导读:本文包含了生长相关肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:骨关节炎,软骨下骨,降钙素基因相关肽,神经生长因子
生长相关肽论文文献综述
常琦,阮贞,王宪伟,王茂朋[1]（2019）在《骨关节炎模型大鼠血清骨保护素及软骨下骨降钙素基因相关肽、神经生长因子表达及Mankin评分变化》一文中研究指出目的探讨大鼠膝关节骨关节炎(OA)软骨下骨神经因子表达及血清骨保护素(OPG)水平动态的变化。方法 40只SD大鼠随机分为实验组及对照组,实验组采用切断大鼠右后膝前交叉韧带方法建立OA模型,对照组仅切开关节囊,实验组根据造模至处死时间再次分为2 w组,4 w组,8 w组,分别于术后2 w,4 w,8 w处死,对照组于术后8 w处死。采用心脏采血方法收取大鼠血清标本,处死动物后取膝关节标本,肉眼观察膝关节改变,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清OPG浓度值,膝关节标本脱钙后分别行HE染色、软骨下骨降钙素基因相关肽(CGRP)、神经生长因子(NGF)免疫组化染色,比较关节软骨Mankin评分及CGRP、NGF灰度值。结果大鼠造模后均存活,无死亡及伤口感染,对照组膝关节面光滑,有光泽,实验组膝关节软骨面破坏逐渐加重,2 w组膝关节面完整性开始遭到破坏,呈现颗粒感,表面晦涩、无光泽,关节滑液混浊;4 w组部分大鼠开始出现骨赘,8 w组关节磨损严重,骨赘明显,溃疡面积增大。HE染色显示对照组关节软骨结构清晰,软骨表面光滑、完整,实验组出现软骨细胞簇集现象,排列紊乱,细胞数目减少,后期发生部分区域软骨细胞缺损;血清OPG含量2 w、4 w呈下降趋势,8 w又逐渐上升,CGRP及NGF表达与前趋势相一致,各组间比较存在统计学差异(P<0. 01)。结论采用前交叉韧带切断法可成功建立大鼠OA模型,血清OPG及软骨下骨CGRP、NGF的表达随着OA的进展发生改变,是OA的重要参与因子。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2019年04期）
肖怀清,张志豪,王细勇[2]（2016）在《老年慢性阻塞性肺病患者基质金属蛋白酶-9、转化生长因子-β和降钙素基因相关肽水平及意义》一文中研究指出目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9、转化生长因子(TGF)-β、降钙素基因相关肽(CGRP)在老年慢性阻塞性肺病(COPD)患者中的临床价值及其与肺功能的关系。方法应用美国Vmax 6200型肺功能仪测定80例健康对照组及80例COPD组(稳定期32例,急性加重期48例),应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定3组MMP-9、TGF-β、CGRP水平。采用Pearson单因素分析MMP-9、TGF-β、CGRP与老年COPD患者肺功能的关系。结果对照组第1秒呼气量(FEV1)、最大肺活量(FVC)、FEV1/FVC值、一氧化碳弥散量(DLco)、最大通气量(MVV)显着高于COPD组(P<0.05),而COPD稳定组FEV1、FVC、FEV1/FVC、DLco、MVV值高于COPD急性加重期组(P<0.05)。对照组血清MMP-9、TGF-β水平显著低于COPD组,而CGRP水平高于COPD组(P<0.05),而COPD稳定组血清MMP-9、TGF-β水平显著低于COPD急性加重期组,而CGRP水平高于COPD急性加重期组。经Pearson相关分析可知,MMP-9、TGF-β与FEV1、DLco、MVV呈负相关(P<0.05),CGRP与FEV1、FEV1/FVC、DLco呈正相关(P<0.05)。结论血清MMP-9、TGF-β、CGRP与COPD患者肺功能有密切的关系,它们在体内相互作用相互调节,共同影响气道重塑。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2016年09期）
孙嵩,高强国,张纲,谭颖徽[3]（2015）在《神经生长因子调控降钙素基因相关肽的表达及对MG-63细胞增殖的影响》一文中研究指出目的探讨创伤愈合过程中神经生长因子(NGF)调控降钙素基因相关肽(CGRP)的表达,以及影响MG-63细胞增殖的作用机制。方法加入不同质量浓度的NGF刺激MG-63细胞,1、2、3、4 d后收集样本,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测CGRP的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-QPCR)检测CGRP m RNA的表达,采用细胞计数法(CCK-8)检测MG-63细胞的增殖;在MG-63细胞中加入NGF受体阻断剂,采用RT-QPCR和CCK-8检测CGRP m RNA的表达及MG-63细胞的增殖效率。结果在NGF作用下,MG-63细胞分泌的CGRP表达量明显上调,随NGF质量浓度升高,CGRP表达量也相应升高,具有浓度依赖性,CGRP表达量随NGF作用时间延长也相应增加(P<0.05);随NGF质量浓度升高和作用时间延长,MG-63细胞的增殖效率也相应增加(P<0.05)。加入NGF受体阻断剂后此作用相应减弱(P<0.05)。结论在创伤愈合过程中NGF能通过上调CGRP的表达量影响MG-63细胞的增殖,从而促进创伤愈合。(本文来源于《华西口腔医学杂志》期刊2015年03期）
张颖[4]（2015）在《DNA损伤检查点通路介导甲状旁腺素相关肽调节骨骼生长和骨形成》一文中研究指出我们前期利用基因工程方法在小鼠甲状旁腺素相关肽基因第84位氨基酸序列后插入一个终止密码子TGA,使其只表达1-84位而缺乏NLS和C-末端,建立了PTHrP NLS和C-末端缺失的PTHrP Knock-In(PTHrP KI)小鼠模型。PTHrP KI小鼠表现为严重的生长阻滞和成熟前衰老以及骨质疏松表型。然而,PTHrP NLS和C-末端在调节骨骼发育和成骨细胞骨形成中的作用及机制尚不明确。为明确PTHrP核定位序列和C末端是否通过调节氧化应激和DNA损伤反应介导骨骼生长发育,我们利用流式细胞术、Real-time RT-PCR和Western blot检测PTHrP KI小鼠骨组织中氧化应激和DNA损伤反应相关指标的变化。结果发现,PTHrP KI小鼠骨组织ROS水平升高,DNA损伤及其反应相关蛋白γ-H2AX、p-Chk2和p53蛋白表达水平明显上调,而抗氧化酶SOD1、SOD2、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSR)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)mRNA表达水平均明显下调。因此,我们建立了Chk2和PTHrP NLS及C-末端双基因缺失的(Chk2~(-/-)KI)小鼠模型,运用影像学、组织化学、免疫组织化学、Real time RT-PCR和Western Blot等方法,比较分析其与同窝WT、Chk2~(-/-)和PTHrP KI小鼠的表型差异。为明确Chk2敲除是否能够纠正PTHrP NLS和C末端缺失引起的生长阻滞和成熟前衰老,我们比较分析了Chk2~(-/-)KI与同窝WT、Chk2~(-/-)和PTHrP KI小鼠的体型、体重和生存期的差异。结果发现:PTHrP KI小鼠的平均生存期仅为2周(5-18天),而Chk2~(-/-)KI小鼠平均生存期延至3周(12-24天)。与WT小鼠相比,2周龄Chk2~(-/-)小鼠体型有所增大,体重显着增加;PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠体型较小,体重明显降低。然而,与PTHrP KI小鼠相比,Chk2~(-/-)KI小鼠体型有所增大,体重明显增加。这些结果表明Chk2敲除能够延长PTHrP KI小鼠的生存期,并能改善其生长发育。为明确Chk2敲除是否能够纠正PTHrP NLS和C末端缺失引起的骨骼生长阻滞,我们利用X线摄影和组织学的方法,比较分析了2周龄同窝WT、Chk2~(-/-)、PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI四种基因型小鼠骨骼生长发育相关指标的变化。结果发现:与WT小鼠相比,长骨大小和长度,生长板和增殖带宽度在Chk2~(-/-)小鼠明显增加,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显下降。然而,与PTHrP KI小鼠相比,这些指标在Chk2~(-/-)KI小鼠明显增加。这些结果表明Chk2敲除能够改善PTHrP KI引起的骨骼生长阻滞。为明确Chk2敲除是否能够纠正PTHrP NLS和C末端缺失引起骨密度和骨容量降低,我们利用微CT扫描和叁维重建以及总胶原组织化学染色的方法,比较分析了同窝四种基因型小鼠骨密度和骨容量相关指标的变化。结果发现:与WT小鼠相比,骨密度、小梁骨骨容量/组织容量(BV/TV,%)百分率、骨骺和皮质骨骨容量以及骨小梁数目在Chk2~(-/-)小鼠明显增加,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显下降。然而,与PTHrP KI小鼠相比,这些指标在Chk2~(-/-)KI小鼠明显增加。此外,与WT小鼠相比,小梁骨分离度在Chk2~(-/-)小鼠明显下降,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显增加。然而,与PTHrP KI小鼠相比,小梁骨分离度在Chk2~(-/-)KI小鼠明显降低。这些结果表明Chk2敲除能够改善PTHrP KI引起的骨密度和骨容量降低。为明确Chk2敲除改善PTHrP KI小鼠的骨密度和骨容量是否与成骨细胞骨形成有关,我们利用组织学、ALP组织化学染色、I型胶原(COL-I)免疫组织化学染色和Real-time PCR等方法,比较分析了四种基因型小鼠成骨细胞骨形成相关指标的变化。结果显示:与WT小鼠相比,成骨细胞数、ALP和COL-I阳性面积百分比以及成骨相关基因包括Runx2、ALP、OCN和COL-I表达水平在Chk2~(-/-)小鼠均明显增加,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠均明显下降。然而,与PTHrP KI小鼠相比,这些参数在Chk2~(-/-)KI小鼠明显增加。这些结果表明Chk2敲除能够通过促进成骨细胞骨形成而改善PTHrP KI引起骨容量减少。为明确Chk2敲除改善PTHrP KI引起的成骨细胞骨形成减少是否与骨髓间充质干细胞(BM-MSC)增殖和分化的改变有关,我们体外培养了四种基因型小鼠来源的BM-MSC,进行甲基蓝和ALP细胞化学染色,利用图像分析方法检测了甲基蓝染色阳性成纤维细胞集落形成单位(CFU-f)和ALP阳性CFU-f(CFU-fap)面积的变化。结果显示:与WT小鼠相比,Chk2~(-/-)小鼠骨髓细胞甲基蓝染色阳性CFU-f面积和ALP阳性CFU-f面积百分率明显增加,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显降低。然而,与PTHrP KI小鼠相比,这些指标在Chk2~(-/-)KI小鼠明显增加。这些结果表明Chk2敲除通过促进BM-MSC增殖和向成骨细胞分化纠正PTHrP KI引起的成骨细胞骨形成减少。为明确Chk2敲除改善PTHrP KI引起的骨密度和骨容量降低是否与破骨细胞骨吸收改变有关,我们利用TRAP组织化学染色和Real-time RT-PCR的方法,比较分析了四种基因型小鼠破骨细胞骨吸收相关指标的变化。结果显示:与WT小鼠相比,TRAP阳性破骨细胞面(Oc.S/B.S,%)、RANKL与OPG比值以及破骨相关基因TRAP和RANKL表达水平在Chk2~(-/-)小鼠明显减少,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显增加。然而,与PTHrP KI小鼠相比,Chk2~(-/-)KI小鼠的这些指标均明显降低。这些结果表明Chk2敲除通过抑制破骨细胞骨吸收改善PTHrP KI引起的骨密度和骨容量的降低。为明确Chk2敲除改善PTHrP KI引起的成熟前衰老和骨质疏松表型是否与氧化应激有关,我们利用Real time RT-PCR和Western blot方法比较分析了四种基因型小鼠骨组织中氧化应激相关基因和蛋白的表达水平变化。结果显示:与WT小鼠相比,抗氧化酶基因包括SOD1/2、过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSR)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达水平以及SOD1和Bmi1蛋白表达水平在Chk2~(-/-)小鼠明显上调,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显下调。然而,与PTHrP KI小鼠相比,这些指标在Chk2~(-/-)KI小鼠均明显上调。这些结果表明Chk2敲除能够通过抑制氧化应激纠正PTHrP KI引起的成熟前衰老和骨质疏松表型。为明确Chk2敲除改善PTHrP KI引起的成熟前衰老和骨质疏松表型是否与DNA损伤及其反应有关,我们通过Real-time RT-PCR和Western blot方法比较分析了四种基因型小鼠骨组织中DNA损伤及其反应相关指标的变化。结果显示:与WT小鼠相比,DNA损伤指标γ-H2AX、凋亡相关指标Caspase-3和DNA损伤反应蛋白p53的蛋白表达水平,以及细胞周期依赖性激酶抑制因子(CDKI)包括p16、p19、p53、p21和p27的mRNA表达水平在Chk2~(-/-)小鼠明显下调,在PTHrP KI和Chk2~(-/-)KI小鼠明显上调。然而,与PTHrP KI小鼠相比,这些指标在Chk2~(-/-)KI小鼠均明显下调。这些结果说明Chk2敲除能够通过抑制DNA损伤及其反应,下调细胞周期依赖性激酶抑制因子,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,从而纠正PTHrP KI引起的成熟前衰老和骨质疏松表型。以上结果表明PTHrP核定位序列和C末端缺失能够导致氧化应激增加和DNA损伤及其反应增强。敲除DNA损伤反应关键基因Chk2能够抑制氧化应激和DNA损伤及其反应,从而促进软骨内成骨、BM-MSC增殖和向成骨细胞分化以及成骨细胞骨形成,同时抑制破骨细胞骨吸收,部分纠正PTHrP KI引起的骨骼生长阻滞和骨质疏松。我们的结果证明DNA损伤检查点通路作为PTHrP胞内分泌作用的下游靶标,在PTHrP调节骨骼生长发育过程中起重要作用。本研究进一步阐述了PTHrP核定位序列和C末端在调节骨骼生长发育中的作用机制,为临床应用PTHrP核定位序列和C末端或抗氧化剂防治骨质疏松提供了理论和实验依据。(本文来源于《南京医科大学》期刊2015-05-01）
肖增兵,陈通,付爱军,朱军,李建民[5]（2015）在《构建颅脑损伤合并股骨闭合性骨折大鼠模型:骨痂中降钙素基因相关肽和胰岛素样生长因子1的表达》一文中研究指出背景:合并下肢骨折颅脑损伤患者的骨折手术时机仍存在争论,颅脑损伤后早期骨折加速愈合的机制有待进一步阐明。目前颅脑损伤合并股骨闭合性骨折动物模型的制备报道较少,需建立稳定的动物模型以供临床研究。目的:制备稳定的颅脑损伤合并股骨闭合性骨折大鼠模型,观察颅脑损伤后大鼠股骨骨折愈合过程中骨痂降钙素基因相关肽和胰岛素样生长因子1的表达,分析脑损伤对大鼠股骨骨折愈合速度的影响机制。方法:48只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成2组,分别制备颅脑损伤合并股骨骨折模型及单纯股骨骨折模型,每组24只。分别于造模后7,14,28 d分批处死大鼠,截取骨折端长10 mm左右股骨骨痂标本,应用苏木精-伊红染色及免疫组化法,观察降钙素基因相关肽和胰岛素样生长因子1表达的动态变化。结果与结论:免疫组化法测定两组大鼠骨折位点骨痂中降钙素基因相关肽阳性表达吸光度(A)值及胰岛素样生长因子1阳性细胞百分率,结果显示,颅脑损伤合并骨折组在7,14 d与单纯骨折组比较差异有显着性意义(P<0.05);造模后28 d两组比较差异无显着性意义(P>0.05);颅脑损伤合并骨折组的组内比较差异有显着性意义(P<0.05);单纯骨折组的组内比较差异无显着性意义(P>0.05)。提示骨折端降钙素基因相关肽、胰岛素样生长因子1在脑损伤后合并股骨骨折模型大鼠骨折愈合的早中期表达增高,有利于多种细胞趋化、增殖与分化,促进成骨。在骨折愈合过程中降钙素基因相关肽和胰岛素样生长因子1可能是脑损伤后促进骨折愈合的影响因素。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年05期）
张晓玲,余宗林[6]（2014）在《腹股沟疝与降钙素基因相关肽受体及肝细胞生长因子受体关系分析》一文中研究指出腹股沟疝是一种常见的先天性畸形,其发病机制尚未阐明清楚,而患儿鞘状突未闭是目前较为公认的发病原因之一[1]。临床治疗腹股沟疝的主要方法是手术治疗,但是越来越多的数据显示手术给患儿带来较多的并发症,如阴囊血肿、输精管损伤、睾丸萎缩等,且术后约4%左右的患儿会出现疝复发[2]所以寻找新的非手术治疗方法是临床治疗腹股沟疝的新方向而降钙素基因相关肽(CGRP)和肝细胞生长因子(HGF)能够(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2014年20期）
岳维,郭政[7]（2014）在《急性心肌缺血早期神经生长因子对降钙素基因相关肽表达的影响》一文中研究指出目的:观察急性心肌缺血早期经硬膜外给予神经生长因子(NGF)受体(酪氨酸激酶受体A,Trk A)拮抗剂对降钙素基因相关肽(CGRP)合成与释放的影响,探讨内源性NGF是否参与心肌缺血早期CGRP表达的调控。方法:健康成年雄性SD大鼠84只,随机分为(1)手术对照组(Sham组),只开胸暴露心脏,不结扎冠脉;(2)结扎冠状动脉组(CAO组),单纯扎闭冠状动脉左前降支;(3)酪氨酸激酶受体A(Trk A)拮抗剂组(AG879组),在结扎冠状动脉前15分钟经硬膜外管给予AG879(10-7mol/L)20μl。于术后15min、30min、60min和6h处死大鼠,采用荧光免疫组织化学观察心肌组织和背根神经节NGF和CGRP的共表达情况,采用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验检测心脏缺血区和背根神经节CGRP的表达及Trk A拮抗剂干预效应。结果:CAO组缺血心肌组织和背根神经节CGRP蛋白及其mR NA水平较手术对照组明显升高(P<0.05);硬膜外给予AG879可以显着抑制DRG内α-CGRP mR NA和β-CGRP mR NA的表达(P<0.05),对缺血心肌组织和DRG中CGRP蛋白有下调趋势,但无统计学意义(P>0.05)。结论:NGF参与心肌缺血早期CGRP基因转录的调控。(本文来源于《2014国际麻醉学基础与临床研究论坛资料汇编》期刊2014-05-23）
刘民[8]（2012）在《神经生长因子降钙素基因相关肽在下颌骨骨缺损愈合时调节机制研究》一文中研究指出因外伤、肿瘤、先天性畸形等造成颌骨缺损的修复一直是困扰口腔颌面外科临床医生的难题。颌骨缺损一方面造成功能障碍，另一方面造成美观问题，加重患者的心理负担。随着社会的进步和发展，交通事故的发生机会也越来越多，头面部损伤和颌骨骨折的发生率呈增高趋势。现代战争中，面部缺乏防护，颌面部现代战伤发生率超出10%。因此，有关颌骨骨缺损修复的研究也一直是基础和临床研究的热点问题。骨缺损的修复中，神经系统在其中发挥着重要的调节作用。我们的前期研究发现，神经介质在修复的启动、成骨和后期改建中均发挥重要作用，有许多细胞因子参与这一过程。分子生物学研究表明，骨折愈合是一个多种细胞生长因子参与调控的复杂过程，这其中既有骨缺损周围成骨相关细胞分泌的细胞因子作用，也有远端相关器官通过体液转运而来的各种激素和调节因子，还有神经系统通过神经末梢释放出的神经递质参与其中。神经生长因子(nerve growth factor，NGF)是神经营养因子(neurotrophicfactor； neurotrophic factors，NTF)的一种，也是骨缺损周围成骨相关细胞分泌的一种细胞因子。研究表明，NGF对骨缺损愈合过程起着重要的调节作用。降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)作为重要的感觉神经信号分子，因在骨折愈合调控中的重要作用而受到广泛关注。NGF与CGRP都与骨缺损愈合过程相关，并且国内外诸多研究发现CGRP和NGF骨折区的含量均增多。而且都与支配骨组织的神经系统有关联，不同在于NGF是神经靶细胞分泌，被神经末梢摄取的，CGRP是神经末梢释放的，作用于靶细胞的。这两者在骨愈合过程中的相互关系如何？有没有相互之间的调节机制？基于以上想法，并结合国内外研究进展，本课题首先制备可以在骨缺损区域持续释放NGF的缓释微球，研究下颌骨骨缺损愈合过程中NGF对支配下颌骨的叁叉神经节中CGRP的合成与分泌的影响。利用药剂学技术，制备单甲氧基聚乙二醇聚乳酸神经生长因子[(mono-methoxy poly (ethylene glycol)-poly(lactic acid)-nerve growth factor，mPEG-PLA-NGF]缓释微球，检测微球的包封率、载药量等理化性质，研究缓释微球国家自然科学基金资助项目(编号30973334）；重庆市自然科学基金（CSTC2009BB5334）的体外释放规律。利用PC-12细胞培养实验，检测微球释放NGF的生物活性和临床实际应用价值。制备大鼠下颌骨骨缺损模型，通过全身注射或局部应用NGF缓释微球干预骨愈合过程，检测大鼠叁叉神经节内NGF、CGRP、TrkA(tyrosine kinase A，络氨酸激酶A)等的变化，探讨下颌骨骨缺损愈合过程中NGF对神经节的作用。原代培养大鼠的成骨细胞，并进行形态观察和鉴定，用不同浓度的CGRP刺激成骨细胞，观察CGRP对成骨细胞合成NGF的影响实验方法和结果：1、 mPEG-PLA-NGF缓释微球的制备及体外释放实验研究mPEG-PLA-BSA微球的制备预实验：取叁种不同配比的单甲氧基聚乙二醇聚乳酸(mono-methoxy poly (ethylene glycol)-poly(lactic acid)，mPEG-PLA)(mPEG：PLA分别为1:4，1:10，1:20的3种mPEG-PLA，其中mPEG分子量均为5000。)用复乳法制备微球，通过筛选，选用mPEG：PLA=1:20的mPEG-PLA。用复乳法制备mPEG-PLA-NGF缓释微球，观察微球的表面形态，微球表面光滑圆整，球体大小较均匀。微球平均粒径为74.2±21.3μm，粒径分布范围较窄。载药量和包封率的实验表明，mPEG-PLA-NGF缓释微球包封率为(77.3±1.81)％。载药量为[(2.13±0.24)×10-5]%。微球的体外释放实验表明，微球在14d内，不仅一直持续释放神经生长因子，而且所释放出的神经生长因子浓度可以保持在一定的水平：(54.67-76.81) fmol/μL，平均浓度为(65.74±11.07) fmol/μL。经检测表明，神经生长因子缓释微球的24h内释放量为27.36％，21d后释放度达72.34％。NGF缓释系统中释放的NGF活性测定试验中，通过PC-12细胞的出芽情况证明了mPEG-PLA-NGF缓释微球可以持续释放出有生理活性的NGF。2、神经生长因子在下颌骨骨缺损愈合过程中对骨折愈合的促进作用以及对叁叉神经节合成降钙素基因相关肽的影响建立大鼠下颌骨骨缺损动物模型，分为：①空白组：只手术，不给药；②对照组：手术后，NGF腹腔给药；③实验组：手术时，局部涂布mPEG-PLA-NGF缓释微球。分别在术后1w，2w，4w，8w处死动物。术区标本HE染色显示，mPEG-PLA-NGF实验组的骨痂生成量和骨痂成熟度要明显高于对照组和空白组，而且愈合时间明显提前。四环素荧光染色结果显示，mPEG-PLA-NGF实验组可加快大鼠新生骨的形成，结果有统计学意义。建立大鼠下颌骨骨缺损动物模型，分为：①单纯骨缺损组，不给药；②单纯全身给药组，不手术；③骨缺损+全身给药组；④骨缺损+NGF微球；⑤空白组。在术后第1d，2d，3d，7d处死动物，获取叁叉神经节标本，并通过免疫组化法，检测叁叉神经节中NGF、CGRP、TrkA的表达差异。结果显示，各组均观察到叁叉神经节内NGF、CGRP、TrkA表达有所增强，第2组最不明显，第4组表达显着高于其他组。3天达到最高，以后逐渐下降，但仍高于两对照组。叁项指标结果极为相似，显示出密切的相关性。3、降钙素基因相关肽对成骨细胞分泌神经生长因子的影响原代培养大鼠成骨细胞，并进行了形态观察和鉴定。用不同浓度的CGRP刺激成骨细胞，在第1，2，3，5d，用ELISA法测不同浓度CGRP对大鼠成骨细胞上清液中NGF浓度的影响。结果显示成骨细胞自身可以产生少量的NGF，在CGRP作用下，可以明显上调成骨细胞分泌的NGF，而且随CGRP浓度升高，此作用也相应增强。此外，成骨细胞上清液中NGF的浓度随CGRP作用后时间延长也增加。结论：1、以mPEG-PLA为载体，采用复乳法(w/o/w)制备的mPEG-PLA-NGF缓释微球具有良好的物理和生化性能，能够持续释放具有生物活性的神经生长因子。2、实验采用的微球制备方法和工艺确实可行，并具有一定的实用性。通过中国、美国、欧盟、日本等专利检索，“一种生长因子缓释微球及其制备方法”具有原创性，已经获得了中国知识产权局技术发明专利(专利号： ZL201110027337.8)。3、体内实验表明骨缺损区域的NGF能够促进大鼠下颌骨骨缺损的愈合，促进大鼠的叁叉神经节细胞合成CGRP。4、体外研究表明CGRP对成骨细胞NGF的表达有促进作用，并与剂量和时间呈正相关。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2012-11-01）
张菁[9]（2012）在《甲状旁腺素相关肽经p27介导在调节骨骼生长和成骨细胞骨形成中的作用及机制研究》一文中研究指出我们先前通过在小鼠PTHrP基因第84位氨基酸序列后敲入一个氨基酸翻译终止密码一TGA,使其只表达PTHrP(1-84),而不表达NLS和C-末端,建立了一个PTHrP NLS和C-末端缺失小鼠模型,被称为PTHrP Knock-In(PTHrP KI)小鼠。PTHrP KI小鼠表现为生长阻滞及成熟前衰老和骨质疏松表型。然而,PTHrP NLS和C-末端在调节骨骼发育和成骨细胞骨形成中的作用及机制尚不清楚。为了证明PTHrP NLS和C-末端是否通过p27介导发挥调节骨骼生长和成骨细胞骨形成的作用,通过建立p27和PTHrP KI双基因敲除(p27-/-PTHrP KI)小鼠模型,运用影像学、组织化学、免疫组织化学、实时荧光定量RT-PCR和Western Blot等方法,比较分析了它们与p27-/-PTHrP KI及WT小鼠的骨骼表型差异。为了明确p27基因敲除是否能够矫正PTHrPKI引起的早衰和生长阻滞,我们观察了 p27基因敲除对PTHrP KI小鼠生存期、体型和体重的影响。结果显示:WT和p27-/-小鼠能存活2年以上,PTHrPKI小鼠平均生存期为2周左右,而p27-/-PTHrPKI小鼠平均生存期延长至3周左右。与WT小鼠相比,p27-/-小鼠体型明显增大,体重明显增加;PTHrPKI和p27-/-PTHrPKI小鼠体型明显缩小,体重明显降低。与PTHrPKI小鼠相比,p27-/-PTHrPKI小鼠体型有所增大,体重明显增加。这些结果说明p27基因敲除能够延长PTHrPKI小鼠的寿命,改善其生长发育。为了明确p27基因敲除是否能够改善PTHrP KI引起的骨骼生长阻滞,我们利用X线摄影、组织学和增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学的方法,观察了p27基因敲除对PTHrPKI小鼠长骨长度及软骨细胞增殖的影响。结果显示:长骨长度、软骨生长板增殖带宽度和增殖细胞核抗原(PCNA)阳性软骨细胞百分率在p27-/-小鼠较WT小鼠均明显增加;在PTHrP KI和p27-/-PTHrP KI小鼠较WT小鼠均明显降低;而在p27-/-PTHrPKI小鼠较PTHrPKI小鼠则明显增加。这些结果说明p27基因敲除能够改善PTHrPKI小鼠的骨骼生长。为了明确p27敲除是否能够改善PTHrP KI引起的成熟前骨质疏松的表型,我们利用微CT扫描和叁维重建分析、组织化学或免疫组化染色及分子生物学的方法,观察了p27基因敲除对PTHrPKI小鼠成骨细胞骨形成的影响。结果显示:骨密度、小梁骨容量、成骨细胞数、碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原(Col-I)和骨钙素(OCN)阳性面积、成骨细胞相关基因包括Runx2、ALP、Col-I、OCN的表达水平及甲状旁腺素1型受体(PTHR)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的表达水平在p27-/-小鼠较WT小鼠均明显增加;在PTHrP KI和p27-/-PTHrP KI小鼠较WT小鼠均明显降低;而在p27-/-PTHrP KI小鼠较PTHrP KI小鼠则明显增加。这些结果说明p27基因敲除能够改善PTHrP KI小鼠的成骨细胞骨形成。为了进一步明确p27基因敲除对PTHrP KI小鼠成骨细胞骨形成的影响是否与细胞周期调控分子表达水平改变有关,我们检测了原癌基因Bmi-1及细胞周期依赖性激酶抑制因子p16和p53在骨组织的表达变化。结果发现:与同窝WT小鼠相比,Bmi-1表达水平在p27-/-小鼠上调,在PTHrP KI和p27-/-PTHrP KI小鼠下调;而在p27-/-PTHrP KI小鼠则较PTHrP KI小鼠有所上调。与Bmi-1表达水平变化相反,p53和p16表达水平在p27-/-小鼠变化不大,而在PTHrP KI和p27-/-PTHrP KI小鼠上调;p27-/-PTHrP KI小鼠则较PTHrP KI小鼠有所下调。这些结果说明p27基因敲除能够上调Bmi-1表达,下调p16和p53表达,发挥改善PTHrP KI小鼠成骨细胞骨形成的作用。为了明确p27敲除对PTHrP KI小鼠成骨细胞的影响是否与骨髓间充质干细胞募集和分化的改变有关,我们通过骨髓细胞培养,观察了成纤维细胞集落形成单位(CFU-f)的变化。结果显示:CFU-f和ALP阳性CFU-f在p27-/-小鼠较WT小鼠均明显增加;在PTHrP KI小鼠较WT小鼠均明显降低;而在p27-/-PTHrP KI小鼠较PTHrP KI小鼠则明显增加。这些结果说明p27基因敲除能够通过促进骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化,发挥改善PTHrPKI小鼠成骨细胞骨形成的作用。本研究结果说明PTHrPNLS和C-末端能够通过抑制p27,经上调Bmi-1继而抑制p16和p53,促进软骨细胞增殖及骨髓间充质干细胞的增殖和向成骨细胞的分化,从而发挥了促进骨骼生长和成骨细胞骨形成的作用。本研究结果为将PTHrPNLS和C-末端应用于防治骨质疏松的临床研究提供实验和理论依据。(本文来源于《南京医科大学》期刊2012-05-01）
周燕[10]（2012）在《降钙素基因相关肽在颌骨骨折愈合过程中对转化生长因子-β_1的调控作用研究》一文中研究指出降钙素基因相关肽(Calcatonin gene related peptide，CGRP)作为一种肽类神经递质，主要分布在代谢活跃的骨组织中，可调节骨细胞生长、分化、活性，从而调控骨折愈合过程，但是其具体调控机制目前尚不明确。同时研究发现转化生长因子-β(TGF-β)可同时刺激间充质干细胞、软骨细胞和成骨细胞的增殖及分化，还可以诱导细胞外蛋白质的产生，在软骨形成期及骨形成改建期发挥十分重要的作用。目前已经发现TGF-β有五种不同结构为TGF-β_1-5，骨折愈合过程中不同结构的TGF-β在不同时间到达表达峰值，发挥的调控作用也不相同。其中TGF-β_1的表达时间最长，TGF-β_1与TGF-β2的比例约为4：1，TGF-β_1也是目前研究的最多的一个亚结构。在颌骨骨折愈合过程中，降钙素基因相关肽是否通过对TGF-β_1的调控，促使骨折愈合？本实验在课题组以往工作的基础上，建立失下牙槽神经支配的下颌骨骨折模型，检测骨痂中CGRP的分布，进而研究颌骨骨折愈合的骨痂中CGRP的改变对TGF-β_1的表达所产生的影响；体外细胞实验研究中，通过加入外源性CGRP培养成骨细胞，检测成骨细胞培养液中TGF-β_1的表达，研究对成骨细胞的调控作用。方法：细胞实验：观察CGRP对成骨细胞TGF-β_1表达的影响。原代培养新生兔颅骨成骨细胞，对所培养的细胞进行形态学观察及碱性磷酸酶染色鉴定后，分别向细胞培养液中加入不同浓度的CGRP，分别在不同时间段进行处理，用MTT法检测成骨细胞生长活力，用western-blot检测成骨细胞中TGF-β_1的蛋白表达。动物实验：实验建立失下牙槽神经下颌骨骨折愈合实验组和单纯性下颌骨骨折愈合对照组的实验动物模型(每组各25只)。两组动物分别伤后于4d、7d、14d、21d、28d于耳缘静脉处空气栓塞致死，截取制备骨折处之骨痂，采用免疫组化方法对观察愈合情况，运用Western-blot法检测TGF-β_1蛋白表达。结果：细胞实验结果：(1)原代培养并分离兔颅骨成骨细胞，进行碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定。(2)外源性地加入同一浓度的CGRP后随着时间的增加MTT值也呈增加趋势；(3)同一时间点做比较，随着CGRP浓度的不断增加，MTT值也呈上升趋势，并且在48h和72h组，这种趋势愈加明显(P<0.05)。(4)Western blot实验中随CGRP浓度的增加TGF-β_1条带灰度显着升高，显示TGF-β_1蛋白的表达逐渐增强(P<0.05)，CGRP促进兔颅骨成骨细胞TGF-β_1的表达。动物试验结果：(1)骨痂标本HE染色观察：单纯性骨折对照组可见骨痂组织中新生骨小梁生长速度较快、排列规则、粗大致密；失下牙槽神经实验组的骨痂中骨小梁稀疏并且排列不规则、骨痂结构存在缺陷，类骨质及骨吸收空腔较多。(2)TGF-β_1免疫组化染色观察：正在增殖中的软骨成骨细胞TGF-β_1呈阳性染色，钙化并转变为新骨的软骨及其表面的成骨细胞，其中在14d时对照组TGF-β_1呈强阳性染色，与实验组比较有表达差异(P <0.05)。(3)新鲜骨痂中TGF-β_1的蛋白表达：Western-blot分析显示对照组的骨痂中TGF-β_1蛋白随着时间增加表达量逐渐上涨，在术后第14d表达量最高，之后趋于平稳，在14d时间点，失神经实验组条带蛋白表达低于单纯性骨折组(p<0.05)。结论(1)细胞实验表明，外源性地加入CGRP影响成骨细胞中TGF-β_1的表达，CGRP的浓度与TGF-β_1的表达呈正相关性，CGRP可能存在上调细胞TGF-β_1合成的能力。(2) CGRP对成骨细胞的增殖具有促进作用。(3)骨折愈合过程中，失下牙槽神经实验组由于神经缺失所至的CGRP表达减少，导致TGF-β_1的表达降低，影响骨痂的正常愈合。(4)在骨痂生长过程中TGF-β_1的表达量随着时间的增加而递增。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2012-05-01）
生长相关肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9、转化生长因子(TGF)-β、降钙素基因相关肽(CGRP)在老年慢性阻塞性肺病(COPD)患者中的临床价值及其与肺功能的关系。方法应用美国Vmax 6200型肺功能仪测定80例健康对照组及80例COPD组(稳定期32例,急性加重期48例),应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定3组MMP-9、TGF-β、CGRP水平。采用Pearson单因素分析MMP-9、TGF-β、CGRP与老年COPD患者肺功能的关系。结果对照组第1秒呼气量(FEV1)、最大肺活量(FVC)、FEV1/FVC值、一氧化碳弥散量(DLco)、最大通气量(MVV)显着高于COPD组(P<0.05),而COPD稳定组FEV1、FVC、FEV1/FVC、DLco、MVV值高于COPD急性加重期组(P<0.05)。对照组血清MMP-9、TGF-β水平显著低于COPD组,而CGRP水平高于COPD组(P<0.05),而COPD稳定组血清MMP-9、TGF-β水平显著低于COPD急性加重期组,而CGRP水平高于COPD急性加重期组。经Pearson相关分析可知,MMP-9、TGF-β与FEV1、DLco、MVV呈负相关(P<0.05),CGRP与FEV1、FEV1/FVC、DLco呈正相关(P<0.05)。结论血清MMP-9、TGF-β、CGRP与COPD患者肺功能有密切的关系,它们在体内相互作用相互调节,共同影响气道重塑。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
生长相关肽论文参考文献
[1].常琦,阮贞,王宪伟,王茂朋.骨关节炎模型大鼠血清骨保护素及软骨下骨降钙素基因相关肽、神经生长因子表达及Mankin评分变化[J].中国老年学杂志.2019
[2].肖怀清,张志豪,王细勇.老年慢性阻塞性肺病患者基质金属蛋白酶-9、转化生长因子-β和降钙素基因相关肽水平及意义[J].中国老年学杂志.2016
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