导读:本文包含了马来丝虫论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:周期型马来丝虫,半胱氨酸蛋白酶抑制剂,转染,细胞株
马来丝虫论文文献综述
陆施娟,徐倩,徐邦生,方政[1]（2015）在《周期型马来丝虫基因稳定转染细胞株的建立》一文中研究指出目的将含周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Bm-CPI)基因的重组质粒pc DNA3.1(+)-Bm-CPI转染人宫颈癌细胞(Hela细胞)获得重组质粒稳定转染细胞株,为重组蛋白的获得提供基础。方法将成功构建的重组质粒pc DNA3.1(+)-Bm-CPI转染Hela细胞,以G418筛选转染细胞,通过RT-PCR和SDS-PAGE鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。结果重组真核表达质粒pc DNA3.1(+)-Bm-CPI转染Hela细胞后,d 14可见G418抗性细胞株开始形成。G418抗性Hela细胞株筛选、扩大培养后RT-PCR扩增出621bp左右的目的条带;SDS-PAGE检测获得了明显的目的条带。结论实验证实pc DNA3.1(+)-Bm-CPI重组质粒被成功转入Hela细胞,并获得稳定表达;为进一步研究Bm-CPI表达、蛋白纯化和测定其生物学活性奠定了基础。(本文来源于《现代预防医学》期刊2015年21期）
陆施娟,方政,王慧,徐邦生,李群[2]（2014）在《表达马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的Hela细胞的无血清培养》一文中研究指出目的:使用无血清培养基培养可稳定表达马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(Brugia malayi cystatin,Bm-CPI)的人宫颈癌细胞(Hela)。方法:将已获得的Bm-CPI稳定转染的Hela细胞株,进行无血清培养并观察Hela细胞的维持时间和培养过程中Hela细胞的形态变化。结果:无血清培养基培养Hela细胞可维持细胞的正常生长。结论:无血清培养基可以逐步代替含血清的培养基,为后续Hela细胞扩大培养和Bm-CPI基因重组蛋白纯化提供依据。(本文来源于《南通大学学报(医学版)》期刊2014年04期）
钱一言,徐怿琳,陆施娟,王慧,方浩[3]（2013）在《周期型马来丝虫复合基因真核表达体系的建立》一文中研究指出目的将含周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmCPI)复合基因的重组质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH转染人宫颈癌细胞(Hela)细胞获得复合重组质粒稳定转染细胞株,并纯化所表达的重组蛋白,为研制新型的抗周期型马来丝虫重组蛋白疫苗提供理论及实验依据。方法将成功构建的pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH和空载体pcDNA3.1(+)分别转染Hela细胞,以G418筛选转染细胞,进而通过RT-PCR和SDS-PAGE鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。对阳性克隆进行无血清悬浮培养,收集细胞及其培养液。亲和层析纯化所表达的重组蛋白并通过Western-blotting对纯化的重组蛋白进行生物学鉴定。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH经转染Hela细胞,G418持续筛选14 d获得稳定表达。表达产物经Western-blotting法鉴定能够与相应的免疫鼠血清反应,相对分子质量Mr约为54×103。结论成功建立了周期型马来丝虫复合重组质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH稳定转染细胞株并获得了相应的重组蛋白。(本文来源于《现代预防医学》期刊2013年23期）
刘志荣,李佐,张富南,李瑞洋[4]（2012）在《眉山市马来丝虫病防治后期流行趋势》一文中研究指出目的了解眉山市丝虫病防治后期的流行病学特征,评价消除丝虫病后的流行趋势和慢性丝虫病患者的变化。方法采取查治残存传染源、集体服药和重点人群与防治薄弱村组为主要监测对象的巩固措施,采用重点乡镇人群普服0.3%乙胺嗪药盐的净化措施;开展后期慢性丝虫病调查和复查及横向人群监测。结果 1983年眉山市基本消除丝虫病后,1983-1985年在重点人群监测的原微丝蚴血症者114人和疫点人群3 605人中,分别检出微丝蚴血症者4例,微丝蚴密度1～252条/120μl,平均38.75条/120μl;1984年和1988年横向人群监测3 104、5 551人,分别新检出微丝蚴血症者5、1人,平均微丝蚴密度6.20条、11条/120μl。随着巩固和净化措施实施,1989-2012年连续监测24年未检出微丝蚴血症者。原慢性丝虫病患者由基本消除丝虫病前的393例,减少至2011年的29例,1989年以来无新发慢性丝虫病发生。现遗留的慢性丝虫病患者表现为高龄化、病程长的特点。结论眉山市消除丝虫病后监测,未发现内源性传染源,显示实施巩固与净化措施后远期效果显着,原流行区现39岁以下人群得到了有效保护。后期工作重点应放在对输入性传染源的监测和原慢性丝虫病患者给予关怀与照料。(本文来源于《预防医学情报杂志》期刊2012年12期）
张赛楠,方政,陆施娟,王慧,徐邦生[5]（2011）在《周期型马来丝虫CPI基因真核表达载体的构建和免疫学研究》一文中研究指出目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmCPI)基因真核表达载体pcDNA3.1-BmCPI,并观察其在小鼠体内的免疫应答反应。方法以周期型马来丝虫总RNA为模板,逆转录PCR(RT-PCR)扩增目的基因片段。与pGEM-T Easy克隆载体连接,筛选出阳性克隆,经PCR和双酶切鉴定后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1,构建pcDNA3.1-BmCPI表达载体。将48只小鼠随机分为4组,每组12只,分别为健康对照组、空质粒组、pcDNA3.1-BmCPI组和pcDNA3.1-BmCPI/CpG组,分别注射PBS 100μl、空质粒pcDNA3.1 100μg、重组质粒pcDNA3.1-BmCPI100μg和重组质粒pcDNA3.1-BmCPI 100μg+佐剂CpG 30μg,采用左后腿胫前肌注射免疫。每2周1次,共3次,于末次免疫后第4周,用RT-PCR方法检测小鼠注射部位肌肉组织内目的基因转录情况。于末次免疫后第4和第6周,用噻唑蓝(MTT)法检测小鼠T淋巴细胞刺激增殖水平。于末次免疫后第2、4和6周,用ELISA法检测小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)水平。结果成功构建了pcDNA3.1-BmCPI真核表达载体,基因片段大小为621 bp。该真核表达载体免疫小鼠后,从小鼠肌肉组织扩增出目的基因。末次免疫后第4和第6周,2个免疫组小鼠淋巴细胞刺激增殖指数均显着高于健康对照组和空质粒组(53.789±1.937、59.735±4.139和61.975±1.029)(均P<0.05),2个免疫组间差异无统计学意义(P>0.05)。于末次免疫后第2、4和6周,pcDNA3.1-BmCPI组和pcDNA3.1-BmCPI/CpG组小鼠血清IFN-γ水平随时间延长逐渐升高,分别为69.544±3.145和106.069±7.518、120.019±5.968和136.229±7.198、149.109±2.700和178.429±1.126,均显着高于健康对照组和空质粒组(28.264±1.129、35.179±1.029和40.110±1.176)(均P<0.05),其中末次免疫后第2和第6周,pcDNA3.1-BmCPI/CpG组IFN-γ水平显著高于pcDNA3.1-BmCPI组(均P<0.05)。于末次免疫后第4和第6周,2个免疫组的IL-4水平均显着高于健康对照组和空质粒组(均P<0.05),2个免疫组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 pcDNA3.1-BmCPI真核表达载体能在小鼠体内转录,并可诱导免疫应答。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2011年06期）
张赛楠,方政,童海燕,方浩,谢东方[6]（2010）在《周期型马来丝虫GAPDH部分编码基因原核及真核表达载体的构建》一文中研究指出[目的]构建我国流行的周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)部分编码基因原核和真核表达质粒以及基因序列分析,为进一步的研究奠定基础。[方法]根据GeneBank中马来丝虫GAPDH基因的已知序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因。扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-BmGAPDH,经测序验证,并进行同源性比较。亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-BmGAPDH,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证。[结果]RT-PCR扩增出一条约877 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为99%。转染的COS-7细胞高水平表达BmGAPDH的mRNA,根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的一致。[结论]成功构建了周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶部分编码基因原核及真核表达载体,为进一步功能研究提供了条件。(本文来源于《现代预防医学》期刊2010年22期）
张育智,张富南,陈漪澜,张丽萍[7]（2010）在《四川省马来丝虫病防治后期流行趋势分析》一文中研究指出目的掌握马来丝虫病防治后期的流行病学特征及媒介变化情况,为巩固防治成果,防止丝虫病的再度流行提供科学数据。方法采取查治残存传染源和全民普服药盐的巩固措施;开展丝虫病防治后期病原学、血清学和蚊媒监测及慢性丝虫病调查,并对收集到的资料进行分析。结果东坡区于基本消除丝虫病后的前6年,重点人群监测检出残存微丝蚴血症者7例,其中复阳3例,新检出4例;筠连、雨城区和沐川县于基本消除丝虫病后的前1~5年,横向监测各检出残存微丝蚴血症者2、1和1例,其中原阳拒治者1例,新检出3例中漏查者2例。消除丝虫病后,4个县连续监测14年未检出微丝蚴,无新发慢性丝虫病患者。结论基本消除丝虫病后的初期,丝虫病传播继续存在,采取巩固措施后未检出微丝蚴;消除丝虫病后监测表明,实施不同巩固措施后的远期效果显着。后期工作重点应放在对原慢性丝虫病患者的关怀与照料。(本文来源于《寄生虫病与感染性疾病》期刊2010年02期）
秦元华,郑莉莉,戴晓冬,任一鑫,陈玉凤[8]（2010）在《中国马来丝虫库建设与发展》一文中研究指出伴随着中国基本消灭丝虫病,保藏中国的丝虫物种资源和丝虫基因资源具有重要而深远的意义。大连医科大学寄生虫学教研室多年来从事中国马来丝虫活体保存及丝虫动物虫库的发展,并参与中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所寄生虫种质资源平台建设。本文就该虫库发展过程及加入种质资源平台后所做工作及展望进行阐述。(本文来源于《大连医科大学学报》期刊2010年01期）
陈漪澜,张富南[9]（2009）在《马来丝虫病不同巩固防治与净化措施的远期效果分析》一文中研究指出目的了解基本消除丝虫病后实施不同巩固防治与净化措施的远期效果。方法采取查治残存传染源和全民普服0.3%乙胺嗪药盐的巩固与净化措施,开展丝虫病的重点人群和横向、纵向监测及慢性丝虫病调查。结果夹江县于基本消除丝虫病后次年监测原微丝蚴血症者349人,检出复阳9例;筠连和夹江县于基本消除丝虫病后前3年,横向监测各检出残存微丝蚴血症者2人和15人,其中新检出1人和12人;洪雅县未检出微丝蚴血症者。3个县均无新发慢性丝虫病发生。结论筠连和夹江县基本消除丝虫病后的初期,丝虫病传播继续存在,经采用巩固防治与净化措施和重点人群为主的监测措施后,未检出微丝蚴。通过消除丝虫病后监测,未发现内源性传染源,表明实施不同巩固和净化措施后的远期效果显着。(本文来源于《寄生虫病与感染性疾病》期刊2009年04期）
谢东方,方政,童海燕,徐邦生,黄为群[10]（2009）在《马来丝虫肌球蛋白基因序列及编码产物预测》一文中研究指出目的克隆周期型马来丝虫肌球蛋白(BmMyosin)基因,进行序列测定、分析及编码产物的B细胞表位预测。方法依据公布的BmMyosin基因序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因。扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠埃希菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-BmMyosin,经测序验证,并进行同源性比较。应用5种参数和方法对其编码产物进行B细胞表位预测。结果RT-PCR扩增出一条约1 292 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为98.45%。经表位预测分析,BmMyosin的B细胞表位可能在287~300位、339~350位和416~422位氨基酸区域。结论成功构建了周期型马来丝虫肌球蛋白重组质粒pGEM-T克隆载体,对其编码产物进行B细胞表位预测。为蛋白质特性分析及免疫学研究提供基础依据。(本文来源于《中国公共卫生》期刊2009年10期）
马来丝虫论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:使用无血清培养基培养可稳定表达马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(Brugia malayi cystatin,Bm-CPI)的人宫颈癌细胞(Hela)。方法:将已获得的Bm-CPI稳定转染的Hela细胞株,进行无血清培养并观察Hela细胞的维持时间和培养过程中Hela细胞的形态变化。结果:无血清培养基培养Hela细胞可维持细胞的正常生长。结论:无血清培养基可以逐步代替含血清的培养基,为后续Hela细胞扩大培养和Bm-CPI基因重组蛋白纯化提供依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
马来丝虫论文参考文献
[1].陆施娟,徐倩,徐邦生,方政.周期型马来丝虫基因稳定转染细胞株的建立[J].现代预防医学.2015
[2].陆施娟,方政,王慧,徐邦生,李群.表达马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的Hela细胞的无血清培养[J].南通大学学报(医学版).2014
[3].钱一言,徐怿琳,陆施娟,王慧,方浩.周期型马来丝虫复合基因真核表达体系的建立[J].现代预防医学.2013
[4].刘志荣,李佐,张富南,李瑞洋.眉山市马来丝虫病防治后期流行趋势[J].预防医学情报杂志.2012
[5].张赛楠,方政,陆施娟,王慧,徐邦生.周期型马来丝虫CPI基因真核表达载体的构建和免疫学研究[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2011
[6].张赛楠,方政,童海燕,方浩,谢东方.周期型马来丝虫GAPDH部分编码基因原核及真核表达载体的构建[J].现代预防医学.2010
[7].张育智,张富南,陈漪澜,张丽萍.四川省马来丝虫病防治后期流行趋势分析[J].寄生虫病与感染性疾病.2010
[8].秦元华,郑莉莉,戴晓冬,任一鑫,陈玉凤.中国马来丝虫库建设与发展[J].大连医科大学学报.2010
[9].陈漪澜,张富南.马来丝虫病不同巩固防治与净化措施的远期效果分析[J].寄生虫病与感染性疾病.2009
[10].谢东方,方政,童海燕,徐邦生,黄为群.马来丝虫肌球蛋白基因序列及编码产物预测[J].中国公共卫生.2009
标签：周期型马来丝虫; 半胱氨酸蛋白酶抑制剂; 转染; 细胞株;