魏晓雷:黄颡鱼自噬相关基因LC3B和Beclin1的原核表达及多克隆抗体制备论文

魏晓雷:黄颡鱼自噬相关基因LC3B和Beclin1的原核表达及多克隆抗体制备论文

本文主要研究内容

作者魏晓雷,叶汉梅,罗智(2019)在《黄颡鱼自噬相关基因LC3B和Beclin1的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出:为深入研究黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco自噬的发生过程和机制,从黄颡鱼cDNA中克隆获得372和1344 bp的黄颡鱼LC3B(PfLC3B)和Beclin1(PfBeclin1)基因编码序列,并成功构建了pET32a(+)-PfLC3B和pET32a(+)-PfBeclin1重组表达载体,分别采用亲和层析和包涵体纯化的方法得到了纯度较高的重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白;以重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白免疫Balb/C小鼠,制备多克隆抗体。通过Western blot鉴定了PfLC3B和PfBeclin1抗血清可以分别特异性识别重组PfLC3B和PfBeclin1蛋白; PfLC3B抗血清可以特异性识别黄颡鱼内源性LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白, PfBeclin1抗血清可以特异性识别黄颡鱼内源性Beclin1蛋白。蛋白水平的组织分布显示,黄颡鱼LC3和Beclin1蛋白在肝脏中表达水平均较高,在肾脏和脾脏中的表达水平较低。综上所述,研究成功制备了黄颡鱼LC3B和Beclin1的多克隆抗体,为深入研究黄颡鱼自噬机制提供了有力工具。

Abstract

wei shen ru yan jiu huang sang yu Pelteobagrus fulvidracozi shi de fa sheng guo cheng he ji zhi ,cong huang sang yu cDNAzhong ke long huo de 372he 1344 bpde huang sang yu LC3B(PfLC3B)he Beclin1(PfBeclin1)ji yin bian ma xu lie ,bing cheng gong gou jian le pET32a(+)-PfLC3Bhe pET32a(+)-PfBeclin1chong zu biao da zai ti ,fen bie cai yong qin he ceng xi he bao han ti chun hua de fang fa de dao le chun du jiao gao de chong zu PfLC3Bhe PfBeclin1dan bai ;yi chong zu PfLC3Bhe PfBeclin1dan bai mian yi Balb/Cxiao shu ,zhi bei duo ke long kang ti 。tong guo Western blotjian ding le PfLC3Bhe PfBeclin1kang xie qing ke yi fen bie te yi xing shi bie chong zu PfLC3Bhe PfBeclin1dan bai ; PfLC3Bkang xie qing ke yi te yi xing shi bie huang sang yu nei yuan xing LC3-Ⅰhe LC3-Ⅱdan bai , PfBeclin1kang xie qing ke yi te yi xing shi bie huang sang yu nei yuan xing Beclin1dan bai 。dan bai shui ping de zu zhi fen bu xian shi ,huang sang yu LC3he Beclin1dan bai zai gan zang zhong biao da shui ping jun jiao gao ,zai shen zang he pi zang zhong de biao da shui ping jiao di 。zeng shang suo shu ,yan jiu cheng gong zhi bei le huang sang yu LC3Bhe Beclin1de duo ke long kang ti ,wei shen ru yan jiu huang sang yu zi shi ji zhi di gong le you li gong ju 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自水生生物学报的魏晓雷,叶汉梅,罗智,发表于刊物水生生物学报2019年06期论文,是一篇关于黄颡鱼论文,原核表达论文,多克隆抗体制备论文,水生生物学报2019年06期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自水生生物学报2019年06期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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