导读:本文包含了发色底物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人纤维蛋白溶酶原,发色底物法,效价,验证
发色底物论文文献综述
胡勇,彭焱,陈克金,詹骞,周雁翔[1]（2019）在《发色底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原纯化工艺的可行性分析》一文中研究指出目的分析发光底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原(plasminogen,Pg)纯化工艺的可行性。方法采用纤溶酶原测定试剂盒对ACL7000血凝仪运行发色底物法的性能进行确认;并对该方法的线性范围、准确度、精密度、选择性进行验证;应用Softmax及Statistic软件分析定标血浆及Pg纯化样品检测结果的平行性;采用验证的方法检测Pg全层析工艺样品的效价及目标样品存贮稳定性。结果 ACL7000血凝仪运行发色底物法的性能稳定。定标血浆标准曲线线性范围为0. 128～1. 28 U/mL,稀释样品回收率在92%～103%之间,R~2≥0. 99;定标血浆的高、中、低值、检测下限及正常质控血浆(control plasma normal,CPN)效价回收率批内及批间分别在91%～108%和94%～107%之间,批内及批间CV分别在0. 5%～1. 9%和0. 3%～1. 4%之间;Pg纯化各段层析缓冲液所含特殊组分除1%Tween80+0. 3%磷酸叁丁酯外对Pg效价检测无影响。纯化样品Pg效价检测曲线与定标血浆曲线平行。全层析工艺Pg半成品的比活性达8 U/mg以上,效价总回收率达50%以上;Pg亲和层析洗脱液在-30℃保存42 d、18～25℃及2～8℃保存7 d效价稳定,Pg半成品在-30℃保存68 d、18～25℃及2～8℃保存38 h效价稳定。结论纤溶酶原测定试剂盒(发色底物法)具有较好的线性范围、准确度、精密度和选择性,ACL7000血凝仪运行该方法可用于Pg全层析工艺样品的效价检测,本实验为Pg纯化工艺研究奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年10期）
张晋超,赵雄,吕茂民,尹惠琼,王延琳[2]（2015）在《发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性》一文中研究指出目的优化发色底物法,使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响;计算初速度并确定被底物饱和的最大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育,剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线,测定相关样品的活性,进行精密度和准确度验证。结果胰蛋白酶浓度为0.0625 mg/ml,20 min内酶促反应处于初速度内。AAT标准曲线范围为200~1200 IU/ml,r>0.99。该法测定CohnⅣ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为(720.59±18.63)、(601.84±19.18)、(568.09±24.83)IU/ml。每个样品之间的RSD<10%,加样回收率均在90%~110%。结论发色底物法经优化后,准确度和精密度大幅度提高,更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。(本文来源于《军事医学》期刊2015年03期）
张晋超,赵雄,吕茂民,章金刚[3]（2014）在《发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性》一文中研究指出目的α1-抗胰蛋白酶(alpha-1 antitrypsin,AAT)是人血浆中最重要的蛋白酶抑制剂,临床上采用静脉注射补充AAT方法治疗先天性AAT缺乏所引起的肺气肿等肺部疾病,疗效显着。发色底物法是国内测定AAT活性的常用方法之一,但标准品和测定时间不同会影响人AT活性测定结果。本研究采用AAT国际标准品为参考标准,将测定时间控制在反应初期,在酶促反应初速度内测定AAT活性,优化了发色底物法。方法发色底物法是以胰蛋白酶为靶酶,以苯甲(本文来源于《中国输血协会第七届输血大会论文专辑（摘要篇）》期刊2014-11-13）
白国良,杨潇骁,林浩,杨立泉,王德心[4]（2012）在《酰基苯肼型保险拉手树脂的合成及在多肽对硝基苯胺发色底物合成中的应用》一文中研究指出针对液相合成对羧基苯胺发色底物的不足,采用Boc-对羧基苯肼和MBHA树脂为原料合成了具有保险拉手型连接臂结构的树脂,对保护基形式及树脂载体类型的选择进行了探讨。基于该型树脂采用微波辅助的Fmoc/Boc混合策略在树脂上合成了5个用于丝氨酸蛋白酶活性实验的多肽中间体,经温和的N-溴代琥珀酰亚胺/吡啶条件氧化连接臂后,与对硝基苯胺(pNA)发生氨解反应,以较高的收率和纯度得到5个丝氨酸蛋白酶发色底物。中间体及产物经过高分辨质谱和核磁共振氢谱确定了结构。(本文来源于《化学试剂》期刊2012年11期）
李子杰[5]（2009）在《发色底物S-2288和S-2251的化学合成》一文中研究指出组织纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)在脑中大量存在,可能是调节血液流向脑细胞的关键因素。它在体内的活性高低与肿瘤、冠心病等多种疾病有关。tPA主要通过发色底物来检测,S-2251和S-2288是其中常用的两种发色底物。S-2288是一种对丝氨酸蛋白酶广谱具有高灵敏度的发色底物,S-2251是用于检测纤维蛋白溶酶和链激酶激活纤维蛋白溶酶原的发色底物。S-2251和S-2288都属于多肽类化合物,其合成国外文献已有报道。文献是用液相合成,每一步都必须分离和纯化,路线繁琐,总的收率较低,价格较高。本文在国外报道的合成路线进行研究的基础上进行改进,主要是采用液相和固相相结合的合成路线,高效、快速、高产率合成出S-2251、S-2288。同时缩短合成周期,减少纯化步骤。本文先固相合成全保护肽Boc-D-Ile-L-Pro-L-Arg(Pbf)-OH和Boc-D-Val- L-Leu -L-Lys(Boc)-OH,然后再跟对硝基苯胺(pNA)反应,但发现由于pNA的对位硝基的吸电子作用,使得其反应活性很低,产率比文献报道的还要低。在此基础上,本文进一步提出了用全保护肽先跟对苯二胺的一个氨基反应,然后再用双氧水把剩下的那个氨基氧化成硝基。该合成方法的难点在于要控制好对苯二胺用量,使得1摩尔对苯二胺只能跟1摩尔Boc-D-Ile-L-Pro-L-Arg(Pbf)-OH或者Boc-D-Val-L-Leu-L-Lys(Boc)-OH反应;本文采用对苯二胺:全保护肽=4:1,先活化好全保护肽,然后往对苯二胺溶液中滴加的方法,有效的避免了对苯二胺的两个氨基都反应的情况。另外一个难点就是在氧化氨基的时候要确保Arg或Lys上的氨基不被氧化。本文通过控制氧化剂的用量及反应时间,用HPLC跟踪反应的情况,有效的避免了Lys及Arg上的氨基被氧化。由于氧化反应是用叁氟乙酸来做溶剂的,而叁氟乙酸又可以脱除侧链保护基,因此本文提出了将氧化反应和脱除侧链保护基同时进行。通过改变氧化剂及叁氟乙酸的比例,同时加入TIS以减少侧链保护基脱除时带来的副反应,发现TFA:H_2O_2:TIS=80:15:5时,可以取得较好的结果。本文还对固相合成全保护肽过程中的影响产率高低的因素,如氨基酸树脂替代度、激活剂种类及用量、保护氨基酸投料量、反应时间等做了详细的探讨。(本文来源于《华南理工大学》期刊2009-11-29）
雷丹青,刘绵林,周先丽[6]（2005）在《发色底物法测定注射用降纤酶中类凝血酶的含量》一文中研究指出目的建立发色底物法测定注射用降纤酶类凝血酶的方法。方法以Be-Phe-Val-Arg-PNA为发色底物,检测波长405nm。结果降纤酶在2~10单位/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.9993(n=5)。结论本法简便,准确,专属性强,适用于产品的质量控制。(本文来源于《中国现代应用药学》期刊2005年06期）
胡显文,高丽华,李世崇,胥照平,张正光[7]（2003）在《发色底物法定量测定重组u-PA产品的总活性和单链比例》一文中研究指出目的 :建立一种发色底物酶水解方法定量分析重组尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u_PA)中的总活性及其单链酶原比例。方法 :用嗜热菌蛋白酶激活u_PA转化成具有催化活性的双链尿激酶 ,再用尿激酶的发色底物S_2 44 4测定u_PA的总活性。在非激活条件下 ,u_PA产品中的单链酶原不会催化水解S_2 44 4底物 ,因而可以测定其单链酶原比例。结果 :优化了嗜热菌蛋白酶激活u_PA的反应条件和尿激酶催化水解S_2 44 4的反应条件。用这种方法测定了用CHO细胞表达的基因重组u_PA产品 ,单链比例大于 98%,比活性约为 11× 10 4 U/mg。结论 :用发色底物法测定重组人u_PA产品中的总活性和单链比例具有很好的重复性和准确性。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2003年05期）
王明山,黄珺,袁谦,陈晓东[8]（2003）在《纤维蛋白(原)降解产物对发色底物法测定抗凝血酶活性的影响》一文中研究指出目的 探讨纤维蛋白 (原 )降解产物 (FDP)、D 二聚体 (DD)对发色底物法测定抗凝血酶活性 (AT :A)的影响。方法 留取 31例体检正常标本和 85例FDP、DD可能增高的患者标本 ,分别用发色底物法测定AT :A ,免疫比浊法测定抗凝血酶抗原 (AT :Ag) ,ELISA法测定其FDP、DD含量。再将正常混合血浆与高FDP、DD浓度的异常混合血浆以不同比例混合后同上法分别测定其AT :A、AT :Ag、FDP及DD的含量。 结果 AT :A除肝硬化组外其余各组与对照组比较差异均无显着性 (P >0 .0 5 ) ,而AT :Ag含量各组均显着低于对照组 ;AT :A与AT :Ag含量的比值均明显高于对照组 ,其比值增高的幅度与FDP、DD的浓度呈正相关。结论 FDP、DD对发色底物法测定AT :A结果有影响。临床应用中 ,若同时测定AT :A和AT :Ag含量 ,更能明确反映该指标的临床意义。(本文来源于《上海医学检验杂志》期刊2003年04期）
黄珺,王明山,袁谦,陈晓东[9]（2002）在《纤维蛋白(原)降解产物对用发色底物法测定抗凝血酶Ⅲ活性的影响》一文中研究指出目的:探讨纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D—二聚体(D—D)对用发色底物法测定抗凝血酶Ⅲ活性(AT—Ⅲ:A)的影响。方法:留取31例体检正常标本和85例FDP、D—D可能增高的患者标本,分别用发色底物法测定AT—Ⅲ:A,用免疫比浊法测定抗凝血酶Ⅲ抗原(AT—Ⅲ:Ag),用EIISA法测定其FDP、D—D含量。再将正常混合血浆与高FDP、D—D浓度的异常混合血浆、高D—D浓度的标准品以不同比例混合后,用上法分别测定其AT—Ⅲ:A及AT—Ⅲ:Ag、FDP、D—D的含量。结果:AT—Ⅲ:A除肝硬化组外其余各组与对照组比较均无显着性差异,P>0.05,而AT—Ⅲ:Ag含量各组均显着低于对照组;AT—Ⅲ:A与AT—Ⅲ:Ag含量的比值均明显高于对照组,其比值增高的幅度与FDP、D—D的浓度呈正相关。结论:FDP、D—D会使发色底物法测定AT—Ⅲ:A结果偏高,其偏高的幅度与FDP、D—D的含量呈正相关,此时测定AT—Ⅲ:Ag含量更能反映其临床意义。(本文来源于《检验医学教育》期刊2002年03期）
蒋昌盛,缪谦,柯玉萍,尤田耙[10]（2002）在《人血凝结因子Xa发色底物的合成研究》一文中研究指出利用混合酸酐法和活泼酯法及廉价的试剂较方便地合成了人血凝结因子 Xa的一种发色底物。(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2002年02期）
发色底物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的优化发色底物法,使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响;计算初速度并确定被底物饱和的最大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育,剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线,测定相关样品的活性,进行精密度和准确度验证。结果胰蛋白酶浓度为0.0625 mg/ml,20 min内酶促反应处于初速度内。AAT标准曲线范围为200~1200 IU/ml,r>0.99。该法测定CohnⅣ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为(720.59±18.63)、(601.84±19.18)、(568.09±24.83)IU/ml。每个样品之间的RSD<10%,加样回收率均在90%~110%。结论发色底物法经优化后,准确度和精密度大幅度提高,更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
发色底物论文参考文献
[1].胡勇,彭焱,陈克金,詹骞,周雁翔.发色底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原纯化工艺的可行性分析[J].中国生物制品学杂志.2019
[2].张晋超,赵雄,吕茂民,尹惠琼,王延琳.发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性[J].军事医学.2015
[3].张晋超,赵雄,吕茂民,章金刚.发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性[C].中国输血协会第七届输血大会论文专辑（摘要篇）.2014
[4].白国良,杨潇骁,林浩,杨立泉,王德心.酰基苯肼型保险拉手树脂的合成及在多肽对硝基苯胺发色底物合成中的应用[J].化学试剂.2012
[5].李子杰.发色底物S-2288和S-2251的化学合成[D].华南理工大学.2009
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[7].胡显文,高丽华,李世崇,胥照平,张正光.发色底物法定量测定重组u-PA产品的总活性和单链比例[J].军事医学科学院院刊.2003
[8].王明山,黄珺,袁谦,陈晓东.纤维蛋白(原)降解产物对发色底物法测定抗凝血酶活性的影响[J].上海医学检验杂志.2003
[9].黄珺,王明山,袁谦,陈晓东.纤维蛋白(原)降解产物对用发色底物法测定抗凝血酶Ⅲ活性的影响[J].检验医学教育.2002
[10].蒋昌盛,缪谦,柯玉萍,尤田耙.人血凝结因子Xa发色底物的合成研究[J].中国医药工业杂志.2002