导读:本文包含了月见草脂肪酸脱氢酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:油菜,月见草,Δ6-脂肪酸脱氢酶基因,γ-亚麻酸
月见草脂肪酸脱氢酶论文文献综述
杨佳,怡荣,张立全,牛一丁,王秀珍[1]（2011）在《月见草Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因转化油菜的研究》一文中研究指出以油菜子叶节为外植体优化了农杆菌介导的甘蓝型油菜的遗传转化体系,为在油料作物中用基因工程手段生产γ-亚麻酸打下基础。采用CaCl2法制备农杆菌AGL1感受态细胞,将已经构建好的植物表达载体pPZP221(35S-D6D-NOS)通过液氮冻融法转化农杆菌,PCR筛选阳性转化子。结果表明:优化的甘蓝型油菜子叶节外植体预培养条件是:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基预培养2 d;用于侵染的农杆菌菌液的最适浓度为OD600=0.4,时间为5 min,并得到转基因植株。经侵染的外植体在含有庆大霉素的分化选择培养基上培养,抗性芽移至生根培养基,PCR检测阳性小植株移栽花盆,共得到12株转基因植株,首次将来自月见草的D6D基因通过农杆菌介导法整合到油菜基因组中。(本文来源于《华北农学报》期刊2011年06期）
杨佳[2]（2011）在《月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化油菜的研究》一文中研究指出多数高等植物和动物中由于缺乏脱氢酶等相关酶系而不能合成C18以及超过C18的多不饱和脂肪酸,必须从特殊植物或微生物中获得。利用生物技术将外源编码相关脱氢酶的基因在油料作物中表达,在控制种子中脂质组成方面具有很好的发展前景。本研究以子叶节为外植体优化了农杆菌介导的甘蓝型油菜品种秦油3号的遗传转化体系,分别探讨预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、抗生素浓度及硝酸银添加与否对转化率的影响。在此基础上,首次将来自月见草的A6-脂肪酸脱氢酶基因(Δ6-fatty acid desaturase gene, D6D)通过农杆菌介导法导入油菜中,经PCR检测获得了转基因植株。主要结果如下：1)子叶节的最佳预培养条件:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L,培养2d。2)侵染菌液的适宜浓度为OD600=0.4,侵染时间为5 mmin,共培养时间为2d。3)侵染后的外植体在含有庆大霉素的分化选择培养基上培养,初期筛选浓度为5 mg/L,一周后增加到10 mg/L。分化期间选择头孢米诺钠作为抑菌剂,浓度为200 mg/L,同时加入硝酸银以促进植物分化。4)抗性芽移至含IBA的生根培养基中,获得了再生植株,经PCR检测共得到12株阳性转基因植株,转化率为35.3%,阳性小植株移栽花盆。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2011-06-01）
王秀珍[3]（2010）在《农杆菌介导的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻的研究》一文中研究指出本研究采用农杆菌介导的方法,将本实验室克隆得到的月见草Δ6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻,为在转基因亚麻中增加γ-亚麻酸含量奠定了基础。主要结果如下：1)首先较系统地研究并确立了亚麻组织培养再生体系。本研究通过不同外植体的选择及不同激素浓度组合等影响植株再生的因素进行了优化。结果表明亚麻植株再生最适宜的外植体为下胚轴及子叶节；亚麻不定芽诱导率最高的激素配比为0.2mg／L IAA+0.5 mg／L 6-BA；亚麻不定芽最适生根培养基的激素配比为0.03mg／L IBA+0.07mg／L NAA。2)对农杆菌遗传转化亚麻体系进行了优化。在已建立的亚麻组织培养再生体系的基础上,研究并优化了根癌农杆菌介导的亚麻遗传转化体系。对影响根癌农杆菌转化的因子：预培养时间、共培养时间、农杆菌侵染浓度、农杆菌侵染时间等进行了优化,确定了下胚轴及子叶节的最佳预培养时间分别为2d和Od,最佳共培养时间为2d和5d,最佳农杆菌侵染浓度为OD600=0.5-0.6和0.8-1.5,最适侵染时间为5 min和30 min。3)获得的再生转化植株经PCR检测,结果证明目的基因已转化到亚麻基因组中。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2010-06-05）
黄胜和[4]（2009）在《月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆与异源表达》一文中研究指出γ-亚麻酸作为人体必需脂肪酸之一,是组成各组织生物膜的结构材料,也是合成人体一系列前列腺素的前体,具有多种生物学功能。目前,γ-亚麻酸的主要商业来源是月见草等植物的种子油,但远远满足不了市场需求,需要寻求替代的生物资源。而△6-脂肪酸脱氢酶(D6D)是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶,催化亚油酸、α-亚麻酸分别脱氢形成γ-亚麻酸和十八碳四烯酸。因此,人们试图克隆并转化△6-脂肪酸脱氢酶基因,利用微生物或油料作物作为生产γ-亚麻酸的“生化反应器”。月见草种子油富含γ-亚麻酸,但月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及转化一直未见报道。本研究根据已报道的植物△6-脂肪酸脱氢酶基因保守的组氨酸Ⅱ区和Ⅲ区设计简并引物,进行RT-PCR,得到565bp的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因cDNA部分序列,再利用RACE技术首次从月见草中克隆了1941bp的D6D cDNA全长序列。序列分析表明有一个1344bp、编码447个氨基酸的ORF框。推测的蛋白分子量为51.1 kDa, pI=8.0,具备△6-脂肪酸脱氢酶基因的特征性结构：3个组氨酸保守区、2个疏水区和N末端类cyt-b5的结合区。GenBank上BLAST分析,该蛋白氨基酸序列与植物鞘脂△8-脱氢酶、△6-脂肪酸脱氢酶的相似性在70%左右。该cDNA编码区序列亚克隆到pYES2,构建成表达载体pYES2-D6D, LiAc法转化酿酒酵母W303a,验证了ObD6D具有△6-脂肪酸脱氢酶功能,将其提交GenBank,获得登录号：EU416278。以月见草总DNA为模板,PCR扩增△6-脂肪酸脱氢酶基因的基因组DNA,测序结果显示,ObD6D基因没有内含子,ORF框的3'末端有9个串联终止密码子UGA。CLUSTAL W分析结果显示,在系统进化关系上,ObD6D很可能是植物D6D与D8D之间的中间过渡形式。另外,RT-PCR结果表明,ObD6D在叶片和成熟种子中表达量较低,在未成熟种子中较高。通过PCR扩增获得油菜品种太空3-19的种子特异性启动子NAPIN,序列分析表明,该启动子与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为98.5%以上,提交到GenBank,获得登录号EU416279。构建了植物表达载体pPZP221-SDN和pPZP221-NDN,花粉管通道法导入油菜,各收获了大约2000粒T0代种子,经初步筛选,得到了抗性和PCR检测都是阳性的5株转pPZP221-SDN和6株转pPZP221-NDN To代植株。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2009-12-11）
刘睿杰[5]（2007）在《应用RACE技术克隆月见草△～6-脂肪酸脱氢酶基因cDNA》一文中研究指出多不饱和脂肪酸由于在人类健康中的重要作用而成为有价值的产品，目前市场上对γ-亚麻酸等多不饱和脂肪酸的需求持续增长，然而当前来源难以满足市场需求，寻找合适的替代来源将有助于解决这一问题。Δ~6-脂肪酸脱氢酶是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶。本实验根据其它植物中已知Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因保守区序列设计简并引物，以种子中富含高活性γ-亚麻酸的野生柳叶菜科植物月见草(Oenothera biennis)未成熟种子总RNA为模板，通过RT-PCR扩增获得大小为565bp的cDNA片段。再根据获得的序列设计基因特异性引物，通过3′RACE和5′RACE技术获得753bp和313bp的cDNA片段，将叁段序列拼接得到1445bp的具有完整3′非编码区的cDNA序列，该序列所编码的氨基酸序列在GeneBank数据库中的BLAST进行相似性搜索，检索结果表明与ω-6途径的Δ~6-脂肪酸脱氢酶具有最大同源性。成功获得Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因1445bp cDNA片段为进一步克隆全长cDNA和下一步将Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在油料作物种子中特异表达，利用转基因油料作物作为多不饱和脂肪酸的生物反应器奠定基础。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2007-06-04）
月见草脂肪酸脱氢酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
多数高等植物和动物中由于缺乏脱氢酶等相关酶系而不能合成C18以及超过C18的多不饱和脂肪酸,必须从特殊植物或微生物中获得。利用生物技术将外源编码相关脱氢酶的基因在油料作物中表达,在控制种子中脂质组成方面具有很好的发展前景。本研究以子叶节为外植体优化了农杆菌介导的甘蓝型油菜品种秦油3号的遗传转化体系,分别探讨预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、抗生素浓度及硝酸银添加与否对转化率的影响。在此基础上,首次将来自月见草的A6-脂肪酸脱氢酶基因(Δ6-fatty acid desaturase gene, D6D)通过农杆菌介导法导入油菜中,经PCR检测获得了转基因植株。主要结果如下：1)子叶节的最佳预培养条件:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L,培养2d。2)侵染菌液的适宜浓度为OD600=0.4,侵染时间为5 mmin,共培养时间为2d。3)侵染后的外植体在含有庆大霉素的分化选择培养基上培养,初期筛选浓度为5 mg/L,一周后增加到10 mg/L。分化期间选择头孢米诺钠作为抑菌剂,浓度为200 mg/L,同时加入硝酸银以促进植物分化。4)抗性芽移至含IBA的生根培养基中,获得了再生植株,经PCR检测共得到12株阳性转基因植株,转化率为35.3%,阳性小植株移栽花盆。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
月见草脂肪酸脱氢酶论文参考文献
[1].杨佳,怡荣,张立全,牛一丁,王秀珍.月见草Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因转化油菜的研究[J].华北农学报.2011
[2].杨佳.月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化油菜的研究[D].内蒙古大学.2011
[3].王秀珍.农杆菌介导的月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化亚麻的研究[D].内蒙古大学.2010
[4].黄胜和.月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆与异源表达[D].内蒙古大学.2009
[5].刘睿杰.应用RACE技术克隆月见草△～6-脂肪酸脱氢酶基因cDNA[D].内蒙古大学.2007
标签：油菜; 月见草; Δ6-脂肪酸脱氢酶基因; γ-亚麻酸;