导读:本文包含了鉴定效率论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:聚(β-氨基酯),阳离子聚合物,报告基因,细胞毒性
鉴定效率论文文献综述
王润杨,张紫怡,段海潇,刘滨磊,胡翰[1]（2019）在《PBAE 447的合成鉴定及其基因传递效率》一文中研究指出PBAE 447是一种能够携带负电DNA进入细胞进行表达的阳离子聚合物。通过4-氨基-1-丁醇和1,4-丁二醇二丙烯酸酯进行加成反应,并加入1-(3-氨丙基)-4-甲基哌嗪封端合成PBAE 447,所得产物数均分子量大小为17586,并使用ICP4、LoVo、B16R,CT-26做为转染用细胞系,绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因。结果表明,PBAE447能够携带基因进入多种肿瘤细胞系进行表达。(本文来源于《湖北工业大学学报》期刊2019年05期）
郑东颖,侯悦,李媛媛,杨云,乔宠[2]（2019）在《长链非编码RNA-GAS5慢病毒表达载体构建及其转染效率鉴定》一文中研究指出目的构建长链非编码RNA-GAS5(lncRNA-GAS5)过表达及干扰慢病毒载体,并在人滋养细胞中进行转染效率鉴定。方法获取lncRNA-GAS5基因序列,合成重组lncRNA-GAS5全基因序列,同时设计并合成3条lncRNA-GAS5 RNAi序列,构建过表达及干扰慢病毒载体,转染至293T细胞包装病毒并测定其滴度,转染人滋养细胞株HTR-8/SVneo后,使用荧光显微镜观察荧光表达情况,采用实时定量聚合酶链式反应法检测lncRNA-GAS5表达,并筛选出最佳干扰效率的表达载体。结果过表达载体感染细胞后,其表达量提高了2.12倍;干扰载体感染细胞后,其表达量降低了67.3%。结论本实验成功构建了lncRNA-GAS5慢病毒过表达和干扰载体,可为后续进一步研究提供基础。(本文来源于《临床军医杂志》期刊2019年08期）
张本旭,于红霞,李夏云,邢翔[3]（2019）在《海葵基底附生酵母的分离鉴定与乙醇发酵效率研究》一文中研究指出酿酒酵母菌是酿酒生产以及工业生产乙醇的最主要菌种,酵母菌本身的特性对工业生产的效率与质量有着重要的影响。本研究选取了分离自威海海洋中海葵着生层的4株酵母菌,通过其生长曲线、发酵过程中CO_2排放量、发酵液酒精度等指标筛选出1株发酵性能较好、预计发酵产率较高的酵母菌进行发酵条件的优化。采用单因素试验对培养基中的碳源、氮源种类以及浓度、培养基pH值、发酵温度进行筛选,选取2个对发酵效率影响明显的因素,通过正交试验的方法优化该菌的培养基成分和发酵条件。结果表明,4株酵母菌中ZE发酵性能较为优秀,优化培养基配方为葡萄糖20%、氮源为蛋白胨与酵母浸粉2∶1的混合氮源,浓度为2%、pH值为5.0、发酵温度为38℃,发酵所得酒精度为4.056%vol,优化后相比原发酵配方酒精度提高了10.3%。(本文来源于《酿酒科技》期刊2019年08期）
董昕,田小龙,李伟,刘晨旭,杨华[4]（2019）在《玉米高油型诱导系CHOI1和CHOI3的单倍体鉴定效率评价》一文中研究指出为系统评价新型高油型诱导系油份鉴定单倍体的效率,以籽粒油分含量分别为8.71%和8.72%的2个高油型诱导系CHOI1和CHOI3为父本,分别在海南省和北京市对10个普通玉米杂交种进行诱导,利用油分和R1-nj遗传标记对诱导产生的籽粒分别进行单倍体的鉴定,并对2种鉴定方法进行评价。结果表明:与遗传标记法相比,油分标记法的单倍体鉴定准确率更高,且不易受环境影响。CHOI1和CHOI3诱导杂交籽粒与其母本单倍体籽粒间的平均油分均值差异分别为2.21%和2.02%,变异范围分别为1.86%～2.63%,1.54%～2.46%;各组合诱导率平均值分别为8.30%和8.59%,变异范围分别为6.25%～10.40%,5.81%～11.19%。诱导系CHOI1作父本时,以油份均值(μ)+1.645×标准差(σ)作为区分单倍体的阈值,所测组合的单倍体鉴定准确率均高于90%,漏选率均低于10%。以4.0%的籽粒油分含量为通用阈值,所测组合均可达到90%以上的鉴定准确率。(本文来源于《中国农业大学学报》期刊2019年06期）
梁诚诚,李文桂[5]（2019）在《铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I构建、鉴定及其在大肠埃希菌中的表达效率》一文中研究指出目的构建并鉴定铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I,观察其在大肠埃希菌中的表达效率。方法以铜绿假单胞菌PA01株的DNA为模板,PCR扩增OprF和OprI抗原编码基因,采用基因拼接法(gene SOEing)剪切OprF和OprI得到OprF-I融合基因,酶切后与表达载体pGEX-1λT连接,构建重组质粒pGEX-OprF-I并转化入大肠埃希菌中,抽提质粒进行双酶切和PCR鉴定。重组菌用异丙硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,采用SDS-PAGE和western blot分析和鉴定表达产物。结果基因拼接法获得1289 bp的OprF-I融合基因;其连接产物经双酶切和PCR鉴定证实该基因成功插入pGEX-1λT中。重组质粒转化DE3后经IPTG诱导,SDS-PAGE检测显示重组菌表达预期约68×10~3的融合蛋白,该蛋白约占菌体总量的18%。Western blot检测Pa感染的鼠血清可特异性识别该融合蛋白。结论成功构建并鉴定了铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I,转化大肠埃希菌后高效表达OprF-I融合蛋白,该蛋白具有反应原性。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年05期）
耿挺[6]（2019）在《新算法将代谢物结构鉴定效率提高10倍》一文中研究指出中国科学院上海有机化学研究所生物与化学交叉研究中心朱正江研究员课题组，研发了一种基于代谢反应网络的代谢物结构鉴定算法MetDNA，能够在多种生物样本中鉴定出超过2000种代谢物的结构，相比传统方法提高了近10倍，极大地提高了代谢物结构鉴定的效率和准确度。(本文来源于《上海科技报》期刊2019-05-01）
于凌娇,张履冰,王阔鹏,刘倩宏[7]（2019）在《噬菌体展示布鲁氏菌基因文库插入效率鉴定》一文中研究指出布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的以流产和发热为主要特征的人兽共患病,严重威胁着人和多种动物的生命健康,导致巨大经济损失及严重危害公共安全。实验室前期利用噬菌体展示技术建立布鲁氏菌16M株基因组文库,以期从该文库中筛选具有良好抗原性的诊断制剂。为检测构建文库的随机性及多样性,本研究利用Touch-down PCR对构建的噬菌体展示布鲁氏菌基因组文库进行评价。结果表明,构建文库具有较好随机性及多样性,为后续试验奠定基础。(本文来源于《吉林农业科技学院学报》期刊2019年01期）
全钢,贾铠宁,于果,许尧祥,岳金[8]（2019）在《兔p38MAPK基因沉默腺病毒载体构建及体外干扰效率的鉴定》一文中研究指出目的构建并筛选p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)基因沉默腺病毒载体,为进一步研究及应用p38MAPK基因沉默进行瘢痕增生基因治疗奠定基础。方法依据兔p38MAPK基因的cDNA序列,设计并合成3对干扰序列,并对腺病毒进行包装。分别将以上3对双链DNA oligo退火后连入pDC316-ZsGreenshRNA载体,经PCR及测序鉴定后,将以上质粒分别与包装质粒混合物共转染HEK293A细胞,包装产生病毒颗粒。各组病毒载体转染兔皮肤成纤维细胞后,运用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测p38MAPK表达水平。结果 PCR和测序证实目的双链DNA oligo片段已被准确克隆到pDC316-ZsGreen-ShRNA载体;realtime PCR检测到各组慢病毒感染兔皮肤成纤维细胞后均可以明显抑制p38MAPK mRNA的表达(P<0.05)。以AD-shRNA-P38MAPK-1组抑制效果最明显。结论成功构建并筛选出针对p38MAPK的最有效RNAi腺病毒表达载体;构建的腺病毒载体可以抑制兔皮肤成纤维细胞p38MAPK的表达。(本文来源于《重庆医学》期刊2019年09期）
曲雪菲,华佳,吴进,龚爱华,蒋鹏[9]（2019）在《ASIC3-shRNA干扰慢病毒质粒的构建及其效率的鉴定》一文中研究指出目的:构建酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)干扰慢病毒质粒并进行效率鉴定。方法:利用Gen Bank获取ASIC3基因序列并合成相应干扰序列,通过T4DNA连接酶将ASIC3基因片段连接至环状Plko. 1-Puro载体,将重组质粒转染293T细胞获取慢病毒,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测病毒滴度;将包装之后的慢病毒感染PC12、BV2、N2a细胞,分别分为ASIC3-shRNA组和EGFP-shRNA组(阴性对照),经慢病毒感染后用qRT-PCR和免疫印迹技术分别检测ASIC3 mRNA和蛋白表达。结果:合成的ASIC3干扰序列成功连接至Plko. 1-Puro载体; qRT-PCR及DNA测序鉴定结果证实,ASIC3-shRNA质粒构建成功; qRT-PCR与免疫印迹结果表明,在PC12、BV2、N2a细胞中,与EGFP-shRNA组相比,ASIC3-shRNA组ASIC3 mRNA和蛋白表达量均明显下调(P <0. 05)。病毒滴度约为1×109IU/mL。结论:ASIC3-shRNA干扰慢病毒质粒构建成功。(本文来源于《江苏大学学报(医学版)》期刊2019年01期）
王海波[10]（2018）在《干旱条件下苹果水分利用效率相关性状的QTL定位和候选基因的筛选与鉴定》一文中研究指出我国的苹果(Malus domestica)栽培面积及产量均居世界首位,苹果产业是支撑我国乡村振兴和农民脱贫的重要产业。然而,水资源短缺严重威胁我国干旱、半干旱地区苹果产业的可持续发展。通过提高水分利用效率(Water Use Efficiency,WUE)实现节水农业,是保证我国旱区苹果产业可持续发展的根本途径。本研究以干旱条件下高WUE品种‘秦冠’和低WUE品种‘蜜脆’为亲本构建的遗传群体为试材,采用RAD-Seq(Restriction-site Associated DNA Sequencing)开发SNP(Single Nucleotide Polymorphisms)标记,构建苹果遗传连锁图谱,评价不同供水条件下苹果的WUE相关表型,并鉴定干旱条件下与苹果WUE相关的数量性状位点(Quantitative Trait Loci,QTL),筛选有效分子标记及关键调控基因,并对筛选的关键基因进行了克隆及功能鉴定,旨在为干旱下苹果WUE分子机制研究和遗传改良提供基本资料。主要研究结果如下:1.以‘蜜脆’x‘秦冠’F_1株系建立作图群体,利用RAD测序技术开发SNP分子标记,经过标记筛选分群,构建了1张由10172个SNP标记和350个单株组成的双亲遗传连锁图谱。该图谱由17条连锁群(Linkage Group,LG)构成,总覆盖遗传距离2430.52cM,该图谱标记类型和数量分别为:4421个lmxll型标记、1603个hkxhk型标记和4688个nnxnp标记,最长连锁群为LG15,长度为179.97 cM,含有574个标记,最短连锁群为LG9,长度为115.99 cM,含有590个标记;采用其中4421个lmxll型标记和930个hkxhk型标记构建母本‘蜜脆’图谱,含有17条LG,遗传距离1837.61 cM,标记密度0.34cM;采用其中4688个nn×np型标记和935个hk×hk型标记构建父本‘秦冠’图谱,含有17条LG,遗传距离1687.33cM,标记密度0.30 cM。2.对2014、2015两年间,在中度干旱和正常供水条件下苹果群体植株的茎生长量、叶面积、叶片水分状况、叶片光合作用、水分利用效率等共计11项相关表型指标进行评价,并利用构建的遗传图谱进行QTL定位。群体表型评价结果表明,干旱使苹果群体的生长受抑,比叶面积(SLA)减小,净光合速率(Pn)、气孔导度(gs)和蒸腾速率(Tr)下降,叶片保水力(WHC)降低,但干旱提高了苹果的内在水分利用效率(WUEi)和稳定碳同位素组成(δ~(13)C)。另外,WUEi和δ~(13)C在两种供水条件下均表现出较明显的超亲遗传现象。各表型值在群体中均表现出连续的单峰分布,表明这些表型均为多基因控制的数量遗传性状;Shapiro-Wilk检验结果表明,干旱下相对含水量(RWC)、WHC、Pn、δ~(13)C的群体分布类型在年份间存在差异,说明这些性状较其它性状的环境效应更显着。在两年间,干旱条件下群体的WUEi均与Pn呈极显着正相关关系,与gs、Tr呈极显着负相关关系,而干旱下δ~(13)C均与总叶面积(TLA)、Pn呈显着或极显着正相关关系,与比叶面积(SLA)、Tr呈显着负相关关系;群体同一表型在年份间均存在显着或极显着的正相关关系,表明测定指标在年份间的重复性较好。通过QTL定位,2014、2015两年间,在中度干旱和正常供水条件下,我们共获得与11项指标相关的266个QTL,包括22个与苹果内在WUE(WUEi)相关的QTL和33个与长期WUE(δ~(13)C)相关的QTL。其中,检测到2个干旱下年份间共定位,即年份间稳定的WUEi相关QTL:WUEiDS14.LG17.2和WUEiDS15.LG17,以及6个年份间稳定的δ~(13)C相关QTL:δ13CDS14.LG8和δ13CDS15.LG8.1,δ13CDS14.LG15和δ13CDS15.LG15.1,δ13CDS14.LG16和δ13CDS15.LG16.1。检测到22个“QTL热点”区域,这些区域分别包含2~8个QTL。采用KASP分型技术证实了干旱胁迫下与δ~(13)C相关稳定QTL定位的可靠性,并验证了相关SNP标记lm1712(Chr8:12659110),np2623(Chr15:36996403)和np2691(Chr16:4666838)进行基因分型的有效性。3.在干旱下苹果WUE相关稳定QTL对应基因组区域进行基因筛选和表达分析,筛选到36个可能参与干旱下苹果WUE调控的候选基因,它们涉及到光保护、信号转导、物质代谢和转运,或转录调控等生物学过程。其中,18个基因(MAPKKK、PP2A、GL1、ARF、ERF020、ATG4a、LAX、ATGP4、STN7、DnaJ、RLK、ARF17、GOLS1、MPL3、bZIP-1、VPS34、PIP5K1、TAT7等)在WUE差异品种‘秦冠’和‘蜜脆’中对干旱胁迫的表达响应模式或表达水平存在品种间差异,可作为优先候选基因开展深入研究。这些基因的挖掘为干旱下苹果WUE调节机制的研究和WUE的遗传改良奠定了基础。在筛选到的候选基因中,进一步克隆了一个位于δ~(13)C相关的稳定QTL区间,显着受干旱诱导的基因MDP0000217124。通过序列分析和多物种系统进化分析,确认该基因为苹果DnaJ蛋白的编码基因(MdDnaJ)。对该基因启动子的顺式作用元件进行分析表明,其启动子区域包含18个与干旱、热激、低温、缺氧、防御和逆境响应等逆境胁迫响应和多种激素响应相关的顺式作用元件。将MdDnaJ在拟南芥中过表达,对拟南芥转基因株系进行了自然干旱胁迫结合复水和200 mM甘露醇渗透胁迫处理,结果表明,自然干旱20 d后,拟南芥转基因株系叶片丙二醛含量、电解质渗透率水平均低于野生型,而脯氨酸含量显着高于野生型,转基因株系δ~(13)C也显着高于野生型,复水3 d后,3个转基因株系的存活率分别达到64.0%、62.0%和55.3%,均明显高于野生型(17.9%);甘露醇渗透胁迫对拟南芥野生型的生长抑制作用比转基因株系更加显着,逆境下各株系植株鲜重和根长高于野生型。将MdDnaJ在苹果‘王林’愈伤组织中过表达,对转基因愈伤进行150 mM甘露醇渗透胁迫处理,甘露醇渗透胁迫处理后,2个转基因苹果愈伤的鲜重、脯氨酸含量显着高于对照,丙二醛含量、电解质渗透率显着低于对照。本研究结果表明,MdDnaJ基因具有提高植物耐旱、耐渗透胁迫和干旱下WUE的功能。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2018-11-01）
鉴定效率论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建长链非编码RNA-GAS5(lncRNA-GAS5)过表达及干扰慢病毒载体,并在人滋养细胞中进行转染效率鉴定。方法获取lncRNA-GAS5基因序列,合成重组lncRNA-GAS5全基因序列,同时设计并合成3条lncRNA-GAS5 RNAi序列,构建过表达及干扰慢病毒载体,转染至293T细胞包装病毒并测定其滴度,转染人滋养细胞株HTR-8/SVneo后,使用荧光显微镜观察荧光表达情况,采用实时定量聚合酶链式反应法检测lncRNA-GAS5表达,并筛选出最佳干扰效率的表达载体。结果过表达载体感染细胞后,其表达量提高了2.12倍;干扰载体感染细胞后,其表达量降低了67.3%。结论本实验成功构建了lncRNA-GAS5慢病毒过表达和干扰载体,可为后续进一步研究提供基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
鉴定效率论文参考文献
[1].王润杨,张紫怡,段海潇,刘滨磊,胡翰.PBAE447的合成鉴定及其基因传递效率[J].湖北工业大学学报.2019
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[10].王海波.干旱条件下苹果水分利用效率相关性状的QTL定位和候选基因的筛选与鉴定[D].西北农林科技大学.2018