49%。监测数据显示禽流感病毒在笼具物表层擦拭物和禽类饮用水中均有存在。以上研究表明禽类交易、宰杀等环节中极易造成活禽市场的环境污染，宰杀环节中所用的水和案板等更容易被禽流感病毒污染。人感染禽流感的主要途径就是密切接触病死禽，危险行为包括禽类的宰杀、拔毛以及加工[6]。建议实行活禽集中屠宰，以便每天对禽类冲洗水、粪便、内脏、案板等高危器物进行集中消毒处理。
3结论
研究结果表明，咸阳市活禽市场近年存在禽流感病毒H9亚型污染，且检出率逐渐增加，三、四季度检出率均高于当年一、二季度。为降低人禽流感发生风险，应加强对城乡活禽市场外环境的监测，重点监测已在人和家禽中引起疫病的禽流感病毒，为预防和控制禽流感提供准确的流行病学资料；还应加强对相关人员的健康教育，提高相关人员的操作和防护水平，改善城乡活禽宰杀现场的环境；实行活禽集中屠宰，禽类冲洗水、粪便、内脏、案板等高危器物定期集中消毒处理，有效控制禽流感病毒在人与禽类间的传播。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部.人禽流感诊疗方案[S].北京:中华人民共和国卫生部,2008.
[2]国家卫生和计划生育委员会办公厅.人感染H7N9禽流感诊疗方案[S].2013年第2版.
[3]向妮娟,周蕾,怀扬,等.2005-2009年中国人禽流感（H5N1）病例流行病学特征分析[J].实用预防医学,2010,17(6):1070-1073.
[4]梅玉发,王喜云,崔龙,等.2011-2012年湖北省十堰市城乡活禽市场禽流感监测分析[J].疾病监测,2013,28(11):881-883.
[5]王英,孔雯骅,朱洪浩,等.武汉市外环境中禽流行性感冒病毒分布及禽类职业暴露人群H5N1抗体水平调查[J].中华预防医学杂志,2011,45(12):1082-1085.
[6]王陇德.人感染高致病性禽流感[M].北京:人民卫生出版社,2007.