导读:本文包含了构象刻录论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:脂肪酶,生物印迹,分子印迹,构象刻录
构象刻录论文文献综述
宣锋[1]（2007）在《双底物诱导脂肪酶构象刻录的催化及吸附性能研究》一文中研究指出本文以脂肪酶为研究对象，结合分子印迹和生物印迹两种技术制备双底物刻录脂肪酶。在制备过程中利用底物诱导酶构象，然后利用高交联度聚合物对该构象进行刻录，最终制备出的刻录酶构象是刚性化的。本文重点研究了双底物刻录酶在水相和有机相中的催化活性、稳定性以及有机相中吸附配体能力，并考察了影响吸附能力的一些因素。本文采用四种不同的功能单体(聚乙二醇200(400)二(甲基)丙烯酸酯)和叁羟甲基丙烷叁甲基丙烯酸酯为聚合原料，并加入底物月桂酸和正丁醇对脂肪酶进行活性构象诱导，再经紫外光引发聚合、抽提和干燥后，获得了四种刻录脂肪酶聚合物。其中，选用石油醚作为抽提溶剂，单体和交联剂的质量比为2：1，紫外光照聚合时间为45s。本文对制备得到的双底物刻录酶进行水相和有机相中催化活性的测定。四种双底物刻录脂肪酶在水相催化中表现出较高的活性和稳定性，其中双底物刻录酶聚合物Da具有最高水相催化活性(3.71U／g)，而且还发现含有甲基的单体聚合时容易增大刻录脂肪酶聚合物的空间位阻，从而增大了反应时的传质阻力，造成其催化活性比不含甲基的单体为原料聚合成的双底物刻录脂肪酶的催化活性低(Ba＞Aa，Da＞Ca)。四种双底物刻录脂肪酶在pH=7.5和温度50℃～60℃时均表现出它们各自的最大催化活性，而且在强酸、强碱和高温环境下也可保持较高的催化活性；同样用沉淀变性剂和溶解变性剂分别浸泡20d后，它们的活性仍都保持在初始活性的50％以上。这表明双底物刻录脂肪酶聚合物在有变性剂存在的环境中也能保持较高的催化效率。有机相催化以选用月桂酸和正丁醇的正庚烷酯化反应体系，随着温度的升高，平衡催化转化率也随之提高，同时催化活性也逐步提高。但温度越高，平衡催化转化率和催化活性上升幅度越来越小。反应24h后，在60℃时，有机相双底物刻录酶聚合物Da的催化活性达到最大值(20.92U／g)。本文还对双底物刻录酶Da的吸附能力做了考察。发现Da对配体月桂酸和正丁醇显示出了一定的吸附能力，其中还对温度、溶剂、双底物刻录酶聚合物Da中的含水量以及Da的催化活性等因素对Da吸附性能的影响作了考察。结果发现升温有利于双底物刻录酶Da对配体吸附能力的上升，在50℃下它的平衡吸附量为37.55(mg·g~(-1))，但随着温度的进一步上升，吸附量增加不明显，甚至出现吸附量下降的情况；溶剂是通过对聚合物和配体的分子作用来影响两者之间的选择性和亲和力的；双底物刻录酶聚合物Da中含水量的增加导致其吸附能力大大减小；失活的双底物刻录酶聚合物Da对配体的吸附能力明显下降：此外，双底物刻录酶聚合物上的空穴对配体来说并不是特定对应的，许多其它酸、醇类似物也能吸附到双底物刻录酶聚合物上。(本文来源于《浙江大学》期刊2007-05-01）
龚伟,宋锡瑾,王杰[2]（2006）在《脂肪酶构象刻录及稳定性研究》一文中研究指出探讨了一种高度稳定的新型固定化酶———刻录酶的制备方法和催化性能.以聚乙二醇200(400)二(甲基)丙烯酸酯4种不同的功能单体和叁羟甲基丙烷叁甲基丙烯酸酯为原料,底物月桂酸对脂肪酶进行构象诱导后,经过紫外光聚合和洗脱月桂酸,获得了4种锁定脂肪酶活性构象的聚合物,即刻录脂肪酶.研究结果表明,选用聚乙二醇400二丙烯酸酯为功能单体时,刻录脂肪酶的活性较游离脂肪酶提高近1倍,并且所得4种刻录脂肪酶的稳定性大大提高.在强酸、强碱和高温下刻录脂肪酶可以分别保持其初始活性的75%、50%和70%以上,用沉淀变性剂浸泡刻录脂肪酶30 d后,酶活性仍然可以保持其初始活性的50%以上.(本文来源于《浙江大学学报(工学版)》期刊2006年05期）
董斌[3]（2006）在《脂肪酶构象的刻录及荧光光谱分析》一文中研究指出本文提出通过构建油包水(W/O)型微乳体系,使酶分子能够在有机相中被反应底物诱导出活性构象,利用高交联度聚合物对该构象进行刻录,比较了底物诱导对刻录酶活性的影响,考察了刻录酶在水相中催化特性,并对脂肪酶溶液和刻录酶聚合物在各种变性条件下的荧光光谱进行分析。 文中采用九种不同链长的单体和两种交联剂为聚合原料,紫外光引发聚合并干燥、研磨之后,获得18种不同载体的刻录酶聚合物。I(聚乙二醇400二丙烯酸酯)和G(聚乙二醇200二丙烯酸酯)两种作为功能单体时其活性和活力收率最高,Ib的活性高达3.6U/g,其活力收率为346.4%。研究发现四种活性最高的刻录酶聚合物(Ia,Ib,Ga,Gb),在强酸(pH=3.5)、强碱(pH=12.1),高温(80℃)下都保持其大部分活性,而脂肪酶液在相同条件下完全失活,证明这种刻录方法有效提高了脂肪酶的稳定性。 用月桂酸为底物诱导脂肪酶构象并进行刻录,接着用有机溶剂抽提洗脱底物月桂酸获得诱导刻录酶聚合物。选用丙酮和石油醚作为抽提溶剂,两者的洗脱效果相差不大,但是用石油醚洗脱后的聚合物内酶活性较高。对得到的诱导刻录酶进行活性测定和分析,发现其活性是未诱导刻录酶活性的两倍以上;并且诱导后的刻录酶聚合物具备与未诱导的刻录酶聚合物相近的稳定性。 本文还对游离脂肪酶溶液和刻录酶聚合物内蛋白质构象用荧光光谱进行了研究,游离脂肪酶溶液依据其内源的色氨酸残基进行光谱测定,对FITC(异硫氰基荧光素)荧光探针标记后的脂肪酶进行刻录并光谱测定。发现游离酶蛋白质在高温(80℃),强酸(pH=3.5)、强碱(pH=12.1),变性剂(盐酸胍和脲)的作用下基本表现为荧光强度增大,最大发射波长在331～350nm之内逐渐增大,说明蛋白质整体构象从球状到了伸展状态。刻录脂肪酶聚合物中荧光探针的荧光强度是表征了蛋白质表面氨基酸的距离变化,结果显示在强酸(pH=3.5)、强碱(pH=12.1)、变性剂(盐酸胍、脲和乙醇)及高温(80℃)条件下,荧光强度一定程度增大,即部分蛋白质的构象发生改变。(本文来源于《浙江大学》期刊2006-05-01）
龚伟[4]（2006）在《脂肪酶构象刻录及催化能力考察》一文中研究指出本文首次阐述了一种新型固定化酶——“刻录酶”的制备方法。和普通固定化酶相比,首先,它在制备过程中加入了配体诱导酶构象;其次,最终制备得到的刻录酶构象是刚性化的。文中对刻录酶的整个制备流程进行了摸索,重点讨论了它在水相和有机相中的催化活性、稳定性以及在有机相中的吸附配体能力,最后利用SEM对刻录酶载体进行了宏观表征。 以聚乙二醇200(400)二(甲基)丙烯酸酯4种不同的功能单体和叁羟甲基丙烷叁甲基丙烯酸酯为聚合原料,脂肪酶为模板分子,加入配体月桂酸对脂肪酶进行活性构象诱导,再通过紫外光引发聚合以及无水有机溶剂索式抽提月桂酸后,获得了4种锁定脂肪酶活性构象的聚合物,即刻录脂肪酶聚合物。在以无水丙酮为洗脱剂时获得了最高86.31%的月桂酸洗脱率,且脂肪酶的洗脱量保持在一个较小范围。当单体和交联剂以质量比为2:1,紫外光照聚合时间为45s时,所得四种刻录酶都表现出了优异的抗溶胀稳定性,尤其在正庚烷和水中为最佳。这些都基本符合对“刻录酶”载体性能的预期设想。 论文对刻录酶在水相和有机相的催化特性进行了探索。水相催化采用橄榄油水解法,发现四种刻录酶都具有较好的活性和稳定性。它们在水相中最佳催化时间为15min,活性最大在Da(聚乙二醇400二丙烯酸酯为单体的刻录酶)上获得(6.07U/g),活性收率高达171%;同时经过比较,发现含有甲基的单体聚合时容易形成超支化聚合物,增大反应时的传质阻力,造成其活性和活性收率都大大降低:四种刻录酶在强酸(pH=2.42)、强碱(pH=12.00)和高温(80℃)下均可以分别保持它们初始活性的75%、50%和70%以上,其中Da在160℃左右完全失活,这是因为载体在153℃开始热不稳定造成的;用沉淀变性剂和溶解变性剂分别浸泡刻录酶30d后,四种刻录酶仍然可以表现出它们初始活性的50%和45%以上。这说明脂肪酶构象的高度刚性化对它在水相催化时的活性和稳定性都是非常有利的。有机相催化选用月桂酸和正丁醇的正庚烷酯化反应体系,以活性最大的Da为考察对象,发现它在有机相催化中活性较为低下。40℃时催化24h活性为15.30U/g,升温至50℃可以小幅度提升Da活性为16.67U/g,而此时活性仅为固体酶粉的46.88%;但刻录酶优异的稳定性在有机相中继续得以体现。经过5(本文来源于《浙江大学》期刊2006-02-01）
构象刻录论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
探讨了一种高度稳定的新型固定化酶———刻录酶的制备方法和催化性能.以聚乙二醇200(400)二(甲基)丙烯酸酯4种不同的功能单体和叁羟甲基丙烷叁甲基丙烯酸酯为原料,底物月桂酸对脂肪酶进行构象诱导后,经过紫外光聚合和洗脱月桂酸,获得了4种锁定脂肪酶活性构象的聚合物,即刻录脂肪酶.研究结果表明,选用聚乙二醇400二丙烯酸酯为功能单体时,刻录脂肪酶的活性较游离脂肪酶提高近1倍,并且所得4种刻录脂肪酶的稳定性大大提高.在强酸、强碱和高温下刻录脂肪酶可以分别保持其初始活性的75%、50%和70%以上,用沉淀变性剂浸泡刻录脂肪酶30 d后,酶活性仍然可以保持其初始活性的50%以上.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
构象刻录论文参考文献
[1].宣锋.双底物诱导脂肪酶构象刻录的催化及吸附性能研究[D].浙江大学.2007
[2].龚伟,宋锡瑾,王杰.脂肪酶构象刻录及稳定性研究[J].浙江大学学报(工学版).2006
[3].董斌.脂肪酶构象的刻录及荧光光谱分析[D].浙江大学.2006
[4].龚伟.脂肪酶构象刻录及催化能力考察[D].浙江大学.2006