转鲑鱼降钙素基因酵母论文-王鹏,姜勇,田敬云,马健,张学成

转鲑鱼降钙素基因酵母论文-王鹏,姜勇,田敬云,马健,张学成

导读:本文包含了转鲑鱼降钙素基因酵母论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:转鲑鱼降钙素酵母,小鼠,大鼠,急性毒性

转鲑鱼降钙素基因酵母论文文献综述

王鹏,姜勇,田敬云,马健,张学成[1](2012)在《多拷贝表达转鲑鱼降钙素基因酵母的急性、亚急性毒性》一文中研究指出口服转鲑鱼降钙素基因酵母为鲑鱼降钙素的应用开辟了一条新的途径.为评价转鲑鱼降钙素基因酵母的安全性,将转基因酵母分别灌胃昆明种小鼠和Wistar大鼠进行急性毒性实验(7 d)、亚急性毒性实验(8周).急性毒性实验结果表明灌喂转基因酵母对小鼠无致死效应(LD50>10 000 mg/kg);亚急性毒性实验中高(2.0 g/kg)、低(0.5 g/kg)剂量组动物的一般状况、体重、主要脏器系数、血液学指标及血液生化指标与各对照组比较,均未见明显差异(P>0.05),组织病理切片检查未发现病理性变化.实验结果说明转鲑鱼降钙素基因酵母不会对实验动物造成不良影响,是安全无毒的.图3表3参16(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2012年04期)

姜勇,张辉,王鹏,赵喜喜,徐科凤[2](2011)在《转鲑鱼降钙素基因酵母对体外培养破骨细胞的影响》一文中研究指出用机械分离的方法获得新生Wistar大鼠的破骨细胞,在培养液中分别加入经肠激酶酶切的转鲑鱼降钙素基因酵母的上清液和密钙息(Miacalcic,鲑鱼降钙素注射液),以HE染色观察破骨细胞形态,Image-Pro Plus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的面积,骨片培养7天,吸收陷窝结果显示,转鲑鱼降钙素对破骨细胞吸收功能具有明显的抑制作用。(本文来源于《山东农业科学》期刊2011年06期)

陈云松[3](2010)在《转鲑鱼降钙素基因酵母的发酵条件优化及安全性评价》一文中研究指出降钙素是一种由32个氨基酸组成的多肽类激素,其蛋白结构的N端为二硫键,C端为脯氨酰胺基团。它在哺乳动物中起源于甲状腺C细胞,在鱼类中后腮体分泌。现在临床上广泛使用的是合成的人、鲑鱼降钙素,天然来源的猪降钙素和鳗鱼降钙素类似物,主要用于骨质疏松、高钙血症、变形性骨炎及类风湿性关节炎的治疗。由本实验室姜勇构建的转鲑鱼降钙素基因酵母yAGA2-r-sCT经实验证明具体内生物活性,这为开发鲑鱼降钙素的口服途径创造了可能,在生产上具有较大的应用潜力。为了提高发酵产量,我们对转鲑鱼降钙素基因酵母的发酵条件进行了优化,并通过动物毒理学实验对其进行了安全性评价,为实现降钙素的口服应用提供了实验数据。转鲑鱼降钙素基因酵母发酵条件的优化包括对实验用酵母培养基的改良、外界培养条件的优化、工业用培养基组成及其诱导条件的优化:(1)以豆粕水解液作为氮源,采用正交设计方法,得出转基因酵母改良增殖培养基配方为:6%豆粕水解液,3%葡萄糖,0.5%酵母提取物,1%蛋白胨,pH 5。(2)通过单因素实验,对影响酵母生长的外界条件包括温度、发酵时间、接种量、搅拌转速和通气量进行优化,得出优化条件为:温度28℃,搅拌转速为200 rpm,通气量为8 L/min,接种量为8%,培养时间为3天。(3)采用部分因子设计筛选出显着影响转基因酵母生长的因子为豆粕水解液、葡萄糖和NaCl,并利用最速上升实验确定了这叁个因子接近最大响应值所在的区域,最后结合响应面分析法得到了转基因酵母工业用增殖培养基最佳优化组合为:86.5g/L豆粕水解液,56.8g/L葡萄糖,1.10 g/L NaCl,5.0g/L K2HPO4,0.6 g/L (NH4)2SO4,0.2g/L MgSO4。(4)采用流式细胞和ELISA检测,通过对影响酿酒酵母表达鲑鱼降钙素蛋白的多个因素,包括诱导起始浓度、诱导时间、半乳糖浓度和添加方式的研究,结果表明:转鲑鱼降钙素基因酵母采用摇瓶发酵培养时,起始OD为0.8,诱导时间为12 h,半乳糖浓度为2%且一次性添加的方式下,外源蛋白的表达量达到5.92%。以大鼠和小鼠为实验对象对表达鲑鱼降钙素的转基因酵母进行了毒理学实验,包括急性毒性实验、遗传毒性实验(小鼠骨髓微核实验、小鼠精子畸形实验)传统致畸实验、大鼠30天喂养实验和长期毒性实验。经口急性毒性实验显示LD50>10.0g/k,表明转基因酵母属于实际无毒物质;遗传毒性实验结果显示小鼠红细胞微核率和精子畸形率与对照组相比没有显着差异,且无剂量-效应关系,表明转基因酵母不具有遗传毒性,没有致突变作用;传统致畸实验结果显示灌胃转基因酵母的孕鼠生长发育良好,对所产小鼠胚胎外观和胎鼠内脏和骨骼观察无致畸现象,表明转基因酵母没有对孕鼠产生母体毒性,对母鼠的生殖机能没有不良影响,对小鼠胚胎发育无致畸作用;30天喂养实验中大鼠增重、摄食量、血液和血液生化指标、脏器系数均在正常范围内,与对照组均无显着差异(P>0.05),脏器组织切片检查未发现病理性变化;90天长期毒性实验结果显示,长期饲喂转鲑鱼降钙素基因酵母不会对实验动物产生毒副作用,最大无作用剂量在5.0 g/kg·BW以上,相当于人体推荐剂量0.8 g/kg·BW.因此转鲑鱼降钙素基因酵母未对实验动物造成不良影响,是安全无毒的。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2010-06-04)

高岩,王敬东,张学成[4](2009)在《转鲑鱼降钙素基因酵母及RANKL对大鼠血管平滑肌细胞体外钙化的影响》一文中研究指出观察核因子kB受体激活物配体(RANKL)对大鼠血管平滑肌细胞体外钙化的调节作用,以及转鲑鱼降钙素基因酵母对RANKL调节作用的影响。体外培养大鼠血管平滑肌细胞,建立体外血管平滑肌细胞钙化模型,在培养介质中分别加入RANKL及转鲑鱼降钙素基因酵母蛋白上清液,观察细胞钙沉积、细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的变化情况。结果表明,RANKL促进钙化培养的大鼠血管平滑肌细胞的钙沉积、细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达,而转鲑鱼降钙素基因酵母能够抑制RANKL的促钙化作用。RANKL可能通过增加细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达从而促进血管平滑肌细胞向成骨细胞转化;转鲑鱼降钙素基因酵母可能通过OPG/RANKL/RANK途径抑制血管平滑肌细胞钙化。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2009年06期)

陈云松,张学成,姜勇,高岩,黄维清[5](2009)在《口服转鲑鱼降钙素基因酵母的安全性评价》一文中研究指出以小鼠为实验对象对表达鲑鱼降钙素的转基因酵母进行了毒理学实验,包括急性毒性实验、遗传毒性实验(小鼠骨髓微核实验、小鼠精子畸形实验)、传统致畸实验和大鼠30 d喂养实验.结果表明,急性毒性实验显示LD50>10.0 g/kg,属于实际无毒物质;遗传毒性实验结果均为阴性,显示无致突变性;致畸实验结果表明转鲑鱼降钙素基因酵母对小鼠不会产生母体毒性,对小鼠胚胎发育无影响且无致畸作用;30 d喂养实验中各项检测指标均无显着差异(p>0.05),组织病理切片检查未发现病理性变化.本文的结论是口服转鲑鱼降钙素基因酵母未对实验动物造成不良影响,是安全无毒的.(本文来源于《武汉大学学报(理学版)》期刊2009年05期)

高岩[6](2009)在《转鲑鱼降钙素基因酵母对骨质疏松和血管钙化作用的研究》一文中研究指出降钙素(calcitonin,CT)是一种32个氨基酸组成的多肽类激素。临床应用鲑鱼降钙素(salmon calcitonin,sCT)治疗骨质疏松,而现有给药途径仅仅注射和鼻喷两种,且昂贵的价格也限制了它在我国的普及。实现鲑鱼降钙素的口服给药(转鲑鱼降钙素基因酵母yAGA2-sCT)将是最为理想的选择。为研究转鲑鱼降钙素基因酵母(yAGA2-sCT)对骨质疏松大鼠的作用,我们建立了骨质疏松大鼠模型,观察sCT和yAGA2-sCT对骨质疏松大鼠骨密度、骨形态计量学影响;同时检测血钙、血碱性磷酸酶、血清骨钙素、血清胰岛素样生长因子-1以及尿钙、羟脯氨酸等经典的骨代谢生化标志物水平以观察sCT和yAGA2-sCT对骨代谢的影响。实验分假手术组、模型对照组、sCT组及yAGA2-sCT组。通过大鼠股骨X光照片、光镜观察及骨密度值检测说明骨质疏松大鼠造模成功。sCT组及yAGA2-sCT组的腰椎和股骨骨密度及骨代谢生化标志物水平明显得到改善,提示sCT及yAGA2-sCT通过抑制骨吸收从而抑制了骨质疏松。sCT组及yAGA2-sCT组两组比较差异无显着性,提示口服yAGA2-sCT与sCT注射液对骨质疏松大鼠有相似的作用,均具有干预骨重建、抑制骨质疏松的作用。为进一步探讨转鲑鱼降钙素基因酵母(yAGA2-sCT)对骨质疏松的作用机制,我们观察了yAGA2-sCT对体外成骨细胞的作用。应用酶消化-连续组织块法体外培养大鼠成骨细胞,观察sCT和yAGA2-sCT对体外培养成骨细胞增殖、分化、矿化功能的影响。经病理学检查及染色证实体外培养成骨细胞成功;sCT及yAGA2-sCT对体外培养大鼠成骨细胞的增殖、分化和矿化功能具有刺激作用。众所周知老年患者发生骨质疏松的同时常常伴发血管钙化。近来认为叁个新发现的肿瘤坏死因子家族成员骨保护素(Osteoprotegrin,OPG),核因子kB受体激活物配体( Receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)和核因子kB受体激活物(Receptor activator of nuclear factor kappaB,RANK),亦称OPG/RANKL/RANK系统,参与骨质疏松和血管钙化的调节过程,是这两种伴发疾病之间的分子联系。为研究OPG/RANKL/RANK系统在血管钙化中的调节作用以及降钙素对OPG/RANKL/RANK途径的干预作用,本实验建立了大鼠动脉钙化模型,病理学观察血管钙化情况,测定血管组织中钙含量及碱性磷酸酶活性,免疫组化法检测OPG和RANKL在血管组织中的表达。实验分对照组、模型组、sCT组及yAGA2-sCT组。病理学观察成功建立维生素D3诱发的血管钙化模型;与对照组比较,钙化血管组织中钙含量及碱性磷酸酶活性增高;模型组血管壁OPG表达明显减少而RANKL表达明显增加。与模型组比较,sCT组和yAGA2-sCT组血管钙化程度明显减轻,血管壁OPG表达明显增加而RANKL表达明显减少。提示OPG/RANKL/RANK系统参与血管钙化的调节,sCT和yAGA2-sCT可通过OPG/RANKL/RANK途径有效抑制血管钙化。为进一步观察RANKL对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)体外钙化的调节作用及降钙素对其调节作用的影响,我们体外培养大鼠VSMC,建立体外VSMC钙化模型,在培养介质中分别加入RANKL及降钙素,观察细胞钙沉积及细胞碱性磷酸酶活性、骨钙素的变化情况。VSMC经von Kossa染色证实动脉钙化模型成功建立。实验分对照组、钙化模型组、RANKL组、sCT组及yAGA2-sCT组。钙化模型组、RANKL组、sCT组及sCT组钙沉积、碱性磷酸酶活性、骨钙素水平明显高于对照组;与钙化模型组比较,RANKL组钙沉积、碱性磷酸酶活性、骨钙素水平均明显增高;与RANKL组比较, sCT组和yAGA2-sCT组钙沉积、碱性磷酸酶活性、骨钙素水平明显降低。提示RANKL促进钙化培养的VSMC钙沉积、碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达,而sCT和yAGA2-sCT能够抑制RANKL的以上效应。此结果进一步提示RANKL可促进钙化培养的VSMC的钙质沉积,其作用可能与增加细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达、促进VSMC向成骨细胞转化有关,而sCT和yAGA2-sCT可通过对RANKL的抑制作用、通过OPG/RANKL/RANK途径抑制VSMC钙化。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2009-06-01)

姜勇,张学成,孙平楠,陈云松[7](2009)在《以rDNA为同源重组位点酵母表达鲑鱼降钙素基因多拷贝整合载体的构建》一文中研究指出根据酵母整合质粒的设计要求,PCR扩增2.2 kb rDNA片段,导入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)整合载体pYD1中,设计并合成适合在酵母中表达的鲑鱼降钙素(Salmon Calcitonin),以此为目标基因,构建适合酿酒酵母多拷贝整合的表达载体p-r-sCT。通过载体p-r-sCT引入到酿酒酵母菌株EBY100中,得到酵母重组菌株yAGA2-r-sCT。流式细胞检测结果表明,目标基因鲑鱼降钙素在重组菌株的yAGA2-r-sCT中得到了表达,实现了外源基因在酿酒酵母菌株中的稳定表达。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2009年03期)

陈云松,张学成,孙平楠[8](2007)在《转鲑鱼降钙素基因酵母的亚急性毒性实验》一文中研究指出评价转鲑鱼降钙素基因酵母的安全性。取转基因酵母分别以高(5 g/kg)、中(0.5 g/kg)、低(0.1 g/kg)3种剂量组对大鼠连续灌胃给药,30 d后观察其行为,测试大鼠体重、血常规、生化指标及病理组织学观察。结果:转基因酵母各剂量组动物的一般状况、体重、主要脏器系数、血液学指标及血液生化指标,与正常对照组比较,均未见明显差异;病理检查未见与药物毒性相关的主要脏器组织形态学改变。转鲑鱼降钙素基因酵母对实验大鼠安全无毒,且在试验期内本试验所用剂量对于试验大鼠来说是安全的。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2007年S2期)

孙平楠[9](2007)在《酵母表达鲑鱼降钙素基因载体的构建及相关研究》一文中研究指出十九世纪六十年代,降钙素作为一种降血钙的物质被copp发现。它在哺乳动物中起源于甲状腺C细胞,在鱼类中后腮体分泌。降钙素是一种32个氨基酸组成的多肽内激素,其蛋白结构的N端为二硫键,C端为脯胺酰胺基团。降钙素在体内的钙、磷代谢中发挥着重要的作用。它能够直接作用于破骨细胞,降低破骨细胞的活性,从而抑制骨的吸收。降钙素的这种抗骨吸收活性使降钙素能够被广泛的使用于治疗Paget综合症,骨质疏松,以及高钙血症。在所有的降钙素当中,鲑鱼降钙素的活性最高,大约是人体的30-40倍。临床上已经多年使用鲑鱼降钙素进行治疗。然而,一方面,鲑鱼降钙素的现有给药途径仅仅注射和鼻喷两种,病人的依从性差。另一方面,鲑鱼降钙素的价格昂贵也限制了它在我国的普及。如何实现鲑鱼降钙素的口服途径,降低鲑鱼降钙素的造价成为了当前研究的重点。为了达到上述目标,本文通过生物工程的方法构建了含肠激酶位点的转鲑鱼降钙素基因的酵母yAGA2-sCT,并通过细胞实验和动物实验进行了活性检测。首先,通过化学与酶法相结合,人工合成了由酿酒酵母偏爱密码子组成的鲑鱼降钙素基因。合成的产物通过电泳进行了验证。合成的鲑鱼降钙素基因被克隆到puc18载体上进行保存。蛋白结构分析显示该基因和天然鲑鱼降钙素的蛋白结构相同。然后,该基因被克隆到了穿梭载体p-sf上得到了质粒p-sct-sf。质粒p-sf由INVITROGEN公司的质粒pyd1改造而来。酵母URA3基因分别被加到了质粒pyd1表达框的两侧当作重组位点,以增加酵母转化子的稳定性。经过改造以后的质粒和原质粒一样表达配体蛋白AGA2亚基。AGA2亚基与酵母表面的AGA1亚基通过二硫键连接于酵母表面的葡聚糖上,从而实现了外源蛋白在酵母表面的表达。质粒p-sct-sf通过LiAc转化的方法转化酵母菌株EBY100,得到了转基因酵母yAGA2-sCT。同时质粒p-sf转化酵母EBY100,得到了转化子yAGA2-V5。在后继实验当中,yAGA2-V5作为对照验证重组鲑鱼降钙素的活性。利用间接荧光标记的方法,在荧光显微镜下观察到了转化子yAGA2-V5和yAGA2-sCT外源蛋白的表达。进一步的流式细胞仪分析显示,表达开始12小时之后,yAGA2-sCT中有65%的细胞表达外源蛋白,yAGA2-V5转化子中有52%的细胞表达外源蛋白。在肠激酶的作用下,转基因酵母中的外源蛋白释放到酶切液的上清当中。该上清简称为EKS。外源表达的蛋白通过细胞实验对其体外的活性进行了检测。实验中采用的是破骨细胞。破骨细胞作为一种终分化细胞,能够在骨组织上进行骨的吸收,形成骨陷窝。实验首先通过骨片切割机制作了小牛皮质骨骨片。骨片与破骨细胞进行培养的过程中加入了yAGA2-V5 EKS和yAGA2-sCT EKS。密钙息(医用鲑鱼降钙素注射液)作为培养实验的阳性对照。骨片培养一周之后,骨片在数码显微镜下拍照并计算出骨陷窝面积。结果发现yAGA2-sCT EKS能够显着减少骨陷窝的生成。即重组鲑鱼降钙素能够在体外抑制破骨细胞的活性。根据英国药典的方法进行了动物降血钙实验。动物采用了正常的Wistar雌性大鼠。实验分为阴性对照组,阳性对照组和试剂组。阴性对照组灌胃5g/kg yAGA2-V5,阳性对照组则注射200mIU/kg密钙息(医用鲑鱼降钙素注射液)。试剂组当中,灌胃了低、中、高叁个剂量(0.1 g/kg, 0.5 g/kg, 5 g/kg)冷冻干燥的yAGA2-sCT。实验动物在不同的时间段(1,2,4,6,8,10小时)从眼球丛静脉毛细血管吸取全血制备血清,血清送往青岛市解放军401医院测定血钙值。实验结果表明,灌胃5 g/kg冷冻干燥的酵母yAGA2-sCT显着降低了大鼠血钙值(p<0.01)。其最大药效时间Tmax为2小时,Wistar大鼠血钙值降低到2.355±0.012mM。实验发现灌胃yAGA2-sCT能持续降低血钙值,且呈现出剂量效应。转基因酵母yAGA2-sCT的持续降血钙能力对治疗高钙血症具有特殊意义。高钙血症是最常见的伴癌内分泌综合征,晚期癌肿病人约10%有高钙血症。当此症状转化为高钙血危象时,将严重威胁患者的生命。目前治疗高钙血症的首选药物是pamidronate等双磷酸盐药物。这些双磷酸盐药物毒副作用较大,长期使用可能导致体内解毒器官病变。鲑鱼降钙素安全性强且见能迅速降低血钙值,但注射鲑鱼降钙素2小时之后药效逐渐消失,故临床上鲑鱼降钙素在治疗高钙血症时作为辅助药物。为了研究转基因酵母yAGA2-sCT对高钙血症的作用,实验首先制作了高钙血症大鼠模型。根据文献方法,连续一周灌胃正常的Wistar雌性大鼠活性维他命D3(1, 25-dihydroxy-cholecalciferol)。大鼠血钙值由2.638±0.017 mM上升到2.838±0.022 mM,显着高于普通大鼠,标志着造模的成功。高钙血大鼠实验分为阴性对照组,阳性对照组和试剂组。阴性对照组灌胃5 g/kg yAGA2-V5,阳性对照组则注射1.25 mg/kg双磷酸盐药物pamidronate。试剂组当中,灌胃了低、中、高叁个剂量(0.1g/kg,0.5g/kg,5g/kg)冷冻干燥的yAGA2-sCT。处理12小时之后从眼球丛静脉毛细血管吸取全血制备血清,血清送往青岛市解放军401医院测定血钙值。实验发现,灌胃5 g/kg冷冻干燥的酵母yAGA2-sCT显着降低了模型大鼠的血钙值,血钙值从2.81±0.018 mM降低到了2.69±0.025 mM,差异显着,P < 0.01。灌胃0.5g/kg yAGA2-sCT时,血钙值降低到2.75±0.016 mM,P < 0.05。实验表明转基因酵母对高钙血症具有抑制作用。实验探讨了转基因酵母的yAGA2-sCT的生物安全性问题。在急性毒性实验中,未能检测出半致死剂量LD50。在亚急性毒性实验当中,检测了大鼠的体重变化,血液生理指标,生化指标,脏器系。各项指标均无显着变化,初步证明转基因酵母用药安全。论文探讨了鲑鱼降钙素的口服给药可能的新途径,拓宽了鲑鱼降钙素在高钙血症治疗上的应用。为鲑鱼降钙素在我国医疗事业上更广泛的使用提供了实验依据。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2007-06-09)

钟辉,彭英芳,李平,袁志刚,杨晓莉[10](2002)在《鲑鱼降钙素与骨生长肽融合基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达》一文中研究指出降钙素 (Calcitonin ,CT)和骨生长肽 (Osteogenicgrowthpeptide ,OGP)是两种治疗骨质疏松症的药物 ,设想通过这两种基因的融合表达来达到治疗骨质疏松的目的。体外合成OGP和sCT的基因 ,经过DNA体外重组构建酵母表达质粒 ,实现了在毕赤酵母中的表达 ,通过纯化后进行氨基酸N端测序 ,证明表达的蛋白序列正确。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2002年05期)

转鲑鱼降钙素基因酵母论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

用机械分离的方法获得新生Wistar大鼠的破骨细胞,在培养液中分别加入经肠激酶酶切的转鲑鱼降钙素基因酵母的上清液和密钙息(Miacalcic,鲑鱼降钙素注射液),以HE染色观察破骨细胞形态,Image-Pro Plus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的面积,骨片培养7天,吸收陷窝结果显示,转鲑鱼降钙素对破骨细胞吸收功能具有明显的抑制作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

转鲑鱼降钙素基因酵母论文参考文献

[1].王鹏,姜勇,田敬云,马健,张学成.多拷贝表达转鲑鱼降钙素基因酵母的急性、亚急性毒性[J].应用与环境生物学报.2012

[2].姜勇,张辉,王鹏,赵喜喜,徐科凤.转鲑鱼降钙素基因酵母对体外培养破骨细胞的影响[J].山东农业科学.2011

[3].陈云松.转鲑鱼降钙素基因酵母的发酵条件优化及安全性评价[D].中国海洋大学.2010

[4].高岩,王敬东,张学成.转鲑鱼降钙素基因酵母及RANKL对大鼠血管平滑肌细胞体外钙化的影响[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2009

[5].陈云松,张学成,姜勇,高岩,黄维清.口服转鲑鱼降钙素基因酵母的安全性评价[J].武汉大学学报(理学版).2009

[6].高岩.转鲑鱼降钙素基因酵母对骨质疏松和血管钙化作用的研究[D].中国海洋大学.2009

[7].姜勇,张学成,孙平楠,陈云松.以rDNA为同源重组位点酵母表达鲑鱼降钙素基因多拷贝整合载体的构建[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2009

[8].陈云松,张学成,孙平楠.转鲑鱼降钙素基因酵母的亚急性毒性实验[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2007

[9].孙平楠.酵母表达鲑鱼降钙素基因载体的构建及相关研究[D].中国海洋大学.2007

[10].钟辉,彭英芳,李平,袁志刚,杨晓莉.鲑鱼降钙素与骨生长肽融合基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J].中国生物工程杂志.2002

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