导读:本文包含了胆汁螺杆菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:胆汁螺杆菌(H.bilis),荧光定量PCR(q,PCR),Taq,Man探针
胆汁螺杆菌论文文献综述
伍妙梨,袁文,饶丹,王静,朱余军[1]（2015）在《胆汁螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立》一文中研究指出目的建立快速、敏感、特异的胆汁螺杆菌(Helicobacter bilis,H.bilis)Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,对胆汁螺杆菌进行定量检测。方法 PCR扩增H.bilis保守基因P17序列全长ORF435 bp,进行TA克隆,构建质粒标准品p MD-HBP17。通过对p MD-HBP17标准品的定量分析,优化反应体系,检测Taq Man探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性及重复性;用所建立的q PCR方法检测77份临床样品,并与普通PCR的检测结果作比对。结果所建立的q PCR检测方法,质粒DNA浓度在108~101拷贝之间表现出较好的线性和相关性,所得标准曲线的斜率为-3.46,相关系数为0.999,检测灵敏度达到20个拷贝,对77份临床样品的检出率为14.3%,较普通PCR(7.8%)的检出率高。结论建立的H.bilis q PCR检测方法特异性好、敏感性高、稳定性强,可用于胆汁螺杆菌的定量及定性检测。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2015年10期）
陈锡福,刘星,张丽芳,李红[2]（2008）在《抗胆汁螺杆菌单克隆抗体的制备》一文中研究指出目的制备抗胆汁螺杆菌单克隆抗体(McAbs)。方法用胆汁螺杆菌B2m株皮下免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行融合。以酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选抗胆汁螺杆菌单克隆杂交瘤细胞株并初步鉴定其特异性;免疫印迹试验测定单抗所结合的抗原表位;免疫双向扩散试验确定IgG亚类;腹腔接种法、辛酸-硫酸铵盐析法大量制备、纯化单克隆抗体。结果经过ELISA筛选获得11个阳性杂交瘤细胞株,其效价最高达1:4×105以上,并与实验动物常见的15种病原菌呈阴性反应;IgG亚类为IgG2a和IgG2b;免疫印迹试验显示,6株(A~F)与胆汁螺杆菌大约相对分子质量(172、0、21、30、52、66)×103的抗原特异结合,5株(G~K)皆与胆汁螺杆菌、幽门螺杆菌等叁种螺杆菌大约相对分子质量(52、82)×103的抗原呈阳性反应,表明A~F株针对的是胆汁螺杆菌特异性抗原,G~K株可能具有属特异性。结论筛选的单克隆抗体具有较高的特异性和敏感性,所结合的抗原为胆汁螺杆菌或螺杆菌的免疫优势抗原,为进一步的种、属生物学特性研究、菌株分型及血清学检测方法建立等奠定了基础。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2008年05期）
陈锡福[3]（2008）在《抗胆汁螺杆菌单克隆抗体的研制及其初步应用》一文中研究指出以胆汁螺杆菌等为主的啮齿动物螺杆菌在实验啮齿类动物的感染已引起人们的极大关注,使之成为各国实验动物微生物学质量标准中必须排除的病原菌。但我国尚缺乏有效的检测方法,至今未将其列入国家标准。血清学检测方法以其灵敏度高、简便快捷及费用相对低廉等各种优点已经广泛用于病原微生物感染的实验室诊断,但其检测结果准确性的关键是检测试剂的特异性和敏感性。本研究利用B细胞杂交瘤技术制备抗胆汁螺杆菌的特异性单克隆抗体(以下简称单抗),进而建立以检测抗原为目的的双抗体夹心ELISA法及间接免疫荧光法,以期发展起一种特异、敏感和快速的实验动物胆汁螺杆菌检测方法。为此,我们从以下几个方面进行了研究。首先,单抗的制备与鉴定。使用自行分离自实验小鼠的胆汁螺杆菌B2m株全菌抗原免疫BABL/c小鼠,经细胞融合,用ELISA法筛选获得A～K共11个阳性杂交瘤细胞株,其分泌抗体的效价最高达1:4×10~5以上,并与实验动物常见的15种病原菌呈阴性反应;IgG亚类为IgG_(2a)和IgG_(2b);免疫印迹试验显示,6株(A～F)与胆汁螺杆菌大约相对分子质量(17、20、21、30、52、66)×10~3的抗原特异结合,5株(G～K)皆与胆汁螺杆菌、幽门螺杆菌等叁种螺杆菌大约相对分子质量(52、82)×10~3的抗原呈阳性反应,表明A～F株针对的是胆汁螺杆菌特异性抗原,G～K株可能具有属特异性。其次,我们建立了以单抗为诊断抗体的双抗体夹心ELISA法及间接免疫荧光法(IFA),并初步探索其用于实验动物胆汁螺杆菌隐性感染检测的可行性。在双抗体夹心ELISA法,采用最佳配对实验,筛选出以单抗D、E作为包被抗体、C-辣根过氧化物酶标记(C-HRP)作为检测抗体的配对,对胆汁螺杆菌抗原的检测限均可达到ng级水平;用于胆汁螺杆菌感染阳性鼠群小鼠盲肠内容物的检测显示5/10、4/10的阳性。在IFA,通过6种单抗的比较,确定了单抗C作为诊断抗体。该单抗与胆汁螺杆菌感染阳性鼠群小鼠盲肠内容物反应,荧光显微镜下能清晰地观察到螺旋状、周质纤毛缠绕的典型胆汁螺杆菌菌体形态,与免疫血清比较,背景更清晰,很容易排除假阳性反应,并克服了双抗体夹心ELISA的不足。其用于胆汁螺杆菌感染阳性鼠群小鼠盲肠内容物的检测显示6/10的阳性。最后,通过PCR法对上述阳性动物群进行检测,阳性数为8/10。由此可见,双抗体夹心ELISA法与之符合率为50～60%,IFA符合率为75%。因此,可以认为所建立的两种血清学方法基本能满足实验啮齿类胆汁螺杆菌隐性感染的检测。综上所述,本研究采用B淋巴细胞杂交瘤细胞技术成功地制备出了11株较高特异性和敏感性的抗胆汁螺杆菌单抗,并以其为诊断抗体建立起以检测抗原为目的的双抗体夹心ELISA法和间接免疫荧光法。在实验小鼠胆汁螺杆菌自然感染的检测中初步显示基本能满足实验动物质量检测需求。其中抗多种螺杆菌单抗在进一步的检测方法学研究中有重要意义。本研究为胆汁螺杆菌血清学常规检测方法的完善、试剂盒的研制提供了保障,也为其他啮齿动物螺杆菌血清学检测方法的建立奠定了基础。(本文来源于《中国协和医科大学》期刊2008-05-01）
张丽芳,李红[4]（2005）在《从实验小鼠成功分离一株啮齿类螺杆菌——胆汁螺杆菌》一文中研究指出包括肝螺杆菌(Helicobacterhepaticus)和胆汁螺杆菌(Helicobacterbilis)在内的啮齿类螺杆菌(rodenthelicobacter)已经被公认为是啮齿类实验动物重要的致病菌,美国、日本、欧洲等发达国家,以及国际实验动物理(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2005年02期）
胆汁螺杆菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的制备抗胆汁螺杆菌单克隆抗体(McAbs)。方法用胆汁螺杆菌B2m株皮下免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行融合。以酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选抗胆汁螺杆菌单克隆杂交瘤细胞株并初步鉴定其特异性;免疫印迹试验测定单抗所结合的抗原表位;免疫双向扩散试验确定IgG亚类;腹腔接种法、辛酸-硫酸铵盐析法大量制备、纯化单克隆抗体。结果经过ELISA筛选获得11个阳性杂交瘤细胞株,其效价最高达1:4×105以上,并与实验动物常见的15种病原菌呈阴性反应;IgG亚类为IgG2a和IgG2b;免疫印迹试验显示,6株(A~F)与胆汁螺杆菌大约相对分子质量(172、0、21、30、52、66)×103的抗原特异结合,5株(G~K)皆与胆汁螺杆菌、幽门螺杆菌等叁种螺杆菌大约相对分子质量(52、82)×103的抗原呈阳性反应,表明A~F株针对的是胆汁螺杆菌特异性抗原,G~K株可能具有属特异性。结论筛选的单克隆抗体具有较高的特异性和敏感性,所结合的抗原为胆汁螺杆菌或螺杆菌的免疫优势抗原,为进一步的种、属生物学特性研究、菌株分型及血清学检测方法建立等奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胆汁螺杆菌论文参考文献
[1].伍妙梨,袁文,饶丹,王静,朱余军.胆汁螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国比较医学杂志.2015
[2].陈锡福,刘星,张丽芳,李红.抗胆汁螺杆菌单克隆抗体的制备[J].中国比较医学杂志.2008
[3].陈锡福.抗胆汁螺杆菌单克隆抗体的研制及其初步应用[D].中国协和医科大学.2008
[4].张丽芳,李红.从实验小鼠成功分离一株啮齿类螺杆菌——胆汁螺杆菌[J].中国实验动物学报.2005
标签：胆汁螺杆菌(H.bilis); 荧光定量PCR(q; PCR); Taq; Man探针;