导读:本文包含了单肟靛玉红论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:保护作用,细胞存活率,亚组,靛玉红
单肟靛玉红论文文献综述
张书刚,林兴建,陈道文,许利刚,陆杰[1]（2014）在《3'单肟靛玉红对β淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用》一文中研究指出目的探讨细胞周期依赖性蛋白激酶(cdks)抑制剂3'单肟靛玉红(IMX)对β淀粉样蛋白(Aβ)致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分别加入0、0.2、0.4、0.8、1.6、3、6、12μmol/L IMX(IMX组),0、10、20、30、40、50μmol/L Aβ_(25-35)(Aβ组);以及加入0.25、0.5和1.0μmol/L IMX 24 h后,再加入20、40(本文来源于《中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编（上）》期刊2014-09-19）
张书刚,林兴建,陈道文,许利刚,陆杰[2]（2013）在《3'单肟靛玉红对β淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用》一文中研究指出目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)抑制剂3'单肟靛玉红(IMX)对β淀粉样蛋白(Aβ)致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分别加入0.2、0.4、0.8、1.6、3、6、12μmol/L IMX(IMX组);10、20、30、40、50μmol/L Aβ25-35(Aβ组);以及加入0.25、0.5和1.0μmol/L IMX 24 h后,再加入20、40μmol/L Aβ25-35(IMX+Aβ组);同时以未加入IMX及Aβ25-35的SH-SY5Y细胞作为空白对照组,分别孵育48 h、72 h。用细胞计数试剂盒测定细胞的存活率。用原位末端标记法检测细胞凋亡,计算凋亡指数。结果与空白对照组孵育48 h、72 h比较,IMX 0.2～1.6μmol/L亚组的细胞存活率的差异无统计学意义;IMX≥3.0μmol/L亚组的细胞存活率明显降低(P<0.01～0.001)。与空白对照组相比,10～50μmol/L Aβ25-35可使细胞活性逐渐降低(P<0.05～0.001)。0.25、0.5、1.0μmol/L IMX+40μmol/L Aβ亚组的细胞存活率均显著高于40μmol/L Aβ亚组(P<0.05～0.005)。0.5、1.0μmol/L IMX+20、40μmol/L Aβ亚组的细胞凋亡指数分别明显低于20、40μmol/L Aβ亚组(P<0.01～0.001)。结论 IMX能显着提高用Aβ处理的SH-SY5Y细胞的存活率,减少Aβ导致的SH-SY5Y细胞凋亡,有神经保护作用。(本文来源于《临床神经病学杂志》期刊2013年06期）
许利刚,张书刚,张仕林,张颖冬[3]（2011）在《3'单肟靛玉红的药物代谢动力学研究》一文中研究指出目的研究3'单肟靛玉红(IMX)在大鼠体内的药物代谢动力学过程。方法利用高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠血液中IMX的含量;分别研究静脉注射、腹腔注射2种给药途径后,IMX在大鼠体内的药物代谢动力学,应用3P87药物代谢动力学程序,计算出主要的药物代谢动力学参数;并进一步观察静脉给药后药物在动物体内主要器官心、肺、肾、脑组织中IMX的含量。结果鼠尾静脉注射IMX,药物代谢动力学符合二室模型。IMX在鼠体内吸收快、分布快、药物起效快,在体内主要以消除过程为主,药物在体内滞留时间较长。静脉注射10 mg/kg IMX,于不同时间处死,用HPLC测定各组织中IMX的含量,结果发现,IMX在心脏组织中含量较高,在1 h达峰值;脑组织、肺组织中IMX含量在0.5 h即达峰值;肾脏组织中IMX含量在3 h达峰值。IMX主要分布在体循环和血流丰富的脏器中。结论应用HPLC法测定大鼠血浆中IMX的浓度,操作简便、省时,精密度及重现性均较好。静脉注射IMX,药物代谢动力学符合二室模型,IMX在鼠血中主要以消除过程为主,IMX主要分布在血流丰富的组织中,分布速率较快。IMX易于透过血脑脊液屏障。(本文来源于《实用药物与临床》期刊2011年01期）
张书刚[4]（2009）在《Cdks抑制剂3’单肟靛玉红对Aβ神经毒性的保护作用及其机制研究》一文中研究指出阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种进行性神经变性疾病,是老年期痴呆中最常见的类型。全世界约有2400万AD患者,其中我国约有400万左右。随着疾病进展,患者出现记忆、思维、行为等方面的症状,严重影响日常工作及社会生活,给家庭和社会带来沉重的负担,已经成为一个严重的社会和医疗问题。但到目前为止,AD的发病机制尚不完全清楚,临床缺乏理想的治疗药物。因此,研究AD的发病机制及研发有效的防治药物显得尤为重要。一些对AD患者脑内新病理现象的认识,为阐明AD的神经元死亡机制提供了新的线索,也为AD的治疗带来新的希望。越来越多的证据显示神经元凋亡的出现伴随细胞周期蛋白的激活。在各种神经应激情况下,完成有丝分裂的成熟神经元重新进入细胞周期,但是终极分化的神经元由于自身有丝分裂能力的限制,无法协调的经过细胞周期的各个阶段,最终导致凋亡性细胞死亡。因此异常出现的细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases, Cdks)在AD的细胞死亡中起关键作用。据此推论,应用药物干预Cdks的活性,可能为AD的治疗提供新的有效的药物。但是Cdks抑制剂作为神经保护剂的研究刚刚起步,并且多在细胞水平和急性脑缺血模型中进行。靛玉红(indirubin)是中国医学科学院在传统中成药当归芦荟丸中发现的抗白血病有效成分。目前已经清楚它是一种选择性的Cdks抑制剂,可以在纳摩尔水平抑制Cdk1、Cdk2、Cdk5的活性,但其水溶性和脂溶性都很差,且有一定的肝毒性。3’单肟靛玉红(Indirubin-3’-monoxime, IMX),为其衍生物,不仅是强有力的Cdks抑制剂,而且毒性低、分子量小、有较好的膜通透性,IMX可以与ATP竞争Cdks激酶的催化位点。本文工作旨在研究Cdks抑制剂IMX对β淀粉样蛋白25-35(β-amyloid protein 25-35, Aβ25-35)所致SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用,并在此基础上研究其对tau蛋白磷酸化的影响及其可能机制。本文包括以下两部分工作:第一部分IMX对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用目的:探讨Cdks抑制剂IMX对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:采用细胞培养法,以神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系为材料制备Aβ25-35损伤的离体细胞模型。通过Cell Counting Kit 8(CCK-8)分析不同剂量IMX和(或)Aβ25-35在不同时间点对细胞存活率的影响;采用相差显微镜观察细胞形态并配以Hoechst染色检测细胞核固缩;用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:(1) IMX浓度高至3.0μM以上时可使细胞活性逐渐降低,与对照组相比差异有显着性意义(在3.0μM和6.0μM组,P<0.01;在12μM组,P<0.001);(2)10-50μM Aβ25-35可使细胞活性逐渐降低,与对照组相比差异有显着性意义(在10-30μM组,P < 0.01;在40-50μM组,P < 0.001);(3)同时给予0.25、0.5、1.0μM的IMX可使细胞活性明显升高,与损伤组相比差异有显着性意义(与损伤组比较,在0.25μM组,P<0.05;在0.5、1.0μM组,P<0.01);(4)Hoechst 33258染色结果显示,Aβ25-35处理组凋亡细胞明显增多,出现核固缩、凋亡小体,凋亡细胞升高至42.4±3.86% (P <0.001),而0.5和1.0μM IMX给药后凋亡细胞明显减少,阳性细胞分别减少至27.4±3.09%和19.2±2.02% (P< 0.001);(5)流式细胞仪实验证实,与正常对照组相比,20μM Aβ25-35处理组细胞凋亡率显着升高,可达20.33±2.02%(P<0.01),1.0μM IMX与Aβ25-35同时孵育后,细胞凋亡率降低至12.4±1.82% (与模型组比较,P<0.01 )。在40μM处理组,Aβ25-35处理组凋亡细胞百分率可从对照组的8.1±1.42%增加至50.2±4.77%,而0.5和1.0μM IMX给药后凋亡细胞百分率分别恢复至33.9±3.09%和24.5±3.47%(P<0.001)。结论:IMX能显着减少Aβ25-35所致的SH-SY5Y细胞凋亡,从而抑制其神经毒性作用。第二部分IMX减轻Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞tau蛋白磷酸化的作用及其机制研究目的:探讨IMX减轻Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞tau蛋白过度磷酸化的作用及其可能机制。方法:(1)SH-SY5Y细胞分别与0、0.5和1.0μM IMX预孵育24 hr后,加入40μM老化的Aβ25–35,继续孵育48 hr,应用caspase-3活性检测试剂盒观察各组细胞caspase-3活性变化(。2)用0.5μM和1.0μM IMX预处理SH-SY5Y细胞1 hr后,加入终浓度为20μM凝聚态Aβ25-35,再孵育6 hr,应用蛋白免疫印迹的方法,观察tau蛋白在pS396、pS199、pT205位点的磷酸化水平,并检测磷酸化糖原合酶激酶3beta(p-glycogen synthase kinase 3β, p-GSK3β)(Ser9)的表达;(3)同样的方法处理细胞后24 hr和2 hr,应用蛋白免疫印迹的方法,观察c-jun N末端激酶(c-jun N-terminal kinase, JNK)和细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinases, ERKs)的活化情况,以探讨这些蛋白在tau蛋白磷酸化中的作用。结果:(1)caspase-3蛋白激酶活性在Aβ25–35诱导的AD细胞模型中明显增高,IMX可以降低其激酶活性;(2)空白对照组tau蛋白在pS396、pS199、pT205位点的磷酸化水平较低,Aβ25–35损伤后tau蛋白磷酸化明显增加,IMX给药可以减少损伤组中tau蛋白磷酸化水平;(3)Aβ25–35损伤后p-GSK3β(Ser9)的表达较空白对照组减少,意味着GSK3β的磷酸化增加,而IMX给药可以增加损伤组中p-GSK3β(Ser9)的表达水平,从而抑制GSK3β的磷酸化;(4)空白对照组p-JNK和p-ERK的表达水平较低,Aβ25–35损伤后其表达明显增加,但IMX给药后蛋白表达无明显变化。结论:(1)IMX可通过抑制caspase-3活化,在一定程度减轻凝聚态的Aβ25-35所致的SH-SY5Y细胞凋亡;(2)IMX可以通过抑制tau蛋白在pS396、pS199、pT205位点的磷酸化水平,从而减轻Aβ25–35的细胞毒性;(3)GSK3β参与了Aβ25–35诱导细胞tau蛋白磷酸化的作用,IMX可通过诱导失活形式的p-GSK3β(Ser9)表达增加而抑制GSK3β的活性,进而抑制Aβ诱导的细胞tau蛋白磷酸化;(4)p-JNK和p-ERK没有参与IMX抑制Aβ诱导的细胞tau蛋白磷酸化的作用。(本文来源于《南京医科大学》期刊2009-05-01）
许利刚[5]（2007）在《周期素依赖性蛋白激酶抑制剂3'单肟靛玉红对Alzheimer病治疗的实验研究》一文中研究指出阿尔茨海默病(Alzheimet's disease, AD)是老年期痴呆的最常见的类型，其临床特点包括记忆力障碍、认知功能损害及行为异常。AD的发病率随着年龄的增加而上升。AD给家庭和社会带来沉重的负担，已经成为一个严重的社会和医疗问题。但是到目前为止，AD的发病机制尚不完全清楚，临床缺乏理想的治疗药物。因此，研究AD的发病机制及研发有效的防治药物显得尤为重要。AD病理上以大脑出现细胞外老年斑(senile plaques, SP)、细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFTs)和神经元及突触减少为特征，特定区域神经元的丧失不仅是脑萎缩的形态学基础，还是引起患者临床学习和记忆障碍的关键。越来越多的证据显示，AD发病过程中周期素依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases, Cdks)的异常激活可以导致细胞周期紊乱，诱发神经细胞死亡。Cdks抑制剂最早用于癌症的治疗，最近已经有利用Cdks抑制剂作为神经保护剂的研究报道，但是大部分资料来自体外细胞培养实验，仅有少数研究来自神经变性和凋亡动物模型。虽然Cdks抑制剂治疗AD的可能机制尚不完全清楚，但是Cdks抑制剂已经用于研究异常的Cdks活性与神经变性性疾病的关系。Cdks抑制剂极可能成为治疗AD的重要靶标。靛玉红(indirubin)是中国医学家们在传统中成药当归芦荟丸中发现抗肿瘤有效成分。目前已经清楚靛玉红是一种选择性的Cdks抑制剂，它可以在纳摩尔水平抑制Cdk1、Cdk2、Cdk5的活性，但其水溶性和脂溶性都很差，且有一定的肝毒性。然而，靛玉红的衍生物：3’单肟靛玉红(Indirubin-3’-monoxime, IMX)，不仅是强有力的Cdks抑制剂，而且毒性低、分子量小、有较好的膜通透性，IMX可以与ATP竞争Cdks激酶的催化位点。本文工作旨在研究Cdks在Aβ_(1-40)诱导的AD动物模型中表达情况，并在此基础上研究Cdks抑制剂IMX对AD动物模型的实验性治疗作用。本实验不仅为AD的治疗探索新的途径和寻找有效的新药物，也为把IMX研发成临床新药积累实验基础。本文包括以下叁部分工作：第一部分Cdk4和cyclin B1在AD动物模型中的表达分析目的：研究周期素依赖性蛋白激酶和周期素在Aβ_(1-40)诱导的AD动物模型中的表达及其与神经元凋亡的关系。方法：应用Aβ_(1-40)侧脑室内持续给药建立AD大鼠模型；应用免疫组织化学检测周期素依赖性蛋白激酶Cdk4和周期素cyclin B1的表达；应用TUNEL方法检测神经元的凋亡；应用荧光双标的方法确定Cdk4表达的细胞类型，同时还进行了Cdk4及cyclin B1与TUNEL的荧光双标实验。结果：(1)Cdk4和cyclin B1于造模后7天就达较高水平，21天达高峰，直到28天仍然持续表达；(2)AD动物模型组TUNEL阳性细胞于造模后14天开始出现，21天达高峰并且少量持续存在；(3)存在Cdk4与神经元标志性抗体的双标阳性细胞；(4)发现Cdk4和cyclin B1与TUNEL的双标阳性细胞。结论：Cdks参与了Aβ毒性引起的神经元凋亡机制，Cdks抑制剂可能减少神经元凋亡的发生。第二部分Cdks抑制剂3’单肟靛玉红的药物代谢动力学研究目的：本实验研究IMX在体内的药物代谢动力学过程及其能否进入脑内，为其临床应用提供了理论依据。方法：利用高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠血液中IMX的含量；分别研究静脉注射、腹腔注射两种给药途径后，IMX在大鼠体内的药物代谢动力学特点，应用3P87药物代谢动力学程序，计算出主要的药物代谢动力学参数；并进一步观察了静脉给药后药物在动物体内主要器官心、肺、肾、脑组织中IMX的含量。结果：(1)鼠尾静脉注射IMX，药物代谢动力学符合二室模型。IMX在鼠体内吸收快，分布也快，药物起效快，在体内主要以消除过程为主，药物在体内滞留时间较长；(2)腹腔注射IMX后，在150min血药浓度达峰值。静脉注射10mg／kg IMX，于不同时间处死，用HPLC测定各组织中IMX的含量，结果发现IMX在心脏组织中含量较高，在1h达峰值；脑组织、肺组织中IMX含量在0.5h即达峰值；肾脏组织中IMX含量在3h达峰值，结合其化学结构特征推测，IMX易于透过血脑脊液屏障，以被动扩散为主，IMX主要分布在体循环和血流丰富的脏器中。结论：应用HPLC法测定大鼠血浆中IMX的浓度，操作简便、省时、精密度及重现性均较好。静脉注射IMX，药物代谢动力学符合二室模型，IMX在鼠血中主要以消除过程为主，IMX主要分布在血流丰富的组织中，分布速率较快。IMX易于透过血脑脊液屏障，以被动扩散为主。第叁部分IMX对AD动物模型行为学的影响及其神经保护机制研究目的：研究IMX对AD大鼠神经元凋亡和学习记忆功能的影响及可能的神经保护机制。方法：应用Aβ_(1-40)侧脑室给药建立AD大鼠模型。成年健康雄性SD大鼠40只，随机分成：假手术组、AD模型组、IMX干预组Ⅰ(7.5mg／kg i．p．)、IMX干预组Ⅱ(15mg／kg i．p．)。IMX干预组在造模前1天经腹腔给药。造模后第7、14、21天行Morris水迷宫实验观测大鼠的学习和记忆功能的改变；行为学测试结束后应用组织切片原位末端标记(TUNEL)技术对额颞叶皮层和海马CA1区神经元的凋亡进行分析；应用Western blotting技术检测Cdk4和周期素cyclin B1的表达；同时还观察IMX对Cdc2激酶和ChAT活性的影响。结果：(1)Morris水迷宫实验显示IMX治疗组Ⅰ和IMX治疗组Ⅱ大鼠的平均逃避潜伏期分别为58.7±6.34s和48.8±7.83s较AD模型组(66.9±6.52s)明显缩短，t=2.85(IMX治疗组Ⅰ，P＜0.05)，t=5.62(IMX治疗组Ⅱ，P＜0.01)。在第22天的空间探索实验中，IMX治疗组Ⅰ和IMX治疗组Ⅱ大鼠在原安全岛所在象限的搜索距离较AD模型组明显增加；(2)TUNEL原位检测显示AD模型大鼠的皮层和海马CA1区神经元凋亡明显增加，凋亡百分率为35.88±6.26％和11.21±2.15％；(3)IMX干预组Ⅰ大鼠的皮层和海马CA1区神经元凋亡百分率为13.22±5.23％和3.65±0.75％，低于AD模型组；IMX干预组Ⅱ大鼠的皮层和海马CA1区神经元凋亡百分率为11.91±3.34％和2.58±0.57％，低于AD模型组；(4)与AD模型组相比，IMX干预组Cdk4和cyclin B1的表达减少、Cdc2激酶活性下降和ChAT活性升高。结论：Cdks抑制剂IMX可以改善AD大鼠的学习记忆功能，减少Aβ诱导的额颞叶皮层和海马CA1区神经元凋亡。IMX改善AD大鼠的学习记忆功能可能与其抑制Cdks有关。(本文来源于《南京医科大学》期刊2007-04-01）
单肟靛玉红论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)抑制剂3'单肟靛玉红(IMX)对β淀粉样蛋白(Aβ)致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分别加入0.2、0.4、0.8、1.6、3、6、12μmol/L IMX(IMX组);10、20、30、40、50μmol/L Aβ25-35(Aβ组);以及加入0.25、0.5和1.0μmol/L IMX 24 h后,再加入20、40μmol/L Aβ25-35(IMX+Aβ组);同时以未加入IMX及Aβ25-35的SH-SY5Y细胞作为空白对照组,分别孵育48 h、72 h。用细胞计数试剂盒测定细胞的存活率。用原位末端标记法检测细胞凋亡,计算凋亡指数。结果与空白对照组孵育48 h、72 h比较,IMX 0.2～1.6μmol/L亚组的细胞存活率的差异无统计学意义;IMX≥3.0μmol/L亚组的细胞存活率明显降低(P<0.01～0.001)。与空白对照组相比,10～50μmol/L Aβ25-35可使细胞活性逐渐降低(P<0.05～0.001)。0.25、0.5、1.0μmol/L IMX+40μmol/L Aβ亚组的细胞存活率均显著高于40μmol/L Aβ亚组(P<0.05～0.005)。0.5、1.0μmol/L IMX+20、40μmol/L Aβ亚组的细胞凋亡指数分别明显低于20、40μmol/L Aβ亚组(P<0.01～0.001)。结论 IMX能显着提高用Aβ处理的SH-SY5Y细胞的存活率,减少Aβ导致的SH-SY5Y细胞凋亡,有神经保护作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单肟靛玉红论文参考文献
[1].张书刚,林兴建,陈道文,许利刚,陆杰.3'单肟靛玉红对β淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用[C].中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编（上）.2014
[2].张书刚,林兴建,陈道文,许利刚,陆杰.3'单肟靛玉红对β淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞毒性的保护作用[J].临床神经病学杂志.2013
[3].许利刚,张书刚,张仕林,张颖冬.3'单肟靛玉红的药物代谢动力学研究[J].实用药物与临床.2011
[4].张书刚.Cdks抑制剂3’单肟靛玉红对Aβ神经毒性的保护作用及其机制研究[D].南京医科大学.2009
[5].许利刚.周期素依赖性蛋白激酶抑制剂3'单肟靛玉红对Alzheimer病治疗的实验研究[D].南京医科大学.2007