本文主要研究内容
作者周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军（2019）在《小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备》一文中研究指出：为开发可用于小反刍兽疫病毒(PPRV)诊断及其抗原的检测方法,参考GenBank中PPRV Nigeria75/1株N基因序列设计引物,采用RT-PCR方法获得目的基因后连接到载体pCzn1中,转化到大肠杆菌DH5α克隆菌株,经PCR和双酶切鉴定测序后,将阳性克隆转化至大肠杆菌BL21 (DE3)菌株后采用IPTG进行诱导表达。结果表明,成功地构建了含有小反刍兽疫病毒N基因的重组质粒pCzn1-N;诱导条件经过优化后N蛋白为可溶性表达,重组蛋白大小约为64 ku,能够与PPRV阳性血清较好地反应;制备的家兔多克隆抗体效价为1∶128 000,经过纯化后抗体效价为1∶64 000且具有较高的结合特异性;用间接ELISA和Western-blot对N蛋白纯化后制备的家兔多克隆抗体进行分析,发现重组N蛋白的免疫原性良好,且制备的多克隆抗体特异性良好。这表明重组的N蛋白具有较高的特异性及反应活性。
Abstract
wei kai fa ke yong yu xiao fan chu shou yi bing du (PPRV)zhen duan ji ji kang yuan de jian ce fang fa ,can kao GenBankzhong PPRV Nigeria75/1zhu Nji yin xu lie she ji yin wu ,cai yong RT-PCRfang fa huo de mu de ji yin hou lian jie dao zai ti pCzn1zhong ,zhuai hua dao da chang gan jun DH5αke long jun zhu ,jing PCRhe shuang mei qie jian ding ce xu hou ,jiang yang xing ke long zhuai hua zhi da chang gan jun BL21 (DE3)jun zhu hou cai yong IPTGjin hang you dao biao da 。jie guo biao ming ,cheng gong de gou jian le han you xiao fan chu shou yi bing du Nji yin de chong zu zhi li pCzn1-N;you dao tiao jian jing guo you hua hou Ndan bai wei ke rong xing biao da ,chong zu dan bai da xiao yao wei 64 ku,neng gou yu PPRVyang xing xie qing jiao hao de fan ying ;zhi bei de jia tu duo ke long kang ti xiao jia wei 1∶128 000,jing guo chun hua hou kang ti xiao jia wei 1∶64 000ju ju you jiao gao de jie ge te yi xing ;yong jian jie ELISAhe Western-blotdui Ndan bai chun hua hou zhi bei de jia tu duo ke long kang ti jin hang fen xi ,fa xian chong zu Ndan bai de mian yi yuan xing liang hao ,ju zhi bei de duo ke long kang ti te yi xing liang hao 。zhe biao ming chong zu de Ndan bai ju you jiao gao de te yi xing ji fan ying huo xing 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国兽医科学的周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军，发表于刊物中国兽医科学2019年10期论文，是一篇关于小反刍兽疫病毒论文,基因论文,原核表达论文,中国兽医科学2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国兽医科学2019年10期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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