导读:本文包含了奶牛成纤维细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:金黄色葡萄球菌,奶牛乳腺成纤维细胞,MMPs,TIMP-1
奶牛成纤维细胞论文文献综述
缪增强,王凤龙,丁玉林,陈梦娟,曹霞[1]（2019）在《金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞MMPs/TIMP-1和uPA/PAI-1表达的影响》一文中研究指出(目的)金黄色葡萄球菌(S.aureus)是导致奶牛乳腺炎常见的病原菌之一,持续感染可造成奶牛乳腺纤维化甚至乳腺硬化,其分子机制尚未完全确定。本研究以体外培养并纯化的奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)为研究对象,探讨S.aureus对BMFBs MMPs/TIMP-1和u PA/PAI-1表达的影响。(方法)采用热灭活的S.aureus(10~5、10~6、10~8 CFU/m L)作用BMFBs,于不同时间点(6h、12h、24h、48h)提取细胞的总RNA和总蛋白。应用qPCR和Western blot方法分别检测MMP-1、MMP-3、MMP-13、TIMP-1、u PA、PAI-1 m RNA和蛋白的表达。(结果)结果表明,经不同浓度热灭活的S.aureus作用BMFBs,随着时间的延长,108 CFU/m L热灭活的菌液显着上调了MMP-1和MMP-13m RNA的表达,其蛋白的表达也呈上升趋势;而不同浓度热灭活的菌液对MMP-3和TIMP-1的作用表现为明显的量效和时效关系且呈上升趋势,其蛋白的表达呈先下降后上升的趋势;对u PA/PAI-1的影响,随不同浓度热灭活的菌液作用时间的延长,处理组u PAm RNA和蛋白的表达与对照组相比呈升高趋势且呈时效和量效关系,108 CFU/m L的菌液对PAI-1的m RNA和蛋白的表达与对照组相比显着升高。(结论)不同浓度热灭活的S.aureus菌液对MMPs/TIMP-1和u PA/PAI-1 m RNA和蛋白的表达具有一定的上调作用,MMPs/TIMP-1及u PA/PAI-1的激活可能在S.aureus诱导的BMFBs细胞外基质代谢中发挥一定的作用。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
张旭,武瑞,王建发,贺显晶,杨彬[2]（2018）在《脂多糖对奶牛乳腺成纤维细胞增殖速率、胞内Toll样受体及其信号通路相关基因mRNA表达水平的影响》一文中研究指出目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺成纤维细胞(bovine mammary fibroblast,BMFB)增殖速率、胞内Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)及其信号通路相关基因m RNA表达水平的影响。方法原代培养BMFB,用LPS(终浓度10μg/mL)刺激BMFB不同时间后,经CCK-8法检测BMFB的增殖速率,实时荧光定量PCR法检测BMFB胞内TLR及其信号通路相关分子m RNA的表达水平。结果 LPS刺激BMFB 0、1、3 h后,BMFB增殖速率差异无统计学意义(P>0.05),LPS刺激BMFB 6 h开始,试验组BMFB的增殖速率明显快于对照组(P<0.05)。与对照组比较,LPS刺激BMFB 12 h后,TLR2、TLR4、信号转导通路激活核转录因子κB(nuclear factor of kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha-α,TNF-α)和白细胞介素-1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor associated kinase 1,IRAK1)基因m RNA表达水平显着升高(P<0.05),髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)基因m RNA的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BMFB可能通过TLR2和TLR4识别LPS,并与NF-κB信号通路级联诱导炎性细胞因子和趋化因子的释放,参与奶牛乳腺先天性免疫应答。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年04期）
赵弥,丁玉林,毕艳楠,张芮今,郭运泽[3]（2017）在《无乳链球菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞瘦素及其受体表达的影响》一文中研究指出为研究无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)瘦素(Leptin)及其长型受体(OB-Rb)表达的影响,本研究将不同浓度热灭活的无乳链球菌(0、10~5 cfu/mL、10~6 cfu/mL和10~8 cfu/mL)作用于BMFB,分别于不同作用时间采用荧光定量PCR(qPCR)方法检测Leptin及OB-Rb mRNA转录水平,western blot方法检测Leptin及OB-Rb蛋白的表达。各组总体变化规律结果显示,无乳链球菌作用BMFB后,除6 h、12 h 10~6 cfu/m L和10~8 cfu/mL作用浓度外,其余作用时间实验组Leptin mRNA的转录水平及蛋白表达量与对照组相比显着升高(p<0.05);各作用时间实验组OB-Rb mRNA的转录水平及蛋白表达量与对照组相比极显着升高(p<0.01)。上述研究结果表明,热灭活的无乳链球菌能够促进BMFB的Leptin及OB-Rb mRNA的转录水平和蛋白的表达,为奶牛乳腺纤维化的防治提供依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2017年09期）
杨威,张涌,高明清[4]（2017）在《间质成纤维细胞在奶牛乳腺炎中的作用》一文中研究指出研究目的奶牛乳腺炎是由于机体代谢和生理状态改变、乳房损伤以及接触传染性或环境性病原微生物等引起的乳腺炎症反应,是奶牛最常见的疾病之一,其迁延不愈会导致奶牛乳腺不同程度的纤维化。乳腺间质成纤维细胞是构成乳腺组织的重要细胞成分,广泛参与人、小鼠以及牛等哺乳动物乳腺的发育过程,并在多种炎症疾病中发挥着重要的作用,但基质成纤维细胞在奶牛乳腺炎中的作用尚不清楚。(本文来源于《中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会论文集》期刊2017-07-28）
赵爽[5]（2017）在《TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞、成纤维细胞金黄色葡萄球菌易感性影响及机制研究》一文中研究指出发达国家奶牛饲养中主要粗饲料为营养价值较高的苜蓿草,而我国农作物秸秆资源丰富,奶牛饲养中主要粗饲料是低营养价值的农作物秸秆。然而营养对机体免疫状况有明显的影响,蛋白质营养不足是感染性疾病高发病率和死亡率的重要因素。实验室前期研究发现饲喂秸秆组奶牛外周血PBMCs中TGF-β1表达水平显着高于饲喂苜蓿干草组。TGF-β1是一种多功能的细胞因子,对调节机体免疫及细胞的易感性方面发挥重要的作用。因此,我们推测高表达的TGF-β1可能对奶牛乳腺炎的发病有影响。奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)是病原菌感染乳腺最容易损害的细胞,也是分泌乳汁的细胞,BMECs受损是乳腺炎发生后导致乳品质下降的根本原因。奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)是乳腺组织的基质细胞,主要支持BMECs,并通过细胞间直接和间接的作用调节BMECs功能。因此,我们试图探讨TGF-β1对BMECs和BMFBs金黄色葡萄球菌(S.aureus)易感性的影响及其作用机制。为此本课题开展以下两方面工作:首先,建立BMECs的金黄色葡萄球菌感染模型,检测TGF-β1作用下的BMECs对金黄色葡萄球菌易感性的变化。结果发现TGF-β1可显着促进金黄色葡萄球菌黏附与侵入BMECs。经q RT-PCR检测TGF-β1作用下BMECs表面金黄色葡萄球菌黏附受体m RNA表达的变化,结果显示纤连蛋白(Fn)和β1整合素(Integrinβ1)的表达显着上调,且有关细胞凋亡的膜表面分子(Fas)同样表达上调。采用Western blot的方法发现Fn,Integrinβ1和Fas在蛋白水平上均表达上调。采用免疫荧光的方法发现Fn和Integrinβ1上调表达同时伴随金黄色葡萄球菌对细胞的黏附能力显着增加。抗体封闭Fn、Integrinβ1和Fas后可显着抑制金黄色葡萄球菌对BMECs的黏附及侵袭能力。TGF-β1促进金黄色葡萄球菌诱导的BMECs凋亡,且抑制金黄色葡萄球菌感染后促炎性因子TNF-α和趋化因子IL-8的m RNA表达。然后,为确定乳腺纤维化与金黄色葡萄球菌乳腺感染的关系,我们建立BMFBs的金黄色葡萄球菌感染模型,探讨TGF-β1促进金黄色葡萄球菌感染BMFBs的机制。采用抗α平滑肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原(I Collagen)抗体封闭其功能后进行金黄色葡萄球菌黏附与侵袭实验,结果均显着下调金黄色葡萄球菌对BMFBs的黏附与侵袭能力。抑制ERK1/2信号途径来抑制α-SMA和I Collagen表达同样显着抑制金黄色葡萄球菌对BMFBs的黏附与侵袭能力。通过金黄色葡萄球菌感染制备小鼠乳房炎模型,发现TGF-β1处理组小鼠乳腺和血液中金黄色葡萄球菌的定植量显着上调。综上所述,TGF-β1通过促进BMECs表面Fn,Integrinβ1和Fas大量表达从而促进金黄色葡萄球菌黏附与侵入BMECs。TGF-β1促进了金黄色葡萄球菌诱导的BMECs凋亡,并且在共感染模型中抑制BMECs促炎性因子TNF-α和趋化因子IL-8的表达。在TGF-β1诱导的BMFBs纤维化中,金黄色葡萄球菌通过α-SMA和I Collagen来增强对BMFBs的黏附与侵袭能力,这一过程受ERK信号调控。通过小鼠实验进一步证实TGF-β1对金黄色葡萄球菌感染小鼠乳腺的显着促进作用。在细胞水平和动物水平表明体内高水平的TGF-β1可能是促进奶牛乳房炎发生的原因之一。这些结果将细胞因子与BMECs和BMFBs对金黄色葡萄球菌的易感性联系在一起,为科学利用秸秆饲料以及从饲料营养方面控制乳房炎的发生提供了理论基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-06-01）
张芮今[6]（2017）在《无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞几种生长因子表达的影响》一文中研究指出无乳链球菌(Streptococcus aagalactiae,S.agalactiae)通过乳头管侵入奶牛乳房内部,引起奶牛隐性或部分临床型乳腺炎。奶牛乳腺炎可引起乳腺损伤和机能障碍,最终会造成乳腺纤维化。奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)是乳腺纤维化的主要参与细胞,在奶牛乳腺发生纤维化时可以产生细胞外基质(ECM)。本文探讨S.aagalactiae对BMFBs纤维化相关的细胞因子和受体的表达的影响,以便为乳腺纤维化的机制丰富数据。本研究以体外培养的BMFBs作为研究对象,在6h、12h、24h和48h后,分别用无血清培养液和105CFU/mL、106CFU/mL、108CFU/mL的不同浓度的热灭活S.agalactiae作用于BMFBs,采用RT-qPCR法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板源性生长因子(PDGF-BB)和对应的受体 TβRI、FGFR2、PDGFRβ 以及 Toll 样受体(TLR2、TLR4)的 mRNA 的表达,采用 Western-blot 法检测 TGF-β1、bFGF、PDGF-BB及对应的受体 TβRI、FGFR2、PDGFRβ、Toll 样受体(TLR2、TLR4)、NF-κB和AP-1的蛋白的表达。结果显示:(1)菌液处理组中的TGF-β1 mRNA相比对照组表达量明显升高,24h时表达量最大(P<0.05);TGF-β1蛋白表达量于12h时达到最大值,然后蛋白表达量开始降低(P<0.05)。TβRI mRNA的表达量在48h达到峰值(P<0.05);TβRI蛋白在12h的表达量低于6h时,在24h时达到峰值,之后又下降(P<0.05)。bFGF和FGFR2的mRNA的表达量均是108CFU/mL菌液浓度处理组的最大(P<0.05);bFGF蛋白表达量在48h时的表达量最大;FGFR2蛋白表达量在6h时表达量最大(P<0.05)。PDGF-BB mRNA表达量在48h的106CFU/mL浓度处理组达到最大值,PDGFRβmRNA表达量在12h的108CFU/mL菌液浓度处理组达到最大值(P<0.05);PDGF-BB蛋白表达量在6h的106CFU/mL菌液浓度处理组的表达量最大,PDGFRβ蛋白表达量在24h时、105CFU/mL菌液浓度处理组的表达量最大(P<0.05)。(2)与对照组比较,TLR2除了 48h时外,TLR4除了 6h时外,TLR2、TLR4的mRNA的表达量在108CFU/mL处理组最大,且差异性显着(P<0.05)。在同一时间段,TLR2蛋白的表达量会随着处理组菌液浓度的加大而降低。随着作用时间的延长,菌液浓度增高,TLR4的蛋白的表达量会变低。(3)热灭活的无乳链球菌可促进NF-κB和AP-1蛋白的表达。在同一时间段,NF-κB和AP-1蛋白的表达量在105CFU/mL处理组最大,与对照组比较差异显着(P<0.05)。研究表明,热灭活的无乳链球菌能够促进体外培养的BMFBs上述叁种细胞因子及对应的受体和TLR2、TLR4的mRNA及蛋白的表达,热灭活的无乳链球菌也能够促进NF-κB和AP-1蛋白的表达,这些与纤维化有关的生长因子及其受体和TLR2、TLR4在奶牛乳腺纤维化中可能发挥着重要作用。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2017-06-01）
赵弥[7]（2017）在《无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞瘦素和细胞外基质表达的影响》一文中研究指出无乳链球菌(Streptococcus agalctiae,S.agalactiae)是引起奶牛乳腺炎的主要病原菌之一,能够导致奶牛乳腺纤维化。奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)是乳腺组织的主要间质细胞,本研究目的是探讨S.agalactiae对体外培养的BMFB瘦素(Leptin)及其功能性受体(OB-R b)、细胞外基质(ECM)表达的影响,以探索S.agalactiae引起奶牛乳腺纤维化中Leptin与奶牛乳腺纤维化的关系。本研究采用不同浓度热灭活的S.agalactiae(OCFU/mL、105CFU/mL、106CFU/mL和108CFU/mL)作用于体外培养的BMFB,于不同作用时间(6h、12h、24h、48h和72h)提取细胞的总mRNA和总蛋白,采用荧光定量PCR和Westemblot方法检测Leptin及其功能性受体和细胞外基质αα-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠα 1)mRNA及蛋白的表达,采用ELISA方法检测细胞培养上清液中细胞外基质透明质酸(Hyaluronic acid,HA)的表达情况。结果表明:(1)不同浓度的S.agalactiae作用BMFB不同时间后,均可不同程度地促进Leptin及OB-R b mRNA和蛋白的表达。Leptin mRNA和蛋白的表达基本一致,6h、12h105CFU/mL浓度极显着高于对照组(P<0.01),24h、48h、72h表达水平基本随着浓度的增加而增加;OB-Rb mRNA和蛋白的表达基本一致,随着浓度的增加而增加,mRNA的表达48h108CFU/mL浓度最大,蛋白的表达12h108CFU/mL浓度最大。(2)不同浓度的S.agalactiae作用于BMFB均能不同程度地促进α-SMA和COLⅠα 1的mRNA及蛋白的表达。α-SMA mRNA和蛋白的表达基本一致,各个作用时间105CFU/mL浓度极显着高于对照组(P<0.01),12h表达最大;COLⅠα 1 mRNA和蛋白的表达不一致,mRNA的表达随着时间的延长呈先降低再升高的趋势,24h、48h表达降低,72h再升高,6h 108CFU/mL浓度表达最大,蛋白的表达各个作用时间105CFU/mL、106CFU/mL浓度极显着高于对照组(P<0.01),108CFU/mL浓度表达低于对照组。(3)不同浓度的S.agalactiae于BMFB后,细胞培养上清液中HA的表达不同程度地上升,24h106CFU/mL浓度表达最大。综上所述,热灭活的S.agalactiae能够促进体外培养的BMFBLeptin及OB-Rb mRNA和蛋白的表达,与时间和浓度有一定的关系;S.agalactiae作用于BMFB后,叁种细胞外基质(α-SMA、COLⅠα 1和HA)的表达均上升。提示Leptin在S.agalactiae致奶牛乳腺纤维化中有一定的作用。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2017-06-01）
张文耀[8]（2017）在《奶牛乳腺上皮细胞在炎性状态下对基质成纤维细胞生物学特性及功能的影响》一文中研究指出奶牛乳腺炎是由于乳房损伤或病原微生物入侵所引起的机体代谢和生理状态改变的炎症反应,是严重影响奶牛业发展的最常见的疾病之一。在奶牛乳腺发生炎症的早期,乳腺导管中的病原菌会首先侵入腺泡表层的乳腺上皮细胞,进而影响乳腺上皮细胞的生理特性,导致上皮细胞的炎性细胞因子异常分泌。乳腺上皮细胞异常分泌的炎性细胞因子通过内环境影响周围组织中基质细胞的生理特性,使基质细胞初步表现出炎症反应特征。成纤维细胞是构成乳腺组织重要的基质细胞,其生长状态的改变会直接影响乳腺组织正常的结构和功能,因此研究奶牛乳腺上皮细胞在炎性状态下对基质成纤维细胞生物特性和功能的功能影响对于奶牛乳腺炎的防治具有重要的意义。金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是引起奶牛乳腺炎主要的两种细菌,脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)和脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)分别是这两种导致奶牛乳腺炎的细菌主要毒力成分。本试验以荷斯坦奶牛乳腺组织分离的原代乳腺上皮细胞作为研究对象,首先利用LPS和LTA对乳腺上皮细胞进行炎症诱导,确定了LPS和LTA炎症诱导的最适浓度和最适时间,建立了体外诱导的炎性奶牛乳腺上皮细胞模型;然后通过体外间接共培养模式,以LPS和LTA体外诱导的炎性乳腺上皮细胞与正常基质成纤维细胞共培养的方法模拟炎性上皮细胞影响成纤维细胞过程,研究炎性乳腺上皮细胞对基质成纤维细胞活性、增殖、迁移、凋亡、炎性细胞因子分泌等生物学特性的影响,同时对导致这些特性发生变化的分子机制进行探究。结果表明,LPS和LTA诱导的炎性上皮细胞均可促进了基质成纤维细胞的激活,通过MAPK信号通路抑制成纤维细胞的增殖,通过WNT/β-catenin信号通路促进了成纤维细胞的迁移、同时增强成纤维细胞对TNF-α,CCL5,CXCL2,IL6,IL8等炎性相关因子的表达和分泌,诱导细胞外基质蛋白Fibronection和Collagen I的沉积。这些结果表明奶牛乳腺上皮细胞在炎性状态下,通过内环境对基质成纤维细胞生炎症响应。这一结果为进一步研究乳腺基质成纤维细胞在奶牛乳腺炎反应中的作用及奶牛乳腺炎的防治提供了一定的理论依据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2017-05-01）
和桂良[9]（2017）在《奶牛乳腺炎中成纤维细胞分泌的SDF-1对乳腺上皮细胞的作用及机制研究》一文中研究指出奶牛乳腺炎是由于奶牛机体代谢和生理状态改变、乳房损伤及接触传染性或环境性病原微生物等引起的乳腺炎症反应。大量的文献已经证实乳腺组织中的乳腺上皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等组成了乳腺组织的细胞免疫系统,共同参与乳牛乳腺炎的免疫应答。成纤维细胞是乳腺组织中数量最多的基质细胞,但其在奶牛乳腺炎和乳腺炎迁延不愈导致乳腺纤维化中的作用及机制尚不明确。本研究通过对比从奶牛炎性乳腺组织中分离的成纤维细胞(inflammatoryfibroblasts,INFs)和从正常乳腺组织分离的成纤维细胞(normalfibroblasts,NFs)的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白和炎症相关因子的表达或分泌水平等基本生物学特性的差异,明确基质成纤维细胞是否参与在奶牛乳腺炎疾病过程中;并进一步研究了在INFs中表达明显上调的基质衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对奶牛乳腺上皮细胞生物学功能的影响及机制,进而探究成纤维细胞在乳腺炎以及乳腺纤维化发生发展过程中的作用,这一研究对奶牛乳腺炎及纤维化的防治具有重要的意义。本研究首先运用实时定量聚合酶链反应(qRCR)和蛋白印迹技术(Western blot)检测ECM蛋白Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-1)、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)基因水平和蛋白水平的表达;通过qRCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测了细胞因子和趋化因子IL-8、CXCL2和SDF-1的基因和蛋白水平的表达;通过细胞划痕实验检测两种成纤维细胞的迁移能力;利用代表大肠杆菌毒力成分的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)和代表金黄色葡萄球菌毒力成分的脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)建立体外的诱导的成纤维细胞模型检测ECM相关蛋白,细胞因子和趋化因子的蛋白水平表达。通过以上从不同角度对INFs和NFs生物学特性的对比,明确成纤维细胞是否参与奶牛乳腺的炎症过程。然后,通过建立成纤维细胞和乳腺上皮细胞的体外间接共培养模式,研究INFs对乳腺上皮细胞形态变化及EMT(epithelial-mesenchymal transition)标志分子如α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和角蛋白(Cytokeratin)表达的影响;并进一步通过一系列分子生物学的方法研究了在INFs中高表达的SDF-1对乳腺上皮细胞的影响及分子机制。最后,通过建立SDF-1诱导的体外乳腺炎小鼠模型验证SDF-1的促炎性和促纤维化作用。结果显示,Collagen-1、Vimentin、MMP-1等ECM蛋白和IL-8、CXCL2和SDF-1等炎性相关因子在INFs、LPS以及LTA诱导的成纤维细胞中的表达或分泌水平均明显高于NFs,表明成纤维细胞参与在奶牛乳腺的炎症应答过程。体外共培养结果显示,INFs可诱导乳腺上皮细胞的形态从铺路石样转变为梭形,并促进EMT标志分子α-SMA和Cytokeratin的表达,表明在共培养条件下,INFs可诱导乳腺上皮细胞发生EMT。进一步的研究发现,LPS和LTA处理后的NFs,以及炎性乳腺组织中SDF-1的表达或分泌都高于正常对照组。外源性SDF-1通过激活NF-κB通路促进乳腺上皮细胞发生EMT,诱导炎症反应并抑制细胞增殖。此外,体内实验发现SDF-1在小鼠乳腺中能够诱发乳腺炎和轻微的纤维化,而SDF-1的特异性抑制剂可以减轻这一现象,结果表明INFs分泌SDF1介导其对乳腺上皮细EMT和炎性诱导过程。综上所述,本研究表明奶牛乳腺在炎症状态下,基质成纤维细胞通过分泌SDF-1促进乳腺上皮细胞EMT和炎症反应的发生,进而参与乳腺炎及其迁延所致乳腺纤维化。这一发现从新的角度初步阐明了炎性状态下的乳腺间质成纤维细胞对上皮细胞的作用,为进一步探究乳腺炎及乳腺纤维化的发生机制奠定了基础。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2017-05-01）
杨彬,徐丹丹,孙志鹏,王建发,单旭菲[10]（2016）在《NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化中的作用》一文中研究指出为探索NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)转分化中的作用。本研究用热灭活金黄色葡萄球菌(0、104、105、106、107、和108 CFU/mL)刺激BMFB,24 h后采用Real-time PCR方法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β1 mRNA的表达量,Westem blot方法检测Cα-SMA、collagen-I及p-NF-κB p65蛋白的表达量。使用NF-κB通路抑制剂PDTC预处理细胞,再用105 CFU/mL热灭活金黄色葡萄球菌刺激细胞,24 h后采用Real-time PCR方法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β1mRNA的表达量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-I及p-NF-κB p65蛋白的表达量,免疫荧光法检测α-SMA及collagen-I蛋白的表达量。结果显示,不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理细胞的TGF-β1 mRNA、α-SMA及collagen-I蛋白的表达量显着升高(p<0.05),其中以105 CFU/mL刺激组的TGF-β1 mRNA及α-SMA、collagen-I蛋白的表达量最高。随着热灭活金黄色葡萄球菌浓度的升高,p-NF-κB p65蛋白的表达量及TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA的表达量逐渐升高(p<0.01)。抑制剂PDTC能够显着抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1 mRNA及α-SMA、collagen-I、p-NF-κB p65蛋白的的表达量(p<0.01)。结果提示,NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞过程中发挥重要作用,本研究为揭示金黄色葡萄球菌性乳腺炎发生硬化的机制奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2016-08-20）
奶牛成纤维细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺成纤维细胞(bovine mammary fibroblast,BMFB)增殖速率、胞内Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)及其信号通路相关基因m RNA表达水平的影响。方法原代培养BMFB,用LPS(终浓度10μg/mL)刺激BMFB不同时间后,经CCK-8法检测BMFB的增殖速率,实时荧光定量PCR法检测BMFB胞内TLR及其信号通路相关分子m RNA的表达水平。结果 LPS刺激BMFB 0、1、3 h后,BMFB增殖速率差异无统计学意义(P>0.05),LPS刺激BMFB 6 h开始,试验组BMFB的增殖速率明显快于对照组(P<0.05)。与对照组比较,LPS刺激BMFB 12 h后,TLR2、TLR4、信号转导通路激活核转录因子κB(nuclear factor of kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha-α,TNF-α)和白细胞介素-1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor associated kinase 1,IRAK1)基因m RNA表达水平显着升高(P<0.05),髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)基因m RNA的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BMFB可能通过TLR2和TLR4识别LPS,并与NF-κB信号通路级联诱导炎性细胞因子和趋化因子的释放,参与奶牛乳腺先天性免疫应答。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
奶牛成纤维细胞论文参考文献
[1].缪增强,王凤龙,丁玉林,陈梦娟,曹霞.金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞MMPs/TIMP-1和uPA/PAI-1表达的影响[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[2].张旭,武瑞,王建发,贺显晶,杨彬.脂多糖对奶牛乳腺成纤维细胞增殖速率、胞内Toll样受体及其信号通路相关基因mRNA表达水平的影响[J].中国生物制品学杂志.2018
[3].赵弥,丁玉林,毕艳楠,张芮今,郭运泽.无乳链球菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞瘦素及其受体表达的影响[J].中国预防兽医学报.2017
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