本文主要研究内容
作者王翠（2019）在《猪星状病毒1型(PAstV1)GX1株的致病性研究》一文中研究指出：星状病毒(Astrovirus,AstV)是一种单股正链RNA病毒,无囊膜,直径约28-30nm。该病毒具有基因高度变异性和遗传多样性,且宿主范围广泛,具有跨种间传播并适应新宿主的能力,是一种潜在的人畜共患性病原。星状病毒被认为能引起人和其他多种动物腹泻,特别是人星状病毒(HAstV)被认为是仅次于轮状病毒的导致婴儿病毒性腹泻的第二大病原体。其他的致病性实验研究表明,星状病毒感染能引起火鸡、小鼠腹泻。猪星状病毒在全世界范围内广泛传播,具有较高的感染率,但其感染猪只导致的致病情况却不得而知。由于缺乏合适的星状病毒细胞培养系统和动物模型,导致人们对星状病毒的发病机制知之甚少。早期的火鸡雏鸡攻毒模型实验研究表明星状病毒只引起轻微的炎症反应,其腹泻是由于麦芽糖酶活性降低导致肠道对糖分的消化和吸收出现障碍而引起的渗透性腹泻。同时,有研究者用人星状病毒感染已分化的CaCo-2细胞发现,人星状病毒可引起F-肌动蛋白重排并增加肠屏障的通透性,使液体分泌到肠腔引起腹泻。实验室前期用猪星状病毒1型感染16日龄的哺乳仔猪的研究表明PAstV-GX1会引起仔猪轻度腹泻,但其致病机理仍然不清楚,因此本实验在此基础上进一步推进研究其致病机理。本研究将23头7日龄的哺乳仔猪,随机分为两个组,其中实验组12只,对照组11只。利用本实验室前期分离得到的猪星状病毒1型毒株(TCID50为1×10 4.5/ml)进行攻毒,攻毒后每天观察临床症状、采集粪便、量体温、称体重,并在攻毒后的第2,4,7天分别剖杀3只试验组和3只对照组仔猪,第10天剖杀3只试验组和2只对照组仔猪。用荧光定量PCR、免疫组化等方法研究猪星状病毒的致病性。结果表明:PAstV感染哺乳仔猪后产生一过性轻微症状,主要临床症状为轻微腹泻,食欲下降,生长缓慢;病理组织学变化显示感染仔猪的十二指肠、空肠和回肠肠粘膜上皮的绒毛发生变性、坏死和绒毛断裂或结构排列不整齐,大量淋巴细胞和嗜中性粒细胞浸润,肠系膜淋巴细胞不同程度的活化增生同时发生空泡变性,淋巴小结结构消失以及周边滤泡样活化增生,淋巴小结周边少量血管扩增充血等轻度炎症反应;荧光定量检测显示:1)排毒规律:与对照组相比,在实验组的粪便中检测到PAstV,且发现在攻毒后的第2-6天大量排毒,而第七天后仍然有排毒,但排毒量减少;2)组织病毒载量:实验组在攻毒后第二天、第四天和第七天肠道组织的病毒载量差异性极显著(P<0.01),其中以回肠、十二指肠、空肠、肠系膜淋巴结中病毒含量较高。然而,攻毒后第十天的实验组和对照组只有回肠和结肠差异性显著(0.01<P<0.05),实验组和对照组的其他组织的病毒载量差异性不显著(P>0.05)。总体来说,整个研究期间实验组中肠道组织的病毒载量先逐渐升高至第四天达到峰值便逐渐下降。IHC显示攻毒后第2,4,7和10天时实验组的肠绒毛细胞的细胞浆中检测到PAstV抗原,为淡黄色、棕黄色或棕褐色颗粒,呈弥漫性分布,但细胞核均未见染色。第2,4天检测到的抗原标记较多,而第7和第10天检测到的抗原标记较少,其中抗原标记的部位为十二指肠和空肠的绒毛以及回肠、盲肠、结肠、直肠的绒毛顶部。对照组的中未检测到免疫标记的PAstV抗原。通过以上研究初步证实了猪星状病毒对哺乳仔猪具有一定的致病性,且在攻毒后第10天仍有排毒现象,增加PAstV的传播风险。通过荧光定量PCR检测肠道组织细胞因子的变化情况发现:IFN-β和ISG54攻毒后呈上调趋势,IFN-β和ISG54在机体的抗病毒过程及机体天然免疫中起重要作用,表明猪星状病毒感染会刺激先天性免疫系统;通过荧光定量检测肠道组织的屏障通透性的变化情况发现:猪星状病毒感染后肠上皮细胞TJP1、TPJ2紧密连接蛋白和ZO-1(闭合小带蛋白1)的表达量减少,可能会导致肠屏障功能降低,通透性增加,因此推测PAstV攻毒后可能引起肠上皮细胞通透性增加,导致液体分泌到肠腔引起腹泻。本研究是首次对PAstV致病机理的研究,旨在为进一步了解猪星状病毒的致病性、致病机理,为后续深入研究猪星状病毒致病机制奠定基础,并为星状病毒的临床诊断、免疫和预防提供科学依据。
Abstract
xing zhuang bing du (Astrovirus,AstV)shi yi chong chan gu zheng lian RNAbing du ,mo nang mo ,zhi jing yao 28-30nm。gai bing du ju you ji yin gao du bian yi xing he wei chuan duo yang xing ,ju su zhu fan wei an fan ,ju you kua chong jian chuan bo bing kuo ying xin su zhu de neng li ,shi yi chong qian zai de ren chu gong huan xing bing yuan 。xing zhuang bing du bei ren wei neng yin qi ren he ji ta duo chong dong wu fu xie ,te bie shi ren xing zhuang bing du (HAstV)bei ren wei shi jin ci yu lun zhuang bing du de dao zhi ying er bing du xing fu xie de di er da bing yuan ti 。ji ta de zhi bing xing shi yan yan jiu biao ming ,xing zhuang bing du gan ran neng yin qi huo ji 、xiao shu fu xie 。zhu xing zhuang bing du zai quan shi jie fan wei nei an fan chuan bo ,ju you jiao gao de gan ran lv ,dan ji gan ran zhu zhi dao zhi de zhi bing qing kuang que bu de er zhi 。you yu que fa ge kuo de xing zhuang bing du xi bao pei yang ji tong he dong wu mo xing ,dao zhi ren men dui xing zhuang bing du de fa bing ji zhi zhi zhi shen shao 。zao ji de huo ji chu ji gong du mo xing shi yan yan jiu biao ming xing zhuang bing du zhi yin qi qing wei de yan zheng fan ying ,ji fu xie shi you yu mai ya tang mei huo xing jiang di dao zhi chang dao dui tang fen de xiao hua he xi shou chu xian zhang ai er yin qi de shen tou xing fu xie 。tong shi ,you yan jiu zhe yong ren xing zhuang bing du gan ran yi fen hua de CaCo-2xi bao fa xian ,ren xing zhuang bing du ke yin qi F-ji dong dan bai chong pai bing zeng jia chang bing zhang de tong tou xing ,shi ye ti fen bi dao chang qiang yin qi fu xie 。shi yan shi qian ji yong zhu xing zhuang bing du 1xing gan ran 16ri ling de bu ru zai zhu de yan jiu biao ming PAstV-GX1hui yin qi zai zhu qing du fu xie ,dan ji zhi bing ji li reng ran bu qing chu ,yin ci ben shi yan zai ci ji chu shang jin yi bu tui jin yan jiu ji zhi bing ji li 。ben yan jiu jiang 23tou 7ri ling de bu ru zai zhu ,sui ji fen wei liang ge zu ,ji zhong shi yan zu 12zhi ,dui zhao zu 11zhi 。li yong ben shi yan shi qian ji fen li de dao de zhu xing zhuang bing du 1xing du zhu (TCID50wei 1×10 4.5/ml)jin hang gong du ,gong du hou mei tian guan cha lin chuang zheng zhuang 、cai ji fen bian 、liang ti wen 、chen ti chong ,bing zai gong du hou de di 2,4,7tian fen bie pou sha 3zhi shi yan zu he 3zhi dui zhao zu zai zhu ,di 10tian pou sha 3zhi shi yan zu he 2zhi dui zhao zu zai zhu 。yong ying guang ding liang PCR、mian yi zu hua deng fang fa yan jiu zhu xing zhuang bing du de zhi bing xing 。jie guo biao ming :PAstVgan ran bu ru zai zhu hou chan sheng yi guo xing qing wei zheng zhuang ,zhu yao lin chuang zheng zhuang wei qing wei fu xie ,shi yu xia jiang ,sheng chang huan man ;bing li zu zhi xue bian hua xian shi gan ran zai zhu de shi er zhi chang 、kong chang he hui chang chang nian mo shang pi de rong mao fa sheng bian xing 、huai si he rong mao duan lie huo jie gou pai lie bu zheng ji ,da liang lin ba xi bao he shi zhong xing li xi bao jin run ,chang ji mo lin ba xi bao bu tong cheng du de huo hua zeng sheng tong shi fa sheng kong pao bian xing ,lin ba xiao jie jie gou xiao shi yi ji zhou bian lv pao yang huo hua zeng sheng ,lin ba xiao jie zhou bian shao liang xie guan kuo zeng chong xie deng qing du yan zheng fan ying ;ying guang ding liang jian ce xian shi :1)pai du gui lv :yu dui zhao zu xiang bi ,zai shi yan zu de fen bian zhong jian ce dao PAstV,ju fa xian zai gong du hou de di 2-6tian da liang pai du ,er di qi tian hou reng ran you pai du ,dan pai du liang jian shao ;2)zu zhi bing du zai liang :shi yan zu zai gong du hou di er tian 、di si tian he di qi tian chang dao zu zhi de bing du zai liang cha yi xing ji xian zhe (P<0.01),ji zhong yi hui chang 、shi er zhi chang 、kong chang 、chang ji mo lin ba jie zhong bing du han liang jiao gao 。ran er ,gong du hou di shi tian de shi yan zu he dui zhao zu zhi you hui chang he jie chang cha yi xing xian zhe (0.01<P<0.05),shi yan zu he dui zhao zu de ji ta zu zhi de bing du zai liang cha yi xing bu xian zhe (P>0.05)。zong ti lai shui ,zheng ge yan jiu ji jian shi yan zu zhong chang dao zu zhi de bing du zai liang xian zhu jian sheng gao zhi di si tian da dao feng zhi bian zhu jian xia jiang 。IHCxian shi gong du hou di 2,4,7he 10tian shi shi yan zu de chang rong mao xi bao de xi bao jiang zhong jian ce dao PAstVkang yuan ,wei dan huang se 、zong huang se huo zong he se ke li ,cheng mi man xing fen bu ,dan xi bao he jun wei jian ran se 。di 2,4tian jian ce dao de kang yuan biao ji jiao duo ,er di 7he di 10tian jian ce dao de kang yuan biao ji jiao shao ,ji zhong kang yuan biao ji de bu wei wei shi er zhi chang he kong chang de rong mao yi ji hui chang 、mang chang 、jie chang 、zhi chang de rong mao ding bu 。dui zhao zu de zhong wei jian ce dao mian yi biao ji de PAstVkang yuan 。tong guo yi shang yan jiu chu bu zheng shi le zhu xing zhuang bing du dui bu ru zai zhu ju you yi ding de zhi bing xing ,ju zai gong du hou di 10tian reng you pai du xian xiang ,zeng jia PAstVde chuan bo feng xian 。tong guo ying guang ding liang PCRjian ce chang dao zu zhi xi bao yin zi de bian hua qing kuang fa xian :IFN-βhe ISG54gong du hou cheng shang diao qu shi ,IFN-βhe ISG54zai ji ti de kang bing du guo cheng ji ji ti tian ran mian yi zhong qi chong yao zuo yong ,biao ming zhu xing zhuang bing du gan ran hui ci ji xian tian xing mian yi ji tong ;tong guo ying guang ding liang jian ce chang dao zu zhi de bing zhang tong tou xing de bian hua qing kuang fa xian :zhu xing zhuang bing du gan ran hou chang shang pi xi bao TJP1、TPJ2jin mi lian jie dan bai he ZO-1(bi ge xiao dai dan bai 1)de biao da liang jian shao ,ke neng hui dao zhi chang bing zhang gong neng jiang di ,tong tou xing zeng jia ,yin ci tui ce PAstVgong du hou ke neng yin qi chang shang pi xi bao tong tou xing zeng jia ,dao zhi ye ti fen bi dao chang qiang yin qi fu xie 。ben yan jiu shi shou ci dui PAstVzhi bing ji li de yan jiu ,zhi zai wei jin yi bu le jie zhu xing zhuang bing du de zhi bing xing 、zhi bing ji li ,wei hou xu shen ru yan jiu zhu xing zhuang bing du zhi bing ji zhi dian ding ji chu ,bing wei xing zhuang bing du de lin chuang zhen duan 、mian yi he yu fang di gong ke xue yi ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自广西大学的王翠，发表于刊物广西大学2019-10-14论文，是一篇关于猪星状病毒论文,致病性论文,致病机理论文,肠屏障通透性论文,广西大学2019-10-14论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自广西大学2019-10-14论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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