导读:本文包含了钙结合蛋白基因表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:大片吸虫,钙结合蛋白2(CaBP2),克隆,表达
钙结合蛋白基因表达论文文献综述
袁晓丹,张念章,黄思扬,马元元,王春仁[1]（2019）在《大片吸虫钙结合蛋白2基因的克隆表达及其表达产物的免疫活性研究》一文中研究指出通过克隆、表达大片吸虫钙结合蛋白2(FgCaBP2)基因,旨在探索其作为诊断抗原的可行性。在分析大片吸虫蛋白组数据的基础上,根据肝片吸虫CaBP2基因组序列和转录组数据,设计以NdeⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物。以大片吸虫总RNA为模板,通过RT-PCR获得FgCaBP2基因,对其进行测序、生物信息学分析。构建pET-30a-FgCaBP2重组表达载体,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中完成诱导、表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析,并用目的蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。结果表明,FgCaBP2基因的开放阅读框长570 bp,编码189个氨基酸残基。生物信息学预测显示,FgCaBP2主要以α螺旋为主,β折叠较少,有7个β转角、4个较长的无规则卷曲、含有4个亲水区、具有较多的B细胞抗原表位。SDS-PAGE分析表明,FgCaBP2呈现出可溶性表达。Western-blot分析表明,25 ku大小的特异性目的蛋白条带能够很好地被大片吸虫感染的阳性水牛血清识别,具有良好的免疫反应性。本研究成功克隆了FgCaBP2基因,并获得了可溶性重组蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,是潜在的大片吸虫病诊断抗原。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年03期）
袁晓丹,侯俊玲,田艾灵,黄思扬,王春仁[2]（2018）在《大片吸虫钙结合蛋白-2(CaBp2)基因的克隆、表达及免疫反应性研究》一文中研究指出目的克隆、表达大片吸虫钙结合蛋白-2(Ca Bp2),并探索其作为诊断抗原的可行性。方法鉴定大片吸虫后,以肝片吸虫Ca Bp2的基因序列为模板,设计以Nde 1和Xho 1作为酶切位点的Ca Bp2蛋白的引物。提取大片吸虫总RNA,利用RT-PCR克隆出目的基因,对其进行测序鉴定、生物信息学分析、系统进化分析。构建p ET-30a-Fg Ca Bp2重组表达载体后,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中完成诱导、表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析;目的蛋白免疫家兔后,制备多克隆抗体。结果大片吸虫Ca Bp2开放阅读框为570 bp,编码189个氨基酸残基。生物信息学预测表明,CaBp2主要以α螺旋为主,β折叠较少;具有较多B细胞抗原表位。Ca Bp2呈现出可溶性表达。Western blotting检测结果表明所表达的蛋白在25 kD处存在特异性条带,其具有良好的免疫反应性。结论成功克隆大片吸虫Ca Bp2基因,其表达产物能与该蛋白的特异性多克隆抗体产生良好的免疫反应性,是潜在的大片吸虫病诊断抗原。(本文来源于《第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集》期刊2018-08-10）
叶柳,李曌,陈振银,刘笃强,廖键梅[3]（2016）在《人钙结合蛋白S100A9基因克隆表达纯化及其对SH-SY5Y细胞作用的研究》一文中研究指出钙结合蛋白S100A9在许多慢性疾病中聚集并可能在一些自身免疫性如老年痴呆中发挥了重要的作用。大量的报道也表明S100A9日益获得人们的注意。通过获取足量重组人S100A9蛋白,探索其对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的作用及机制。运用全基因合成法合成人S100A9基因,构建人S100A9原核表达重组质粒p ET28a-S100A9,经单酶切法及PCR法鉴定重组质粒已构建成功。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)在18℃、25℃、37℃分别诱导表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting鉴定,结果显示18℃时蛋白大量表达于上清中,在37℃时大量表达于包涵体。采用镍亲和层析法分别纯化两种来源重组蛋白,透析后低温冻干获得蛋白粉。使用CCK-8法检测上清来源和包涵体来源的S100A9蛋白对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的增殖抑制作用。结果显示两种来源重组蛋白对SH-SY5Y细胞具有生长抑制作用,在浓度为0.05 mg/m L时即有明显抑制作用(p<0.01),且二者作用无明显差异(p<0.01)。采用AO/EB双重染色和流式细胞术初步检测S100A9对SH-SY5Y细胞的增殖抑制机理,结果显示该蛋白可促进SH-SY5Y细胞的凋亡。两种来源蛋白之间的比较也显示二者对于SH-SY5Y细胞作用无明显差异(p<0.05)。本研究成功获得足量S100A9重组蛋白,且两种来源S100A9蛋白作用于SH-SY5Y细胞的生物学效应一致。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2016年12期）
李冲,吴峰洋,陈赛娟,刘亚娟,谷子林[4]（2015）在《维生素D对动物钙结合蛋白等基因表达的调控》一文中研究指出维生素D是机体所需的重要的营养素,其活化形式1,25(OH)2D3除了通过非基因效应对Ca+进行调节,还在基因水平上对钙结合蛋白的基因表达产生影响,同时对其他基因也具有一定的调节作用,文章对其主要机制进行阐述。(本文来源于《饲料工业》期刊2015年20期）
胡亚卓,高雅,韩志涛,夏征,耿艳[5]（2015）在《脑苷肌肽对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑内β-淀粉样蛋白42和钙结合蛋白-D28K表达的影响》一文中研究指出目的观察脑苷肌肽(cattle encephalon glycoside and ignotin injection,CEGI)对APPswe/PS1d E9双转基因痴呆模型小鼠脑内β-淀粉样蛋白42(amyloidβ-peptide,Aβ42)和钙结合蛋白-D28K(calbindin-D28K,CB)表达的影响,探讨CEGI对阿茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的防治作用。方法 APPswe/PS1d E9双转基因AD模型小鼠共48只,随机分为脑苷肌肽低剂量组[Tg+CEGI-L组,腹腔注射CEGI 6.6 ml/(kg·d)]、高剂量组[Tg+CEGI-H组,腹腔注射CEGI 13.2 ml/(kg·d)]、阳性药盐酸多奈哌齐组[Tg+Donepezil组,Donepezil灌胃2 mg/(kg·d)],模型组(Tg组,腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液),每组12只;同月龄同背景非转基因野生型C57BL/6J小鼠12只作为正常对照组(n Tg组,腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液)。小鼠自5月龄开始腹腔注射给药1个月,然后进行Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,硫黄素S荧光染色和免疫组织化学染色检测皮质区Aβ42表达,免疫组织化学染色检测海马CA1区及CA3区CB表达的变化。结果行为学实验,与Tg组比较,Tg+CEGI-L组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.05);小鼠大脑皮质Aβ42的表达数目在Tg组显着高于Tg+CEGI-L组和Tg+CEGI-H组(43.00±10.03 vs 24.63±10.61/24.89±6.81,P<0.05);小鼠海马CA1区神经元保护性蛋白CB在Tg+CEGI-L组显着高于Tg组(0.056±0.023 vs 0.031±0.001,P<0.05)。结论 CEGI能抑制Aβ42在大脑中的聚集沉积、CB过表达来降低神经元损伤,进而改善APPswe/PS1d E9双转基因痴呆模型小鼠的学习记忆能力。(本文来源于《解放军医学院学报》期刊2015年07期）
施洁[6]（2014）在《电针对去卵巢大鼠肠粘膜钙结合蛋白D9K和维生素D受体基因表达的影响》一文中研究指出目的：本课题以电针对骨质疏松症大鼠肠钙吸收的影响为切入点,研究电针干预对绝经后骨质疏松症模型大鼠肠粘膜中VDR和CaBP-D9KmRNA和蛋白表达的影响,从分子生物学角度客观评价电针干预对绝经后骨质疏松症模型大鼠的作用效果,揭示电针对绝经后骨质疏松症模型大鼠的可能作用机制及作用环节,为针灸防治骨质疏松症提供科学的理论依据。方法：按随机数字表法将40只雌性SD大鼠分为两组,一组为假手术组,另一组为手术组,其中假手术组大鼠10只,手术组大鼠30只。摘除全部手术组大鼠双侧卵巢,以制造绝经后骨质疏松症动物模型；假手术组大鼠保留双侧卵巢,仅切除一段小肠系膜。手术结束,正常饲养3个月后,分别进行骨密度检测,判断造模是否成功。造模成功后,再按随机数字表法将手术组大鼠进一步分成3组,分别为模型组、电针组和药物组,每组含大鼠10只。电针组选取两组穴位①关元、双侧叁阴交；②双侧肾俞、双侧后叁里。每日取其中一组穴位,二组穴位交替进行,接韩氏电针仪进行电针刺激,其刺激参数为连续脉冲波、频率3-4Hz、强度4-5mA,以大鼠局部轻度抖动为度,每次20分钟,每日1次。药物组皮下注射苯甲酸雌二醇,每只大鼠每次以0.1mg/kg体重,每周1次。假手术组和模型组均不作任何处理。治疗12周后,大鼠行骨密度的检测。随后处死大鼠,提取小肠粘膜,采用RT-PCR法及Westen Blot观察电针对去卵巢大鼠肠粘膜中VDR和CaBP-D9KmRNA和蛋白表达的影响。结果：1.骨密度检测：电针组和药物组大鼠腰椎骨密度较模型组均有明显的提高,有统计学意义；两组股骨的骨密度也有不同程度的提高,尤其以药物组提高明显。2. CaBP-D9K. VDRmRNA及蛋白表达：模型组大鼠肠粘膜中CaBP-D9K. VDRmRNA及蛋白表达量较假手术组均明显减少。药物组与电针组CaBP、 VDRmRNA及蛋白表达量与模型组相比,有显着提高,差异有统计学意义。结论：1.电针能提高骨质疏松症模型大鼠骨密度。2.电针能增强VDR和CaBP-D9K在绝经后骨质疏松症模型大鼠肠粘膜中的表达。3.电针治疗绝经后骨质疏松症的作用机制可能是通过改善胃肠对钙等营养物质的利用度,纠正钙吸收障碍而实现的。(本文来源于《南京中医药大学》期刊2014-03-25）
侯斐,王立魁,王红,谷俊朝[7]（2013）在《脓毒症患者全血中钙结合蛋白S100A12的基因表达水平研究》一文中研究指出目的检测脓毒症患者全血中钙结合蛋白S100A12的基因表达情况,并将其与炎症反应性疾病的其他炎性指标进行比较,探讨其是否可以作为脓毒症患者诊断的另一种新的指示蛋白。方法实时定量PCR方法检测脓毒症患者44例,以及10例健康人全血中S100A12基因mRNA表达水平,运用2-ΔΔCT算法计算相对表达量,并将S100A12的基因表达水平与白细胞、中性粒细胞绝对值、C反应蛋白、降钙素原水平进行相关性分析。结果在44例脓毒症患者中有15例患者全血中S100A12的基因表达水平升高,高表达率为34.09%;29例病人S100A12的基因表达呈低表达水平,低表达率为65.91%;S100A12的基因表达水平与白细胞、中性粒细胞绝对值、C反应蛋白、降钙素原水平经相关性分析结果显示P值均大于0.05,差异无统计学意义。结论尚不能认为在脓毒症患者全血中S100A12普遍呈高表达状态,暂不能将其作为脓毒症的另一种新的指示蛋白。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2013年23期）
高雪[8]（2011）在《柑橘钙结合蛋白基因的克隆及其在果皮褐变中的表达分析》一文中研究指出从柑橘果皮褐变相关基因的差减cDNA文库中,筛选了一个与钙结合蛋白基因家族同源的EST片段,通过RACE技术克隆了其全长cDNA序列(CsCAB,GenBank登录号EF010854)。CsCAB基因全长984 bp,含有一个621 bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,预测蛋白质分子量为22.95 kD,理论等电点为4.5;序列分析结果显示CsCAB与钙结合蛋白具有很高的同源性,且具有钙结合蛋白的保守结构域EF-hand。Northern blot结果显示CsCAB在褐变果皮中上调表达,说明该基因与柑橘果实的果皮褐变有密切关系。(本文来源于《生物技术通报》期刊2011年06期）
汪礼文,唐小牛,姚涌,汪学龙[9]（2011）在《日本血吸虫P14钙结合蛋白样蛋白基因真核表达载体的构建、表达和鉴定》一文中研究指出目的从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出钙结合蛋白样蛋白SjP14编码基因,并亚克隆至真核表达载体pcD-NA3.1(+),制备重组分子疫苗。方法提取日本血吸虫成虫总RNA,逆转录cDNA,设计引物常规PCR法扩增出SjP14编码基因,通过线性T克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),经转染至Hela细胞中表达,表达产物经Western blot鉴定。结果 PCR扩增产物与预期大小相一致,pGEM-T-SjP14及pcDNA3.1(+)-SjP14分别经双酶切后均获得一特异性基因片段,表达产物经Western blot鉴定分子量约为38ku。结论成功构建了日本血吸虫钙结合蛋白样蛋白真核表达载体,并获得了表达产物。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2011年04期）
尹磊淼,宋凯,张庆华,魏颖,王宇[10]（2010）在《大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究》一文中研究指出目的构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白。方法根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果,并亲和层析纯化重组蛋白。结果 PCR扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致,克隆构建了pET-32a-S100A9原核表达载体,测序结果与预期完全一致,经亲和层析纯化获得毫克级纯化重组蛋白,并发现该蛋白在21℃有比较强的表达。结论为进一步探讨S100A9蛋白生物学功能奠定基础。(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2010年06期）
钙结合蛋白基因表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的克隆、表达大片吸虫钙结合蛋白-2(Ca Bp2),并探索其作为诊断抗原的可行性。方法鉴定大片吸虫后,以肝片吸虫Ca Bp2的基因序列为模板,设计以Nde 1和Xho 1作为酶切位点的Ca Bp2蛋白的引物。提取大片吸虫总RNA,利用RT-PCR克隆出目的基因,对其进行测序鉴定、生物信息学分析、系统进化分析。构建p ET-30a-Fg Ca Bp2重组表达载体后,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中完成诱导、表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析;目的蛋白免疫家兔后,制备多克隆抗体。结果大片吸虫Ca Bp2开放阅读框为570 bp,编码189个氨基酸残基。生物信息学预测表明,CaBp2主要以α螺旋为主,β折叠较少;具有较多B细胞抗原表位。Ca Bp2呈现出可溶性表达。Western blotting检测结果表明所表达的蛋白在25 kD处存在特异性条带,其具有良好的免疫反应性。结论成功克隆大片吸虫Ca Bp2基因,其表达产物能与该蛋白的特异性多克隆抗体产生良好的免疫反应性,是潜在的大片吸虫病诊断抗原。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钙结合蛋白基因表达论文参考文献
[1].袁晓丹,张念章,黄思扬,马元元,王春仁.大片吸虫钙结合蛋白2基因的克隆表达及其表达产物的免疫活性研究[J].中国兽医科学.2019
[2].袁晓丹,侯俊玲,田艾灵,黄思扬,王春仁.大片吸虫钙结合蛋白-2(CaBp2)基因的克隆、表达及免疫反应性研究[C].第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集.2018
[3].叶柳,李曌,陈振银,刘笃强,廖键梅.人钙结合蛋白S100A9基因克隆表达纯化及其对SH-SY5Y细胞作用的研究[J].基因组学与应用生物学.2016
[4].李冲,吴峰洋,陈赛娟,刘亚娟,谷子林.维生素D对动物钙结合蛋白等基因表达的调控[J].饲料工业.2015
[5].胡亚卓,高雅,韩志涛,夏征,耿艳.脑苷肌肽对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑内β-淀粉样蛋白42和钙结合蛋白-D28K表达的影响[J].解放军医学院学报.2015
[6].施洁.电针对去卵巢大鼠肠粘膜钙结合蛋白D9K和维生素D受体基因表达的影响[D].南京中医药大学.2014
[7].侯斐,王立魁,王红,谷俊朝.脓毒症患者全血中钙结合蛋白S100A12的基因表达水平研究[J].临床和实验医学杂志.2013
[8].高雪.柑橘钙结合蛋白基因的克隆及其在果皮褐变中的表达分析[J].生物技术通报.2011
[9].汪礼文,唐小牛,姚涌,汪学龙.日本血吸虫P14钙结合蛋白样蛋白基因真核表达载体的构建、表达和鉴定[J].安徽医科大学学报.2011
[10].尹磊淼,宋凯,张庆华,魏颖,王宇.大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究[J].中国医药生物技术.2010
标签：大片吸虫; 钙结合蛋白2(CaBP2); 克隆; 表达;