导读:本文包含了斑点酶免疫渗滤法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:斑点免疫酶渗滤法,雌叁醇,单克隆抗体
斑点酶免疫渗滤法论文文献综述
薛添,赵轶君,董洁,李红民[1]（2013）在《斑点酶免疫渗滤法定量检测雌叁醇的实验研究》一文中研究指出目的制备高特异性的抗雌叁醇(E3)单克隆抗体(mAb),建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法。方法采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA。应用mAb技术制备抗E3的mAb;以硝酸纤维素膜为固相载体,抗E3 mAb为包被抗体,建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法。结果筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株。mAb效价为1×105~5×105,亲和常数为5.1×108~5.2×109L/mol。检测敏感度为2 ng/mL,检测范围2~200 ng/mL。结论建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2013年08期）
王武军,徐淑菲,孔繁德,唐泰山,黄一帆[2]（2012）在《牛传染性鼻气管炎抗体的纳米胶体金斑点免疫渗滤法检测》一文中研究指出将无血清细胞培养的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗原包被于硝酸纤维素膜,加入待检血清样品后,利用纳米胶体金标记的山羊抗牛IgG显色,建立了检测IBR抗体的纳米胶体金斑点免疫渗滤法检测试纸盒。整个试验过程仅需5min即可判断结果,与蓝舌病、牛赤羽病、牛地方流行性白血病、牛病毒性腹泻黏膜病、猪瘟、猪伪狂犬病和猪细小病毒病的阳性血清不发生交叉反应。将该法与用于IBR抗体检测的ELISA方法同时对300份临床牛血清样品进行IBR抗体检测,结果二者的阳性符合率达94.4%。结果表明,该法具有特异、敏感、快速可靠、效果直观、结果容易判断的特点,非常适用于IBR的早期诊断和流行病学调查。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2012年08期）
王素洁[3]（2009）在《斑点酶免疫渗滤法检测脑膜炎球菌、单纯疱疹病毒巨细胞病毒及新型隐球菌抗原实验方法的建立》一文中研究指出目的:建立用斑点酶免疫渗滤法(Dot Immunoenzyme Filtration Assay,DIEFA)检测脑膜炎双球菌(A群)、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、新型隐球菌抗原的诊断方法,为进一步研制检测急性脑(膜)炎病原体蛋白芯片试剂盒提供实验依据。方法:1建立用斑点酶免疫渗滤法检测已知的脑膜炎双球菌(A群)抗原:制备抗原,按二倍顺序稀释法将抗原、抗体及酶标抗体稀释成不同浓度;用方阵滴定法确定所有试验点及其相应的抗原抗体反应浓度;判读实验结果并用分析软件读取光密度值(OD值),统计学分析得出最佳反应组合及反应方程。2建立用斑点酶免疫渗滤法检测已知的单纯疱疹病毒抗原:用二倍顺序稀释法将抗原、抗体及酶标抗体稀释成不同浓度,用方阵滴定法确定所有试验点及其相应的抗原抗体反应浓度;判读实验结果并用分析软件读取光密度值(OD值),统计学分析得出最佳反应组合及反应方程。3建立用斑点酶免疫渗滤法检测已知的巨细胞病毒抗原:用二倍顺序稀释法将抗原、抗体及酶标抗体稀释成不同浓度,用方阵滴定法确定所有试验点及其相应的抗原抗体反应浓度;判读实验结果并用分析软件读取光密度值(OD值),统计学分析得出最佳反应组合及反应方程。4建立用斑点酶免疫渗滤法检测已知的新型隐球菌抗原:制备抗原,用二倍顺序稀释法将抗原、抗体及酶标抗体稀释成不同浓度,用方阵滴定法确定所有试验点及其相应的抗原抗体反应浓度;判读实验结果并用分析软件读取光密度值(OD值),统计学分析得出最佳反应组合及反应方程。结果:1斑点酶免疫渗滤法检测已知的脑膜炎双球菌抗原的最佳反应浓度:鼠抗(A)群脑膜炎双球菌多克隆抗体浓度0.1250μg/ml(1:800)与抗鼠/兔通用型酶标抗体浓度1:10。稀释抗原建立回归方程Y=0.4564X+0.0728,相关系数r=0.9212(P <0.05),抗原最小检出浓度33.7 ng/m(l1?3200);对照均为阴性,无非特异性反应。鼠抗(A)群脑膜炎双球菌单克隆抗体浓度0.3125μg/ml(1:320)与抗鼠/兔通用型酶标抗体浓度1:10为最佳反应浓度组合;稀释抗原建立回归方程Y=0.4828X+0.0689,相关系数r=0.9070(P<0.05),抗原最小检出浓度16.8 ng/ml(1?6400);对照均为阴性,无非特异性反应。2斑点酶免疫渗滤法检测已知的单纯疱疹病毒抗原的最佳反应滴度为:兔抗单纯疱疹病毒多克隆抗体浓度8.4μg/ml(1:100)与抗鼠/兔通用型酶标抗体浓度1:10。稀释抗原建立回归方程Y=0.0984X+0.1310,相关系数r=0.8884(P<0.05),抗原最小检出浓度66.8 ng/ml(1?2048);对照均为阴性,无非特异性反应。3斑点酶免疫渗滤法检测已知的巨细胞病毒抗原的最佳反应滴度为:兔抗巨细胞病毒多克隆抗体浓度12.5μg/ml(1:160)与抗鼠/兔通用型酶标抗体浓度1:10。稀释抗原建立回归方程Y=0.0440X+0.0576,相关系数r=0.9297(P<0.05),抗原最小检出浓度55.7 ng/ml(1?4096);对照均为阴性,无非特异性反应。4斑点酶免疫渗滤法检测已知的新型隐球菌抗原的最佳反应滴度为:鼠抗新型隐球菌单克隆抗体浓度2.5μg/ml(1:80)与抗鼠/兔通用型酶标抗体浓度1:10。建立不同稀释浓度的抗原与A值变化关系的标准曲线,求出回归方程Y=0.3528X+0.0693,相关系数r=0.8889(P<0.05),抗原最小检出浓度8.7 ng/ml(1:4096);对照均为阴性,无非特异性反应。结论:初步建立了用斑点酶免疫渗滤法检测脑膜炎双球菌(A群)、单纯疱疹病毒抗原、巨细胞病毒抗原、新型隐球菌抗原的实验方法。用已知鼠抗A群脑膜炎双球菌多克隆抗体、单克隆抗体检测脑膜炎双球菌抗原反应的抗原最小检出浓度分别为33.7 ng/ml和16.8 ng/ml;已知兔抗单纯疱疹病毒多克隆抗体检测单纯疱疹病毒,抗原最小检出浓度66.8 ng/ml;已知兔抗巨细胞病毒多克隆抗体检测巨细胞病毒,抗原最小检出浓度55.7 ng/ml;已知鼠抗新型隐球菌单克隆抗体检测新型隐球菌,抗原最小检出浓度8.7 ng/ml。该方法具有灵敏度高、特异性强,且快捷、简单、结果可保存等优点,适合在广大临床实验室推广应用。(本文来源于《河北医科大学》期刊2009-03-01）
王星伟[4]（2008）在《斑点酶免疫渗滤法检测纳米细菌致兔胆结石血清学方法的建立》一文中研究指出纳米细菌(Nanobacteria,Nb)是由芬兰科学家Kajander于1989年发现的一种超微细菌,它们呈球形或杆状,具有细胞壁,直径在80～500nm之间,菌落常呈蔟状;能生成含有磷灰石的生物膜,具有很强的抗热、抗γ射线辐射及抵御抗生素的能力;能通过100nm的滤菌器,且具独特的生物矿化能力。近年来,有研究资料表明,纳米细菌与胆囊结石、肾结石、动脉粥样硬化等多种骨骼外钙化性或硬化性疾病有关,引起了科学界极大的关注。采用抗纳米细菌单克隆抗体作免疫荧光及免疫组化检测,扫描电镜、透射电镜及免疫电镜等形态学观察,是目前鉴定纳米细菌的主要方法。目的本研究旨在通过对胆石症患者胆汁纳米细菌分离培养,免疫动物,制备多克隆抗体;并对试验条件的探讨优选,建立斑点酶免疫渗滤法检测动物血清中特异性纳米细菌抗体的初步诊断方法。方法1.选择无急性胆囊炎发作病史,腹腔镜手术前未接受抗生素治疗的6例胆囊结石患者,无菌操作抽取胆汁进行纳米细菌培养,同时设DMEM全培养液培养和合成羟基磷灰石培养为阴性对照。2.用数显浊度仪测量胆石症患者胆汁分离培养物和对照组中纳米细菌生长情况并绘制生长曲线。3.用扫描电镜对胆石症患者胆汁分离培养物进行能谱分析,并用透射电镜对纳米细菌培养物进行形态学观察。4.用纳米细菌培养物制成纳米细菌滴片,分别按文献方法进行间接免疫荧光染色、Von KOSSA染色及Hochest 33258染色。5.纯化抗原,通过考马斯亮蓝定量蛋白浓度为174.2μg/ml,保存备用。6.免疫家兔免疫家兔3只,背部多点接种含福氏完全佐剂的纳米细菌(总量200μg/ml/只)。2周后接种含福氏不完全佐剂的纳米细菌(总量50μg/ml/只)进行加强免疫(每次间隔2周,共4次),制备纳米细菌多克隆抗体,并用ELISA测定其含量。7.建立纳米细菌多克隆抗体斑点酶免疫渗滤检测法将兔抗纳米细菌多克隆抗体用二倍顺序稀释法稀释至1:6400～1:51200;纳米细菌抗原稀释至1?10～1:160等不同浓度;通用型抗鼠/兔酶标抗体稀释至1:10～1:40。用方阵滴定法确定所有试验点及其相应的抗原抗体反应浓度。每个试验点重复6次,以出现肉眼能判读的棕色斑点或圆圈者为阳性,不能判读者为阴性。对每个阳性反应棕色斑点,用“Motic Med 6.0数码医学图象分析系统(A)”读取光密度值(OD值),求出每个试验点的平均OD值。分析数据,选择检测纳米细菌多抗的最佳兔抗纳米细菌抗原滴度和酶标抗体滴度的反应组合。抗原和酶标抗体滴度固定后,进一步检测不同稀释度的多克隆抗体,读取数据,分析OD值变化与纳米细菌多抗含量的关系,绘制标准曲线,求出回归方程及相关系数。8.斑点酶免疫渗滤法的特异性检测及评价用最佳纳米细菌抗原滴度和酶标抗体滴度的反应组合,以斑点酶免疫渗滤法对不同浓度的实验动物感染阳性血清标本和阴性血清标本进行检测,通过诊断灵敏度、诊断特异性和假阳性率等指标确定样本的最佳稀释浓度。用最佳纳米细菌抗原滴度和酶标抗体滴度的反应组合,对纳米细菌感染实验各组家兔血清标本进行检测,并评价其诊断灵敏度、诊断特异度、阳性结果预期值、阴性结果预期值及总有效率。结果1. 6例胆石症患者胆汁样本在含有10%γ-FBS的DMEM、37℃和5%CO2培养条件下,纳米细菌培养均为阳性。2.胆石症患者胆汁培养物在倒置相差显微镜下可见做布朗运动的微小的颗粒。培养过程中纳米细菌缓慢生长,培养液的pH值无明显变化;传代后的纳米细菌仍维持上述生物学特性。3.经数显浊度仪测量,在4周内,每5天测量一次,纳米细菌培养组浊度一直呈上升趋势,其倍增时间约为3天,而DMEM和羟基磷灰石对照组无明显变化,经180℃干烤4h灭活的纳米细菌培养组也未见明显变化。4.纳米细菌的鉴定透射电镜下观察,纳米细菌约为80～350nm,呈椭球形或短棒状颗粒,聚集成簇状,其表面覆有细菌被膜。扫描电镜能谱分析(EDX)显示,纳米细菌含有钙、磷、铝、硅、硫等元素,其钙/磷比值为1.62,与羟基磷灰石中钙/磷比值的1.66相近。Von KOSSA钙染色法结果显示纳米细菌形成的矿化外壳呈黑色。间接免疫荧光染色显示纳米细菌被荧光抗体结合,在荧光显微镜下激发绿色荧光。纳米细菌可被Hoechst 33258染色,发出特征性的蓝色荧光,提示纳米细菌含有DNA成分。5.免疫家兔血清经ELISA检测,多抗的浓度为56.25mg/ml。6.斑点酶免疫渗滤法检测Nb多克隆抗体的最佳反应滴度为:Nb抗原1:20(8.71μg/ml),通用型酶标抗体浓度1:10。建立不同稀释浓度的多抗与OD值变化关系的标准曲线,求出回归方程Y=0.0832X+0.0745,相关系数r=0.876(P<0.05)。确定最小Nb多克隆抗体稀释比例为1:12800,最小抗体检出浓度为68.59ng/ml。7.用最佳纳米细菌抗原滴度和酶标抗体滴度的反应组合,以斑点酶免疫渗滤法对不同浓度的实验动物感染阳性血清标本和阴性血清标本进行检测,确定最佳血清样本工作滴度为1:6400。8.用斑点酶免疫渗滤法检测对纳米细菌感染实验各组家兔血清标本进行检测的结果:40份阳性,56份阴性;而芬兰nanobac公司ELISA试剂盒检测结果为:38份阳性,58份阴性。检测结果经配对资料χ2检验,与纳米细菌感染家兔致胆结石结果相关(χ2=88.055, P=0.001),且两者具有高度诊断一致性(kappa值为0.957)。结论1.患有胆囊结石的患者胆汁中存在纳米细菌感染。纳米细菌体积微小,生长缓慢,在生理条件下其菌体表面可生成羟基磷灰石矿化外壳。2.纳米细菌具有免疫原性,可以通过免疫动物制备抗血清。3.初步建立斑点酶免疫渗滤法对兔血清中纳米细菌抗体检测法,其灵敏度:96.55%;特异度:82.09%;约登指数:0.7867;总有效率:86.46%;阳性预期值:70.00%;阴性预期值:98.21%。(本文来源于《华北煤炭医学院》期刊2008-04-01）
朱贞友,陈世菊[5]（2008）在《斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探》一文中研究指出目的比较斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病的效果。方法选择疫区水牛,耳静脉取血制备血纸,作为待检样品。分别采用斑点金标免疫渗滤法与斑点酶标法检测,比较检测结果。结果斑点金标渗滤法检测仅需30 min,而斑点酶标法则需160 min。结论斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病,操作简便易行、快捷,省时、省工,工作效率成倍提高。(本文来源于《中国兽医寄生虫病》期刊2008年01期）
黄红莹,马远方,许国强,杜耀武[6]（2006）在《斑点免疫渗滤法检测抗精子抗体的反应条件优化》一文中研究指出近年的研究显示,精子膜抗原与生育关系密切,其抗体的产生可导致免疫性不育。目前比较快速的抗精子抗体(AsAb)检测法是斑点免疫渗滤法,但经与酶免试剂盒相比,市售的胶体金免疫渗滤试剂盒灵敏度不十分理想。因此,我室用自己提取的精子膜抗原,建立了快速检测AsAb(本文来源于《检验医学》期刊2006年04期）
王仲元,陈红兵,何秀云,张小刚,阎世明[7]（2005）在《斑点酶免疫渗滤法抗体检测对结核性脑膜炎诊断价值的评估》一文中研究指出脑脊 液(CSF)检 查 有助 于 准 确 诊断 结 核 性 脑 膜 炎 (TBM )。我 们 将 CSF 涂 片 找 抗 酸 杆 菌 、PCR 扩 增 结 核 杆 菌 DN A 和 金标 抗 体 试 剂盒 检 测 IgG 设 为 对 照 ,评 价 用(本文来源于《北京医学》期刊2005年02期）
徐兵,薛昭卿,李忆农[8]（2000）在《金标记斑点免疫渗滤法检测尿中微量白蛋白》一文中研究指出我们用常规细胞融合技术制备了抗人血清白蛋白 (ｈｕ ｍａｎｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ ,ＨＳＡ)单克隆抗体 (ＭｃＡｂ) ,用胶体金标记抗ＨＳＡＭｃＡｂ ,用抗ＨＳＡ兔抗体点样的硝酸纤维素膜作固相 ,建立了一种快速检测尿中微量白蛋白的金标记斑点免疫渗滤法(本文来源于《临床检验杂志》期刊2000年04期）
王惠峰,顾其龙,胡忠义[9]（1999）在《快速斑点免疫渗滤法检测结核抗体》一文中研究指出快速斑点金渗滤法检测血清结核抗体对结核病的诊断及病情有较大意义。经典的结核分支杆菌涂片及培养操作烦琐,阳性率偏低,且需时较久,为寻求早期、特异性诊断方法,我们应用快速斑点金渗滤法检测血清结核抗体,并与涂片和培养进行比较,结果如下。 1 材料和方法 1.1 试剂:快速斑点金渗滤法测定结核抗体试剂盒购自B.J.公司(批号970804、980102)。 1.2 血清:80份活动性肺结核病人血清取自临床确(本文来源于《临床肺科杂志》期刊1999年02期）
黄映辉,单万水,涂红,刘剑雄[10]（1998）在《斑点免疫渗滤法检测丙肝IgG抗体试剂盒的研制》一文中研究指出用基因工程重组的丙肝抗原包被于硝酸纤维素膜，建立了检测丙肝ＩｇＧ抗体的斑点免疫渗滤法。与ＥＬＩＳＡ试剂盒进行双盲式同步测定，二法检验结果差异无显着性。渗滤法简便快速，适用于各级医院，有很强的推广价值。(本文来源于《湖北医科大学学报》期刊1998年02期）
斑点酶免疫渗滤法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
将无血清细胞培养的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗原包被于硝酸纤维素膜,加入待检血清样品后,利用纳米胶体金标记的山羊抗牛IgG显色,建立了检测IBR抗体的纳米胶体金斑点免疫渗滤法检测试纸盒。整个试验过程仅需5min即可判断结果,与蓝舌病、牛赤羽病、牛地方流行性白血病、牛病毒性腹泻黏膜病、猪瘟、猪伪狂犬病和猪细小病毒病的阳性血清不发生交叉反应。将该法与用于IBR抗体检测的ELISA方法同时对300份临床牛血清样品进行IBR抗体检测,结果二者的阳性符合率达94.4%。结果表明,该法具有特异、敏感、快速可靠、效果直观、结果容易判断的特点,非常适用于IBR的早期诊断和流行病学调查。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
斑点酶免疫渗滤法论文参考文献
[1].薛添,赵轶君,董洁,李红民.斑点酶免疫渗滤法定量检测雌叁醇的实验研究[J].细胞与分子免疫学杂志.2013
[2].王武军,徐淑菲,孔繁德,唐泰山,黄一帆.牛传染性鼻气管炎抗体的纳米胶体金斑点免疫渗滤法检测[J].中国兽医科学.2012
[3].王素洁.斑点酶免疫渗滤法检测脑膜炎球菌、单纯疱疹病毒巨细胞病毒及新型隐球菌抗原实验方法的建立[D].河北医科大学.2009
[4].王星伟.斑点酶免疫渗滤法检测纳米细菌致兔胆结石血清学方法的建立[D].华北煤炭医学院.2008
[5].朱贞友,陈世菊.斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探[J].中国兽医寄生虫病.2008
[6].黄红莹,马远方,许国强,杜耀武.斑点免疫渗滤法检测抗精子抗体的反应条件优化[J].检验医学.2006
[7].王仲元,陈红兵,何秀云,张小刚,阎世明.斑点酶免疫渗滤法抗体检测对结核性脑膜炎诊断价值的评估[J].北京医学.2005
[8].徐兵,薛昭卿,李忆农.金标记斑点免疫渗滤法检测尿中微量白蛋白[J].临床检验杂志.2000
[9].王惠峰,顾其龙,胡忠义.快速斑点免疫渗滤法检测结核抗体[J].临床肺科杂志.1999
[10].黄映辉,单万水,涂红,刘剑雄.斑点免疫渗滤法检测丙肝IgG抗体试剂盒的研制[J].湖北医科大学学报.1998