导读:本文包含了病毒含量检测论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:GⅡ.4型诺如病毒,VP1蛋白,病毒样颗粒,中和表位
病毒含量检测论文文献综述
唐芳,韩子泊,侯俊伟,杜丽芳,栗子谦[1]（2019）在《基于中和表位的GⅡ.4型重组诺如病毒VP1蛋白病毒样颗粒抗原含量检测方法的建立及验证》一文中研究指出目的建立基于中和表位的GⅡ. 4型重组诺如病毒(Norovirus,NoV)VP1蛋白病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)抗原含量检测方法,并进行验证,以用于重组NoV疫苗质量控制。方法应用ELISA和HBGA-VLP阻断试验筛选中和性单克隆抗体,并筛选配对抗体,分别作为包被抗体和检测抗体,建立GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP双抗夹心ELISA抗原定量检测方法。确定方法的线性检测范围,并对方法的专属性、准确性和精密性进行验证。结果27株GⅡ. 4 VLP特异性ELISA检测阳性的杂交瘤细胞克隆中,有12株GⅡ. 4型阻断抗体检测呈阳性,选择具有GⅡ. 4型阻断活性的特异性单抗2H7-C5和2E6-B3作为双抗夹心抗体对,用于建立GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP双抗夹心ELISA抗原定量检测方法。该方法的线性测定范围为15. 63～250 ng/mL,标准曲线R2均> 0. 98;准确性验证的加标回收率在72. 23%～134. 03%之间;重复性验证的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为7. 06%,中间精密性验证的RSD分别为8. 04%和9. 14%。结论建立了基于中和表位的GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP抗原含量检测方法,该方法专属性、准确性、精密性良好,可用于GⅡ. 4型重组NoV VP1蛋白VLP定量检测,为GⅡ. 4抗原相关疫苗研发中质量控制和检定提供了技术支持。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年11期）
华涛,唐波,黄江,常晨,刘国阳[2]（2019）在《猪伪狂犬病毒Real-time PCR检测方法的建立和弱毒疫苗病毒含量的检测》一文中研究指出根据伪狂犬病毒的gB基因设计引物,将含gB基因的质粒作为标准品,绘制标准曲线,建立了伪狂犬病毒PRV的荧光定量PCR检测方法。该检测方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,不与PCV2、PPV、CSFV、JEV和PRRSV发生反应。用该方法对不同滴度病毒液的基因拷贝数进行检测,发现病毒滴度和病毒拷贝数之间存在较好的相关性。采用该方法对7种商品化PRV弱毒疫苗进行病毒含量检测,结果显示不同商品化弱毒疫苗的病毒含量存在显着差异,与说明书标注的病毒含量基本一致。(本文来源于《江西农业学报》期刊2019年09期）
全晓杭[3]（2019）在《基于量子点标记检测狂犬病病毒G蛋白含量的荧光免疫吸附法的建立》一文中研究指出狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种感染几乎所有温血动物的中枢神经系统的人兽共患病,是至今为止人类病死率最高的急性传染病之一。狂犬病到目前为止仍没有特效治疗药物出现,现如今只能在被患病动物咬伤之后尽快暴露后免疫来预防狂犬病的感染。其中狂犬病病毒G蛋白是唯一一个诱导机体产生中和抗体的蛋白,在一定程度上可以认为疫苗中G蛋白的含量可以决定疫苗的保护效力。因此建立快速检测狂犬病病毒G蛋白含量的方法对于疫苗免疫效力的确定及免疫剂量的确定十分重要。酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一种广泛使用的免疫学检测方法,但是传统的ELISA仍具有灵敏度相对不足,检测成本高等缺点。而量子点以其优良的光谱特征和光化学稳定性在生命科学尤其是体外诊断中的应用越来越广泛,其中与ELISA结合的方法可以大大提高传统方法的灵敏度。本研究以ELISA作为基本分析方法,以狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体作为捕获抗体,以量子点标记的糖蛋白单克隆抗体作为检测抗体,建立荧光免疫吸附法(Fluorescence-linked immunosorbent assay,FLISA)来检测狂犬病病毒G蛋白含量,对于疫苗抗原含量的效价和免疫剂量的确定具有重要意义。1.狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体的制备与鉴定本研究成功获得3株抗狂犬病病毒G蛋白的单克隆抗体,分别命名为9F10,1F1和9G10。并对这3株抗体的特性进行鉴定,这3株单克隆抗体均为IgG类抗体,其中9F10和1F1为IgG_(2b),9G10为IgG_(2a),而轻链均为kappa。染色体检测结果9F10的染色体数目为90,1F1的染色体数目为89,9G10染色体数目为97。在间接免疫荧光实验中3株单克隆抗体均能特异性识别实验室狂犬病病毒固定毒株SAD、B2c,狂犬病病毒犬源野毒株DRV-Mexico、DRV-HuNPN01,DRV-AH08以及蝙蝠源野毒株SHBRV。在Western blot实验中,1F1、9F10和9G10均只能识别SAD。在抗原表位鉴定的Western blot实验中,结果显示9G10的抗原位点在239-339 aa之间,9F10与1F1的抗原位点在1-139 aa之间。2.狂犬病病毒G蛋白量子点荧光免疫吸附法FLISA检测方法的建立通过量子点偶联抗体前后表征实验,结果表明量子点偶联抗体之后能够正常的激发荧光,且荧光波长没有发生改变,凝胶电泳实验表明量子点已经成功修饰在抗体上。通过配对试验确定以9F10为捕获抗体,包被浓度为2μg/mL,以9G10与ZnCdSe/ZnS量子点偶联量子点并作为检测抗体,稀释度为1:200。用以上包被浓度和抗体稀释度进行反应条件优化。结果最优封闭液为0.5%BSA+0.05%Tween-20磷酸盐缓冲液,封闭时间为1 h,样品稀释液为1%BSA+0.05%Tween-20磷酸盐缓冲液,样品孵育时间为2 h,量子点偶联抗体孵育时间为1 h。灵敏性实验表明FLISA最低检测限度为1:1600稀释度,而传统双抗夹心ELISA为1:400稀释度。以梯度稀释的样品进行检测,构建了用于定量检测的标准曲线y=0.6176x+7559.5,R~2为0.9719。特异性实验表明,该方法不会与犬瘟热病毒,犬细小病毒以及293T细胞和BSR细胞产生非特异性反应。本研究成功获得3株特异性好的抗狂犬病病毒G蛋白的单克隆抗体,并以此为基础偶联量子点建立荧光免疫吸附法用于检测狂犬病病毒G蛋白的含量,为今后狂犬病疫苗的效价评估提供一种快速、灵敏的检测方法。(本文来源于《华中农业大学》期刊2019-06-01）
何天慈[4]（2019）在《单克隆抗体夹心ELISA检测猪圆环病毒2型抗原含量的研究》一文中研究指出猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是1974年发现的一种无囊膜单股环状DNA病毒,分3个型。猪圆环病毒1型(PCV1)对猪无致病性,猪圆环病毒2型(PCV2)则可引起猪断奶后多系统衰弱综合征(PMWS)、皮炎和肾病综合征(PDNS)、仔猪先天性震颤(CT)、坏死性增生性肺炎(PNP)、猪呼吸道综合征(PRDC)、母猪繁殖障碍等多种猪圆环病毒相关疾病(Porcine circovirus-associated desease,PCVAD)。猪圆环病毒3型(PCV3)是近几年新发现的,其致病性及致病机理仍有待研究。因此,防控PCV2的感染成为了养猪业的重中之重,其中疫苗免疫是最有效的防控手段之一,疫苗质量的优劣便成为能否有效防控的关键。但PCV2商品化疫苗品种众多,不同类型或不同生产企业生产的疫苗效力检验方法差异较大,很难形成统一的评价标准。影响疫苗质量的因素较多,但对于灭活疫苗或亚单位疫苗而言,抗原含量的多少则成为疫苗优劣的最重要指标之一,PCV2的衣壳由60个ORF2编码的衣壳蛋白组成,这也是PCV2的唯一结构蛋白,具有较好的免疫原性和抗原性,因此针对Cap蛋白的绝对定量方法无疑是一种更具吸引力的方法,这种方法对于评价疫苗质量甚至替代免疫攻毒等效力检验方法也是非常必要的。本研究以大肠杆菌表达PCV2 Cap蛋白免疫Balb/c小鼠,经检测抗体水平取脾脏制备淋巴细胞,经细胞融合、亚克隆以及间接ELISA筛选,获得2株杂交瘤细胞株,命名为7D7和5C2。经间接夹心ELISA检测,均与PCV2全病毒和PCV2 Cap蛋白反应,且针对不同的抗原表位,其中7D7的反应性更好。经SDS-PAGE,Western Blot检测结果显示7D7和5C2不仅能特异性识别大肠杆菌表达PCV2 Cap蛋白(约26 kDa),也能特异性的与杆状病毒表达PCV2 Cap蛋白(约30 kDa)反应,且为线性表位。单克隆抗体亚型间接ELISA结果显示两株单抗均为IgG2a亚型。鉴于7D7的反应性较好,因此,用改良的过碘酸钠法对单抗7D7进行辣根过氧化物酶标记,形成酶标单抗7D7-HRP。以单克隆抗体7D7作为捕获抗体,7D7-HRP为检测抗体,成功建立了检测PCV2抗原的单克隆抗体夹心ELISA方法,该方法以杆状病毒表达的Cap蛋白为标准抗原,线性范围是0.1096 ng/mL-14.2222 ng/mL,相关系数>0.99,变异系数<10%,回收率在90%以上,且与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)等多种病毒抗原无交叉反应。对13个厂家的猪圆环病毒疫苗进行了检测,显示不同企业疫苗抗原含量差异明显,13家疫苗中有7家疫苗的抗原含量超过了本方法的上限值,6家疫苗的检测值处于标准曲线线性范围内,其中1家疫苗的抗原含量较低,与抗原含量高者相差至少20倍。综上所述,本研究成功筛选了2株针对不同线性表位的PCV2单克隆抗体,为进一步研究PCV2抗原表位分布及特性提供了实验材料。建立了背景值低,特异性好,灵敏性强,准确度高的用于PCV2抗原含量测定的单克隆抗体夹心ELISA方法,为PCV2疫苗生产工艺研究和质量控制以及传统疫苗效检方法替代方法的研究奠定了基础,也为目前解决PCV2疫苗品种多、生产企业多、质量标准不统一,监管难度大提供了技术支撑。(本文来源于《中国兽医药品监察所》期刊2019-05-01）
夏晒歌,苗颖,闻威,兰琛,郭云[5]（2018）在《离子色谱法检测抗病毒药物阿昔洛韦中的醋酸钠含量》一文中研究指出阿昔洛韦,作为一种抗病毒药物,在其生产的过程中会有醋酸钠的产生,醋酸钠含量的测定对于该药物的质量控制和后期工业化大量生产有着重要的指导意义。离子色谱是在离子交换色谱法的基础上建立起来的一种离子分离分析液相色谱技术。目前已成为分析化学领域中发展最快的分析方法之一,被广泛地用于无机阴阳离子和有机离子的测定。具有快速方便灵敏度高,选择性好,可同时分析多种离子化合物,分离柱的稳定性好,容量高,样品用量少,易实现自动化等优点在环境检测、食品、乃至药品及疫苗等领域得到了广泛的应用,非常适合阿昔洛韦中醋酸根离子的分析、测定。本文采用DIONX ICS-3000,阴离子抑制器:ASRS 3000 (4 mm);保护柱:IonPac?AG19 Guard Column (4×50 mm);分析柱:IonPac?AS19 Analytical Column (4×250 mm);淋洗液:20 mmol/L KOH,流速:1 mL/min,标品和样品用6%DMSO甲醇溶液溶解定容,淋洗液稀释进样,在此条件下测定CH3COO-。建立的方法在0.4-20μg/mL之间线性关系良好,R2=0.9992,检出限为0.19μg/mL,定量限为0.63μg/mL,相对标准偏差(RSD)在5.0%之间(n=3),可用于抗病毒药物阿昔洛韦中醋酸钠的含量测定。(本文来源于《河南省化学会2018年学术年会摘要集》期刊2018-09-28）
吴燕,王军,文明,王开功,程振涛[6]（2018）在《实时荧光定量PCR对猪瘟疫苗中病毒含量的检测》一文中研究指出为了更准确地检测猪瘟疫苗中的病毒含量,为猪瘟免疫预防工作提供科学参考,试验设计针对CSFV E2基因的引物,利用RT-PCR方法扩增出目的片段,运用检测猪瘟病毒的SYBR Green-Ⅱ荧光定量PCR方法对来自不同生产厂家的6种猪瘟疫苗的病毒含量进行定量检测。结果:不同厂家生产的猪瘟兔化弱毒疫苗存在效价差异,6种疫苗中的病毒含量由高到低为A>D>F>C>E>B,分别为4.52×10~4、2.36×10~4、2.02×10~4、1.70×10~4、1.08×10~4、6.18×10~3 copies/μL。(本文来源于《贵州畜牧兽医》期刊2018年03期）
宋航,田炎珅,徐倩,马亚萍,程金芝[7]（2018）在《检测DENV-2活病毒含量RTCA标准曲线法的建立》一文中研究指出目的利用实时无标记细胞分析系统(real-time cellular analysis,RTCA)建立半数细胞指数时间(CIT50)与病毒滴度(TCID50)相关性的标准曲线,评估RTCA技术在监测2型登革病毒(DENV-2)感染BHK细胞后引发细胞病变效应(CPE)中的可行性和应用价值。方法检测不同培养条件下BHK细胞的CI值变化,筛选合适的初始细胞接种密度及血清浓度;应用RTCA分析已知不同TCID50滴度DENV-2感染BHK细胞的CIT50值,构建CIT50-TCID50标准曲线,计算回归方程;收集DENV-2感染C6/36细胞后第1~4d的培养上清(D1,D2,D3,D4),利用RTCA法和TCID50法分别检测上清中DENV-2滴度,分析CIT50-TCID50标准曲线法的灵敏度和可行性。结果 BHK细胞以初始接种密度为2×104个/孔,血清浓度为2%的培养条件为最佳;不同滴度DENV-2感染后BHK细胞的生长曲线均左移,CIT50与TCID50间呈线性负相关,线性方程为y=-7.007x+75.546(R2=0.9854);不同时间感染C6/36细胞培养上清中病毒含量(logTCID50/mL):RTCA标准曲线法为4.90±0.05(D2)、6.18±0.20(D3)、6.04±0.10(D4);传统TCID50法为0(D1)、6.25±0.49(D3)、5.87±0.35(D4)。结论利用RTCA技术建立的CIT50-TCID50标准曲线法,可用于已知DENV-2在BHK细胞的定量检测,结果较TCID50法更客观,且该法操作便捷且灵敏度高,为评估DENV-2感染性活病毒颗粒的毒力提供了新的技术手段。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2018年02期）
吴克,陈凤,王伟成,孙晓东,董威[8]（2018）在《毛细管电泳紫外间接检测法测定四价轮状病毒疫苗原液中蔗糖含量》一文中研究指出目的建立、验证四价轮状病毒减毒活疫苗原液中蔗糖含量的毛细管电泳紫外间接检测法。方法采用毛细管电泳紫外间接检测法检测四价轮状病毒减毒活疫苗原液中蔗糖含量,并验证方法的专属性、线性范围、精密度和准确性。结果本方法专属性良好,蔗糖在2.0~10.0mg/ml内有良好的线性关系(r=0.999 7),精密度良好(RSD=1.15%),平均回收率为101.33%,RSD为2.07%,检测限为0.204mg/ml,定量限为1.019mg/ml。结论本方法准确、可靠、简便,适用于测定四价轮状病毒疫苗原液中蔗糖含量。(本文来源于《中国病毒病杂志》期刊2018年02期）
邓霞,单璞,张雅薇,周亚,张钰[9]（2017）在《鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原含量检测方法的建立及验证》一文中研究指出目的建立鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)含量检测方法,并进行验证。方法通过对壳聚糖酶的处理条件(反应温度、酶浓度和酶解时间)进行优化,建立鼻腔喷雾型重组乙肝疫苗中HBsAg含量检测方法,并对该方法进行特异性、线性范围、准确度、精密度(重复性、中间精密度)及耐用性验证。结果确定壳聚糖酶处理条件为:2 U/ml的壳聚糖酶于37℃水浴中孵育60 min,然后采用基于化学发光法的试剂盒定量检测HBsAg含量。壳聚糖酶的加入不会对疫苗中HBsAg含量检测产生干扰;HBsAg浓度在1.25~160 ng/ml之间与发光值具有良好的线性(r2≥0.95);高、中、低浓度疫苗的平均回收率分别为100.18%、103.54%和113.88%;重复性及中间精密度验证结果的变异系数(CV)均≤20%;壳聚糖酶浓度在1.5~2.5 U/ml之间以及酶解时间为60 min,测定值CV均符合≤20%的验证审定标准。结论建立了鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中HBsAg含量检测方法,该方法具有良好的特异性、准确度、精密度及耐用性,可用于该疫苗的质量控制。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2017年12期）
梁婧,李举,马继华,祁春华,金文芳[10]（2017）在《气相色谱法检测灭活狂犬病病毒浓缩液中β-丙内酯的含量》一文中研究指出目的建立气相色谱法检测狂犬病病毒浓缩液中β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)含量,分析BPL在灭活和水解过程中含量的变化。方法气相色谱条件:初始温度80℃,保持1 min,以20℃/min的速率升温至200℃,保持5 min;检测器温度为250℃;进样口温度为150℃;载气为氮气,流速为1 ml/min;进样量为1μl。验证该方法的专属性、重复性和耐用性,绘制标准曲线并确定检测限和定量限。利用该方法检测BPL以1∶2 000、1∶4 000、1∶8 000进行灭活和水解过程中含量的变化。结果气相色谱法检测狂犬病病毒浓缩液中BPL含量具有良好的专属性、重复性和耐用性,线性范围在572.86~8.95μg/ml,定量限为1.145μg/ml,检测限为0.229μg/ml。以不同比例的BPL对狂犬病病毒浓缩液进行灭活,72 h后其含量均高于定量限,水解1 h后BPL含量均低于检测限。结论建立了BPL含量气相色谱检测方法,该方法准确可靠,可用于狂犬病疫苗生产过程中BPL含量的检测,为病毒灭活工艺验证提供了数据支持。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2017年12期）
病毒含量检测论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
根据伪狂犬病毒的gB基因设计引物,将含gB基因的质粒作为标准品,绘制标准曲线,建立了伪狂犬病毒PRV的荧光定量PCR检测方法。该检测方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,不与PCV2、PPV、CSFV、JEV和PRRSV发生反应。用该方法对不同滴度病毒液的基因拷贝数进行检测,发现病毒滴度和病毒拷贝数之间存在较好的相关性。采用该方法对7种商品化PRV弱毒疫苗进行病毒含量检测,结果显示不同商品化弱毒疫苗的病毒含量存在显着差异,与说明书标注的病毒含量基本一致。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
病毒含量检测论文参考文献
[1].唐芳,韩子泊,侯俊伟,杜丽芳,栗子谦.基于中和表位的GⅡ.4型重组诺如病毒VP1蛋白病毒样颗粒抗原含量检测方法的建立及验证[J].中国生物制品学杂志.2019
[2].华涛,唐波,黄江,常晨,刘国阳.猪伪狂犬病毒Real-timePCR检测方法的建立和弱毒疫苗病毒含量的检测[J].江西农业学报.2019
[3].全晓杭.基于量子点标记检测狂犬病病毒G蛋白含量的荧光免疫吸附法的建立[D].华中农业大学.2019
[4].何天慈.单克隆抗体夹心ELISA检测猪圆环病毒2型抗原含量的研究[D].中国兽医药品监察所.2019
[5].夏晒歌,苗颖,闻威,兰琛,郭云.离子色谱法检测抗病毒药物阿昔洛韦中的醋酸钠含量[C].河南省化学会2018年学术年会摘要集.2018
[6].吴燕,王军,文明,王开功,程振涛.实时荧光定量PCR对猪瘟疫苗中病毒含量的检测[J].贵州畜牧兽医.2018
[7].宋航,田炎珅,徐倩,马亚萍,程金芝.检测DENV-2活病毒含量RTCA标准曲线法的建立[J].中国病原生物学杂志.2018
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[10].梁婧,李举,马继华,祁春华,金文芳.气相色谱法检测灭活狂犬病病毒浓缩液中β-丙内酯的含量[J].中国生物制品学杂志.2017