导读:本文包含了冷冻损伤机理论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:西施舌,超低温冷冻保存,流式细胞术,质膜完整性
冷冻损伤机理论文文献综述
吴丽云[1]（2011）在《西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究》一文中研究指出本文采用流式细胞术和显微术的方法,研究流式细胞术用于评价西施舌(Coelomactra antiquata)精子质量的可行性、西施舌精子的超低温冷冻保存技术以及冷冻损伤机制,旨在建立一套成熟的西施舌精子超低温冷冻保存技术,为西施舌的人工育苗和遗传育种等研究提供科学依据和技术支持。主要研究结果如下：采用伊红拒染法和PI拒染法,借助光学显微镜和流式细胞仪进行两种方法的相关性研究和精密性比较,从而探讨流式细胞术用于评价西施舌冻融精子成活率的可行性。结果表明伊红拒染法和PI拒染法呈显着正相关(r=0.954,P=0.003),两种方法均能有效检测西施舌精子的成活率,且相关性很好,但是PI-流式细胞术的精密性(CV为2.39%)要优于伊红拒染法实验(CV为4.67%),故流式细胞术适用于西施舌精子成活率的检测。采用流式细胞术,以质膜完整率即成活率为精子质量评价指标,研究抗冻剂,预冻速率和冷冻速率对西施舌精子超低温冷冻保存的影响。以一定的降温程序进行西施舌精子的超低温保存,研究二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)和丙二醇(PG)叁种抗冻剂分别在1%、2.5%、4%、5%、10%、15%和20%时对西施舌精子质膜完整性及成活率的影响,结果仅4%、10% DMSO,2.5%、5%、15% EG和20%PG被选出用于预冻速率和冷冻速率的筛选。预冻速率分析以下5个速率：①1℃/min;②4℃/min;③6℃/min;④8℃/min⑤20±1℃10min,采用4℃/min的预冻速率可获得最佳的超低温冷冻效果,被用于冷冻速率的筛选。冷冻速率设置5个梯度：①0.25℃/min；②0.5℃/min;③1℃/min;④4℃/min⑤直接投入液氮。35℃水浴解冻,流式细胞仪分析精子质膜完整性及成活率,以及进行人工受精验证,得出以15%EG为抗冻剂,4℃/min为预冻速率,4℃/min为冷冻速率,可获得最佳的成活率和受精率,分别为95.53%和52.32%。采用流式细胞术研究DMSO、EG和PG叁种抗冻剂对西施舌冻融精子质膜完整性、细胞凋亡状况以及线粒体功能状态的影响,进而评价不同抗冻剂对西施舌冻融精子质量的影响,从而研究超低温冷冻保存对西施舌精子的冷冻损伤机理。结果表明,DMSO、EG、和PG叁种抗冻剂对维持冻融精子的质膜完整性起到较好的作用,在一定程度上促进了冻融精子的凋亡进程,且不同抗冻剂及不同浓度的抗冻液对西施舌精子质膜完整性和细胞凋亡的影响不同,15% EG作为抗冻液,得到冻融精子的质膜完整率最高,早期凋亡率最低,分别为80.54%和7.99%；而且超低温冷冻保存过程降低了西施舌精子的线粒体活性,DMSO、EG和PG叁种抗冻剂对维持西施舌冻精的线粒体活性起到了较好的保护作用,15%EG处理组的坏死精子比例最低,有线粒体功能的活性精子比例最高,分别为15.04%和81.32%。采用扫描电子显微镜和透射电子显微镜分析比较超低温保存前后西施舌精子的外部形态和超微结构变化；并结合流式细胞术结果进行超低温冷冻损伤机理的研究。结果表明,扫描电镜下,西施舌冻融精子的顶体、线粒体损伤比较明显,精子头部表面呈不规则凹陷、鞭毛断裂甚至脱落等；透射电镜下西施舌冻融精子的质膜膨胀、破裂,顶体膜脱落、破裂。线粒体膜系统也受到破坏,线粒体解体、呈空泡状等。这些损伤表现与流式细胞术研究超低温冷冻保存对西施舌精子质膜完整性、细胞凋亡状态和线粒体功能的影响结果是相同的。由此可知,超低温冷冻保存过程造成了西施舌精子质膜、顶体、线粒体等处的不同程度的损伤。(本文来源于《福建师范大学》期刊2011-04-06）
宋德荣,王棋文,刘光瑞,张尤嘉[2]（2010）在《猪精液冷冻损伤机理研究进展》一文中研究指出阐明降温-升温过程精子损伤的原因是目前冷冻生物学的研究热点之一。借助分子生物学手段,猪精子冷冻损伤研究已深入到分子水平,对在冷冻过程中的损伤机理研究方面取得很大突破。在参考国内外文献的基础上,综述了猪精液冷冻损伤机理在近几年来的研究进展。(本文来源于《生物技术通报》期刊2010年07期）
刘本伟[3]（2007）在《牙鲆（Paralichthys olivaceus）胚胎玻璃化冷冻保存方法及冷冻损伤机理研究》一文中研究指出本文以牙鲆不同发育期胚胎为实验材料,从抗冻剂的毒性、玻璃化液的筛选、常用抗冻剂的物理特性、牙鲆胚胎的冷敏感性及冷冻损伤机理等几个方面进行研究,对牙鲆胚胎玻璃化冷冻保存的条件进行优化,对玻璃化冷冻过程中冷冻及解冻方式进行了探讨。首先研究了7种渗透性抗冻剂1,2-丙二醇(PG)、甲醇(MeOH)、甘油(Gly)、乙二醇(EG)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、酒精(EtOH)及5种非渗透性抗冻剂聚乙烯吡咯酮(PVP)、蔗糖(Sucrose)、葡萄糖(Glucose)、葡聚糖(Dextran)、果糖(D-fructose)对牙鲆胚胎的毒性作用。结果表明,渗透性抗冻剂对牙鲆尾芽期胚胎的毒性大小依次为:EG > EtOH > Gly > DMF > DMSO > MeOH > PG;非渗透性抗冻剂中PVP对牙鲆尾芽期胚胎毒性最强,葡聚糖和葡萄糖毒性最弱;不同浓度单一抗冻剂平衡牙鲆尾芽期胚胎30min时,MeOH浓度大于27%、PG浓度大于33%时胚胎成活率迅速下降;对抗冻剂混合比例进行研究,发现PM(PG:MeOH =3:2)与DMSO比例为3:1时混合抗冻剂对尾芽期胚胎毒性显着小于其他混合比例。通过对PG、MeOH、DMSO和所筛选的混合抗冻剂PMD(PG:MeOH:DMSO= 9:6:5)的渗透性、冰点和最低玻璃化浓度进行研究,发现体积比浓度相同时,MeOH对牙鲆尾芽期胚胎的渗透最快,冰点最低,PG最低玻璃化浓度为29%,在实验的几种抗冻剂中最低。对牙鲆不同时期胚胎在不同温度下冷冻后的成活率、孵化率、畸形率进行了研究,发现-20℃下冷冻胚胎的成活率随冷冻时间延长而降低,随胚胎发育期推后逐渐升高,-1℃冷冻后的胚胎的孵化率也有相似的变化趋势,畸形率随冷冻时间延长而升高。对玻璃化颗粒冷冻法和麦管冷冻法进行了比较,发现颗粒法降温和解冻时间均比麦管法短,玻璃化率和胚胎完整率比麦管法高,颗粒法冷冻后胚胎的损伤程度比麦管法小。通过对不同处理后胚胎形态的观察,发现五步法平衡后的胚胎卵黄囊存在轻微的损伤,平衡后死亡胚胎卵黄高度聚集。冷冻对胚胎卵膜、卵黄囊、胚体及油球都会造成损伤,对胚体和卵黄囊造成损伤的可能性最大。对超低温冷冻过程中冷冻麦管的解冻方法进行了研究,发现在50℃水浴上方蒸汽中解冻时麦管的玻璃化率显着高于直接在37℃水浴中解冻时的玻璃化率。利用筛选到的混合抗冻剂35%PMD,加入5%的蔗糖配成玻璃化液,采用玻璃化颗粒冷冻保存方法,对牙鲆尾芽期和心跳期胚胎进行超低温冷冻保存,冻存时间超过12h,在叁次冷冻中,解冻后从173粒冷冻胚胎中共获得4粒复活胚胎,其中尾芽期2粒,心跳期2粒。4粒胚胎均孵化出正常仔鱼,在投喂轮虫和小球藻的情况下最长存活15天,最短存活11天。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2007-06-06）
胡银平,童明伟,严嘉,徐广才[4]（2005）在《生物组织冷冻损伤的机理分析》一文中研究指出冷冻外科疗法是根据低温对生物组织细胞有破坏作用的原理,利用低温或超低温清除人体某些病灶的一种医疗手段。本文描述了组织细胞的冷冻过程并探讨了冷冻破坏组织细胞的主要机制,以使在临床应用上达到更好的治疗效果。(本文来源于《中国制冷学会2005年制冷空调学术年会论文集》期刊2005-11-01）
寇正涌[5]（2000）在《细胞冷冻损伤机理的几个假说》一文中研究指出本文对细胞冷冻损伤机理的几个假说作了简要介绍 .(本文来源于《松辽学刊(自然科学版)》期刊2000年04期）
赵中辛,杜竞辉[6]（1986）在《器官冷冻损伤的机理及其预防(文献综述)》一文中研究指出器官冷冻保存的关键在于将完好的脏器冷冻到一个适当的保存温度(Pegg认为是-80℃)。然后再将其无损伤地复温。在这种一定的条件下(-80℃),有机体的腐败和变质是非常缓慢的,在-196℃时则被认为几乎是没有变化的。所以,如果在降温和复温的时候,能完全地避免损伤,从理论上讲保存器官的时间应该是无限的。迄今,人类在单细胞和胚胎冷冻保存的研究方面已取得了巨大的成功。为了解决移植时器官供需之间的矛盾,寻求长期保存脏器的有效方法,最终建立器官库(Organ Bank),早在60年代,国外就有学者对器官的冷冻保存进行实验研究。但近十(本文来源于《国外医学.外科学分册》期刊1986年05期）
冷冻损伤机理论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
阐明降温-升温过程精子损伤的原因是目前冷冻生物学的研究热点之一。借助分子生物学手段,猪精子冷冻损伤研究已深入到分子水平,对在冷冻过程中的损伤机理研究方面取得很大突破。在参考国内外文献的基础上,综述了猪精液冷冻损伤机理在近几年来的研究进展。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
冷冻损伤机理论文参考文献
[1].吴丽云.西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究[D].福建师范大学.2011
[2].宋德荣,王棋文,刘光瑞,张尤嘉.猪精液冷冻损伤机理研究进展[J].生物技术通报.2010
[3].刘本伟.牙鲆（Paralichthysolivaceus）胚胎玻璃化冷冻保存方法及冷冻损伤机理研究[D].中国海洋大学.2007
[4].胡银平,童明伟,严嘉,徐广才.生物组织冷冻损伤的机理分析[C].中国制冷学会2005年制冷空调学术年会论文集.2005
[5].寇正涌.细胞冷冻损伤机理的几个假说[J].松辽学刊(自然科学版).2000
[6].赵中辛,杜竞辉.器官冷冻损伤的机理及其预防(文献综述)[J].国外医学.外科学分册.1986