导读:本文包含了钙调素类似蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:黄瓜,钙调素类似蛋白,单性结实,激素相关基因
钙调素类似蛋白论文文献综述
刘嘉斐,张璐,孟永娇,段莉莉,罗雨薇[1](2019)在《过表达钙调素类似蛋白基因CML25-like诱导黄瓜单性结实的研究》一文中研究指出[目的]钙调素类似蛋白(calmodulin-like protein,CML)是一类含有EF-hand结构域的钙受体蛋白,与植物细胞的分裂及形态建成密切相关。本文基于前期克隆的一个黄瓜果实特异性表达基因CML25-like,研究其调控单性结实的机制。[方法]采用RT-qPCR方法研究CML25-like表达的时空特点;构建植物表达载体pLP100-35S-CML25-like,利用农杆菌介导子叶节法转化黄瓜自交系CCMC,并研究转基因植株的表达特点;观察转基因植株的表型,采用RT-qPCR方法检测其坐果期激素相关基因的表达变化。[结果]CML25-like在黄瓜幼叶和雌花中表达量最高,在雄花中表达量最低,而且CML25-like在果实发育过程中上调表达,在果实败育过程中下调表达;性状统计发现过表达CML25-like植株的单性结实率最高可达到98.25%,比对照CCMC提高了86%,而且单性结实果实与对照授粉果实的长度和横径均无明显差异。RT-qPCR检测结果显示,在转基因植株坐果期22个激素相关基因中有16个显着上调表达。[结论]CML25-like基因的活跃表达与果实发育密切相关,而且CML25-like能够诱导黄瓜单性结实,促进果实膨大,推测CML25-like通过上调弱单性结实黄瓜子房中激素相关基因表达而诱导单性结实。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2019年03期)
司未佳,卢婉佩,刘颖,王佳,程堂仁[2](2019)在《胭脂花及小报春钙调素类似蛋白基因CML19的克隆与表达分析》一文中研究指出CML是一类重要的Ca~(2+)响应蛋白,为了研究CML蛋白对报春花自交不亲和性的影响,该研究从胭脂花和小报春转录组数据中分别筛选出PmCML19和PfCML19基因,并对这2个基因进行全长克隆、生物信息学分析以及基因亚细胞定位和表达模式分析。结果发现:(1)PmCML19和PfCML19基因全长均为435 bp,所编码蛋白的氨基酸相似度达80.56%,均为酸性亲水性蛋白,包含4个EF手性结构;同源分析表明, PmCML19和PfCML19的亲缘关系与中华猕猴桃AcCML19最近,而拟南芥家族中的AtCML40与这2个蛋白的氨基酸序列相似度分别为44%和46%。(2)亚细胞定位结果表明,PmCML19和PfCML19基因在细胞核和细胞膜上均表达。(3)实时荧光定量PCR结果表明,PmCML19和PfCML19基因在花药中的表达量均高于雌蕊;在胭脂花和小报春亲和授粉组合的雌蕊中具有较高的表达量,而在不亲和授粉组合的雌蕊中表达量显着降低。研究推测,胭脂花和小报春CML19基因与报春花的自交不亲和性密切相关,为进一步研究异型自交不亲和遗传机制提供了新思路。(本文来源于《西北植物学报》期刊2019年04期)
黄元佳[3](2018)在《稀杯盔形珊瑚钙调素类似蛋白、钙网蛋白、碳酸酐酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出近年来,由于环境恶化和人类活动的不断增加,致使海洋生态系统严重失衡。作为海洋中的低等无脊椎动物,珊瑚礁正面临着严重的危机,为了了解造礁石珊瑚的钙化机制,以更好的保护珊瑚礁生态系统,许多研究者开始致力于对珊瑚钙化相关基因的功能进行研究。本研究以稀杯盔形珊瑚为实验对象,对钙调素类似蛋白基因、钙网蛋白基因和碳酸酐酶基因进行克隆和原核表达,并对钙调素类似蛋白基因在温度胁迫下以及钙通道抑制剂——异搏定处理后的表达模式进行了探讨,研究结果如下:1.稀杯盔形珊瑚钙调素类似蛋白基因(calmodulin-like protein,Ca LP)c DNA全长1290bp,其中5'UTR为109bp,3'UTR为683bp,开放阅读框498bp,编码165个氨基酸残基,蛋白分子质量为18.89 k Da,理论等电点4.22。运用p ET-32a载体和BL21(DE3)菌株构建蛋白原核表达系统,成功表达了Ca LP重组蛋白,并以可溶性蛋白的形式存在。实时荧光定量结果表明在20℃和30℃时其表达随着时间延长总体上呈现先上升后下降的趋势。另外,在钙通道抑制剂异搏定处理后,Ca LP基因表达明显下调。2.稀杯盔形珊瑚钙网蛋白基因(calreticulin,CRT)c DNA全长1792bp,其中5'UTR为77 bp,3'UTR为380bp,开放阅读框1335bp,编码444个氨基酸残基,蛋白分子质量为51.85 k Da,理论等电点4.43。通过构建原核表达系统得到CRT重组蛋白,纯化后的重组蛋白可以促进革兰氏阳性菌藤黄微球菌和革兰氏阴性菌大肠杆菌凝集,具有细菌凝集活性。3.稀杯盔形珊瑚碳酸酐酶基因(carbonic anhydrase,CA)c DNA全长1120bp,其中5'UTR为148 bp,3'UTR为228bp,开放阅读框744bp,编码247个氨基酸残基,蛋白分子质量为27.54 k Da,理论等电点5.88。通过构建原核表达系统,诱导表达了与预计分子量大小一致的特异性融合蛋白,0.2 mmol/L为最佳IPTG诱导浓度,37℃为最佳诱导温度,目的蛋白以包涵体形式存在。(本文来源于《广东海洋大学》期刊2018-06-01)
黄元佳,袁吉贵,彭慧湃,张艳苹,刘丽[4](2017)在《稀杯盔形珊瑚钙调素类似蛋白基因的克隆、原核表达和温度胁迫下的表达分析》一文中研究指出珊瑚碳酸钙的形成过程涉及到Ca~(2+)的吸收、转运、贮藏、分泌和沉积等,与钙代谢这一高度受控的复杂生理过程紧密相关。本研究以稀杯盔形珊瑚转录组测序结果为基础,通过RACE技术,得到钙调素类似蛋白的c DNA序列,全长1290bp,开放阅读框为498bp,编码165个氨基酸,5′端非编码区为109bp,3′端非编码区为683 bp。相应蛋白质的预测分子量约为18.89kDa,理论等电点为4.22。运用pET-32a载体和BL21(DE3)菌株构建钙调素类似蛋白原核表达系统,诱导出特异性融合蛋白。实时荧光定量PCR检测显示,在不同的胁迫温度(20℃和30℃)处理下,钙调素类似蛋白基因表达随着时间推移呈现先上升后下降的规律,并于24h达到最大表达量。上述结果为进一步深入研究钙调素类似蛋白基因的功能及其调控机理奠定基础。(本文来源于《2017年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2017-11-08)
张杰伟,吴婷,任飞,谢华,魏建华[5](2017)在《桃钙调磷酸酶B类似蛋白基因家族鉴定与分析》一文中研究指出为了研究桃钙调磷酸酶B类似蛋白(CBLs)基因家族在桃中如何发挥作用。利用桃基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定桃CBL家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过序列比对进行进化和分类分析。结果表明,桃基因组中含有8个CBL家族基因,分布于桃的5条染色体上。MEME和Pfam保守结构域分析显示,桃CBL蛋白均含有4个保守的EF结构域。进化树分析表明CBLs可分为4个亚家族。TMHMM 2.0Server分析显示仅PpCBL1含有1个跨膜区。PlantsPFeatureScan分析显示PpCBL2、3和5均含有1个N-豆蔻酰化位点。NetPhos 2.0 Server结果显示PpCBLs存在着大量的丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)及酪氨酸(Tyr)潜在磷酸化位点。以上结果将为今后揭示桃CBL的功能提供重要的理论基础。(本文来源于《西南农业学报》期刊2017年03期)
张杰伟,杨育峰,任飞,谢华,魏建华[6](2016)在《桃钙调磷酸酶B类似蛋白互作蛋白激酶基因家族鉴定与分析》一文中研究指出钙调磷酸酶B类似蛋白互作蛋白激酶(CIPKs)在植物生长发育和抗逆过程中发挥着重要作用。为了对桃中CIPK家族基因进行系统分析,利用桃基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定桃CIPK家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过序列比对进行进化和分类分析。结果表明,桃基因组中含有18个CIPK基因,分布于桃的6条染色体上。MEME和Pfam保守结构域分析显示,桃CIPK蛋白均含有2个保守的PKinase和NAF结构域。进化树分析表明CIPKs可分为2个亚家族。Net Phos 2.0 Server结果显示Pp CIPKs存在着大量的丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)及酪氨酸(Tyr)潜在磷酸化位点。以上结果将为今后揭示桃CIPK蛋白的功能提供重要的理论基础。(本文来源于《科学技术与工程》期刊2016年24期)
赵楠[7](2016)在《本氏烟钙调素类似蛋白Nbrgs-CaM抑制转录后基因沉默的机理研究》一文中研究指出转录后基因沉默(Post transcriptional gene silencing, PTGS)是植物抵抗病毒侵染的一种机制,病毒为了成功侵染寄主植物会编码RNA沉默抑制子。中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus, TYLCCNV)伴随的卫星分子Beta (Tomato yellow leaf curl China Betasatellite, TYLCCNB)编码的唯一蛋白pCl是一个重要的致病因子和RNA沉默抑制子。βC1可以上调本氏烟中的钙调素类似蛋白基因Nbrgs-CaM来抑制RNA沉默途径中的重要基因NbRDR6的表达,从而抑制RNA沉默。Nbrgs-CaM被证实是一个植物内源的RNA沉默抑制子,并在βCl抑制次级小型干扰RNAs (Small interfering RNAs, siRNAs)的产生及诱导双生病毒的致病性中起了重要作用。植物病毒利用Nbrgs-CaM来反击寄主的防御反应,但是Nbrgs-CaM抑制RNA沉默的具体作用尚不清楚。本文围绕着Nbrgs-CaM与本氏烟沉默抑制子(Suppressor of Gene Silencing 3, NbSGS3)的互作开展深入的研究。NbSGS3在细胞内呈颗粒状分布,这种颗粒状结构被称为SGS3/RDR6小体(SGS3/RDR6 bodies)。对NbSGS3序列进行分析,发现它具有叁个典型的结构域。为了明确它的哪一个结构域对于这种颗粒状的定位是必需的,我们分别构建了NbSGS3的各个结构域缺失突变体的亚细胞定位表达载体(pCHF3-NbSGS3-dZF-GFP, pCHF3-NbSGS3-dXS-GFP, pCHF3-NbSGS3-d2CC-GFP)。通过浸润H2B-RFP本氏烟,观察它们的亚细胞定位模式,我们发现NbSGS3的ZF和2CC结构域对于它的亚细胞定位很重要。为了探究NbSGS3的关键定位结构域是否也是它与Nbrgs-CaM的互作结构域,我们构建了NbSGS3的各个结构域缺失突变体的BiFC表达载体(2YN/2YC-NbSGS3-dZF, 2YN/2YC-NbSGS3-dXS,2YN/2YC-NbSGS3-d2CC)。通过在H2B-RFP本氏烟上共表达这些突变体蛋白,分析它们与Nbrgs-CaM蛋白在细胞内的互作情况,结果显示NbSGS3的ZF和2CC结构域对于它与Nbrgs-CaM的互作也是必需的。对Nbrgs-CaM的序列进行分析,发现它具有四个功能结构域。为了探究Nbrgs-CaM的哪个结构域决定了它与NbSGS3的互作,我们构建了Nbrgs-CaM的各个结构域缺失突变体的BiFC表达载体(2YN/2YC-NbCaM-dX,2YN/2YC-NbCaM-dEFI,2YN/2YC-NbCaM-dEFII,2YN/2YC-NbCaM-dEFIV)。在H2B-RFP本氏烟上研究Nbrgs-CaM不同结构域的缺失突变体与NbSGS3蛋白的互作情况,结果显示Nbrgs-CaM的EFI和EFII两个结构域对于它与NbSGS3的互作是必需的。为了明确Nbrgs-CaM与NbSGS3的互作结构域EFI和EFII对于Nbrgs-CaM的PTGS抑制子活性是否同样重要,我们将Nbrgs-CaM及其各个结构域缺失突变体构建到pCambia2300-Flag的重组表达载体上(pCambia2300-NbCaM-dX-Flag, pCambia2300-NbCaM-dEFI-Flag, pCambia2300-NbCaM-dEFII-Flag,pCambia2300-NbCaM-dEFIV-Flag)。分别在野生型本氏烟和16c本氏烟上进行RNA沉默抑制子鉴定实验,结果均显示Nbrgs-CaM与NbSGS3互作所必需的EFI和EFII两个结构域对于Nbrgs-CaM的沉默抑制子功能也是必需的。我们还发现Nbrgs-CaM的过量表达能够降低NbSGS3蛋白的积累量。这些结果说明Nbrgs-CaM可以与NbSGS3互作并降解NbSGS3蛋白的表达从而抑制RNA沉默。(本文来源于《浙江大学》期刊2016-03-01)
林亚,李世国,谢莉萍,张荣庆[8](2014)在《栉孔扇贝钙调素类似蛋白基因的克隆及其与钙调素基因表达特征的比较分析》一文中研究指出软体动物碳酸钙贝壳的形成过程涉及到Ca2+的吸收、转运、贮藏、分泌和沉积等,与钙代谢这一高度受控的复杂生理过程紧密相关。本研究以栉孔扇贝转录组测序结果为基础,通过RACE技术,从栉孔扇贝外套膜中克隆得到钙调素类似蛋白的cDNA序列,全长863bp,编码149个氨基酸,相应蛋白质的预测分子量约为17.0ku,理论等电点为4.03。钙调素类似蛋白具有4个可能的EF-hand Ca2+结合结构域,属于EF-hand钙结合蛋白家族,其氨基酸序列与栉孔扇贝钙调素钙调素的相似度为66%。半定量RT-PCR检测显示,钙调素类似蛋白基因在外套膜中特异性高表达,预示其可能参与贝壳的矿化过程。实时定量PCR检测显示,钙调素类似蛋白基因的表达水平随环境中Ca2+浓度的升高呈先升后降趋势,表明钙调素类似蛋白与外套膜中的钙代谢过程密切相关;在贝壳缺刻损伤后的再生过程中,钙调素类似蛋白基因表达量显着上升,暗示其积极参与到了贝壳的再生过程中。上述结果为进一步阐明钙调素类似蛋白基因的功能及其在栉孔扇贝生物矿化过程中的作用提供可能的理论依据。(本文来源于《水产科学》期刊2014年11期)
王双双,杨雪,张伟[9](2012)在《钙调素类似蛋白参与拟南芥花粉萌发和花粉管生长的实验证据》一文中研究指出花粉是植物雄配子体的载体,其正常萌发和快速极性生长,对于开花植物成功受精并繁殖后代至关重要,因此,探讨花粉萌发和生长的调控网络,对于了解植物生殖调控机理和提高作物种子产量具有重要意义。胞内自由钙离子(CytosolicFreeCalcium,Ca~(2+)cyt)浓度变化是细胞重要的第二信使,参与了花粉萌发和生长的生理过程,但其生理调控机制并不清楚。我们发现一类钙调素类似蛋白(CalmodulinLikeProtein,CML)参与了花粉萌发和花粉管生长,该蛋白编码基因PGCML1(PollenGerminationandelongationrelatedCMLgene1)在花粉和花粉管中高表达,其功能缺失突变体的花粉萌发率和花粉管长度均降低;且对胞外K~+和Ca~(2+)的敏感性降低;进一步结果显示PGCML1在细胞质表达,并且其作用与NO及Ca~(2+)信号转导途径相关。基于以上实验结果,我们推测,PGCML1在胞质内通过NO及Ca2+胞内信号,影响花粉及花粉管的跨膜离子转运(如Ca~(2+)、K~+等),从而实现对花粉萌发及花粉管生长的调控。(本文来源于《山东植物生理学会第七次代表大会暨植物生物学与现代农业研讨会论文集》期刊2012-10-20)
任岗,王岩[10](2011)在《叁角帆蚌钙调素及其类似蛋白的基因克隆和表达分析》一文中研究指出钙的代谢是贝类的一个重要而复杂的生理活动过程,它受到许多调节因子的控制。其中钙调素及其类似蛋白被认为发挥了关键作用。我们采用SMARTer RACE技术成功克隆了淡水育珠贝叁角帆蚌钙调素(CaM)、钙调素类似蛋白(CaLP)cDNA全序列,并对两者mRNA组织表达量进行了荧光定量PCR分析。结果表明:CaM和CaLP在编码区核苷酸相似度为79.6%,CaLP比CaM具有更长的3'UTR序列(分别为716bp和158bp);CaM和CaLP在组织表达上存在明显的差异,1-3龄蚌中CaM在鳃、外套膜、腹足中表达量均较高,CaLP只在外套膜中表达量高。因此,我们推测CaM和CaLP可能在叁角帆蚌钙代谢中扮演不同的角色。(本文来源于《渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2011-11-15)
钙调素类似蛋白论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
CML是一类重要的Ca~(2+)响应蛋白,为了研究CML蛋白对报春花自交不亲和性的影响,该研究从胭脂花和小报春转录组数据中分别筛选出PmCML19和PfCML19基因,并对这2个基因进行全长克隆、生物信息学分析以及基因亚细胞定位和表达模式分析。结果发现:(1)PmCML19和PfCML19基因全长均为435 bp,所编码蛋白的氨基酸相似度达80.56%,均为酸性亲水性蛋白,包含4个EF手性结构;同源分析表明, PmCML19和PfCML19的亲缘关系与中华猕猴桃AcCML19最近,而拟南芥家族中的AtCML40与这2个蛋白的氨基酸序列相似度分别为44%和46%。(2)亚细胞定位结果表明,PmCML19和PfCML19基因在细胞核和细胞膜上均表达。(3)实时荧光定量PCR结果表明,PmCML19和PfCML19基因在花药中的表达量均高于雌蕊;在胭脂花和小报春亲和授粉组合的雌蕊中具有较高的表达量,而在不亲和授粉组合的雌蕊中表达量显着降低。研究推测,胭脂花和小报春CML19基因与报春花的自交不亲和性密切相关,为进一步研究异型自交不亲和遗传机制提供了新思路。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钙调素类似蛋白论文参考文献
[1].刘嘉斐,张璐,孟永娇,段莉莉,罗雨薇.过表达钙调素类似蛋白基因CML25-like诱导黄瓜单性结实的研究[J].南京农业大学学报.2019
[2].司未佳,卢婉佩,刘颖,王佳,程堂仁.胭脂花及小报春钙调素类似蛋白基因CML19的克隆与表达分析[J].西北植物学报.2019
[3].黄元佳.稀杯盔形珊瑚钙调素类似蛋白、钙网蛋白、碳酸酐酶基因的克隆及表达分析[D].广东海洋大学.2018
[4].黄元佳,袁吉贵,彭慧湃,张艳苹,刘丽.稀杯盔形珊瑚钙调素类似蛋白基因的克隆、原核表达和温度胁迫下的表达分析[C].2017年中国水产学会学术年会论文摘要集.2017
[5].张杰伟,吴婷,任飞,谢华,魏建华.桃钙调磷酸酶B类似蛋白基因家族鉴定与分析[J].西南农业学报.2017
[6].张杰伟,杨育峰,任飞,谢华,魏建华.桃钙调磷酸酶B类似蛋白互作蛋白激酶基因家族鉴定与分析[J].科学技术与工程.2016
[7].赵楠.本氏烟钙调素类似蛋白Nbrgs-CaM抑制转录后基因沉默的机理研究[D].浙江大学.2016
[8].林亚,李世国,谢莉萍,张荣庆.栉孔扇贝钙调素类似蛋白基因的克隆及其与钙调素基因表达特征的比较分析[J].水产科学.2014
[9].王双双,杨雪,张伟.钙调素类似蛋白参与拟南芥花粉萌发和花粉管生长的实验证据[C].山东植物生理学会第七次代表大会暨植物生物学与现代农业研讨会论文集.2012
[10].任岗,王岩.叁角帆蚌钙调素及其类似蛋白的基因克隆和表达分析[C].渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集.2011