导读:本文包含了猪肌肉发育论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:脂滴包被蛋白基因,猪,肌肉发育,基因表达
猪肌肉发育论文文献综述
彭玥晗,徐磊,许金蔓,鞠辉明[1]（2019）在《脂滴包被蛋白基因对猪肌肉发育的影响》一文中研究指出PLIN(perilipin,脂滴包被蛋白)是脂滴表面含量最多的一种蛋白,被认为是影响猪生长、胴体及肉质性状的重要候选基因。PLIN基因几乎在所有组织中均有广泛表达,对脂肪组织中甘油叁酯的分解和储存具有重要的双重调控作用,主要调控类固醇激素合成前体、胆固醇酯的分解;通过调节脂肪酶的功能和脂肪沉积来影响肌肉的生长发育并能影响高氧化能力组织内的线粒体功能。本文综述了猪PLIN基因背景、基因结构及组织分布情况,并对近年来PLIN基因对猪肌肉发育影响的研究进行了总结,解析其在骨骼肌发育差异调控网络中的地位和作用,为家猪生产性状改良提供理论依据。(本文来源于《畜牧兽医杂志》期刊2019年03期）
谢水华[2]（2017）在《长白猪和蓝塘猪肌肉发育差异miRNA和mRNA表达谱的整合分析》一文中研究指出长白猪和蓝塘猪产肉量、生长速度明显不同,且从胚胎期肌肉发育到出生后肌肉肥大的不同阶段两者在肌纤维发育程度与表型均有很大的差异。本研究选择长白猪和蓝塘猪胚胎期35、49、63、77天与出生后2、28、90、180天等8个不同时期的背最长肌进行Solexa测序,通过比较两个猪种在肌肉发育过程中miRNA的表达差异,结合靶基因预测和转录组数据,对骨骼肌发育的机制进行研究,并筛选成肌候选miRNA进行功能验证。结果表明:1.出生前后差异miRNAs(DE-miRNAs)表达模式不同通过比较8个不同时期长白猪与蓝塘猪的miRNA表达谱,我们发现了257个miRNA,其中差异表达的miRNA(DE-miRNA)152个。主成分分析(PCA)将DE-miRNAs清晰的分为出生前后两个部分,说明出生前后miRNA表达模式存在差异。因此,我们将8个不同时期分为出生前后2组,分别命名为G1、G2。挑选G1、G2组中高丰度表达量的miRNAs进行热图分析,结果发现超过2/3的miRNA在品种间存在表达差异,在G1组,蓝塘猪的miRNA表达量明显高于长白猪,尤其是胚胎期35、49天;在G2组,长白猪的miRNA表达量要高于蓝塘猪。此外,与成肌相关的miR-1、miR-206和miR-133在G1、G2组中品种间差异明显。2.不同品种同一时期miRNAs表达模式不同在G1、G2组中每个时期分别挑选10个高丰度表达的DE-miRNAs,将其分为G1top(up)、G1top(down)、G2top(up)、G2top(down)等4个亚组进行比较,发现胚胎期35、49、63天和出生后2天高丰度DE-miRNAs的表达量在品种间存在较大差异。在G1top(up)亚组,胚胎期49天miR-378、mi R-30a、miR-148a和miR-127等品种间表达差异较大,胚胎期49、63、77天mi R-206在长白猪中表达量明显高于蓝塘猪。在G1top(down)亚组,胚胎期35、49、63天mi R-20、miR-499、miR-451和miR-335等miRNA品种间表达差异较大。在G2top(up)亚组,出生后2天miR-148a在长白猪中的表达量明显高于蓝塘猪。在G2top(down)亚组,品种间miRNAs表达差异不明显。3.DE-miRNAs与转录组整合分析为了研究DE-miRNA调控肌肉发育过程的分子机制,我们将全部DE-miRNA分为G1all(up)、G1all(down)、G2all(up)和G2all(down)等4个亚组进行韦恩图绘制,发现G1all(down)和G2all(up)组中DE-miRNAs的数量占全部DE-miRNAs数量的88%。对G1all(down)亚组的miRNAs进行聚类分析,发现主要的生物过程是肌肉发育、肌肉分化;对G2all(up)亚组的miRNAs进行聚类分析,发现主要的生物过程是肌肉系统的过程、肌纤维肥大,该结果与胚胎期主要进行肌纤维发育而出生后主要进行肌纤维肥大的表型吻合。采用Targetscan预测G1all(down)、G2all(up)亚组中成肌相关的miRNAs靶基因,用STEM软件分析靶基因在长白猪和蓝塘猪出生前后的表达趋势图,共计获得26个趋势图,其中有9个趋势图显着富集,涵盖138个靶基因。用STRING网站预测138个靶基因的互作关系,并使用Cytoscape软件进行制图,最终形成由22个基因和35个miRNAs组成的互作网络图。网络图中包括已知的miR-206、mi R-133b、miR135-5p、MEF2A、MEF2C等成肌相关miRNAs和基因,MYH7、TPM2、DES等肌纤维形成相关基因。筛选出的未知功能的miRNA或者基因可为今后研究成肌调控机制提供数据。4.成肌相关的DE-miRNA(miR-127、miR-30a)功能验证为了验证生物信息学预测的miRNA在肌肉发育过程中的作用,本研究挑选了miR-127、miR-30a进行功能验证。结果表明,miR-127过表达后,处于S期的细胞显着增加,进入G2/M期的细胞显着减少,同时,细胞中与细胞周期相关因子cyclinA2、cyclinE2、CDK4的表达量显着降低,cyclin-CDK复合物的抑制因子P21显着增加,说明转染miR-127后,C2C12细胞的分裂能力减弱。双荧光报告实验表明miR-127通过作用于SEPT7基因3’UTR区,从而抑制细胞的增殖。miR-30a过表达后,处于G1期的细胞减少,而S期和G2/M期的细胞增加,与之相对应的细胞周期蛋白cyclinA2及蛋白激酶CDK4的表达量也相应的上升,而抑制细胞周期的肿瘤抑制基因Rb的表达量下降,说明转染miR-30a mimic后,C2C12细胞的增殖能力增强。本研究结果表明,品种间miRNA的表达差异在出生前大于出生后,其中蓝塘猪胚胎期35、49天上调的miRNA通过促进成肌细胞过早分化,最终导致产肉量减少;出生后长白猪上调的miRNA促进肌肥大,从而增加产肉量。论文筛选得到miR-378、miR-127、miR-30a等8个成肌相关候选mi RNA,并对miR-127、miR-30a进行了功能验证,发现miR-127作用于SEPT7基因3’UTR区抑制C2C12细胞的增殖,miR-30a促进C2C12细胞的增殖。(本文来源于《中山大学》期刊2017-05-20）
于秀菊,高淑媛,程笳琪,王海东,赫晓燕[3]（2015）在《microRNA与猪肌肉发育》一文中研究指出MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,成熟的miRNAs可通过与靶基因的3′UTR结合,从而发挥对靶向基因负调控作用。目前,研究人员已经证明miRNA在机体的生长、发育、繁殖、分化和凋亡等生理过程中发挥重要的作用。猪肌肉发育的相关研究备受关注,猪肌肉的发育与其他动物一样,受众多基因的调控,这些基因的表达和翻译同时受miRNAs的调控。本文对miRNAs与猪肌肉发育的相关性进行了系统的分析,提出miRNAs在猪生产中的研究和应用的某些展望。(本文来源于《国外畜牧学(猪与禽)》期刊2015年04期）
曹婷[4]（2013）在《五指山猪和长白猪肌肉发育差异的初步研究》一文中研究指出肌肉生长发育和肉质性状形成的分子机理探索是优良猪种选育和肉品质改良的研究重点。MRFs基因家族在肌肉组织的形成和发育过程中起着重要的调控作用。本实验以五指山猪和长白猪不同发育阶段、不同组织为材料,对两个猪种胴体性状和肉品质进行比较;并对比两个猪种胎儿肌肉发育关键时期(妊娠期65天)的肌纤维组织学特征差异进行分析；结合以上差异对MRFs家族基因在五指山猪于不同猪种、不同组织、不同发育阶段的蛋白表达和基因表达差异和变化规律展开研究。以探索影响两个猪种肌肉生长发育影响因素及五指山猪矮小机制,为五指山猪肉品质改良和优良猪种选育奠定理论基础。主要研究结果如下：1、五指山猪和长白猪胴体性状和肉品质分析表明：五指山猪与长白猪宰前重、胴体直长、胴体斜长、屠宰率、眼肌面积、平均背膘厚、瘦肉率、肌内脂肪含量、脂肪酸、氨基酸含量均有显着差异(P<0.01)；五指山猪与长白猪肌肉pH、熟肉率、滴水损失、剪切力差异不显着(P>0.05)。2、五指山猪和长白猪妊娠期65口龄胎儿肌纤维组织切片观察显示,其肌纤维组织表观观察有明显差异;并且长白猪猪胎儿骨骼肌肌纤维数目和横截面积均显着高于五指山猪(P<0.05)。3、Myogenin蛋白的表达定位于骨骼肌细胞核；该蛋白在五指山猪骨骼肌中的表达水平均高于其在长白猪骨骼肌中的表达水平；在猪胎儿骨骼肌中的表达水平均高于其在成年猪骨骼肌中的表达水平；在腿部骨骼肌中的表达水平均高于其在背部骨骼肌中的表达水平(P<0.05)。4、MRFs基因家族成员除了在肝脏、肾脏和肠组织外,在五指山猪猪胎儿组织中的表达水平均高于其在长白猪猪胎儿相应组织中的表达水平(P<0.05)；两猪种在不同组织中的表达水平高低分布顺序基本保持一致,顺序为：腿部骨骼肌>背部骨骼肌>肝脏>肺>胃>脾脏>脑>肾脏>肠>心脏(P<0.05)。5、MRFs基因家族成员在12月龄体成熟五指山猪不同组织中均有表达,在肌肉组织中的相对表达量最高,表达量由高到低的顺序依次为肌肉>小肠>肝脏>胃>肾脏>心脏>肺>脾(P<0.05)。6、MRFs基因家族成员在五指山猪肌肉组织中的mRNA表达水平从出生到360日龄间随着年龄增长而显着增加(P<0.05)。(本文来源于《海南大学》期刊2013-06-01）
孙伟[5]（2013）在《猪肌肉发育相关microRNA-1和microRNA-206的靶标鉴定》一文中研究指出microRNA(miRNA)是一类进化保守的大小在18-25个核苷酸的内源性非编码小分子RNA,广泛存在动植物体内,对机体的生长发育、衰老和死亡等生物过程起着重要的作用。研究表明microRNA在骨骼肌的生长发育过程中发挥着重要调控作用。本文以在骨骼肌中特异性表达的microRNA-1和microRNA-206为主要研究对象,筛选其靶标基因,并研究它们在猪骨骼肌发育中的作用。本研究的主要结果如下：1.利用TargetScan和PicTar等生物信息学软件预测miRNA-1和miRNA-206的靶标基因,结果发现有258个候选靶标基因。利用DAVID数据库对258个候选靶标基因进行GO和KEGG pathway分析,筛选出与肌肉发育相关的分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)和分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因为miRNA-1和miRNA-206的共有的候选靶标基因作为本论文研究重点。2.拼接猪SFRP1的mRNA序列,扩增SFRP1和SFRP2基因mRNA的3'UTR序列。以Psi-Check2作为骨架载体,构建Psi-Check2-SFRP1和Psi-Check2-SFRP2载体,与体外合成的miRNA-1mimics和miRNA-206mimics共转染PIEC细胞36h,并进行双萤光素酶检测。结果发现,SFRP1和SFRP2基因实验组的萤光素酶表达量比对照组均显着下调(P<0.01),表明miRNA-1和miRNA-206可能通过SFRP1和SFRP2基因3'UTR的结合位点相互作用,抑制SFRP1和SFRP2基因的表达。3.利用桥联PCR技术对猪SFRP1基因的结合位点进行突变,并以Psi-Check2作为骨架载体,构建SFRPl基因突变载体,转染PIEC细胞36h,并进行双萤光素酶检测。结果发现,与对照组相比,突变载体的双萤光素酶的活性没有显着变化(P>0.05),表明SFRPl基因的这个突变位点就是miRNA-1和miRNA-206的靶标结合位点。4.由于SFRP1在PIEC细胞中表达量较低,体外扩增SFRP1的CDS区域,构建Psi-Check2-SFRP1CDS-SFRP13'UTR载体,与体外合成的miRNA-1mimics和miRNA-206mimics共转染PIEC细胞36h,收集细胞,检测SFRP1基因在RNA和蛋白质水平的表达。实时荧光定量PCR(real-time PCR)结果表明,实验组miRNA-1和miRNA-206的表达量与对照组没有显着差异(P>0.05)；Western blot结果表明,实验组(转染SFRP1过表达载体和miRNA-1和miRNA-206minics)比对照组的SFRP1蛋白表达水平显着降低,表明SFRP1是miRNA-1和miRNA-206的共同靶标基因,且miRNA-1和miRNA-206主要在翻译水平下调SFRP1的表达。5.利用real-time PCR方法,检测SFRP1和SFRP2基因在通城成年母猪组织(9个组织),以及通城猪(27个时间点)和长白猪(23个时间点)骨骼肌生长发育过程中的表达量。结果显示：SFRP1在肺、肾、小肠和胃中高度表达,在大肠、肝和脾中度表达,在心脏、背肌和腿肌中低度表达；SFRP2在胃、小肠、肺和大肠中表达较高,在背肌和腿肌中中度表达,在心和脾中则是低度表达。SFRP1和SFRP2基因在通城猪和长白猪胚胎期的骨骼肌的表达量均显着高于出生后的表达量,表明SFRP1和SFRP2基因可能主要参与骨骼肌初级和次级纤维的形成。SFRP1和SFRP2基因在通城猪和长白猪两个品种间肌肉发育过程中的表达模式并不完全一致,推测SFRP1和SFRP2可能与不同猪品种间的肌肉表型差异有关。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2013-05-01）
彭兴[6]（2013）在《猪肌肉发育相关microRNA-21靶标基因TSC1和SMAD7的鉴定》一文中研究指出近年来,microRNA (miRNA)已经成为研究领域里的热门。由于其与生物体的早期发育、细胞增殖、分化、凋亡以及组织器官生成和疾病发生等关系密切,一度给基础生物医学领域以及药物研究方面带来了巨大的影响。miRNA是一类由18-22个核苷酸组成的小分子非编码RNA,对生物体中多种生物学过程具有调控作用。miRNA通过与靶基因的3’非翻译区完全或者不完全的碱基互补配对结合,从而发挥对靶基因mRNA的抑制或降解作用。到目前为止,众多的研究发现miRNA在肌细胞的定向分化、增殖、凋亡以及肌肉的发育、再生等生物学过程中具有不可替代的作用。本课题组在构建不同发育时间点的猪骨骼肌小RNA文库过程中发现,miRNA-21在猪骨骼肌发育过程中呈现出显着的差异表达。结合Solexa高通量测序结果,我们推断miRNA-21可能通过靶向某些特定基因参与骨骼肌的生长发育调控。诸多前人研究发现miRNA-21与细胞的增殖、分化、凋亡、肿瘤发生等生物学过程关系密切,但是其影响肌肉发育的生理机制还不是很清楚,因此对靶基因的鉴定和研究就显得十分必要。本研究利用TargetScan、PicTar等靶标预测网站和DAVID数据库进行靶标预测以及GENE ONTOLOGY分析,获得与肌肉发育相关的miRNA-21的候选靶标基因TSC1(Tuberous sclerosis1)和SMAD7(Smad family member7)。针对两靶标基因设计引物,通过PCR获得猪基因组中TSC1和SMAD7包含结合位点的3'UTR片段以及结合位点缺失的3'UTR片段。构建得到两靶标基因的双荧光素酶验证载体以及相应的双荧光素酶突变载体,然后转染PIEC和PK15细胞系。利用双荧光素酶检测系统分析其荧光素酶活性。结果表明实验组和对照组荧光素酶活性差异显着(P<0.05),可初步认定TSC1和SMAD7基因均为miRNA-21的靶标且为miRNA-21下调。结合KEGG数据库对两靶基因进行通路分析,我们推断miRNA-21可能通过靶向结合TSCl以及SMAD7参与调控mTOR信号通路以及TGF-β信号通路来影响肌肉增殖分化。本文为深入研究miRNA-21调控肌肉发育的机制以及对肌肉相关疾病的治疗研究提供参考。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2013-04-10）
刘楠,阮进学,杨述林[7]（2012）在《猪肌肉发育调控和高瘦肉率基因改良猪的研究进展》一文中研究指出猪肉的产量和质量与肌肉发育过程紧密相关。肌肉发育包括胚胎期肌纤维的形成、出生后肌纤维的发育和成年期肌肉的再生等步骤,该过程受到转录水平、转录后水平及通路水平等多层次的网络调控。本文以猪肌肉发育过程为切入点,重点讨论了调控猪肌肉发育的分子基础和高瘦肉率基因改良猪的研究进展,为进一步培育优质猪肉和高瘦肉率猪品种提供了参考。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2012年08期）
吴望军[8]（2011）在《猪肌肉发育相关基因Six1与Pitx2c的分离克隆、表达模式及功能研究》一文中研究指出肉类含有许多重要的蛋白质成份,它是人类营养物质的主要来源之一,对肉品质的改善将有利于提高消费者对肉的接受与感知能力,促进肉类的消费。因此,肉品质的好坏将直接影响到整个生猪产业的可持续发展。在过去的几十年里,传统的育种方法有效的提高了猪的生长率、饲料转换率与瘦肉率,而对这些性状的强度选择却使猪产生了严重的不良反应,如行为异常、生理功能紊乱、免疫能力下降等,另外在肉品质方面则增加了PSE肉,降低了肌内脂肪的含量。目前众多的研究认为遗传因素是影响肌肉品质的主要因素,然而对于遗传因素影响肌肉品质的分子机理还不是很清楚。肌肉是猪胴体重的主要组成部分,它的生长直接决定着猪的生长速率。肌肉的基本组成单位是肌纤维,而不同的肌纤维类型直接影响到肌肉的品质特性(肉色、pH值、嫩度、肌内脂肪、系水力、风味等)。因此,深入了解肌肉的生长发育规律,肌纤类型的形成与转换机制将有助于揭示肌肉品质形成的分子机理。先前的研究表明,Sixl与Pitx2c基因是两个与肌肉的形成有着密切联系的转录因子。因此,本研究将这两个转录因子作为影响猪生长与肌肉品质的重要候选基因,从两个基因的分离克隆着手,全面分析了两个基因的表达模式,进一步分析了两个基因的多态性与猪生产性状的关系,并在细胞水平对Sixl基因的表达调控机制进行了系统的研究。本研究所取得的结果为揭示猪肌肉品质形成的分子机理提供了更多的理论依据。所取得的主要结果如下：1.利用PCR与RACE等技术分离克隆了猪Sixl基因与Pitx2c基因。其中所分离的Sixl基因全长为4248bp,cDNA全长为2201bp；所分离的Pitx2c基因cDNA全长为2316bp,并分离了该基因的第一内含子序列,其序列长为1482bp。2.对这两个基因在猪中的表达模式进行了全面的分析,包括在不同组织中的表达模式,在背最长肌不同发育阶段的表达模式,以及在不同肌肉中的表达模式。(1)利用半定量RT-PCR分析了猪Sixl与Pitx2c基因在不同组织中的表达情况。结果显示,猪Sixl与Pitx2c基因两个均是骨骼肌高表达的基因；(2)利用real-time PCR分析Sixl与Pitx2c在不同发育阶段的表达模式。结果表明,两个基因在胚胎65天均具有较高的表达水平,在出生后60天与120天中,Sixl基因在大白猪中的表达水平要显着高于梅山猪。而Pitx2c基因在大白猪胚胎65天、出生后21、60与120天的表达水平均要高于梅山猪。(3)同样利用real-time PCR分析了两个基因不同肌肉中的表达模式。结果表明,两个基因在快肌股二头肌中的表达均要高于其它几种所检测的肌肉。3.对这两个基因中的多个SNP位点在不同猪中的遗传多样性进行了分析,并利用本实验室建立的大梅F2代资源家系分析它们对经济性状的遗传效应。所分析的猪Sixl基因的多态位点包括：(1)内含子1595bp处的A/G转换突变,关联分析的结果显示该突变位点的多态性与背最长肌肉色(MCV1)(P<0.05)、背最长肌大理石纹(MM1)(P<0.01)以及屠宰率(DP)(P<0.05)存在显着或极显着的相关；(2)启动子136bp处的C/T转换突变(位置相对于转录起始位点),该突变位点的多态性与股二头肌肉色值(MCV2)(P<0.05)、背最长肌肌内脂肪(IMF)(P<0.05)、肩部最厚处背膘厚(SFT)(P<0.05)以及瘦肥比例(RFL)(P<0.05)存在显着相关(P<0.05)；(3)启动子1363bp处的C/T转换突变(位置相对于转录起始位点)该突变位点的多态性与股二头肌pH值(P<0.05)、背最长肌pH值(P<0.05)、失水率(DLR)(P<0.05)、系水力(WHC)(P<0.05)和皮率(SP)(P<0.05)呈显着相关。所分析的猪Pitx2c基因的多态位点包括：(1)编码区的2个无义突变,474bp处C/T突变与636bp处的C/T突变(位置相对于翻译起始位点)；连锁不平衡分析显示,这两个位点处于紧密连锁状态(r2=0.85),关联分析结果表明,这两个位点的多态性与背最长肌肉色均存在显着或极显着相关；(2)3’UTR的2个突变,37bp处G/A突变与47bp处G/A突变(位置相对于翻译终止位点),连锁不平衡分析显示,这两个位点也处于紧密连锁状态(r2=0.95),关联分析结果表明,这两个位点的多态性与背最长肌失不率(DLR)、背最长肌系水力(WHC)以及背最长肌肉色(MCV1)呈显着相关(P<0.05)。单倍型分析结果显示,单倍型与MCV1存在显着相关(P<0.05),并且两拷贝的单倍型-CCGG-有利于肉质的改善。4.采用嵌套缺失法,利用双荧光素酶报告系统对猪Sixl基因的核心启动子序列进行了鉴定,并分析了转录因子MyoD对启动子活性的影响,并进一步初步鉴定了该启动子甲基化水平对启动子活性的影响。实验的结果表明,Sixl基因的核心启动子区位于-360bp/+170bp处,该区域包括两种常见的上游启动子元件GC框与CATT框。在叁种真核细胞中所获得的实验结果显示,除了P2-530启动子(-360bp/+170bp)外,其它启动子片段在小鼠成肌细胞中(C2C12)的活性均显着或极显着的高于其它两种细胞(C3H10T1/2与PK15)。有趣的是,Sixl基因在小鼠成肌细胞(C2C12)分化后表达水平出现了下调,而猪Sixl基因启动子在分化后的C2C12细胞活性则有了明显降低。另外,共转染实验结果显示,共转染MyoD转录因子可促进Sixl基因启动子活性。体外甲基化实验的初步结果表明,Sixl基因启动子的甲基对启动子的活性具有抑制作用。5.分析了猪Sixl基因启动(Region 1)与第一外显子(Region 2)CpG岛区域在不同组织、不同肌肉中甲基化的差异。8种不同组织的甲基化分析结果显示,Region1与Region 2中各位点的平均甲基化水平均在肌肉中最低；3种不同的肌肉的分析结果显示,Region 1中2个甲基化位点的平均甲基化水平在咬肌中最低,而Region 2中10个位点的平均甲基化水平在股二头肌均要低于其它两种肌肉。6.对猪Sixl基因不同氨基酸的缺失序列进行了亚细胞定位,定位的结果表明,CDS全长与HD保守结构域主要定位在细胞核中；ND 3’端无结构域区与HD+ND结合区的定位偏向于细胞核,而SD结构域的定位则趋向于细胞质中。7.在小鼠成肌细胞系C2C12细胞,利用过表达技术分析了Sixl基因对生肌调控网络中的影响。分别采用瞬时转染与稳定转染进行了试验,两次试验的结果表明,过表达Sixl基因可促进生肌决定因子Myf5、myogenin与MyoD,快肌基因Atp2al、Srl与Mylpf的表达上调。Sixl、Pitx2c与Pax3基因均是生肌决定因子MRFs的上游调控基因,过表达Sixl基因并没有引起Pitx2c与Pax3基因的表达变化。8.利用MTT法与流式细胞仪检测方法分析了Sixl基因对细胞增殖与细胞周期的影响。MTT实验结果显示,在过表达Sixl基因的小鼠成肌细胞C2C12中,培养48h后成肌细胞的生长开始受到抑制,培养72-96h后细胞的增殖受到了明显的抑制。进一步采用稳定转染与瞬时转染初步研究了Sixl基因对细胞周期的影响,稳定转染的实验结果显示,Sixl基因对细胞周期的影响表现为使细胞停滞在G2期；瞬时转染的结果显示,Sixl基因对细胞周期的影响表现为使S期的细胞减少与G1细胞的增加。(本文来源于《华中农业大学》期刊2011-06-01）
林仰孝,李伟平,曾志燎,陈丽萍[9]（2010）在《不同品种猪肌肉发育的研究进展》一文中研究指出猪骨骼肌的分化、生长和组织发育的调控过程实际上是内在的遗传、表观遗传基础和外在的各种信号分子相互作用的结果。基因表达的调节是(本文来源于《中国畜禽种业》期刊2010年11期）
猪肌肉发育论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
长白猪和蓝塘猪产肉量、生长速度明显不同,且从胚胎期肌肉发育到出生后肌肉肥大的不同阶段两者在肌纤维发育程度与表型均有很大的差异。本研究选择长白猪和蓝塘猪胚胎期35、49、63、77天与出生后2、28、90、180天等8个不同时期的背最长肌进行Solexa测序,通过比较两个猪种在肌肉发育过程中miRNA的表达差异,结合靶基因预测和转录组数据,对骨骼肌发育的机制进行研究,并筛选成肌候选miRNA进行功能验证。结果表明:1.出生前后差异miRNAs(DE-miRNAs)表达模式不同通过比较8个不同时期长白猪与蓝塘猪的miRNA表达谱,我们发现了257个miRNA,其中差异表达的miRNA(DE-miRNA)152个。主成分分析(PCA)将DE-miRNAs清晰的分为出生前后两个部分,说明出生前后miRNA表达模式存在差异。因此,我们将8个不同时期分为出生前后2组,分别命名为G1、G2。挑选G1、G2组中高丰度表达量的miRNAs进行热图分析,结果发现超过2/3的miRNA在品种间存在表达差异,在G1组,蓝塘猪的miRNA表达量明显高于长白猪,尤其是胚胎期35、49天;在G2组,长白猪的miRNA表达量要高于蓝塘猪。此外,与成肌相关的miR-1、miR-206和miR-133在G1、G2组中品种间差异明显。2.不同品种同一时期miRNAs表达模式不同在G1、G2组中每个时期分别挑选10个高丰度表达的DE-miRNAs,将其分为G1top(up)、G1top(down)、G2top(up)、G2top(down)等4个亚组进行比较,发现胚胎期35、49、63天和出生后2天高丰度DE-miRNAs的表达量在品种间存在较大差异。在G1top(up)亚组,胚胎期49天miR-378、mi R-30a、miR-148a和miR-127等品种间表达差异较大,胚胎期49、63、77天mi R-206在长白猪中表达量明显高于蓝塘猪。在G1top(down)亚组,胚胎期35、49、63天mi R-20、miR-499、miR-451和miR-335等miRNA品种间表达差异较大。在G2top(up)亚组,出生后2天miR-148a在长白猪中的表达量明显高于蓝塘猪。在G2top(down)亚组,品种间miRNAs表达差异不明显。3.DE-miRNAs与转录组整合分析为了研究DE-miRNA调控肌肉发育过程的分子机制,我们将全部DE-miRNA分为G1all(up)、G1all(down)、G2all(up)和G2all(down)等4个亚组进行韦恩图绘制,发现G1all(down)和G2all(up)组中DE-miRNAs的数量占全部DE-miRNAs数量的88%。对G1all(down)亚组的miRNAs进行聚类分析,发现主要的生物过程是肌肉发育、肌肉分化;对G2all(up)亚组的miRNAs进行聚类分析,发现主要的生物过程是肌肉系统的过程、肌纤维肥大,该结果与胚胎期主要进行肌纤维发育而出生后主要进行肌纤维肥大的表型吻合。采用Targetscan预测G1all(down)、G2all(up)亚组中成肌相关的miRNAs靶基因,用STEM软件分析靶基因在长白猪和蓝塘猪出生前后的表达趋势图,共计获得26个趋势图,其中有9个趋势图显着富集,涵盖138个靶基因。用STRING网站预测138个靶基因的互作关系,并使用Cytoscape软件进行制图,最终形成由22个基因和35个miRNAs组成的互作网络图。网络图中包括已知的miR-206、mi R-133b、miR135-5p、MEF2A、MEF2C等成肌相关miRNAs和基因,MYH7、TPM2、DES等肌纤维形成相关基因。筛选出的未知功能的miRNA或者基因可为今后研究成肌调控机制提供数据。4.成肌相关的DE-miRNA(miR-127、miR-30a)功能验证为了验证生物信息学预测的miRNA在肌肉发育过程中的作用,本研究挑选了miR-127、miR-30a进行功能验证。结果表明,miR-127过表达后,处于S期的细胞显着增加,进入G2/M期的细胞显着减少,同时,细胞中与细胞周期相关因子cyclinA2、cyclinE2、CDK4的表达量显着降低,cyclin-CDK复合物的抑制因子P21显着增加,说明转染miR-127后,C2C12细胞的分裂能力减弱。双荧光报告实验表明miR-127通过作用于SEPT7基因3’UTR区,从而抑制细胞的增殖。miR-30a过表达后,处于G1期的细胞减少,而S期和G2/M期的细胞增加,与之相对应的细胞周期蛋白cyclinA2及蛋白激酶CDK4的表达量也相应的上升,而抑制细胞周期的肿瘤抑制基因Rb的表达量下降,说明转染miR-30a mimic后,C2C12细胞的增殖能力增强。本研究结果表明,品种间miRNA的表达差异在出生前大于出生后,其中蓝塘猪胚胎期35、49天上调的miRNA通过促进成肌细胞过早分化,最终导致产肉量减少;出生后长白猪上调的miRNA促进肌肥大,从而增加产肉量。论文筛选得到miR-378、miR-127、miR-30a等8个成肌相关候选mi RNA,并对miR-127、miR-30a进行了功能验证,发现miR-127作用于SEPT7基因3’UTR区抑制C2C12细胞的增殖,miR-30a促进C2C12细胞的增殖。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
猪肌肉发育论文参考文献
[1].彭玥晗,徐磊,许金蔓,鞠辉明.脂滴包被蛋白基因对猪肌肉发育的影响[J].畜牧兽医杂志.2019
[2].谢水华.长白猪和蓝塘猪肌肉发育差异miRNA和mRNA表达谱的整合分析[D].中山大学.2017
[3].于秀菊,高淑媛,程笳琪,王海东,赫晓燕.microRNA与猪肌肉发育[J].国外畜牧学(猪与禽).2015
[4].曹婷.五指山猪和长白猪肌肉发育差异的初步研究[D].海南大学.2013
[5].孙伟.猪肌肉发育相关microRNA-1和microRNA-206的靶标鉴定[D].西北农林科技大学.2013
[6].彭兴.猪肌肉发育相关microRNA-21靶标基因TSC1和SMAD7的鉴定[D].湖南农业大学.2013
[7].刘楠,阮进学,杨述林.猪肌肉发育调控和高瘦肉率基因改良猪的研究进展[J].农业生物技术学报.2012
[8].吴望军.猪肌肉发育相关基因Six1与Pitx2c的分离克隆、表达模式及功能研究[D].华中农业大学.2011
[9].林仰孝,李伟平,曾志燎,陈丽萍.不同品种猪肌肉发育的研究进展[J].中国畜禽种业.2010