王盛林:栅藻Desmodesmus armatus B38扩大培养工艺及其生物活性物质研究论文

王盛林:栅藻Desmodesmus armatus B38扩大培养工艺及其生物活性物质研究论文

本文主要研究内容

作者王盛林(2019)在《栅藻Desmodesmus armatus B38扩大培养工艺及其生物活性物质研究》一文中研究指出:微藻营养价值丰富,含有多种高附加值的生物活性化合物。本文以生物量、蛋白质和多糖含量为指标进行优势微藻的筛选;对筛选出的栅藻(Desmodesmus armatus B38)进行培养条件优化和全营养素分析,评价其作为食品或饵料的潜在利用价值;对蛋白质和多糖进行分离纯化,研究其活性及结构鉴定;对微藻进行饵料的研制与开发,主要结果如下:以15株热带微藻为研究对象,对其生物量、多糖含量和蛋白质含量进行分析比较。其中藻株B38蛋白质和多糖含量分别为49.00±1.35%和5.37±0.03,在15株热带微藻中最具开发潜力,且适合高密度培养。经形态和分子生物学鉴定,其为栅藻(Desmodesmus armatus B38)。通过全营养素分析确定了栅藻(Desmodesmus armatus B38)的营养价值,发现栅藻中含有丰富的营养成分,碳水化合物、油脂、灰分、粗纤维、蛋白质分别占藻粉干重的 13.86%、14.00%、4.28%、3.52%、49.00%,能量为 377.44 kcal。可作为动物体营养物质的来源。栅藻中含有多种脂肪酸,且含有生物体生长所需要的C18:2(n-6)(亚油酸)和C18:3(n-6)(亚麻酸),但含量较低;栅藻含有18种氨基酸,包括8种必须氨基酸和两种鲜味氨基酸,其中必须氨基酸的SRCAA值为100,表明具有较多的游离氨基酸。栅藻中维生素除VB3和VE外,其他维生素种类欠缺,含量较低。栅藻富含多种矿物质元素,其中钠、钾、钙、镁、铁、锌含量较为丰富,可作为动物体必须微量元素的来源,且重金属铅、镉、汞、砷、锡、镍、铬的含量均低于限定标准。对栅藻(Desmodes armatus B38)培养条件进行优化,通过单因素实验确定了最佳的氮源(硝酸盐)、碳源(碳酸氢盐)和光照强度(108μmol m-2 s-1)。采用Plackett-Burman实验设计,初步筛选了对栅藻生物量有显著影响的变量。这些变量通过中心组合设计(CCD)-响应面法(RSM)进一步优化,以获得高生物量和营养成分,并对BG11培养基进行了重组,重组后的培养基为:0.93gL-1硝酸钠,0.04gL-1磷酸氢二钾,0.15 gL-1硫酸镁,0.07 g L-1碳酸氢钠,且最优的生长条件为:温度27℃,光照强度108μmol m-2 s-1,pH 7.00和通气量0.50 L min-1。在上述条件下,培养12天后,生物量,蛋白质含量和多糖含量分别从原来的0.96±0.11gL-1,49±2.37%和5.37±0.25%提高到 1.65±0.15g L’ 53.61±1.25%和 6.15±0.43%,生物量增加 1.7 倍。最后,将优化条件运用到室外800 L光生物反应器中大规模培养。为探索蛋白质和多糖的利用价值,首先对蛋白质和多糖进行优化提取,并对提取的蛋白质和多糖进行结构和性质分析。采用Box-Behnken响应面设计,对蛋白质提取条件进行优化,最佳的提取条件为:pH 11.0;超声功率600 W;提取时间24 min;提取温度20℃;料液比1:15,通过实验验证,最佳提取条件有效,最终,栅藻蛋白质的提取率从53.55±0.98%提高到63.24±0.83%。通过测定,栅藻蛋白质等电点pI=4.3。在pH 12.0时,其溶解度可达89.74%,且一级结构较稳定,分子量主要集中在75 kDa;栅藻蛋白质的热稳定性较高,其热变性温度为109.17℃,和螺旋藻蛋白质、木瓜蛋白质和花生蛋白质相似,超过绿豆和红豆蛋白质;栅藻蛋白质的乳化性和乳化稳定性分别为61.11%和84.55%,和大豆蛋白质具有相似的乳化性,且乳化稳定性较高,可以作为不同食品的粘合剂。选用微波辅助恒温浸提结合法提取栅藻多糖,通过正交试验确定栅藻多糖的最佳提取工艺为:提取温度70℃,微波功率700 W,料液比1:35、微波提取时间20min,恒温浸提2h,用DEAE-52对粗多糖进行分离纯化,共得四种多糖DAP1、DAP2、DAP3和DAP4,分别分离自去离子水段,0.2molL-1、0.5mol L-1和1.0 molL-1 NaCl段。对四种多糖进行分析,四种多糖均由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖和甘露糖组成。高效凝胶色谱(GPC)分析表明,四种多糖分子量分布均匀,DAP1、DAP2、DAP3 和 DAP4 的分子量分别为:3.4kDa、33.4kDa、53.4kDa 和 59.1 kDa。扫描电镜显示DAP1表面结构光滑,结构致密,但不平整;DAP2、DAP3和DAP4是一种非晶态固体,呈薄片状。体外抗氧化结果显示,DAP2、DAP3有较强的抗氧化活性。通过投喂栅藻(Desmodesmus armatus B38)作为方斑东风螺开口饵料和鲤鱼幼鱼饵料,研究栅藻对方斑东风螺和鲤鱼生长及存活的影响,发现在人工配合饲料的基础上添加栅藻作为方斑东风螺的开口饵料不利于方斑东风螺的生长和存活,但栅藻对鲤鱼幼鱼的生长有促进作用,复合饵料组的特定生长率、增重率和肥满度均是最高,分别为0.48%、43.75%和7.65%,且栅藻饵料组的肥满度高于配合饵料组,为7.28%,差异显著。

Abstract

wei zao ying yang jia zhi feng fu ,han you duo chong gao fu jia zhi de sheng wu huo xing hua ge wu 。ben wen yi sheng wu liang 、dan bai zhi he duo tang han liang wei zhi biao jin hang you shi wei zao de shai shua ;dui shai shua chu de shan zao (Desmodesmus armatus B38)jin hang pei yang tiao jian you hua he quan ying yang su fen xi ,ping jia ji zuo wei shi pin huo er liao de qian zai li yong jia zhi ;dui dan bai zhi he duo tang jin hang fen li chun hua ,yan jiu ji huo xing ji jie gou jian ding ;dui wei zao jin hang er liao de yan zhi yu kai fa ,zhu yao jie guo ru xia :yi 15zhu re dai wei zao wei yan jiu dui xiang ,dui ji sheng wu liang 、duo tang han liang he dan bai zhi han liang jin hang fen xi bi jiao 。ji zhong zao zhu B38dan bai zhi he duo tang han liang fen bie wei 49.00±1.35%he 5.37±0.03,zai 15zhu re dai wei zao zhong zui ju kai fa qian li ,ju kuo ge gao mi du pei yang 。jing xing tai he fen zi sheng wu xue jian ding ,ji wei shan zao (Desmodesmus armatus B38)。tong guo quan ying yang su fen xi que ding le shan zao (Desmodesmus armatus B38)de ying yang jia zhi ,fa xian shan zao zhong han you feng fu de ying yang cheng fen ,tan shui hua ge wu 、you zhi 、hui fen 、cu qian wei 、dan bai zhi fen bie zhan zao fen gan chong de 13.86%、14.00%、4.28%、3.52%、49.00%,neng liang wei 377.44 kcal。ke zuo wei dong wu ti ying yang wu zhi de lai yuan 。shan zao zhong han you duo chong zhi fang suan ,ju han you sheng wu ti sheng chang suo xu yao de C18:2(n-6)(ya you suan )he C18:3(n-6)(ya ma suan ),dan han liang jiao di ;shan zao han you 18chong an ji suan ,bao gua 8chong bi xu an ji suan he liang chong xian wei an ji suan ,ji zhong bi xu an ji suan de SRCAAzhi wei 100,biao ming ju you jiao duo de you li an ji suan 。shan zao zhong wei sheng su chu VB3he VEwai ,ji ta wei sheng su chong lei qian que ,han liang jiao di 。shan zao fu han duo chong kuang wu zhi yuan su ,ji zhong na 、jia 、gai 、mei 、tie 、xin han liang jiao wei feng fu ,ke zuo wei dong wu ti bi xu wei liang yuan su de lai yuan ,ju chong jin shu qian 、ge 、gong 、shen 、xi 、nie 、ge de han liang jun di yu xian ding biao zhun 。dui shan zao (Desmodes armatus B38)pei yang tiao jian jin hang you hua ,tong guo chan yin su shi yan que ding le zui jia de dan yuan (xiao suan yan )、tan yuan (tan suan qing yan )he guang zhao jiang du (108μmol m-2 s-1)。cai yong Plackett-Burmanshi yan she ji ,chu bu shai shua le dui shan zao sheng wu liang you xian zhe ying xiang de bian liang 。zhe xie bian liang tong guo zhong xin zu ge she ji (CCD)-xiang ying mian fa (RSM)jin yi bu you hua ,yi huo de gao sheng wu liang he ying yang cheng fen ,bing dui BG11pei yang ji jin hang le chong zu ,chong zu hou de pei yang ji wei :0.93gL-1xiao suan na ,0.04gL-1lin suan qing er jia ,0.15 gL-1liu suan mei ,0.07 g L-1tan suan qing na ,ju zui you de sheng chang tiao jian wei :wen du 27℃,guang zhao jiang du 108μmol m-2 s-1,pH 7.00he tong qi liang 0.50 L min-1。zai shang shu tiao jian xia ,pei yang 12tian hou ,sheng wu liang ,dan bai zhi han liang he duo tang han liang fen bie cong yuan lai de 0.96±0.11gL-1,49±2.37%he 5.37±0.25%di gao dao 1.65±0.15g L’ 53.61±1.25%he 6.15±0.43%,sheng wu liang zeng jia 1.7 bei 。zui hou ,jiang you hua tiao jian yun yong dao shi wai 800 Lguang sheng wu fan ying qi zhong da gui mo pei yang 。wei tan suo dan bai zhi he duo tang de li yong jia zhi ,shou xian dui dan bai zhi he duo tang jin hang you hua di qu ,bing dui di qu de dan bai zhi he duo tang jin hang jie gou he xing zhi fen xi 。cai yong Box-Behnkenxiang ying mian she ji ,dui dan bai zhi di qu tiao jian jin hang you hua ,zui jia de di qu tiao jian wei :pH 11.0;chao sheng gong lv 600 W;di qu shi jian 24 min;di qu wen du 20℃;liao ye bi 1:15,tong guo shi yan yan zheng ,zui jia di qu tiao jian you xiao ,zui zhong ,shan zao dan bai zhi de di qu lv cong 53.55±0.98%di gao dao 63.24±0.83%。tong guo ce ding ,shan zao dan bai zhi deng dian dian pI=4.3。zai pH 12.0shi ,ji rong jie du ke da 89.74%,ju yi ji jie gou jiao wen ding ,fen zi liang zhu yao ji zhong zai 75 kDa;shan zao dan bai zhi de re wen ding xing jiao gao ,ji re bian xing wen du wei 109.17℃,he luo xuan zao dan bai zhi 、mu gua dan bai zhi he hua sheng dan bai zhi xiang shi ,chao guo lu dou he gong dou dan bai zhi ;shan zao dan bai zhi de ru hua xing he ru hua wen ding xing fen bie wei 61.11%he 84.55%,he da dou dan bai zhi ju you xiang shi de ru hua xing ,ju ru hua wen ding xing jiao gao ,ke yi zuo wei bu tong shi pin de nian ge ji 。shua yong wei bo fu zhu heng wen jin di jie ge fa di qu shan zao duo tang ,tong guo zheng jiao shi yan que ding shan zao duo tang de zui jia di qu gong yi wei :di qu wen du 70℃,wei bo gong lv 700 W,liao ye bi 1:35、wei bo di qu shi jian 20min,heng wen jin di 2h,yong DEAE-52dui cu duo tang jin hang fen li chun hua ,gong de si chong duo tang DAP1、DAP2、DAP3he DAP4,fen bie fen li zi qu li zi shui duan ,0.2molL-1、0.5mol L-1he 1.0 molL-1 NaClduan 。dui si chong duo tang jin hang fen xi ,si chong duo tang jun you shu li tang 、yan zao tang 、a la bai tang he gan lou tang zu cheng 。gao xiao ning jiao se pu (GPC)fen xi biao ming ,si chong duo tang fen zi liang fen bu jun yun ,DAP1、DAP2、DAP3 he DAP4 de fen zi liang fen bie wei :3.4kDa、33.4kDa、53.4kDa he 59.1 kDa。sao miao dian jing xian shi DAP1biao mian jie gou guang hua ,jie gou zhi mi ,dan bu ping zheng ;DAP2、DAP3he DAP4shi yi chong fei jing tai gu ti ,cheng bao pian zhuang 。ti wai kang yang hua jie guo xian shi ,DAP2、DAP3you jiao jiang de kang yang hua huo xing 。tong guo tou wei shan zao (Desmodesmus armatus B38)zuo wei fang ban dong feng luo kai kou er liao he li yu you yu er liao ,yan jiu shan zao dui fang ban dong feng luo he li yu sheng chang ji cun huo de ying xiang ,fa xian zai ren gong pei ge si liao de ji chu shang tian jia shan zao zuo wei fang ban dong feng luo de kai kou er liao bu li yu fang ban dong feng luo de sheng chang he cun huo ,dan shan zao dui li yu you yu de sheng chang you cu jin zuo yong ,fu ge er liao zu de te ding sheng chang lv 、zeng chong lv he fei man du jun shi zui gao ,fen bie wei 0.48%、43.75%he 7.65%,ju shan zao er liao zu de fei man du gao yu pei ge er liao zu ,wei 7.28%,cha yi xian zhe 。

论文参考文献

  • [1].不同硫素浓度下产油尖状栅藻的生长及生理生化特征[D]. 王倩雅.暨南大学2017
  • [2].长江三角洲地区绿球藻目的研究[D]. 朱雅茹.上海师范大学2012
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自海南大学的王盛林,发表于刊物海南大学2019-07-15论文,是一篇关于栅藻论文,生物量论文,蛋白质论文,多糖论文,水产饵料论文,海南大学2019-07-15论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自海南大学2019-07-15论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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