导读:本文包含了神经上皮干细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人羊膜上皮干细胞,外泌体,神经干细胞,神经分化
神经上皮干细胞论文文献综述
张姣飞,林健华,王酉,徐辉明,张前军[1]（2018）在《人羊膜上皮干细胞来源的外泌体促进小鼠神经干细胞向神经元方向分化》一文中研究指出人羊膜上皮干细胞(human amniotic epithelial stem cells,h AECs)能促进损伤神经元的修复和再生,但是否影响神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的分化却很少报道。该研究首次发现h AECs能促进小鼠NSCs(mouse NSCs,m NSCs)向神经元方向分化。干细胞来源的外泌体(Exos)仍保留着干细胞的许多特性,因此,该研究探讨了h AECs来源的外泌体(h AECs-Exos)对m NSCs分化的影响。首先,采用超速离心的方法得到了纯度较高的h AECs-Exos,然后将不同浓度的h AECs-Exos与m NSCs共培养。结果发现,与没有h AECs-Exos的对照组相比,200 ng/m L h AECs-Exos能明显促进m NSCs向成熟神经元分化,主要表现在Neu N阳性细胞所占比例明显增高。研究者推测,h AECsExos保留了h AECs的一些特性,其含有的神经营养因子、生长因子、miRNAs等活性物质可能参与了微环境的调控,从而促进m NSCs向神经元方向分化。因此,h AECs-Exos可能促进内源或外源NSCs的神经分化,从而促进损伤或退化神经元的再生,这也为将来h AECs-Exos的临床应用提供研究基础。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2018年08期）
李雪丽[2]（2018）在《大鼠神经嵴干细胞形态的时序特点以及上皮间质特性观察》一文中研究指出目的:神经嵴干细胞(neural crest stem cells,NCSCs)是一种胚胎发育过程中具有多向分化潜能的细胞,可通过上皮间质转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)从神经嵴分离,并分化出中枢与外周神经元以及胶质细胞等。目前大量的研究均着眼于NCSCs,但不同发育阶段的NCSCs的形态和生物学功能不尽相同,但目前阐述不多,因此本实验首先观察不同天数NCSCs的形态和体外增殖模式,为选取适宜的NCSCs提供依据。进一步对不同天数大鼠NCSCs的上皮间质特性进行分析,选取EMT过程中常见的E-cadherin/N-cadherin作为目的基因,利用免疫荧光(Immunofluorescence,IF),Western blot及qRT-PCR技术,对不同天数NCSCs中E-cadherin/N-cadherin表达水平进行检测,探讨EMT在NCSCs迁移中的作用。研究方法:1、NCSCs分离培养健康成熟未孕的Wistar大鼠,雌雄大鼠按4:1比例午夜合笼,次日上午8:00做雌鼠阴道涂片,显微镜下观察发现精子者确认已交配,此日计妊娠0天(embryonic day0,E0)。选取E8.5,E9.5,E11,E13天的Wistar孕鼠,提取NCSC并培养传代。2、细胞爬片及细胞HE染色。3、细胞免疫荧光染色、Western blot及qRT-PCR检测不同天数大鼠NCSCs中E-cadherin/N-cadherin表达情况。4、统计分析数据以均数±标准差表示,采用SPSS软件对实验数据进行分析,采用2~(-△△ct)法分析目的基因mRNA相对表达量变化,观察各天数细胞目的基因表达量的变化趋势。结果:1、培养不同天数的NCSCs利用DMEM/F12完全培养基成功培养出8.5、9.5、11、13天的NCSCs。2、不同天数NCSCs生长速度及HE染色结果小天数NCSCS细胞贴壁、聚集、成球速度较快,且传代能力稍强,可传至4代左右。大天数NCSCs则相反,生长速度慢于小天数细胞,且传代能力较弱,传至3代时可见神经嵴干细胞聚集及生长能力明显减弱,难以聚集成簇形成神经球。HE染色可见NCSCs细胞核较大,胞质胞浆少,体外培养时可见细胞贴壁后,该类细胞相互靠近,排列紧密,呈集落状生长,并最终形成神经球悬浮。随着原代细胞天数的增长可见细胞胞体及胞核稍减小,胞质胞浆所占比例增多。3、免疫荧光染色、Western blot及qRT-PCR检测E-cadherin/N-cadherin随着NCSCs天数的增大,E-cadherin表达降低,N-cadherin表达升高。其中8.5天NCSCs中E-cadherin表达较明显,9.5天、11天、13天表达明显降低。N-cadherin表达趋势与E-cadherin相反,8.5天N-cadherin表达不明显,9.5天、11天、13天则表达明显。结论:(1)NCSCs随着原代细胞天数的增大,细胞形态及生长速度均存在一定的差异。天数越小,细胞核越大,胞质越小,细胞生长相对越快,且传代能力越强。(2)NCSCs生长过程中E-cadherin降低,N-cadherin升高的趋势提示EMT在NCSCs迁移过程中起到重要作用,考虑NCSCs于胚胎发育的第8.5至9.5天之间发生EMT,进而发生细胞迁移。(本文来源于《中国医科大学》期刊2018-03-01）
濮彧[3]（2017）在《IL-1β诱导嗅上皮神经干细胞迁移的机制研究》一文中研究指出目的:嗅上皮神经干细胞作为神经来源的成体干细胞在神经损伤的修复中具有独特的优越性,课题组前期实验发现嗅上皮神经干细胞植入噪声性耳聋大鼠耳蜗内,可一定程度提高大鼠的听力,并发现移植细胞定向迁移至螺旋神经节。大量研究报道了,体内外有多种因子参与细胞的迁移过程。有报道称噪声性损伤内耳可检测到IL-1β、TNF-α的增高。IL-1β作为常见的炎症因子,参与多种细胞中的迁移、侵袭等生物学行为,如胃癌细胞、朗汉斯细胞、骨髓间充质干细胞等,IL-1β是否可以诱导嗅上皮神经干细胞的迁移尚未见相关报道。干细胞迁移至组织损伤部位是修复的前提,细胞迁移涉及到细胞外基质的水解、结构重塑等一系列生物学过程,然而基质金属蛋白酶(MMPs)在多种细胞的迁移、侵袭的过程中发挥重要作用。关于MMPs的报道虽多见于肿瘤细胞,但在骨髓间充质干细胞、人脐带间充质干细胞等干细胞中也有报道称MMPs上调与这些细胞的迁移有关。我们前期实验也证实MMPs在嗅上皮神经干细胞亦有表达,因此,我们推测IL-1β可诱导嗅上皮神经干细胞定向迁移至螺旋神经节的现象,MMPs可能参与迁移过程,对其迁移的机制进一步研究。方法:1.体外原代培养嗅上皮神经干细胞,分别予以0n/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml IL-1β处理嗅上皮神经干细胞,分别通过transwell实验、CCK-8实验、Annexin V/PI染色检测细胞的迁移、增殖和凋亡,选择明显改变迁移能力,同时对细胞增殖、凋亡无明显影响的浓度用于后续实验;2.将细胞分为空白对照、IL-1β处理组,分别通过western blot、rt-PCR检测MMP-2、MMP-9在蛋白、基因水平表达情况;通过siRNA转染的方法干扰MMP-2和MMP-9的表达,检测相应细胞迁移变化情况;3.筛选MMPs常见上游通路,选择IL-1β明显激活的通路;用有效通路抑制剂阻断相关通路,实验分为空白对照组、IL-1β+通路阻滞剂组、IL-1β处理组,分别通过western blot、rt-PCR检测MMP-2、MMP-9在蛋白、基因水平表达情况;tranwell实验检测阻断通路后细胞迁移变化情况。结果:1.本课题检测了IL-1β与嗅上皮神经干细胞迁移的关系,发现IL-1β可以诱导促进嗅上皮神经干细胞迁移,且随着IL-1β浓度的升高,细胞迁移能力递增;2.IL-1β可以上调嗅上皮神经干细胞MMP-2、MMP-9的表达,通过siRNA干扰MMP的表达后发现,细胞迁移能力明显下降;3.IL-1β诱导嗅上皮神经干细胞同时检测MMP上游常见信号通路,发现NF-κB、JNK通路磷酸化明显升高。阻断这两条通路后,MMP-2、MMP-9表达明显下调,同时细胞迁移能力下降。阻断NF-κB后,MMP表达及细胞迁移能力与空白对照组无差异,无统计学意义;而阻断JNK后,MMP表达及细胞迁移能力与空白组相比仍有一定程度上升高,具有统计学意义。结论:1.IL-1β浓度在0-80ng/ml之间,可促进嗅上皮神经干细胞迁移,且随着浓度增高,细胞迁移能力也增强,同时对细胞增殖、凋亡无影响;2.IL-1β通过上调MMP-2、MMP-9诱导嗅上皮神经干细胞的迁移;3.IL-1β可通过激活NF-κB、JNK通路上调MMP-2、MMP-9的表达诱导嗅上皮神经干细胞迁移,其中NF-κB通路可能为关键通路。(本文来源于《第二军医大学》期刊2017-11-01）
艾宗勇,刘国库,牛宝华,赵淑梅,李天晴[4]（2017）在《诱导神经上皮干细胞的临床转化前景及挑战》一文中研究指出诱导神经上皮干细胞(induced neuroepithelial stem cells,i NESCs)具有很强的增殖能力和分化潜能,具有重要的科学和临床应用价值。通过i NESCs自体移植产生功能性神经元,在治疗神经性疾病和神经损伤中具有广阔的前景。然而,当前只能通过外源基因过表达的方法获得灵长类i NESCs,这存在未知的安全风险。因此,通过小分子化合物、3D微环境、压力刺激等非外源基因导入法获得灵长类i NESCs显得重要而迫切。长期以来,大量的研究使用啮齿类动物模型来探索药物和细胞在体内的安全性和有效性,然而啮齿类动物与人存在的巨大物种差异导致很多研究在临床试验中失败。因此,借助与人类亲缘关系相近的非人灵长类动物进行研究,进而评估和测试i NESCs在体内的安全性和有效性,是推动人i NESCs进入临床转化更有效的方法。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2017年11期）
朱小庆[5]（2016）在《胚胎干细胞定向分化为神经上皮干细胞和皮层投射神经元的体系建立》一文中研究指出在胚胎发育过程中,脊索诱导其背侧中线的外胚层(神经外胚层)形成神经板并发育成神经管。紧接着神经管闭合,管腔特化成脑室,背部区域特化成端脑。当端脑起始发育的时候,组成神经管的神经上皮干细胞,不断的增殖扩增,逐渐转变为放射状胶质前体细胞,最后这些胶质前体细胞进行迁移分化最终形成了大脑皮层。神经管发育异常将导致一系列疾病。因此,利用多能性干细胞,发展一种灵长类神经管发育模型,能够帮助我们研究神经管疾病。本研究建立了一种稳健的体系,该体系能够在单细胞水平上进行克隆扩增并形成微小的类神经管结构：另外,单细胞不仅能够在体外产生功能神经元,还能在体内存活并广泛再生神经元轴突：除此之外,本研究还发现神经上皮干细胞特性的维持与类神经管结构的形成依赖高能量代谢：通过Notch信号与细胞粘附分子来调控Wnt信号通路,单个神经上皮干细胞能够转变为放射状胶质前体细胞：最后,利用"NESC-TO-NTs"体系,本研究成功模拟了叶酸在神经管闭合过程中的作用,表明叶酸可以调控多种机制预防神经管疾病。可见,本研究建立了一个能够在体外研究神经管发育和疾病理想的体系。大脑皮层是大脑中最复杂的结构之一,其损伤会导致一系列的神经发育和神经退行性疾病。在结构上,大脑皮层可以分为6层,第1层为cajal细胞层,2、3、4层为上层投射神经元,5、6层为底层投射神经元。根据神经元的位置和突触连接方式,5、6层又称为离皮质投射神经元。离皮质投射神经元的分化方法缺乏,限制了研究其在大脑皮层中的发育和功能。本研究开发了“两步法”能够从人胚胎干细胞快速诱导离皮质神经元：(1)诱导胚胎干细胞转变为神经上皮干细胞；(2)神经上皮干细胞分化产生8096的高纯度离皮质投射神经元。本方法获取的神经上皮干细胞不但能够在单细胞水平进行长时间的自我更新并自我重组形成类神经管结构,还能够稳定的分化为离皮质投射神经元和中间神经元。另外,本研究还发现：移植的神经上皮干细胞能成功整合到小鼠脑中,并分化为投射神经元,从而建立有效的突触连接和特殊的投射模式。因此,有效的产生离皮质投射神经元,能够促进人们了解大脑皮层的发育机制,并为细胞治疗提供充足的储备资源。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2016-05-02）
张飞[6]（2015）在《体外诱导人脐带间充质干细胞、神经生长因子转染及向神经上皮祖细胞分化的实验研究》一文中研究指出目的:糖尿病神经源性膀胱(Diabetic Neurogenic Bladder,DNB)是糖尿病引起的泌尿系统常见并发症,因临床治疗缺乏针对性,只能暂时缓解症状,不能中止DNB的进展和恢复膀胱功能。神经生长因子(Neuron Growth Factor,NGF)减少是DNB重要的致病因素。临床试验证实补充外源性NGF可有效改善DNB,但也存在NGF半衰期短、生物利用度低等问题。人脐带间充质干细胞(Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,hUCMSCs)既具有多向分化潜能,又是一种良好的基因治疗的载体细胞。本课题拟在构建含人NGF的重组慢病毒载体并转染至人脐带MSCs的基础上,体外诱导分化含NGF的人脐带MSCs成为神经上皮祖细胞,使神经上皮祖细胞持续稳定表达NGF,从而使NGF和诱导分化后的人脐带MSCs分别发挥基因治疗和细胞治疗作用,为下一步的实验治疗奠定基础。方法:1.从新生儿脐带中提取hUCMSCs并鉴定其基本生物学特性,采用细胞计数仪计数制作生长曲线、流式细胞仪鉴定hUCMSCs细胞表面抗原,免疫荧光方法验证hUCMSCs的Nestin蛋白表达情况。2、诱导hUCMSCs向成骨方向及成脂方向分化。检测胶原表达、茜素红染色及ALP并评价成骨分化效果。油红O染色评价成脂分化效果。从而验证hUCMSCs的多向分化能力。3、过表达NGF的慢病毒载体构建,筛选最佳MOI后使用慢病毒转染hUCMSCs。荧光显微镜拍照,估算转染效率。4、利用添加bFGF、EGF的无血清D/F12培养基,经过两个阶段诱导过表达NGF的hUCMSCs向神经上皮祖细胞分化,采用形态学观察、免疫荧光、RT-PCR、Western-Blotting、ELISA等多种方法评价诱导效果。结果:1、原代hUCMSCs细胞形态为长梭形,呈漩涡状、鱼鳞样生长,倍增时间为32.1h,hUCMSCs表达间充质表面抗原CD105,CD29,CD13,CD90,不表达CD45,CD14,CD106,CD34,HLA-DR。HLA-DR不表达证明hUCMSCs免疫原性低。2、分别诱导分化hUCMSCs具有成骨和成脂分化潜能,证实hUCMSCs具有多向分化能力。3、构建过表达NGF的慢病毒载体并成功转染至hUCMSCs。4、经过两步诱导法,过表达NGF的hUCMSCs转变成大量神经样细胞团块。免疫荧光染色神经上皮祖细胞抗原标记Nestin和Musha-1高表达,RT-PCR显示Pax-6、Masha-1、Sox-1高表达。ELISA方法检测到培养液中NGF的表达。结论:1.证实提取的新生儿hUCMSCs具有较高的增殖能力及多向分化能力,体外培养多代的hUCMSCs仍然具备干细胞的基本生物学特性且免疫原性低。2.成功构建携带过表达NGF的慢病毒载体。3.利用基因转染技术成功构建过表达NGF的hUCMSCs,并在培养液中得到高效稳定的表达。4.成功诱导分化过表达NGF的hUCMSCs为神经上皮祖细胞,并在培养液中得到高效稳定的表达。5.本试验结果证明hUCMSCs是一种良好的基因治疗的载体细胞,为后续动物实验治疗奠定了基础。(本文来源于《上海交通大学》期刊2015-04-01）
颜建辉,黄丽娟,杨柳,陈雁斌,华力明[7]（2015）在《上皮钙黏素/连环素复合体对大鼠神经干细胞增殖作用的影响》一文中研究指出目的探讨E-钙黏素/连环素(E-cadherin/catenin)复合体对神经干细胞(NSCs)增殖作用的影响。方法从胎鼠脑组织中分离、培养NSCs,制备细胞悬液,随机分为正常组、实验1组、实验2组。克隆大鼠E-cadherin全长于慢病毒(Lentivirus),转染至实验1组NSCs;采用si RNA法将E-cadherin对应片段克隆进入Lentivirus载体,转染至实验2组。RT-PCR及Western印迹方法检测各组细胞E-cadherin、β-catenin、p120-ctn的m RNA及蛋白表达水平。以MTT法绘制细胞生长曲线,免疫荧光染色标记计数Nestin、Brd U阳性细胞数目。结果实验1组E-cadherin、β-catenin、p120-ctn的m RNA及蛋白表达水平均显着高于正常组,但NSCs增长率及Brd U阳性细胞数目显着低于正常组(P<0.05);实验2组E-cadherin、β-catenin、p120-ctn的m RNA及蛋白表达水平显着低于正常组,但NSCs增长率及Nestin、Brd U阳性细胞数目均显着高于正常组(P<0.05)。结论下调E-cadherin/catenin复合体的表达可能促进体外培养的NSCs增殖。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2015年05期）
张敬学,武珅,刘谦[8]（2014）在《神经干细胞与视网膜色素上皮细胞相关基因表达差异的实验研究》一文中研究指出目的探讨神经干细胞(NSC)与成熟视网膜色素上皮细胞(RPE)间相关基因的表达差异。方法分离小鼠原代RPE并进行扩增培养。应用反转录-聚合酶链反应鉴定眼区发育相关基因在NSC和RPE的表达,分析相关差异。进一步应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)对共同表达的基因进行定量分析,比较两者差异。测量指标的数据资料以均数±标准差(x珋±s)的形式表示;采用独立样本t检验的方法分别比较NSC和RPE间各基因表达量的差异。结果原代分离后的小鼠RPE细胞呈圆形生长,细胞内充满色素颗粒,一般48 h后,细胞可稳定贴壁生长,部分细胞呈双核或多核,并逐渐呈叁角形或多边形状伸展。培养7 d左右,细胞生长接近融合状态,进行RPE细胞的特异蛋白免疫荧光染色,可见细胞角蛋白及S-100等显着表达。在眼区发育相关的主要转录因子中,NSC特异表达Sox2 mRNA,RPE细胞特异表达Chx10、Opn4及RPE65 mRNA,两者均表达nestin、Pax6、R、Mitf、Hes1、Zo-1及tublin mRNA。在NSC和RPE共同表达的相关基因中,Pax6、Mtif、Rx,Hes1及ZO-1在RPE的相对表达量都显着高于其在NSC的表达,差异有统计学意义(t=-16.751,-5.439,-8.109,-4.96,-9.172;P<0.05)。而nestin在两类细胞的表达比较,差异无统计学意义(t=-0.328,P>0.05)。结论在NSC向RPE诱导分化过程中,Chx10、Opn4及RPE65具有一定特异性,可作为RPE的鉴定蛋白。NSC和RPE存在共同表达的基因特性,但表达水平存在较大差异,可以在诱导分化过程中进行调控来促进RPE的定向分化。(本文来源于《中华眼科医学杂志(电子版)》期刊2014年06期）
董世桃[9]（2014）在《人羊膜上皮细胞和人羊膜间充质干细胞移植改善阿尔茨海默病大鼠认知功能和减轻神经病理损伤》一文中研究指出目的：阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）是一种退行性神经系统疾病，神经元胞外β-淀粉样蛋白（amyloid-β，Aβ）沉积和胞内神经纤维缠结（neurofibrillarytangles，NFT）为其主要病理特征，临床上主要表现为认知功能障碍。目前，AD尚无有效的治疗方法。人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells，hAECs）和人羊膜间充质干细胞（human mesenchymal stem cells，hMSCs）具有良好神经生物学特性和免疫调节作用，为AD的细胞治疗提供了可能。本研究主要探讨hAECs和hAMSCs移植对AD大鼠模型的治疗效应及生物学原理，评价其孰优孰次，为临床选择更适合于治疗AD的供体细胞提供实验依据。方法：①采用胰酶-胶原酶两步消化法从足月分娩的人羊膜组织中分离hAECs和hAMSCs,用流式细胞仪（Flow cytometry， FCM）和免疫细胞化学（Immunocytochemistry，IC）法进行表型鉴定。②SD大鼠双侧脑室注射脂多糖（LPS）复制AD大鼠模型。模型大鼠随机分为4组:模型组(n=12)、培养基对照组（n=12）、hAECs移植组（n=12）和hAMSCs移植组（n=12）。细胞移植组双侧海马注射10ul hAECs或hAMSCs细胞悬液（5×105个细胞），培养基组同途径注射等体积无血清L-DMEM培养基。同时设正常组作为平行对照。细胞移植后2W和4W，各组处死6只动物，取大脑和外周血进行病理学和免疫学检查。③细胞移植前后和大鼠处死前分别水迷宫试验检测大鼠空间辨别性学习记忆能力的改变。④HE染色观察皮层海马组织的病理改变，硫磺素S染色观察病变组织淀粉样蛋白沉积和NFT。⑤免疫组化染色观察Aβ42、Tau蛋白、Ach、CD68(小胶质细胞）的表达，并用Image-ProPlus6.0图像分析系统分析其阳性区积分光密度（IOD）值（反映目标检测物的相对表达量）。⑥流式细胞术（FCM）检测外周血CD4+IFN-γ（+Th1）、CD4+IL-4+（Th2）、CD4+IL-17+（Th17）和CD4+Foxp3+（Treg）T淋巴细胞亚群的变化。⑦流式微球芯片捕获技术（cytometric bead array, CBA）检测血清IL-2、IL-10、IL-4、TNF-α和IFN-γ细胞因子含量变化。⑧免疫荧光染色检测hAECs和hAMSCs在大脑移植区的存活及分化。结果：①P3hAECs不表达CD34、CD45、HLA-DR、CD80和CD86，表达CD44、CD49f、CD326（Ep-CAM）、E-cad、CD29和CD73及CK19，具有良好的上皮表型特性。P3hAMSCs不表达CD34、HLA-DR、CD19、CD14、CD45、CD80和CD86，表达CD73、CD44、CD29，CD105和CD90及波形蛋白，具有典型的MSCs表型特征。②与正常组比较，模型组从第3天开始大鼠逃避潜伏期明显增加（P﹤0.01），跨越平台次数减少（P﹤0.05），表明有明显的空间探索性学习记忆障碍；细胞治疗后2周，与模型组和培养基组比较，两个细胞治疗组从第3天起逃避潜伏期明显缩短（均P﹤0.01），跨越平台次数明显增加（均P﹤0.05），接近于正常组（均P﹤0.05）；治疗后4周， hAECs原位移植组从第4天起逃避潜伏期明显缩短（P﹤0.05），而hAMSCs组与模型组和培养基组比较则无差别(均P﹥0.05)；与hAMSCs组比较，hAECs组逃避潜伏期明显减少（P﹤0.05）。③模型组和培养基组动物大脑皮质或海马区神经元明显减少，排列紊乱，空泡化，淀粉样斑块和NFT沉积明显；hAECs和hAMSCs移植组神经元增多，排列正常，未见空泡化，淀粉样斑块和NFT明显减少。④与模型组和培养基组比较，两个细胞治疗组Aβ42沉积均明显减少（P﹤0.01，P﹤0.05）、异常磷酸化的Tau蛋白均明显减少（P﹤0.01，P﹤0.05）、Ach水平升高（P﹤0.01，P﹤0.05）、CD68(小胶质细胞)表达上调（P﹤0.01，P﹤0.05）；hAECs组Aβ沉积和Tau蛋白的减少以及Ach和CD68上调较之hAMSCs更为显着（均P﹤0.01，P﹤0.05）。⑤与模型组和培养基组比较，细胞移植后2周，hAECs治疗组外周血Th1和Th17细胞百分比下降（P﹤0.05），而Th2细胞上调（P﹤0.05），Th1类细胞因子IL-2和IFN-γ水平下调（均P﹤0.05），Th2类细胞因子IL-4下调（P﹤0.05），hAMSCs组的免疫指标与模型组和培养基组比较没有变化（P﹥0.05）细胞亚群变化均没有统计学意义（P﹥0.05）。⑥移植后4周，动物大脑移植区均可见hAECs和hAMSCs，并表达神经元特异性核蛋白（NeuN）。结论：hAECs和hAMSCs移植均可明显改善AD大鼠空间辨别性学习记忆能力和神经组织病理损伤，其机制与减轻Aβ沉积和Tau蛋白过度磷酸化有关。实验结果表明，相对于hAMSCs，hAECs作为神经退行疾病细胞治疗的供体细胞更具价值。(本文来源于《遵义医学院》期刊2014-05-01）
王家增[10]（2014）在《胚胎神经上皮干细胞脑内移植治疗大鼠帕金森病》一文中研究指出背景:研究表明胚胎干细胞移植可改善血管性痴呆大鼠的学习记忆功能,增强神经的可塑性,诱导自身定向迁移并分化为成熟神经元。目的:观察胚胎神经上皮干细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠及移植细胞的迁徙情况。方法:将绿色荧光蛋白转基因鼠的胚胎神经上皮干细胞分别移植到帕金森病大鼠的黑质、纹状体和侧脑室内,移植后检测移植细胞的存活、迁徙与分化;利用高效液相色谱法检测实验动物脑内多巴胺神经递质的含量;对比实验动物旋转行为的改变,评估胚胎神经上皮干细胞移植对帕金森病大鼠的治疗作用。结果与结论:移植细胞存活良好且分化出了酪氨酸羟化酶阳性细胞,向黑质纹状体环路迁徙趋势明显;脑内多巴胺含量增加,动物旋转行为改善明显。表明移植到帕金森病大鼠脑内的神经上皮干细胞多向黑质纹状体环路迁徙,且可增加脑内多巴胺神经递质的含量治疗帕金森病。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2014年14期）
神经上皮干细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:神经嵴干细胞(neural crest stem cells,NCSCs)是一种胚胎发育过程中具有多向分化潜能的细胞,可通过上皮间质转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)从神经嵴分离,并分化出中枢与外周神经元以及胶质细胞等。目前大量的研究均着眼于NCSCs,但不同发育阶段的NCSCs的形态和生物学功能不尽相同,但目前阐述不多,因此本实验首先观察不同天数NCSCs的形态和体外增殖模式,为选取适宜的NCSCs提供依据。进一步对不同天数大鼠NCSCs的上皮间质特性进行分析,选取EMT过程中常见的E-cadherin/N-cadherin作为目的基因,利用免疫荧光(Immunofluorescence,IF),Western blot及qRT-PCR技术,对不同天数NCSCs中E-cadherin/N-cadherin表达水平进行检测,探讨EMT在NCSCs迁移中的作用。研究方法:1、NCSCs分离培养健康成熟未孕的Wistar大鼠,雌雄大鼠按4:1比例午夜合笼,次日上午8:00做雌鼠阴道涂片,显微镜下观察发现精子者确认已交配,此日计妊娠0天(embryonic day0,E0)。选取E8.5,E9.5,E11,E13天的Wistar孕鼠,提取NCSC并培养传代。2、细胞爬片及细胞HE染色。3、细胞免疫荧光染色、Western blot及qRT-PCR检测不同天数大鼠NCSCs中E-cadherin/N-cadherin表达情况。4、统计分析数据以均数±标准差表示,采用SPSS软件对实验数据进行分析,采用2~(-△△ct)法分析目的基因mRNA相对表达量变化,观察各天数细胞目的基因表达量的变化趋势。结果:1、培养不同天数的NCSCs利用DMEM/F12完全培养基成功培养出8.5、9.5、11、13天的NCSCs。2、不同天数NCSCs生长速度及HE染色结果小天数NCSCS细胞贴壁、聚集、成球速度较快,且传代能力稍强,可传至4代左右。大天数NCSCs则相反,生长速度慢于小天数细胞,且传代能力较弱,传至3代时可见神经嵴干细胞聚集及生长能力明显减弱,难以聚集成簇形成神经球。HE染色可见NCSCs细胞核较大,胞质胞浆少,体外培养时可见细胞贴壁后,该类细胞相互靠近,排列紧密,呈集落状生长,并最终形成神经球悬浮。随着原代细胞天数的增长可见细胞胞体及胞核稍减小,胞质胞浆所占比例增多。3、免疫荧光染色、Western blot及qRT-PCR检测E-cadherin/N-cadherin随着NCSCs天数的增大,E-cadherin表达降低,N-cadherin表达升高。其中8.5天NCSCs中E-cadherin表达较明显,9.5天、11天、13天表达明显降低。N-cadherin表达趋势与E-cadherin相反,8.5天N-cadherin表达不明显,9.5天、11天、13天则表达明显。结论:(1)NCSCs随着原代细胞天数的增大,细胞形态及生长速度均存在一定的差异。天数越小,细胞核越大,胞质越小,细胞生长相对越快,且传代能力越强。(2)NCSCs生长过程中E-cadherin降低,N-cadherin升高的趋势提示EMT在NCSCs迁移过程中起到重要作用,考虑NCSCs于胚胎发育的第8.5至9.5天之间发生EMT,进而发生细胞迁移。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
神经上皮干细胞论文参考文献
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