导读:本文包含了分化的小鼠胚胎干细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:miR-592,Cep135,胚胎干细胞,自我更新
分化的小鼠胚胎干细胞论文文献综述
白振东,李培昕,张宁彦,程健,张敬[1]（2019）在《miR-592靶向Cep135调控小鼠胚胎干细胞自我更新及分化》一文中研究指出目的探讨miR-592在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,m ESCs)自我更新及分化过程中的作用。方法通过转染试剂将miR-592表达质粒转入m ESCs,以过表达miR-592。利用qRT-PCR及Western印迹法分析miR-592对m ESCs分化的影响。利用Target Scan数据库预测miR-592作用的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验验证靶基因。利用Western印迹法探究miR-592及其靶基因对m ESCs自我更新的影响。结果 qRT-PCR及Western印迹法实验结果表明miR-592促进mESCs向外胚层方向分化。生物信息学分析及双荧光素酶报告实验的结果表明Cep135是miR-592作用的靶基因,而Western印迹法实验发现Cep135能够促进m ESCs的自我更新。结论 miR-592通过靶向下调Cep135的表达,以抑制m ESCs的自我更新,进而促使m ESCs向外胚层方向分化。(本文来源于《同济大学学报(医学版)》期刊2019年05期）
丁玲,苏敏[2]（2019）在《PAX6过表达对小鼠胚胎干细胞(mESCs)向角膜缘干细胞(LSCs)样细胞的诱导分化研究》一文中研究指出角膜的损伤常常会伴随着LSCs的缺乏,目前LSCs的获得多来源于原代组织培养,往往因供体的匮乏导致研究和应用两方面都受到了限制。研究表明PAX6基因在眼球形态发生中发挥重要的调节作用,参与了LSCs的形成。因此,本研究拟通过将PAX6基因转入mESCs后结合微环境诱导法将其向LSCs方向分化,以期为细胞移植治疗角膜疾病提供充足的(本文来源于《中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编》期刊2019-08-18）
郑丽[3]（2019）在《Activin A对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的影响》一文中研究指出小鼠多能性胚胎干细胞(mouse pluripotent embryonic stem cells,mESCs)和上胚层胚胎干细胞(epiblast stem cells,EpiSCs)分别是从囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM)和上胚层(epiblast)分离获得。ESCs其多能性的维持依靠Mek1/2、GSK3通路抑制剂(2i)及白血病抑制因子(LIF);而EpiSCs是由激活素A(Activin A,Act A)、成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)支持。本实验室利用添加Act A和bFGF化学成分明确的培养基(不包括KSR和饲养层细胞)培养小鼠囊胚获得了一种新型胚胎干细胞系(AFSCs)。本研究首先探究单独的Act A和bFGF对小鼠早期胚胎建系及对AFSCs细胞系诱导的影响,其次,用骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein4,BMP4),GSK3通路抑制剂(CHIR99021)和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)分别替代AF培养基中的bFGF,形成AB,AC,AL叁种培养基,培养AFSCs,使其诱导为一种具有早期特殊胚层特征并具有自我更新能力和多能性的细胞。1.类上胚层干细胞系的建立将小鼠受精后3.5天的囊胚(E3.5)分别放入AF(Act A+bFGF)、A(Act A)、2A(2×Act A)、4A(4×Act A)和2F(2×bFGF)五种培养液中培养,在AF、2A、4A中成功获得了AF/SCs(与AFSCs的建立来源及方法相同)、2A/SCs和4A/SCs叁种类上胚层干细胞系,且建系效率分别为15%、14.3%和7.2%。4A/SCs形态上类似AF/SCs,2A/SCs呈现杂合状态,二者AP染色均有阳性细胞。与2A/SCs相比,4A/SCs中多能基因和分化基因都显着提高。2.Act A对AF/SCs细胞系的影响将建立的AF/SCs细胞系放在添加不同浓度的Act A和bFGF的6种培养液(Act A、2×Act A、4×Act A、bFGF、2×bFGF、4×bFGF)中培养,获得了6种细胞系,分别为AF-A/SCs、AF-2A/SCs、AF-4A/SCs、AF-F/SCs、AF-2F/SCs和AF-4F/SCs。AP染色结果显示添加Act A组的阳性细胞数要比添加bFGF组的细胞数多。另外AF-4A/SCs高表达Nanog、Gata4和Cdx2;但AF-4A/SCs嵌合结果显示在胚胎和胚外结构中没有标记细胞,不具备贡献到胎儿的能力。3.Act A和BMP4共同作用对AF/SCs细胞系的影响由BMP4、CHIR99021和LIF分别替代AF/SCs培养基中的bFGF,对AF/SCs进行诱导,诱导后的细胞系分别命名为AF-AB/SCs、AF-AC/SCs和AF-AL/SCs。AF-AB/SCs和AF-AL/SCs与AF/SCs克隆形态相似,AP都呈阳性。AF-AB/SCs和AF-AL/SCs中高表达Nanog、Gata6和T。通过嵌合体制备技术证明:当把AF-AB/SCs和AF-AL/SCs注射到8细胞胚胎,在体外培养44小时,发现两种细胞既贡献到ICM又贡献到滋养外胚层(trophectoderm,TE)。进一步进行体内移植实验结果证明AF-AB/SCs只贡献到E6.5的胚外组织,而AF-AL/SCs既不贡献到胚胎也不贡献到胚外组织。转录组分析结果显示:AF/SCs、AF-AB/SCs和AF-AL/SCs有不同的基因表达模式,AF-AB/SCs中发育调节基因上调,部分差异表达基因富集于胚胎外组织发育和多能性信号通路。综上所述,Act A具有单独支持和维持干细胞自我更新的能力。Act A和BMP4可以将AF/SCs转化为类中胚层干细胞。由于人的ESCs的培养条件也是依赖Act A和bFGF,这个研究为人的ESCs培养及分化提供了新的见解。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-05）
郝俊凯[4]（2019）在《小鼠胚胎干细胞定向血管内皮和造血细胞分化体系的建立》一文中研究指出研究背景:在血管发生和重塑的过程中,血管内皮细胞(endothelial cell,EC)起源于血液血管母细胞(hemangioblast,HA)。但由于缺乏对这一发育过程诸多细节的深入了解,因而成熟的血管内皮在体外扩增十分困难,极大地限制了它的功能研究和临床应用。近年来,多项研究表明哺乳动物成体血管内皮中存在一群具有特定分子表型的“血管内皮干细胞(vascular endothelial stem cell,VESC)”,表达Kit(也称CD117)、Procr(也称EPCR、CD201)等分子,能在体外形成稳定克隆并产生数千万的子代内皮细胞。不仅如此,VESC还具有分化为原代内皮细胞和周细胞的双向潜能,可以在体内产生功能性血管,这为组织工程化血管和临床治疗提供了新的研究方向。造血细胞(hematopoietic cell,HC)的起源与血管内皮密不可分。目前的主流观点认为,造血细胞是由中胚层来源、功能特化的生血内皮(hematopoietic endothelium,HE)通过内皮-造血转化(endothelial to hematopoietic cell transition,EHT)分化演变而来,以产生原始造血和定向造血两大主要形式出现于胚胎早期的多个位点和时间节点,具有明显的时空特异性。小鼠胚胎期的造血细胞表达内皮细胞标志CD31、CD144等,来自外周血CD34~+的造血细胞可以通过体外培养分化为内皮细胞,这些研究也间接证实了造血细胞与内皮细胞有着共同的发育起源。胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)是一类能够分化成机体几乎所有细胞类型的全能干细胞,增殖能力强,是组织工程化研究理想的种子细胞。近年来多项研究表明,在干细胞因子(stem cell factor,SCF)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白细胞介素3(interleukin-3,IL-3)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)等细胞因子的诱导下,ESC在体外能被诱导分化为内皮干祖细胞(endothelial stem and progenitor cell,ESPC),进而分化成内皮细胞、血管壁细胞(周细胞和血管平滑肌)并进一步向动、静脉内皮特化;或者分化为造血干祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cell,HSPC),进而向髓系祖细胞(myeloid progenitor)、巨核-红系祖细胞(megakaryocyte–erythrocyte progenitor,MEP)等及其下游血细胞分化。这些发现为ESC的体外诱导编辑研究奠定了理论基础,然而因诱导手段局限、调控网络不清晰、微环境缺失等原因,ESC体外定向内皮细胞和造血细胞的分化体系仍不十分成熟。研究目的:本研究利用胚胎干细胞的发育全能性和诱导可塑性,通过各种细胞因子和条件控制,定向诱导其分别向内皮细胞和造血细胞分化,构建完整的体外定向分化体系。通过流式检测、免疫组化等各种手段验证诱导后2种细胞的表面分子特征,探索诱导过程中是否存在“干祖细胞”的中间态及其表面分子特征,探讨内皮和造血发育的相关性,为优化稳定、成熟的体外诱导分化体系,进而进行大规模组织工程化应用研究提供实验基础。研究方法:根据胚胎期内皮、造血细胞的起源规律,本研究在无血清的StemPro培养体系中,使用能够诱导干细胞向中胚层分化的BMP4(bone morphogenetic protein 4,骨形态发生蛋白4)、Activin A(激活素-A),以及能够诱导内皮细胞增殖、迁移的FGF-Basic(fibroblast growth factor basic,碱性成纤维细胞生长因子)和VEGF这4种因子,诱导小鼠胚胎干细胞系R1/E形成拟胚体(embryoid body,EB),模拟中胚层发育过程,再用SCF、VEGF和SCF、FLt3L(FLt-3 ligand)、IL-3分别定向诱导EB向EC和HC分化,建立胚胎干细胞体外定向血管内皮和造血细胞的分化系统。研究结果:经过四因子体系诱导分化4天后,ESC成功被诱导为大量形态饱满、克隆边界清楚的EB;继续向内皮和造血定向分化6天后,成功诱导出多个内皮管状结构和造血集落。通过流式检测分析,CD31~+的内皮细胞比例为1.35±0.05%,进一步分析CD31~+CD144~+CD45~-群体,发现其中有3.0±0.2%的细胞表型为Kit~+CD201~+,提示该部分细胞可能是处于分化上游的ESPC;CD45~+的造血细胞比例为35.0±0.5%,其中有0.35±0.05%的细胞表型为Kit~+CD201~+,提示该部分细胞可能是处于分化上游的HSPC。这两群细胞数量非常有限,但具有非常典型的干祖细胞特征标记,且表型相似,间接印证了内皮细胞和造血细胞有着共同的命运起源,与既往的研究认识不谋而合。研究结论:本研究成功地建立了将胚胎干细胞体外定向内皮细胞和造血细胞分化的体系,间接验证了二者可能存在共同的胚胎起源,并且通过流式检测捕捉到具有内皮、造血干祖细胞分子特征的细胞,可作为良好体外诱导分化体系,为深入探讨内皮、造血细胞的发育调控机制及以胚胎干细胞体外大规模定向诱导分化奠定了实验基础。(本文来源于《军事科学院》期刊2019-05-30）
郝俊凯,周杰,刘兵[5]（2019）在《小鼠胚胎干细胞定向血管内皮和造血细胞分化体系的建立》一文中研究指出目的:建立小鼠胚胎干细胞体外定向分化为血管内皮细胞和造血细胞的体系,并验证诱导后2种细胞的表面分子特征。方法:以小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,首先在无血清培养基StemPro中加入骨形态发生蛋白4(BMP4)、激活素A、碱性成纤维细胞生长因子(FGF-Basic)和血管内皮细胞生长因子(VEGF),诱导小鼠胚胎干细胞系R1/E 4 d后形成拟胚体;再将拟胚体消化后与OP9-DL1基质细胞共孵育,分别用干细胞因子(SCF)、VEGF和SCF、FLt3、白细胞介素3(IL-3)诱导向内皮和造血2个方向分化,并以CD31、CD45、CD144、Kit、CD201作为表面标志,流式检测诱导后细胞的表面分子特征和诱导效率;诱导10 d后免疫组化染色,进行内皮细胞的形态学鉴定。结果:诱导分化10 d后,免疫组化染色观察到多个内皮管状结构,流式检测CD31~+的内皮细胞比例为1.35%±0.05%,进一步分析CD31~+CD144~+CD45~-群体,有3.0%±0.2%的细胞表型为Kit~+CD201~+,提示该部分细胞可能是处于分化上游的内皮干祖细胞;CD45~+的造血细胞比例为35.0%±0.5%,其中0.35%±0.05%的细胞表达Kit和CD201,提示该部分细胞可能是处于分化上游的造血干祖细胞。结论:本研究将胚胎干细胞诱导为内皮细胞和造血细胞,并且能诱导出具有内皮、造血干祖细胞分子特征的细胞,可作为理想的体外诱导分化体系。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2019年02期）
王贝,袁晨燕,姚瑞芹[6]（2019）在《异补骨脂甲素调控miR-124对小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的影响》一文中研究指出目的探讨异补骨脂甲素(isobavachin,IBA)调控微小RNA-124(miR-124)对小鼠J1胚胎干细胞向神经细胞分化的影响。方法采用qRT-PCR和免疫荧光染色分别检测IBA干预或抑制miR-124表达的J1细胞中miR-124、八聚体转录因子4(octamer transcription factor-4,OCT4)和神经微丝H(neurofilament-H, NFH)的表达。使用Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因和Western blot实验验证miR-124和锌指蛋白18(zinc finger and BTB domain containing 18, ZBTB18)的靶向关系。在J1细胞中转染pcDNA-ZBTB18或miR-124 mimics、ZBTB18 shRNA,免疫荧光染色检测细胞中OCT4和NFH的表达。结果 IBA可显着抑制J1细胞中OCT4蛋白表达,并上调miR-124和NFH表达;而抑制miR-124表达后所得结果相反。miR-124可靶向调控ZBTB18蛋白表达。在J1细胞中过表达ZBTB18,OCT4阳性表达率升高而NFH阳性表达率降低;敲减ZBTB18可在一定程度上减弱miR-124对IBA干预J1细胞OCT4和NFH表达的促进或抑制作用。结论 IBA能够促进J1细胞中miR-124表达,而miR-124可靶向调控ZBTB18,从而调节OCT4和NFH蛋白表达,这可能是IBA促进小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞的作用机制。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2019年12期）
刘洋,杜晋,吴平,李轩,张璐[7]（2019）在《Lefty1对小鼠胚胎干细胞分化过程的影响》一文中研究指出目的:研究Lefty1在小鼠胚胎干细胞分化过程中的作用。方法:根据染色质免疫沉淀测序结果,在临近Lefty1转录起始位点以及与之相距10 kb的上游区域有TGF-β信号通路Smad2/3蛋白的四个结合区域,通过CRISPR/Cas9方法获得四个区域敲除的单克隆细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各细胞中Lefty1的转录水平,并用TGF-β信号通路的激活剂AC和抑制剂SB分别处理敲除的细胞,检测其对TGF-β信号的响应,最后通过胚状体形成实验,检测敲除细胞系在中内胚层分化过程中的标志分子Gsc和Mixl1的表达。结果:利用CRISPR/Cas9方法成功获得不同区域敲除的单克隆细胞,与野生型E14细胞相比,四种区域敲除的细胞中Lefty1 RNA含量明显降低,并且在干细胞状态和分化状态下,敲除细胞系对TGF-β信号的响应减弱。在胚状体形成的实验中,与野生型E14细胞相比,敲除细胞系在分化过程中Lefty1表达的基础水平明显降低,中内胚层分化的标志分子Gsc和Mixl1转录水平也明显下降。结论:在胚胎干细胞中,Lefty1转录起始位点附近以及上游10 kb的这四段区域通过TGF-β信号通路对Lefty1的转录发挥调控作用,从而影响中内胚层分化过程中的标志分子Gsc和Mixl1的表达。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年02期）
宋波,陈日玲,廖凤玲[8]（2018）在《Notch信号通路对VEGF促小鼠胚胎干细胞分化成为造血干/祖细胞的作用》一文中研究指出目的:探讨Notch信号通路对小鼠胚胎干细胞(ESC)分化为造血干细胞/祖细胞(HSC/HPC)的影响。方法:小鼠胚胎干细胞体外增殖形成拟胚体;拟胚体体外诱导分化,分为EB组、实验对照组、VEGF、DAPT组、VEGF-DAPT组。流式细胞术检测HSC/HPC表型CD117+CD34+Sca1+; RT-PCR检测相关基因表达。结果:VEGF组诱导形成的HSC/HPC数目较对照组及EB组明显增多(P <0.05),提示VEGF促进ESC分化为HSC/HPC;DAPT组诱导分化的HSC/HPC数目较对照组及EB组增多(P <0.05),提示Notch信号通路阻断剂DAPT促进ESC分化为HSC/HPC;VEGF-DAPT组HSC/HPC较VEGF组HSC/HPC和DAPT组增多(P <0.05),提示DAPT、VEGF对促进ESC分化为HSC/HPC有协同作用。结论:Notch信号通路在VEGF促ESC分化为HSC/HP中起抑制作用。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2018年06期）
李海洋,许士俊,张宏家[9]（2018）在《3-羟基丁酸-3-羟基己酸共聚酯材料促进小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究》一文中研究指出目的:观察3-羟基丁酸-3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx)能否促进多能干细胞(m ESC)的存活、增殖以及分化,为心肌梗死的治疗提供新的治疗策略。方法:培养m ESC,传代培养至3代后与PHBHHx材料制成的生物薄膜共同培养72h,CCK-8试剂盒测定m ESC的活性及增殖,DAPI染色观察细胞,电镜观察m ESC生长。将小鼠m ESC向心肌细胞定向分化,15d后免疫荧光和流式细胞术定量测定心肌肌钙蛋白(c Tn T)。结果:CCK-8活性检测显示PHBHHx膜培养m ESC可以促进细胞更好的增殖;电镜扫描显示,m ESC在PHBHHx膜上能够粘附生长,细胞形态正常。加入干细胞分化培养基使干细胞向心肌细胞定向分化15d后,通过免疫荧光显示心肌细胞特异性标志蛋白c Tn T表达阳性;流式细胞术测得PHBHHx膜培养比传统的细胞培养方式能够促进细胞更好的分化,测得的c Tn T表达量明显增加。结论:PHBHHx膜与m ESC有较好的组织相容性,并且能够促进m ESC的增殖和分化。(本文来源于《心肺血管病杂志》期刊2018年08期）
向俊蓓,刘绵学,谢林峰,万谦[10]（2018）在《右归丸能启动小鼠胚胎干细胞1B10和D3的生殖分化》一文中研究指出目的分析补肾中药复方右归丸对干细胞生殖分化的影响。方法以两种小鼠胚胎干细胞1B10和D3为模型,以右归丸大鼠含药血清(YGW-RS)为实验药物干预1B10和D3,同时设生殖分化诱导物维甲酸(RA)为阳性对照,干预72 h,进行显微照像分析;72 h后,提取RNA,立即合成cDNA;采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测1B10和D3 11种与生殖分化相关基因Oct-4、Stra8、GDF-9、SCP3、Mvh、ZP1、ZP2、ZP3、Itga6、Itgb1、TP2的表达模式,GAPDH为内参基因。结果对于1B10,RA显着上调Stra8、Mvh、ZP1、ZP2表达,显着下调SCP3、ZP3、Oct-4表达(P<0.05);对于D3,RA显着上调Stra8表达,显着下调Oct-4、GDF-9、SCP3、Mvh、ZP3、Itgab表达(P<0.05)。对于1B10,YGW-RS显着上调Oct-4、SCP3、Mvh、ZP1、ZP2、ZP3、Itga6表达,显着下调Stra8表达(P<0.05);对于D3,YGW-RS显着上调Oct-4、GDF-9、Stra8、ZP2、TP2表达(P<0.05)。结论右归丸具有启动干细胞生殖分化的作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2018年16期）
分化的小鼠胚胎干细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
角膜的损伤常常会伴随着LSCs的缺乏,目前LSCs的获得多来源于原代组织培养,往往因供体的匮乏导致研究和应用两方面都受到了限制。研究表明PAX6基因在眼球形态发生中发挥重要的调节作用,参与了LSCs的形成。因此,本研究拟通过将PAX6基因转入mESCs后结合微环境诱导法将其向LSCs方向分化,以期为细胞移植治疗角膜疾病提供充足的
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
分化的小鼠胚胎干细胞论文参考文献
[1].白振东,李培昕,张宁彦,程健,张敬.miR-592靶向Cep135调控小鼠胚胎干细胞自我更新及分化[J].同济大学学报(医学版).2019
[2].丁玲,苏敏.PAX6过表达对小鼠胚胎干细胞(mESCs)向角膜缘干细胞(LSCs)样细胞的诱导分化研究[C].中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编.2019
[3].郑丽.ActivinA对小鼠早期胚胎干细胞系建立及分化的影响[D].内蒙古大学.2019
[4].郝俊凯.小鼠胚胎干细胞定向血管内皮和造血细胞分化体系的建立[D].军事科学院.2019
[5].郝俊凯,周杰,刘兵.小鼠胚胎干细胞定向血管内皮和造血细胞分化体系的建立[J].生物技术通讯.2019
[6].王贝,袁晨燕,姚瑞芹.异补骨脂甲素调控miR-124对小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的影响[J].第叁军医大学学报.2019
[7].刘洋,杜晋,吴平,李轩,张璐.Lefty1对小鼠胚胎干细胞分化过程的影响[J].现代生物医学进展.2019
[8].宋波,陈日玲,廖凤玲.Notch信号通路对VEGF促小鼠胚胎干细胞分化成为造血干/祖细胞的作用[J].中国实验血液学杂志.2018
[9].李海洋,许士俊,张宏家.3-羟基丁酸-3-羟基己酸共聚酯材料促进小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究[J].心肺血管病杂志.2018
[10].向俊蓓,刘绵学,谢林峰,万谦.右归丸能启动小鼠胚胎干细胞1B10和D3的生殖分化[J].中国老年学杂志.2018