导读:本文包含了沉默元件论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:顺式元件,沉默子,负调控元件,基因表达调控
沉默元件论文文献综述
胡朝阳,唐培培,邓炎春,孙伟娟,姚勤[1]（2019）在《转录水平调控中的负调控元件——沉默子》一文中研究指出在真核生物、原核生物及病毒的基因组中存在着调控基因表达的顺式元件,沉默子是其中的一种负调控元件,它能够同反式因子协同作用,抑制靶基因的转录活性,在基因表达调控中发挥重要作用。该文主要对沉默子的特性、结构组成及其分类进行简要总结,对沉默子可能作用机制进行简要综述,最后展望沉默子在遗传工程及人类疾病治疗等领域的应用前景。(本文来源于《生命科学》期刊2019年07期）
宋志琦,徐艳峰,邓巍,于品,屈亚锦[2]（2019）在《锂元素对抑制元件沉默性转录因子表达的调控机制》一文中研究指出(目的)抑制元件沉默性转录因子(REST)在大脑内的正常表达对于健康老年人至关重要,而在阿尔兹海默病和朊病毒病等神经退行性疾病中REST的表达受到抑制。特异性促进REST在神经元中的表达可能具有潜在的神经保护作用。本研究旨在分析锂元素对REST表达的影响和潜在的调控机制。(方法)①Pr P106-126毒性多肽孵育原代皮质神经元,收集并分离细胞的胞浆和胞核,分析REST在亚细胞结构中的表达和定位;②在以上环境中加入氯化锂(Li Cl),通过免疫荧光分析氯化锂对REST细胞定位的影响;③用含有锂元素的不同化合物或GSK3β特异性抑制剂孵育原代皮质神经元,检验氯化锂(Li Cl)是否为REST的特异性调节剂;④在原代皮质神经元中干扰REST,再分析Li Cl的孵育是否会缓解REST干扰导致的下游调控蛋白的抑制。(结果)结果表明:①锂元素促进REST的核转移;②锂元素特异性促进REST表达;③锂元素恢复REST干扰引起的下游靶蛋白表达紊乱。(结论)结果提示,锂元素可以特异性缓解毒性多肽对REST1的抑制作用,促进REST表达及核转移,为靶向REST治疗相关神经退行性疾病提供理论基础和科研依据。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
李小芳[3]（2019）在《宫颈鳞状细胞癌中抑制元件1沉默转录因子（REST）调控KCa3.1表达机制初步研究》一文中研究指出目的:中电导钙激活钾离子通道(KCa3.1)在宫颈组织中的表达上调与宫颈鳞状细胞癌的发生及发展有密切的关系,探讨抑制元件l沉默转录因子(repressor element 1silencing transcription factor,REST)又称为神经元限制性沉默因子(neuron restrictive silencing factor,NRSF)在宫颈鳞状细胞癌组织中表达及其对中电导钙激活钾离子通道(KCa3.1)的影响,初步研究宫颈鳞状细胞癌中KCa3.1上调机制。方法:通过查阅整理数据库(NCBI、UCSC、Bio GPS)了解REST在不同组织中的表达情况,分析REST在不同组织以及宫颈组织中的表达情况。通过收集宫颈鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常宫颈组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法检测不同组织中REST与KCa3.1的mRNA表达量,采用免疫组织化学方法检测不同组织中REST蛋白的表达水平。使用染色质免疫沉淀(ChIP)和定量PCR方法检测REST是否能在KCa3.1启动子区抑制元件1(Repressor Element l,RE1)位点处富集以及相应的程度。结果:通过分析整理数据库发现REST在分化成熟的神经组织中低表达,在正常非神经组织中高表达,在正常的宫颈组织中REST的表达较高。qRT-PCR检测发现宫颈鳞状细胞癌组织、癌旁组织、正常宫颈组织中RESTmRNA相对表达量分别为0.46±0.06、0.89±0.13、1.00±0.12;宫颈鳞状细胞癌组织中RESTmRNA相对表达量较癌旁组织和正常宫颈组织分别下降48%、54%。宫颈鳞状细胞癌组织、癌旁组织、正常宫颈组织中KCa3.1mRNA表达量分别为2.14±0.35、1.18±0.21、1.00±0.13;宫颈鳞状细胞癌组织中KCa3.1mRNA表达量较癌旁组织和正常宫颈组织分别上升81%、114%。RESTmRNA表达量在宫颈鳞状细胞癌组织中较癌旁组织及正常宫颈组织明显降低(P<0.05),KCa3.1mRNA表达量在宫颈鳞状细胞癌中较癌旁组织及正常宫颈组织明显增加(P<0.05)。免疫组织化学发现在细胞浆与细胞核处均能观察到REST蛋白阳性反应,在正常宫颈组织中均检测到REST蛋白不同程度的表达,阳性率为100%,宫颈鳞状细胞癌组织中REST蛋白的阳性率为40%,REST蛋白表达量在宫颈鳞状细胞癌组织中较正常宫颈组织明显降低(P<0.05)。ChIP-qPCR发现REST能结合在KCa3.1启动子区RE1位点处,REST在正常宫颈组织、癌旁组织、宫颈鳞状细胞癌组织中RE1位点处的富集量分别为0.41±0.03、0.36±0.041、0.16±0.008;REST在宫颈鳞状细胞癌组织中的富集量相比正常宫颈组织下降了约60.1%,相比癌旁组织下降了约56%。REST在宫颈鳞状细胞癌中富集的量要显着低于正常宫颈组织和癌旁组织(P<0.05)。结论:宫颈鳞状细胞癌组织中REST的表达较正常宫颈组织及癌旁组织均有明显降低,REST可以通过与KCa3.1启动子RE1位点处结合负调控KCa3.1表达。前期研究结果显示KCa3.1在宫颈癌中表达量上升,促进宫颈癌细胞生长,增加宫颈癌细胞的侵袭转移能力,因此宫颈鳞状细胞癌组织REST表达下调导致其对KCa3.1基因表达的抑制减弱,导致KCa3.1基因表达量上升,增强KCa3.1钾离子通道的活性,促进宫颈鳞状细胞癌细胞生长、侵袭和转移。(本文来源于《西南医科大学》期刊2019-05-01）
王莹[4]（2014）在《烟萆脉带花叶病毒非翻译区顺式作用元件的解析及马铃薯X病毒超表达及沉默载体的构建》一文中研究指出复制在病毒的整个生命循环中非常关键。病毒的复制受基因组中顺式作用元件的调控,而这些元件多数位于基因组末端的5′-和3′-非翻译区(untranslated region,UTR)内,因此研究病毒的UTR与侵染的关系对解析其中顺式作用元件、理解病毒复制过程十分重要。本研究以烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV)侵染性克隆为研究材料,通过缺失基因组5′-UTR和3′-UTR的不同序列,明确影响病毒侵染的顺式作用元件。植物病毒侵染性克隆不单是研究病毒侵染的有力工具,它也可以改造为超表达载体,用来生产具有商业价值的功能蛋白;以及病毒介导的基因沉默载体(virus induced gene silencing,VIGS),用来研究植物内源基因的功能。本研究以PVX1985分离物构建了能通过农杆菌浸润的侵染性克隆pCaPVX100,并改造为超表达载体pCaPVX440及pCaPVX760,VIGS载体pCaPVX440-LIC。主要研究结果如下:(1)从TVBMV 5′-UTR(171 nt)的5′-端依次缺失7、25、64、150和171 nt,获得缺失突变体5′-Δ1-7、5′-Δ1-25、5′-Δ1-64、5′-Δ1-150和5′-Δ1-171。通过农杆菌浸润将上述突变体分别接种本氏烟,以接种野生型pCaTVBMV-GFP(wt)的植株为对照。结果发现突变体5′-Δ1-7、5′-Δ1-25、5′-Δ1-64、5′-Δ1-150能够系统侵染本氏烟,但随着缺失区域的扩大,系统侵染所需要的时间越长,病毒RNA的积累量越低,而突变体5′-Δ1-171不能系统侵染本氏烟。除突变体5′-Δ1-7的部分子代RNA回复为wt外,5′-Δ1-25、5′-Δ1-64、5′-Δ1-150的子代RNA没有回复为wt序列,但在其基因组的5′-端都添加了富含AU的序列。即使是同一突变体的子代RNA,5′-端所加AU的数量及顺序都不相同,然而所有突变体的子代RNA在5′-末端都具有类似wt的A4-6U序列。为了明确各子代病毒基因组5′-端富含AU的序列是否还会继续变化,我们将5′-Δ1-64、5′-Δ1-150系统侵染的叶片分别通过摩擦接种本氏烟进行传代,发现第5代病毒RNA的序列与第1代的序列不同,并出现了主导序列。将这两种主导序列分别添加到5′-Δ1-64、5′-Δ1-150基因组的5′-末端获得衍生物5′-Δ1-64-5、5′-Δ1-150-5,发现其比原始突变体发病所需时间缩短,说明主导序列的插入有利于病毒的侵染。带有5′-Δ1-25、5′-Δ1-64、5′-Δ1-150的农杆菌混合后浸润本氏烟,子代RNA的序列全是5′-Δ1-25的子代RNA序列,说明缺失碱基数少的突变体子代RNA在侵染的过程中具有优势。将tvbmv5′-utr的26-171nt进行分段缺失,获得缺失突变体5′-Δ26-64、5′-Δ65-100、5′-Δ101-125、5′-Δ126-150、5′-Δ151-160及5′-Δ161-171。接种结果表明,突变体5′-Δ65-100、5′-Δ101-125、5′-Δ126-150的系统发病时间及病毒rna的积累和野生型病毒一致。5′-Δ26-64侵染的植株荧光亮度低,rna积累少而5′-Δ151-160侵染的植株荧光亮度及病毒的rna积累量比wt的高。测序发现上述各突变体的子代rna与父代的基因组完全一致。将带有5′-Δ161-171的农杆菌接种本氏烟,发现植株的系统发病时间比wt的要长,其子代rna在父代缺失位点的序列相当多样。32个克隆中有3个在父代缺失位点处没有变化,其余29个克隆在该位点都添加了11nt的序列,与基因组172-182nt类似,说明tvbmv5′-utr中161-171nt的缺失不是致命的,但降低了病毒的侵染速度。将突变体5′-Δ1-25编码rna依赖的rna聚合酶(rnadependentrnapolymerase,rdrp)活性中心的序列进行突变,使gdd突变为gaa,获得Δ1-25-gaa。以Δ1-25-gaa浸润的叶片中的转录产物进行5′-race。结果显示Δ1-25-gaa5′-端的序列没有增加,说明有活性的rdrp是病毒基因组修复所必需的。突变体5′-Δ1-150能够系统侵染本氏烟,但不能系统侵染普通烟,说明病毒的修复还与寄主因子有关。(2)从tvbmv3′-utr(184nt)的5′-端依次缺失,获得缺失突变体3′-△1-20和3′-△1-60,通过农杆菌浸润接种本氏烟,发现接种3′-△1-20的植株能系统发病。测序发现3′-△1-20的子代rna在缺失位点都插入了14nt的序列。mfold分析表明,在tvbmv基因组中3′-utr8-42nt折迭成一个不完全配对的茎环结构,新插入的14nt可以使tvbmv基因组在该区域形成完全配对的茎环结构。为了进一步明确3′-utr中的8-60nt序列在病毒侵染过程中的重要性,获得突变体3′-△8-42、3′-△8-14、3′-△15-35及3′-△36-42,通过农杆菌浸润接种本氏烟,发现接种3′-△8-14、3′-△15-35及3′-△36-42的本氏烟能够发病,而接种3′-△8-42的本氏烟没有发病。结合测序结果显示该茎环结构在病毒侵染过程中起着非常重要的作用。mfold预测该茎环结构在烟草脉斑驳病毒、小西葫芦黄花叶病毒等马铃薯y病毒属成员中是保守的。从tvbmv3′-utr的内部进行缺失,获得缺失突变体3′-△43-60、3′-△61-100、3′-△101-141、3′-△142-162及3′-△163-174,接种本氏烟发现仅缺失3′-utr中142-162nt后能够致病,说明tvbmv3′-utr142-162nt的缺失不影响病毒的侵染,但病毒rna的相对积累量低于wt。从TVBMV基因组3′-端缺失10 nt的突变体能侵染本氏烟,但系统症状明显延迟。缺失更多碱基的突变体则丧失生命力。缺失2-10 nt突变体的子代RNA 3′-末端发生了修复,仅部分回复为wt的序列。(3)成功构建了PVX的侵染性克隆,并将其改造为超表达载体和VIGS载体。将35S启动子克隆到PVX1985全基因组序列上游,一起连接到pCambia0390,获得了侵染性克隆pCaPVX100。该克隆可以通过农杆菌浸润接种,在本氏烟、普通烟NC89、番茄及马铃薯上引起的症状和野生型病毒一致。在pCaPVX100的TGB及CP之间插入PVX CP启动子及TMV CP启动子及相应克隆位点,构建成能够同时表达两种外源基因的超表达载体pCaPVX440。将pCaPVX440中部分CP序列替换为一个多克隆位点,获得pCaPVX760。利用该载体可以高水平表达外源蛋白。将LIC(Ligation independent cloning,LIC)序列引入pCaPVX440载体,获得不依赖于连接的PVX沉默载体pCaPVX440-LIC。将本氏烟pds的部分基因分别以正向和反向的方式连入该载体获得pCaPVX440-LIC-PDS和pCaPVX440-LIC-PDSas,接种植株都出现光漂白症状。通过半定量RT-PCR检测到具有光漂白症状的植株内源pds的积累量明显降低,说明该载体可用于沉默外源基因。(本文来源于《山东农业大学》期刊2014-06-10）
祝高春[5]（2011）在《突变亨廷顿蛋白通过阻遏子元件沉默转录因子抑制突触小泡蛋白2C的表达》一文中研究指出亨廷顿舞蹈病(Huntington's disease, HD)是一种常染色体显性遗传的神经变性疾病。临床上,HD患者主要表现为运动障碍、认知和精神异常。病理学上,早期以大脑皮质深层神经元和纹状体中投射神经元的选择性丢失为特征,晚期也出现下丘脑、海马等脑区的明显变性。HD由HD基因突变所致,HD基因编码亨廷顿蛋白(huntingtin, Htt).由于突变的HD基因表达产物突变Htt的致病机制不清,目前尚无有效治疗HD的方法。许多研究表明,HD早期症状的出现与突触功能的异常有关。突变Htt对突触功能具有明显的毒性：突变Htt在神经元轴突终末内形成聚集物,使突触小泡数量减少、结构紊乱；突变Htt抑制突触小泡摄取和释放神经递质,增加神经元对NMDA受体激动剂的敏感性。突触小泡是突触前成份中的一种重要细胞器,通过运载和调节神经递质的释放在突触传递中起重要作用。突触小泡的功能受到多种突触蛋白的调节。突变Htt能影响多种突触蛋白的表达和/或翻译后修饰,也能与突触蛋白发生异常互作。突触小泡蛋白2(Synaptic vesicle protein2, SV2)是神经元突触小泡和内分泌细胞分泌颗粒上的一种跨膜糖蛋白,具有SV2A.SV2B和SV2C叁个亚型,其中SV2C主要局限分布在纹状体、苍白球、黑质、中脑、嗅球等旧脑区和海马的CA3和齿状回区,在神经递质释放和突触传递中起重要作用。SV2C在纹状体、苍白球、黑质、海马等HD受累区域的局限性表达提示,突变Htt对SV2C的表达和／或翻译后修饰的影响或与其发生异常相互作可能与HD的发生有关。但突变Htt与SV2C的关系尚不清楚,突变Htt是否影响SV2C的表达和／或翻译后修饰,目前未见报道。生物信息学分析显示,SV2C的启动子上含有能与阻遏子元件沉默转录因子(repressor element silencing transcription factor, REST)结合的序列神经元限制性沉默元件(neuron restrictive silencer element, NRSE)。REST与NRSE的结合对基因的表达具有阻遏作用。大量研究表明,突变Htt能与多种转录因子结合而影响基因的转录。正常Htt能与REST结合使其定位在细胞质内,对NRSE控制的基因起正性调控作用,而突变Htt则使REST发生核转位,使受NRSE控制的基因表达被抑制。REST作为一种转录抑制因子是否调控SV2C的表达,突变Htt是否通过与REST的作用影响SV2C的表达,目前均未见报道。本研究在观察突变Htt是否影响SV2C表达的基础上,比较了不同REST表达水平对SV2C表达的影响,分析了REST是否通过与SV2C启动子结合来调控SV2C的转录,检测了突变Htt对SV2C启动子活性的影响,并对突变Htt是否促进REST的核转位进行了进一步观察。1.突变Htt下调SV2C的表达为了明确突变Htt是否影响SV2C的表达,首先利用免疫印迹和RT-PCR技术对HD转基因小鼠脑内和HD细胞模型中SV2C蛋白和mRNA进行检测。在表达Htt氨基末端171个氨基酸且含82个谷氨酰胺重复序列的HD转基因小鼠(TG小鼠)的大脑海马、纹状体和皮质中,SV2C蛋白和mRNA水平在第14w即明显降低,第18 W和第20 w进一步降低。免疫组织化学检测也发现,TG小鼠上述脑区的SV2C免疫反应性也呈进行性减弱。在表达含150个CAG重复序列的Htt基因第一外显子的HD转基因小鼠(R6/2小鼠)中,也观察到类似变化。在转染表达含150个CAG重复序列的Htt基因第一外显子的N2a细胞中,SV2C蛋白和mRNA水平在转染48h、72h和96 h均呈进行性下降。以上结果表明,突变Htt可下调SV2C的表达。2. REST通过与SV2C的启动子结合抑制SV2C转录为了明确SV2C的表达是否受REST的调控,首先观察了不同REST表达水平对SV2C的影响。免疫印迹和RT-PCR检测显示,在N2a细胞过表达REST使SV2C的蛋白和mRNA水平明显下调,而沉默REST后,SV2C的蛋白和mRNA水平则明显上调。进而用染色质免疫共沉淀(Chromatin Imunoprecipitation, ChIP)技术检测出具有NRSE基序的SV2C启动子区(-105,-83bp)片段能与REST结合,随后用PCR方法在SV2C的5’侧翼区扩增出SV2C(-322,+3bp)、SV2C(-105,+3bp)、SV2C(-83, +3bp) 3个不同大小的片段,并克隆成不同的pGL3-basic荧光素酶报告基因质粒后,通过双荧光素酶报告基因检测发现,过表达REST后含SV2C(-322,+3bp)和SV2C(-105,+3bp)报告基因的荧光素酶活性明显减弱,而含SV2C(-83,+3bp)的报告基因的荧光素酶活性没有减弱,由此提示SV2C启动子区(-105,-83bp)是REST调节SV2C转录所必须的。这些结果提示REST可与SV2C启动子上的NRSE基序结合来抑制SV2C的转录。3.突变Htt通过促进REST核转位抑制SV2C基因的转录为了证明突变Htt是否可以抑制SV2C启动子的活性,将表达正常Htt的质粒和表达突变Htt的质粒分别与SV2C启动子中的(-322,+3bp)片段克隆成的pGL3-basic荧光素酶报告基因质粒共转染N2a细胞后发现,共转染表达突变Htt的质粒后荧光素酶活性较共转染表达正常Htt的质粒的荧光素酶活性比较明显减弱,并呈浓度依赖性,而沉默REST后,共转染表达突变Htt的质粒后荧光素酶活性无明显变化,由此表明突变Htt可通过REST抑制SV2C基因的转录。ChIP实验发现,与转染表达正常Htt的细胞比较,转染表达突变Htt的N2a细胞中REST与SV2C启动子的结合明显增强。在TG小鼠、R6/2小鼠脑组织中和表达突变Htt的N2a细胞中,RT-PCR检测显示,REST的mRNA水平无明显变化,免疫印迹检测表明REST,总蛋白水平也无明显改变,但核内REST蛋白水平显着增加。对TG小鼠、R6/2小鼠脑组织和表达突变Htt的N2a细胞进行免疫组织化学检测进一步证实,REST在细胞核内定位增多。因此,突变Htt不影响REST的表达但可以促进其从细胞质到细胞核的转位。以上结果表明,突变Htt可通过促进REST从细胞质到细胞核的转位而增强REST与SV2C启动子中NRSE的结合,进而抑制SV2C基因的转录和表达。由此提示,HD中选择性病理学变化可能与SV2C表达的减少而使突触小泡释放神经递质和突触传递功能障碍有关,SV2C基因的转录调控可作为探索治疗HD方法的靶点。(本文来源于《华中科技大学》期刊2011-08-01）
李宏图,刘晓玉,庞希宁[6]（2009）在《神经元抑制性沉默元件双链RNA慢病毒载体的构建与鉴定》一文中研究指出目的构建神经元抑制性沉默元件(RE-1/NRSE)双链RNA的慢病毒载体。方法根据RE-1/NRSE序列合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pGC-LV载体连接产生L-smRE-1/NRSE慢病毒载体,采用PCR和测序对阳性克隆进行鉴定。用L-smRE-1/NRSE和包装质粒pHelper 1.0、pHelper2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,在倒置荧光显微镜下观察293T细胞中绿色荧光蛋白的表达量,并计算病毒滴度,初步观察其对大鼠间充质干细胞的转染效率。结果PCR和测序证实,构建出了RE-1/NRSE双链RNA的慢病毒载体L-smNRSE/RE-1。包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为4×108TU/ml。慢病毒颗粒能稳定转染大鼠间充质干细胞,当感染复数为80时,感染效率达100%。结论成功构建了RE-1/NRSE dsRNA的慢病毒表达载体。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊2009年06期）
刘庆斌,李艳华,裴雪涛[7]（2007）在《不止是沉默——神经元限制性沉默因子及其作用元件的研究进展》一文中研究指出神经元限制性沉默因子(neuron-restrictive silencer factor,NRSF;又称repressor element silencing transcription factor,REST)是一种锌指(zincfinger)蛋白,它能与某些基因中相应的神经元限制性沉默元件(neuron-restrictive silencer element,NRSE;又称repressor element-1,RE-1)相结合,使序列中的组蛋白发生去乙酰化,从而对某些神经性基因的表达发挥阻遏作用。随着研究的深入,人们发现NRSF-NRSE在神经发育过程中有着复杂的调控功能,这主要是由于NRSF/NRST蛋白及REST辅助蛋白(CoREST)介导的甲基化作用,NRSF蛋白转录后形成的一系列剪切体也可能参与其中。另外,NRSF及其不同的剪切体还与一些神经系统疾病和肿瘤的发生密切相关。深入研究NRSF的调控机制对于进一步了解一些神经系统疾病的发生有着重要意义。(本文来源于《生理科学进展》期刊2007年03期）
陈妍,王金发[8]（1998）在《负调控元件——沉默子》一文中研究指出负调控元件———沉默子陈妍王金发（中山大学生物系，广州５１０２７５）ＮｅｇａｔｉｖｅＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＥｌｅｍｅｎｔ———ＳｉｌｅｎｃｅｒＣＨＥＮＹａｎＷＡＮＧＪｉｎｆａ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ，ＺｈｏｎｇｓｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ...(本文来源于《遗传》期刊1998年01期）
沉默元件论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
(目的)抑制元件沉默性转录因子(REST)在大脑内的正常表达对于健康老年人至关重要,而在阿尔兹海默病和朊病毒病等神经退行性疾病中REST的表达受到抑制。特异性促进REST在神经元中的表达可能具有潜在的神经保护作用。本研究旨在分析锂元素对REST表达的影响和潜在的调控机制。(方法)①Pr P106-126毒性多肽孵育原代皮质神经元,收集并分离细胞的胞浆和胞核,分析REST在亚细胞结构中的表达和定位;②在以上环境中加入氯化锂(Li Cl),通过免疫荧光分析氯化锂对REST细胞定位的影响;③用含有锂元素的不同化合物或GSK3β特异性抑制剂孵育原代皮质神经元,检验氯化锂(Li Cl)是否为REST的特异性调节剂;④在原代皮质神经元中干扰REST,再分析Li Cl的孵育是否会缓解REST干扰导致的下游调控蛋白的抑制。(结果)结果表明:①锂元素促进REST的核转移;②锂元素特异性促进REST表达;③锂元素恢复REST干扰引起的下游靶蛋白表达紊乱。(结论)结果提示,锂元素可以特异性缓解毒性多肽对REST1的抑制作用,促进REST表达及核转移,为靶向REST治疗相关神经退行性疾病提供理论基础和科研依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
沉默元件论文参考文献
[1].胡朝阳,唐培培,邓炎春,孙伟娟,姚勤.转录水平调控中的负调控元件——沉默子[J].生命科学.2019
[2].宋志琦,徐艳峰,邓巍,于品,屈亚锦.锂元素对抑制元件沉默性转录因子表达的调控机制[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[3].李小芳.宫颈鳞状细胞癌中抑制元件1沉默转录因子（REST）调控KCa3.1表达机制初步研究[D].西南医科大学.2019
[4].王莹.烟萆脉带花叶病毒非翻译区顺式作用元件的解析及马铃薯X病毒超表达及沉默载体的构建[D].山东农业大学.2014
[5].祝高春.突变亨廷顿蛋白通过阻遏子元件沉默转录因子抑制突触小泡蛋白2C的表达[D].华中科技大学.2011
[6].李宏图,刘晓玉,庞希宁.神经元抑制性沉默元件双链RNA慢病毒载体的构建与鉴定[J].中国医学科学院学报.2009
[7].刘庆斌,李艳华,裴雪涛.不止是沉默——神经元限制性沉默因子及其作用元件的研究进展[J].生理科学进展.2007
[8].陈妍,王金发.负调控元件——沉默子[J].遗传.1998