陈泽历:侵染滇黄精的菜豆普通花叶病毒的检测与鉴定论文

陈泽历:侵染滇黄精的菜豆普通花叶病毒的检测与鉴定论文

本文主要研究内容

作者陈泽历,杨林毅,陈潞,孙雁,魏朝霞,李永忠,赵明富,文国松(2019)在《侵染滇黄精的菜豆普通花叶病毒的检测与鉴定》一文中研究指出:滇黄精作为一种重要的中药材,应用领域广泛。随着其市场需求量的增加,野生滇黄精已较为稀少,因而人工种植产业得到发展,但大面积的单一种植导致滇黄精病害发生较为严重。目前对于滇黄精真菌病(如叶斑病、炭疽病、黑斑病等)的研究较多,但尚未有其病毒病的报道。为了明确侵染滇黄精并引起其花叶、叶片皱缩症状的病毒病原,对采集于云南文山的滇黄精病样采用透射电子显微镜观察以及双抗体夹心酶联免疫吸附法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)、反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术检测。对侵染症状明显的滇黄精病叶进行病毒粒子提纯,在电子显微镜下可观察到线状病毒粒子,大小为(670~760) nm×(9~12) nm。通过DAS-ELISA检测出3份滇黄精病样(DHJ1、DHJ2、DHJ3)汁液与菜豆普通花叶病毒(Bean common mosaic virus,BCMV)抗体呈强阳性反应。随后提取DAS-ELISA检测呈阳性的DHJ1病样的总RNA,利用马铃薯Y病毒科特异性简并引物(Sprimer/M4T)进行RT-PCR扩增,并对扩增产物进行测序分析。结果表明,所得序列长为1 609 bp,其中包含588 bp的部分核内含体蛋白b基因(NIb)、864 bp的完整外壳蛋白(coat protein,CP)基因和157 bp的3′端非翻译区(3′-untranslated region,3′-UTR)。而同源性分析显示该序列与马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的BCMV大豆分离物(KJ807813)的核苷酸序列和CP氨基酸序列的同源性分别高达99%和100%,与BCMV花生分离物(HM776124)的同源性分别为97%和99%。基于CP氨基酸序列的系统发育分析表明,该病毒与已报道的BCMV中国大豆分离物(KJ807813)、花生分离物(HM776124)亲缘关系最近,聚类为一簇。这是首次报道病毒侵染黄精属植物,将其命名为菜豆普通花叶病毒滇黄精分离物(BCMV-DHJ1),表明菜豆普通花叶病毒能自然侵染滇黄精。

Abstract

dian huang jing zuo wei yi chong chong yao de zhong yao cai ,ying yong ling yu an fan 。sui zhao ji shi chang xu qiu liang de zeng jia ,ye sheng dian huang jing yi jiao wei xi shao ,yin er ren gong chong zhi chan ye de dao fa zhan ,dan da mian ji de chan yi chong zhi dao zhi dian huang jing bing hai fa sheng jiao wei yan chong 。mu qian dui yu dian huang jing zhen jun bing (ru xie ban bing 、tan ju bing 、hei ban bing deng )de yan jiu jiao duo ,dan shang wei you ji bing du bing de bao dao 。wei le ming que qin ran dian huang jing bing yin qi ji hua xie 、xie pian zhou su zheng zhuang de bing du bing yuan ,dui cai ji yu yun na wen shan de dian huang jing bing yang cai yong tou she dian zi xian wei jing guan cha yi ji shuang kang ti ga xin mei lian mian yi xi fu fa (double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)、fan zhuai lu PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)ji shu jian ce 。dui qin ran zheng zhuang ming xian de dian huang jing bing xie jin hang bing du li zi di chun ,zai dian zi xian wei jing xia ke guan cha dao xian zhuang bing du li zi ,da xiao wei (670~760) nm×(9~12) nm。tong guo DAS-ELISAjian ce chu 3fen dian huang jing bing yang (DHJ1、DHJ2、DHJ3)zhi ye yu cai dou pu tong hua xie bing du (Bean common mosaic virus,BCMV)kang ti cheng jiang yang xing fan ying 。sui hou di qu DAS-ELISAjian ce cheng yang xing de DHJ1bing yang de zong RNA,li yong ma ling shu Ybing du ke te yi xing jian bing yin wu (Sprimer/M4T)jin hang RT-PCRkuo zeng ,bing dui kuo zeng chan wu jin hang ce xu fen xi 。jie guo biao ming ,suo de xu lie chang wei 1 609 bp,ji zhong bao han 588 bpde bu fen he nei han ti dan bai bji yin (NIb)、864 bpde wan zheng wai ke dan bai (coat protein,CP)ji yin he 157 bpde 3′duan fei fan yi ou (3′-untranslated region,3′-UTR)。er tong yuan xing fen xi xian shi gai xu lie yu ma ling shu Ybing du ke (Potyviridae)ma ling shu Ybing du shu (Potyvirus)de BCMVda dou fen li wu (KJ807813)de he gan suan xu lie he CPan ji suan xu lie de tong yuan xing fen bie gao da 99%he 100%,yu BCMVhua sheng fen li wu (HM776124)de tong yuan xing fen bie wei 97%he 99%。ji yu CPan ji suan xu lie de ji tong fa yo fen xi biao ming ,gai bing du yu yi bao dao de BCMVzhong guo da dou fen li wu (KJ807813)、hua sheng fen li wu (HM776124)qin yuan guan ji zui jin ,ju lei wei yi cu 。zhe shi shou ci bao dao bing du qin ran huang jing shu zhi wu ,jiang ji ming ming wei cai dou pu tong hua xie bing du dian huang jing fen li wu (BCMV-DHJ1),biao ming cai dou pu tong hua xie bing du neng zi ran qin ran dian huang jing 。

论文参考文献

  • [1].滇黄精主要病虫害防治措施的研究综述[J]. 王桥美,杨瑞娟,严亮,庄立.  农村实用技术.2017(12)
  • [2].滇黄精腐皮镰刀菌的分离鉴定[J]. 杨林毅,陈泽历,赖清玉,陈潞,孙雁,唐朝辉,赵明富,文国松.  湖北农业科学.2019(03)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自生物技术进展的陈泽历,杨林毅,陈潞,孙雁,魏朝霞,李永忠,赵明富,文国松,发表于刊物生物技术进展2019年02期论文,是一篇关于滇黄精论文,菜豆普通花叶病毒论文,检测与鉴定论文,生物技术进展2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自生物技术进展2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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