导读:本文包含了多肽载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:P2A,4-1BBL,慢病毒,内部核糖体进入位点
多肽载体论文文献综述
应芙蓉,詹玲玲,赵志超,陈闻捷,吕佳妤[1]（2019）在《基于2A多肽策略的抗CD19嵌合抗原受体表达载体的构建与应用》一文中研究指出目的:构建最优的基于2A多肽策略的抗CD19嵌合抗原受体表达载体,为后期的B细胞恶性肿瘤临床治疗研究提供基础。方法:通过分子克隆技术构建pGIZ-EF1α-19CAR和4-1BBL表达载体,然后连接到pGIZ-EF1α-19CAR-P2A-4-1BBL表达载体中。将构建的重组质粒与两种包装质粒(psPAX.2和PMD2.G)共转染293T细胞以制备所需的慢病毒;MACS珠粒分选技术在分选健康人外周血T细胞时,利用antiCD2-antiCD3-antiCD28单克隆抗体磁珠加IL-2体外扩增培养T细胞;浓缩后的慢病毒感染T细胞,建立CAR-T细胞,利用流式细胞术检测19CAR和4-1BBL的共表达;通过细胞杀伤实验等手段检测CAR-T特异性杀伤细胞的功能。结果:①通过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定构建的pGIPZ-19CAR-P2A-4-1BBL慢病毒表达载体构建成功。②19CAR-P2A-4-1BBL慢病毒转染293T细胞,制得CAR-T细胞,并利用流式细胞仪检测阳性细胞百分率,测定CAR的表达,流式结果表明CD19-CAR-构建成功,可以在细胞膜表面表达。③制备的病毒溶液感染T细胞。通过19CAR-IRES-4-1BBL和19CAR-P2A-4-1BBL感染T细胞后杀伤能力比较。两者均随效靶比的递增,细胞杀伤力变大,当CAR-T细胞与靶细胞比例达到40∶1时,细胞裂解率达到90%左右。两者CAR-T细胞的细胞杀伤能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本课题成功构建了基于2A肽策略的慢病毒表达载体,通过转染获得所需病毒颗粒,慢病毒颗粒感染磁珠分选的T细胞获得抗CD19 CAR-T细胞,初步构建了治疗B淋巴细胞白血病的CAR-T技术平台。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年13期）
李松涛,赵红玲,常安琪,祁麟[2]（2019）在《转铁蛋白受体靶向多肽载体合成条件的优化》一文中研究指出研究表明,转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)在一些肿瘤细胞表面呈现过表达现象,而在正常细胞表达量很低~([1-2]),这种差异化表达提示TfR可能成为肿瘤治疗的作用靶点。噬菌体展示技术是筛选肿瘤靶向多肽的主要方法之一~([3])。DAI等~([4])利用噬菌体展示技术筛选到一条对TfR具有高亲和力的多肽BP9,随后他们又制备了一(本文来源于《承德医学院学报》期刊2019年03期）
叶丽颖,彭臻菲,赵婷婷,谢富安,王军凯[3]（2019）在《靶向人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶多肽药物表达载体的构建》一文中研究指出目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶(IN)表达载体用于双分子荧光互补技术筛选多肽药物。方法PCR扩增HIV-1 IN的全长基因序列,将目的片段插入至pBiFc-VN173载体中,并对重组质粒pBiFc-VN173-IN进行双酶切及测序鉴定。将重组质粒pBiFc-VN173-IN和对照组质粒pBiFc-VN173分别转染HEK293T细胞,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法检测IN的表达。结果通过高保真PCR、载体构建和鉴定,成功获得IN表达载体pBiFc-VN173-IN。与对照组相比,通过Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法证实转染质粒pBiFc-VN173-IN载体的HEK293T细胞表达IN。结论成功构建了IN表达载体,该载体可用于和IN相互作用的多肽药物的双分子荧光互补技术筛选。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年04期）
刘祺,李松涛,赵桂琴[4]（2019）在《肝癌靶向多肽载体的研究进展》一文中研究指出我国为肝癌高发地区,近年来,肝癌的发病率和致死率呈持续上升趋势,成为病死率位居第二位的恶性肿瘤,严重威胁国人的生命健康~([1])。肝癌血供丰富,具有生长快、易转移的特点,使得肝癌的治疗更为困难~([2])。常规化疗药物对肝癌细胞没有选择性,在杀伤癌细胞的同时,也会杀伤正常组织细胞,具有比较严重的毒副作用~([3])。肿瘤靶向(本文来源于《承德医学院学报》期刊2019年02期）
程孝中[5]（2018）在《酶法催化固相载体负载多肽的原位切割与环化》一文中研究指出来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的分选酶Soraste A(Srt A)是一种转肽酶,负责将蛋白锚定在细菌细胞壁的肽聚糖层上。它能够识别蛋白质中的保守序列LPXTG(X=半胱氨酸以外的任意氨基酸),并从T与G之间断裂酰胺键,与底物形成硫酯-酶复合物中间体。带有多聚甘氨酸序列上的氨基作为亲核基团进攻硫酯-酶复合物中间体,与底物形成新的酰胺键,最终Srt A酶释放出来,完成底物蛋白与甘氨酸亲核化合物的连接。Srt A介导的连接反应(Srt-mediated ligation,SML)既可以用于分子间的偶联,也适用于分子内的连接,被广泛应用于多肽或蛋白质定点标记、蛋白质-蛋白质偶联、抗体定点修饰、多肽或蛋白质环化、蛋白质(酶)固定化和细胞或病毒颗粒标记。虽然SML作为一种强大的连接工具,已经被广泛应用,但仍然存在一些问题:(1)纯化步骤较多,产率下降;(2)反应过程中易生成水解副产物;(3)在液相环化反应中,易产生寡聚体副产物;(4)在合成二硫键环肽时(例如植物环蛋白),二硫键氧化与环化很难兼容;(5)合成富含二硫键环肽时,多对二硫键成键时易形成异构体。因此,在SML基础上发展一种新的连接策略,解决目前SML存在的问题,对提高连接产物的产率和扩大SML应用范围具有重要意义。为了解决上述问题,本论文通过在固相载体上负载含有LPXTG序列的多肽,Srt A直接识别载体上的多肽并切割,并能高效地与甘氨酸亲核底物实现原位连接或环化,一锅法生成连接产物。本论文主要研究结果如下:(1)合成RGD(Arg-Gly-Asp;RGD)多价大环肽。设计并多肽固相合成(Solid Phase Peptide Synthesis;SPPS)了含有1-3个RGD序列的线性肽,N端为多聚甘氨酸序列,C端带有Srt A识别序列LPETGGS,序列分别为NH_2-G_7RGDLPETGGS-COOH、NH_2-G_4(RGD)_2LPETGGS-COOH、NH_2-G(RGD)_3LPETGGS。在液相体系中,Srt A介导的连接反应对线性肽进行环化,得到环肽产物,产率为38%-46%。含有不同RGD的环肽和线性肽用于细胞粘附竞争抑制实验,结果表明线性肽NH_2-G_4(RGD)_2LPETGGS-COO H和环肽cyclo-(G_7RGDLPET)对整合素αvβ3表现出良好的选择性结合能力。(2)Srt A在固相载体上对LPETG序列进行原位识别、切割并连接甘氨酸亲核底物。首次发现Srt A能够识别含有LPXTG基序的PEGA树脂支持的肽供体,并与含有寡聚甘氨酸的受体连接,一锅法生成连接产物。该方法解决了Srt A液相催化连接反应中易产生水解副产物、纯化步骤多、产率低等问题。并成功用于双功能肽合成(产率为52%-68%),多肽的脂质修饰(产率为61%),生物素化(产率为71%)和PEG化(产率为65%),以及蛋白质N-末端高效标记(产率为71%)。(3)Srt A在PEGA树脂上一锅法高效合成大环多肽和植物环蛋白。Srt A可以有效地识别锚定于PEGA树脂上含有C末端LPXTG基序和N-末端寡聚甘氨酸残基的双功能肽,并进行切割和原位环化产生环肽。该合成策略解决了Srt A液相合成环肽中易形成寡聚体和异构体副产物、纯化步骤多以及二硫键氧化与环化不兼容等问题。利用该策略头尾环化合成了抗菌牛乳铁蛋白肽LFcinB_(20-35),产率为67%。还可以用于合成含有一对和两对二硫键的植物环蛋白。例如,向日葵胰蛋白酶抑制剂-1(SFTI-1)和α-芋螺毒素MΠ(α-conotoxin MΠ)一锅法合成,产率为77%和61%。(4)Srt A在PEGA树脂上一锅法合成RGD环肽库。在PEGA树脂上多肽固相合成NH_2-G_5RGDXVLPETGGS-COOH序列。其中X突变为20种L-型氨基酸和19种D-型氨基酸。经Srt A介导的树脂上一锅法合成环肽,一步纯化得到含有39个RGD环肽的小肽库。这种树脂上介导环肽库合成方法解决了传统方法中合成步骤复杂、不易形成酰胺键环肽骨架等问题。利用表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance Technique;SPR)和细胞粘附竞争抑制实验筛选RGD环肽与整合素(αvβ3和αvβ5)的特异性结合能力,获得了对整合素αvβ3选择性结合效果较好的环肽c-K(IC50=3.5μM)。(本文来源于《江南大学》期刊2018-12-01）
魏刚[6]（2018）在《功能化多肽修饰的脂质载体用于肿瘤治疗（英文）》一文中研究指出Cancer is one of the top three fatal diseases in the world, and its treatment is still rudimentary despite tremendous advances made in chemotherapy and immunotherapy in the last decade. The frustrating limitations of chemotherapy are due to a number of factors, including random distribution of drugs in the body, ineffective concentration of drugs at the tumor site, poor drug permeability into the tumor cells, inadequate understanding of tumor microenvironment, and smart self-protection mechanisms evolved by the tumor cells. Numerous targeted drug delivery systems have been developed and tested in a hope to improvetherapeutic efficacy of existing drugs and new drug candidates. Unfortunately, the clinical efficacy of such targeted drug delivery systems has been unsatisfactory. Glioma is known to progress rapidly with poor prognosis. Glioma chemotherapy is especially challenging due to intrinsic obstacles of blood-brain barrier(BBB) and blood-brain tumor barrier(BBTB). Other critical factors to consider for successful treatment include understanding drug transport into glioma cells, and inhibiting anti-apoptosis and chemoresistance of the glioma cells. We attempt to integrate the above concerns into multi-functional liposomes by surface modification with a cell-permeable nuclear factor-κB(NF-κB) inhibitor, named CB5005, for treatment of glioma. CB5005 is a rationally designed peptide, which can be divided into two cascaded segments: a cell membranepermeable sequence and a nuclear localization sequence. The nuclear localization sequence of CB5005 is derived from p50 subunit of NF-κB, which can competitively prevent the translocation of activated NF-κB into nucleus. NF-κB is found to be constitutively activated in most malignant cells and in the tumor microenvironment. Thus, blocking NF-κB pathway can inhibit tumor growth and enhance the sensitivity of tumor cells to chemotherapeutic drugs. When applied with doxorubicin(DOX), CB5005 showed a synergistically antagonistic effect on glioma. Here, CB5005 was employed to modify PEGylated liposomes loaded with DOX for penetrating BBB and targeting glioma. Furthermore, CB5005-modified liposome delivery system is expected to improve the efficacy of those antineoplastic agents acting in the cell nuclei, and to be appropriate for those tumors associated with high NF-κB activity.(本文来源于《2018年第十二届中国药物制剂大会论文集》期刊2018-11-30）
朱婷婷[7]（2018）在《以RGD多肽为靶向基团、BODIPY为信号基团、O-羧甲基壳聚糖为载体的荧光探针的制备及相关性能研究》一文中研究指出肿瘤是人类生存健康威胁最大的杀手之一,肿瘤早期可视化诊断以及精准治疗引起了研究者们广泛的关注,荧光探针技术为解决这类问题,找到了突破口。目前在科学前沿领域,已报告出多种不同类型的荧光探针,商业化的荧光探针也广泛的应用。但是,他们都有一些弊端,如荧光易淬灭、荧光量子产率低、易受外界环境影响、毒性大、难溶于水、没有靶向性等。本文设计合成一种新型的两亲性的荧光探针,具体内容如下:(1)以对羟基苯甲醛、吡咯、6-溴-己酸乙酯、对甲氧基苯硼酸等为原料,经过溴化反应、氧化反应、Suzuki反应和酰化反应等,合成化合物BOD-L-C_5COONHS。并通过光学性能测试,发现其具有良好的荧光,其最大荧光发射波长为613 nm。(2)将壳聚糖在碱性条件羧甲基化反应,制备出O-羧甲基壳聚糖(O-CMC)。再将BOD-L-C_5COONHS接枝到O-CMC的-NH_2上,最后连cRGD多肽,制备出具有肿瘤靶向性和水溶性的荧光探针:BODIPY—O-CMC—cRGD。以该探针为载体,分别与BODIPY2和porphyrin两种染料自组装成两种“核-壳”结构的纳米粒子。(3)通过红外光谱、核磁、SEM、荧光光谱和共聚焦显微镜等实验对探针和纳米粒子进行了结构表征和生物性能测试。结果显示荧光探针是低毒性的,荧光探针及包覆BODIPY2的纳米粒子易被肿瘤细胞吞噬。包覆porphyrin的纳米粒子由于porphyrin分子刚性结构、粒径大,不能被肿瘤吞噬。如将抗肿瘤药物替代这两种染料,该荧光探针可望制备成具有精准诊疗一体化的抗肿瘤药物载体,具有广阔的应用前景。(本文来源于《天津大学》期刊2018-05-01）
代叶梅[8]（2018）在《基于多肽—药物共组装构筑还原响应型纳米抗癌药物载体》一文中研究指出多肽因其较低的生物毒性、良好的生物可降解性、易于功能化修饰以及可自组装等特性,在药物载体设计方面受到了越来越多的关注。本文选择多肽作为研究对象,通过在多肽分子中引入二硫键,设计了一种具有还原响应的多肽分子(RRP),通过与疏水性抗癌药物姜黄素(CCM)共组装,得到了纳米药物载体CCM@RRP,并对其肿瘤治疗效果进行了评价。主要研究内容如下:(1)纳米载药体系制备及表征:设计了一条含有二硫键的纯肽分子作为药物载体,其序列为Ac-ATKTAC(S-S)CATKTA-Ac。通过对共组装过程中CCM加入量、组装时间等参数的优化,确定了最佳制备条件:0.5 mg/mL RRP,0.3mg/mL CCM,pH 5.5,16℃下遮光静置1 h。所得的CCM@RRP纳米微粒尺寸约为250 nm,药物包埋率为63.43%。CCM@RRP纳米粒子具有较好的稳定性,冻干处理不会改变粒子尺寸分布,在溶液状态下24 h内能够维持原有结构,在20%血清中能够稳定存在。体外还原响应性测试表明,在含有8 mM谷胱甘肽(GSH)的溶液中,RRP多肽可快速断裂,纳米微球破裂,证明了CCM@RRP具有明显的GSH还原响应性。(2)纳米载药体系释放及应用评价:体外药物释放实验证明,CCM@RRP在正常pH 7.4条件下稳定存在,随着溶液中GSH浓度的增加,其释放CCM的速率也逐渐增加,当GSH浓度为8 mM时,4 h内药物释放率达90%以上。细胞摄取实验和毒性实验证明,CCM@RRP较游离CCM被摄取速率更快,药物摄取率更高,且RRP本身毒性低、生物相容性好。当携带CCM的含量达到50μg/mL时,CCM@RRP对HeLa宫颈癌细胞的致死率达88.03%,为游离CCM的4.26倍,对MDA-MB-231乳腺癌细胞的致死率达98.90%,为游离CCM的1.3倍。活体实验中,CCM@RRP对MDA-MB-231肿瘤抑制率为61.88%,对HeLa肿瘤抑制率为69.12%;组织病理分析表明,在治疗浓度下CCM@RRP对健康细胞具有较小的毒副作用,TUNEL免疫组化分析证实CCM@RRP能够有效导致肿瘤细胞凋亡。(本文来源于《天津大学》期刊2018-05-01）
宫春爱,夏清明,胡楚玲,顾芬芬,强磊[9]（2018）在《还原性多肽共载基因和化学治疗药载体的构建与体外评价》一文中研究指出目的制备一种共载基因和化学治疗药的硫辛酸(LA)修饰的以非内吞机制进入细胞的固有无序蛋白-细胞质定位的内化肽6(CL)的纳米复合物(LA-CL),并考察其在人胚肾细胞系HEK293细胞的转染效率、细胞摄取情况及其体外释放规律。方法以不同比例(2.5%、5%、10%、20%)半胱氨酸作为交联剂,合成4种不同交联度的LA-CLss,分别命名为LA-CLss1~LA-CLss4,并用核磁共振氢谱(1HNMR)和凝胶色谱鉴定。取增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)和LA-CLss以不同氮磷比(N/P,2.5、5、10、20、40、80)自组装形成纳米复合物,用激光粒度测定仪测定复合物的粒径和zeta电位,琼脂糖凝胶电泳测定载体LA-CLss对pEGFP的包裹能力和保护能力。用超声乳化法制备载多西他赛(DTX)的载药胶束,并用芘荧光探针光谱法测定LA-CLss3的临界胶束浓度。将LA-CLss/pEGFP纳米复合物与HEK293细胞共同培养,考察不同交联度复合物的细胞转染情况。结果 1HNMR结果确定LA-CLss合成成功。N/P=40时,HEK293细胞对LA-CLss3/p EGFP的转染效率高于LA-CL、LA-CLss1、LA-CLss2、LA-CLss4与pEGFP形成的复合物。超声乳化法制备的载药胶束包封率为(85.25±0.04)%,载药量为(8.81±0.02)%。细胞摄取结果表明,该载体可以有效地将基因递送至细胞内。体外释放实验结果表明,该多肽胶束具有还原性条件敏感释药行为。结论制备的LA-CLss/DTX/p EGFP纳米复合物有望成为一种高效的共载基因和化学治疗药的载体。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2018年02期）
赵欢乐,梁菊[10]（2017）在《多肽修饰的金纳米载体系统的转染性能研究》一文中研究指出选择SH-PEG-COOH作为连接物,将多肽KKTNVTLSKKRKRR(Pep1)、C18KKTNVTLSKKRKRR(Pep2)、RRKRKKK(C18)KKRKRR(Pep3)与金纳米通过金硫键和酰胺键共价连接,得到多肽-金纳米类的载体系统AuNPs-PEG-Pep1、AuNPs-PEG-Pep2、AuNPs-PEG-Pep3。结果表明,所制备的多肽-金纳米颗粒的粒径在30 nm左右。AuNPs-PEG-Pep2、AuNPs-PEG-Pep3在复合比为1时能够有效复合DNA,而AuNPs-PEG-Pep1在复合比2时有效复合DNA。基因转染结果发现AuNPs-PEG-Pep1、AuNPs-PEG-Pep2、AuNPs-PEG-Pep3对DNA的最大转染效率分别是28.94%、72.18%和48.6%。AuNPs-PEG-Pep2的转染效率接近阳性对照,有望应用于临床上的基因治疗。(本文来源于《中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题G：药物控释载体高分子》期刊2017-10-10）
多肽载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究表明,转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)在一些肿瘤细胞表面呈现过表达现象,而在正常细胞表达量很低~([1-2]),这种差异化表达提示TfR可能成为肿瘤治疗的作用靶点。噬菌体展示技术是筛选肿瘤靶向多肽的主要方法之一~([3])。DAI等~([4])利用噬菌体展示技术筛选到一条对TfR具有高亲和力的多肽BP9,随后他们又制备了一
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
多肽载体论文参考文献
[1].应芙蓉,詹玲玲,赵志超,陈闻捷,吕佳妤.基于2A多肽策略的抗CD19嵌合抗原受体表达载体的构建与应用[J].中国免疫学杂志.2019
[2].李松涛,赵红玲,常安琪,祁麟.转铁蛋白受体靶向多肽载体合成条件的优化[J].承德医学院学报.2019
[3].叶丽颖,彭臻菲,赵婷婷,谢富安,王军凯.靶向人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶多肽药物表达载体的构建[J].细胞与分子免疫学杂志.2019
[4].刘祺,李松涛,赵桂琴.肝癌靶向多肽载体的研究进展[J].承德医学院学报.2019
[5].程孝中.酶法催化固相载体负载多肽的原位切割与环化[D].江南大学.2018
[6].魏刚.功能化多肽修饰的脂质载体用于肿瘤治疗（英文）[C].2018年第十二届中国药物制剂大会论文集.2018
[7].朱婷婷.以RGD多肽为靶向基团、BODIPY为信号基团、O-羧甲基壳聚糖为载体的荧光探针的制备及相关性能研究[D].天津大学.2018
[8].代叶梅.基于多肽—药物共组装构筑还原响应型纳米抗癌药物载体[D].天津大学.2018
[9].宫春爱,夏清明,胡楚玲,顾芬芬,强磊.还原性多肽共载基因和化学治疗药载体的构建与体外评价[J].第二军医大学学报.2018
[10].赵欢乐,梁菊.多肽修饰的金纳米载体系统的转染性能研究[C].中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题G：药物控释载体高分子.2017