导读:本文包含了凝集素芯片论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:凝集素芯片,金黄色葡萄球菌,抗生素,金纳米粒子
凝集素芯片论文文献综述
李铸衡,高晶清,简明红,王振新[1]（2018）在《构建金纳米粒子标记的凝集素芯片应用于抗生素与金黄色葡萄球菌相互作用研究》一文中研究指出建立了一种基于凝集素芯片的共振光散射(Resonance light scattering,RLS)法,用于研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)与3种广谱抗生素(阿莫西林、万古霉素和链霉素)间的相互作用。本方法通过固定于基片表面的凝集素捕获细菌,使用西非单叶豆凝集素II(Griffonia simplicifolia II,GSⅡ)修饰的38.5 nm金纳米粒子(GNP@GSⅡ)标记捕获的S. aureus获取RLS信号。考察了抗生素存在下S. aureus与16种凝集素亲和能力的变化,发现阿莫西林和万古霉素能够显着降低S. aureus表面糖基化合物的表达种类和表达量;链霉素则能够提高S. aureus表面糖基化合物的表达水平。另外,根据凝集素与S. aureus的特异性识别图谱以及GSⅡ子阵列对S. aureus捕获量变化,能够获得不同抗生素对S. aureus的最小抑制浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)和杀菌效率。(本文来源于《分析化学》期刊2018年12期）
孙洋洋[2]（2017）在《凝集素芯片的构建及应用研究：人凝集芯片的构建及植物凝集素芯片的优化》一文中研究指出糖的合成不依赖于模板,由一系列酶催化形成的糖链其数目、种类、结构各不相同。糖基化修饰的蛋白质被称为糖蛋白,细胞膜和细胞外基质中糖蛋白含量丰富,能够介导细胞正常的生理过程,如细胞的生长、分化,细胞间的识别等。蛋白质糖基化的紊乱可能导致许多病理过程,如自身免疫疾病、癌症甚至不孕不育等。针对糖基化的分析有助于我们更好地了解糖介导的细胞生物学功能,基于质谱、糖芯片以及凝集素的一系列方法被广泛地应用于糖链结构及功能的研究。本课题组开发了植物凝集素芯片,并将其用于不同细胞表面的糖基化分析。但是植物凝集素有时无法满足人体中种类丰富、结构复杂的糖型分析要求。人凝集素和类人凝集素蛋白质既能够与人体中复杂的糖型较好地结合,又可以发挥一系列生物学功能。本研究主要目的是构建人凝集素芯片,并证明芯片上人凝集素和类人凝集素蛋白质的活性。从93种人凝集素和类人凝集素蛋白质编码序列的Entry clone开始,通过Gateway系统构建人凝集素蛋白质的酵母表达系统,最终表达并纯化得到60种人凝集素和类人凝集素蛋白质。通过接触式点样仪和高分子叁维基片点制包含60种人凝集素和类人凝集素蛋白质的芯片。利用细胞裂解液和完整细胞证明芯片上至少有43种重组人凝集素是有生物活性的。本研究用人凝集素芯片分析人精子细胞表面糖基化。芯片分析发现,galectin-1、galectin-7、galectin-8,ERGIC-53以及GalNAc-T6能够跟精子细胞结合,它们识别的糖包括半乳糖苷类、甘露糖以及唾液酸。用流式细胞技术和荧光显微镜证明5种人凝集素跟精子细胞的结合并且结合位置不同。通过galectin-1亲和捕获和质谱研究发现,galectin-1跟精子几种细胞膜蛋白有结合,包括HSP90和HSP70、血管紧张素转化酶、Mucin-6以及Tubulinβ-4B chain。在精子体外获能和顶体反应培养液中加入galectin-8后发现,与对照相比galectin-8能够将精子顶体反应发生率提高22.7%。本课题组在植物凝集素芯片领域的研究已经超过10年,已有的芯片包含94种植物凝集素。我们深知植物凝集素芯片存在的不足,因此从芯片构建和应用流程两个方面对已有的植物凝集素芯片做了进一步的整理和完善。剔除芯片上没有活性以及功能冗余的凝集素,将芯片上的植物凝集素从94种缩减到56种。重新制备的植物凝集素芯片除了可用于细胞类样品的分析外,还可分析简单、复杂的蛋白质类的样品以及有膜结构的小泡,如IgG、卵清蛋白、人转铁蛋白、血清样本以及外泌体。另外发现,一些植物凝集素与组蛋白存在非特异性结合,因此植物凝集素芯片技术无法用来分析组蛋白糖基化。综上,本研究构建了首款人凝集素蛋白质芯片,并证明其上71.7%的人凝集素和类人凝集素蛋白有活性。分析精子细胞表面糖基化发现5种人凝集素能够跟精子结合,说明精子表面主要含末端唾液酸糖基化、半乳糖苷型的糖链以及甘露糖;同时还发现galectin-8在体外能够促进精子的获能和顶体反应。另外,本研究还对植物凝集素芯片的构建进行了进一步的完善,并优化了植物凝集素芯片分析蛋白质类样品的操作步骤。期望能够充分利用人凝集素芯片和植物凝集素芯片优势,与质谱、糖芯片等技术相结合,更好的应用于人源样品的糖组学研究。(本文来源于《上海交通大学》期刊2017-07-01）
董晓霞,王莹莹,孟璐,沈力[3]（2017）在《应用凝集素芯片检测胃癌细胞膜表面糖链表达》一文中研究指出目的:应用凝集素芯片检测胃癌细胞株AGS和SGC-7901细胞膜表面糖链表达,并分析差异糖链与胃癌侵袭转移的相关性。方法:用胰酶消化收集细胞,加入荧光标记试剂对细胞进行荧光标记,利用凝集素芯片上的凝集素位点对糖链的亲和特异性捕获荧光标记的细胞,激光共聚焦扫描仪检测,凝集素流式细胞术验证,进而通过Transwell和划痕修复实验比较细胞侵袭转移能力。结果:在大多数凝集素位点上,AGS和SGC-7901这两种细胞荧光信号未出现明显差异。与SGC-7901细胞相比,AGS细胞显示出较强的LEL和MALⅡ信号。甘露糖、唾液酸、乙酰葡萄糖/葡萄糖、乙酰半乳糖/半乳糖在两种细胞中均有表达。AGS细胞含有较多的多聚乳糖胺和α2-3唾液酸,且AGS细胞侵袭转移能力要强于SGC-7901细胞。结论:高侵袭转移潜能的胃癌细胞表达特征性的多聚乳糖胺和α2-3唾液酸。基于凝集素芯片进行细胞膜糖图谱检测,将有助于筛选出肿瘤相关的糖链标志物和肿瘤诊断治疗。(本文来源于《湖北医药学院学报》期刊2017年01期）
杜昊骐[4]（2016）在《基于凝集素芯片技术分析糖鞘脂糖链谱方法的建立与应用》一文中研究指出背景与目的：糖鞘脂是一类普遍存在于生物细胞膜表面的生物活性脂质,它在细胞识别、细胞间信号转导、影响细胞迁移能力和肿瘤血管生成等方面起到了至关重要的生物学作用。由于糖鞘脂的变化与机体的致癌有着直接关系,它成为了近年来肿瘤研究领域中的热点之一。目前,人们对于糖鞘脂结构和化学合成的了解程度远甚于对其生物学功能以及疾病中结构变化的了解程度。对于糖鞘脂的主要研究手段为质谱与色谱-质谱联用。以质谱技术为核心的研究手段不仅成本高昂,对样本的预处理繁琐而严苛,更难以将初期糖链筛选、定位的结果以糖链谱的形式呈现,给研究者在针对特定疾病的糖鞘脂初期研究中带来了困难。凝集素芯片技术相比于质谱技术,有样本预处理简单、成本较低、能够同时分析N-糖链和O-糖链、能实现高通量快速检测等诸多优势。另外,糖鞘脂糖链具有作为癌症等疾病的诊断标志物的巨大潜力。因此,使用凝集素芯片技术研究糖鞘脂糖链谱,对于寻找疾病的糖脂诊断标志物和治疗靶点有着重大意义。方法：本研究首先以糖鞘脂GM1a为研究对象,利用鞘脂神经酰胺脱酰基酶同时实现对糖鞘脂含羰基脂肪链的切除和-NH2的生成,使糖鞘脂分子亲水性增强且易于Cy3荧光的标记,从而能够被应用于凝集素芯片反应体系中。然后对凝集素芯片检测糖鞘脂糖链谱的实验条件进行了改进与优化。最后通过凝集素芯片技术对比细胞肝癌组(HepG2细胞系)与健康组(HL-7702细胞系),和血清肝癌组与健康组的中性与酸性糖鞘脂糖链谱的表达差异,筛选出具有显着性差异的,识别上、下调糖链结构的凝集素。结论：使用凝集素芯片检测糖鞘脂糖链的最佳实验条件为：选用Sephadex G-25凝胶层析柱对Cy3荧光标记后的Lyso-GM1a进行分离纯化；凝集素芯片最佳上样浓度为0.05μg/μL糖链浓度的糖鞘脂；最佳封闭缓冲液为50mmol/L乙醇胺-50mmol/L硼酸钠溶液；最佳孵育缓冲液为含终浓度为0.06%Triton X-100、1% BSA、1.5mol/L甘氨酸的10mmol/L磷酸盐缓冲液；最佳孵育时间为3h。在使用凝集素芯片技术对生物样本的糖鞘脂糖链谱进行研究时,需要首先将总糖鞘脂进行中性和酸性糖鞘脂的分离,再对分别中性和酸性糖鞘脂糖链谱进行分析。在对血清样本进行糖鞘脂糖链谱检测时,是否使用葡萄糖氧化酶处理血清样本对凝集素芯片的检测结果无显着影响。在HepG2和HL-7702细胞糖鞘脂糖链谱研究中,发现了相比于HL-7702细胞,HepG2细胞糖鞘脂中的(GlcNAcβl-4)、T/Tn抗原、Galβ1-4GlcNAc、末端为GalNAcα/β1-3/6Gal等糖链结构上调表达；而α-Gal、α-GalNAc、Siaα2-3、Galα-1,3Gal、 Galα-1,6Glc、高甘露糖型、GlcNAc、(GalNAc)n、平分型GlcNAc、双天线型N-糖链、叁天线和四天线型复杂N-糖链结构下调表达。在肝癌患者和健康志愿者血清糖鞘脂糖链谱研究中,发现了相比于健康对照组,在肝癌实验组中发现了上调表达的T/Tn抗原、高甘露糖型N-糖链、Fucαl-6GlcNAc(核心岩藻糖)、Fucα1-3 (Galβ1-4)GlcNAc与Fucα1-2Gal-等岩藻糖基化糖链结构；在肝癌实验组中发现了下调表达的α-Gal、β-Gal、Galβ-1,4GlcNAc、Galβl-3GlcNAc、 GalNAcα1-3Gal、(GalNAc)n、Siaa2-3和末端为GalNAc与Gal的糖链结构。岩藻糖基化糖鞘脂的上调结果与其他研究结论高度相似,表明岩藻糖基化糖鞘脂可能成为一类肝癌的血清诊断标志物或治疗靶标。在细胞糖鞘脂和血清糖鞘脂中,均显示出显着变化的糖链结构有上调表达的T/Tn抗原和下调表达的α-Gal、(GalNAc)n、Siaa2-3;而在细胞和血清样本中显示出相反变化趋势的糖链结构为在细胞糖鞘脂中下调表达却在血清糖鞘脂中上调表达的高甘露糖型糖链结构。岩藻糖基化的糖鞘脂在血清样本中呈上调表达,而在细胞样本中无显着变化。Siaα2-6结构在细胞总糖鞘脂、中性糖鞘脂和酸性糖鞘脂叁组实验中均未发现显着表达差异,而Siaα2-3结构在细胞和血清酸性糖鞘脂糖链中显着下调,表明表达下调的糖鞘脂的Siaα2-3糖链结构可能是肝癌的肿瘤标志物和肝癌相关糖鞘脂研究的重点。(本文来源于《西北大学》期刊2016-06-01）
袁媛,唐晓磊,张林杰[5]（2016）在《凝集素芯片法分析桥本氏甲状腺炎患者外周血DC细胞膜糖蛋白的表达》一文中研究指出目的通过凝集素芯片法筛选桥本氏甲状腺炎(HT)患者外周血树突状细胞(DC)差异表达的膜表面糖蛋白,了解其在HT中的表达变化。方法通过制备包含有32种凝集素的凝集素芯片对16例HT患者和22例健康者外周血DC细胞膜表面糖蛋白的表达进行分析;凝集素耦联葡聚糖拉下相应差异表达的糖蛋白并进行质谱鉴定;同时应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot法和流式细胞术对HT患者外周血DC中该糖蛋白的mRNA、蛋白表达及Galectin-9+DC比例进行分析。最后通过ELISA法检测DC与CD8+T细胞孵育上清液中IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B浓度。结果凝集素芯片检测结果显示凝集素脱落酸素(ABA)对应的糖蛋白在HT组显着低于健康组(P<0.01)。对凝集素ABA耦联葡聚糖拉下后洗脱的蛋白进行质谱鉴定,结果显示,众多洗脱蛋白中半乳糖结合蛋白-9(Galectin-9)所占比例较为丰富;随后通过qRT-PCR和Western blot进一步验证Galectin-9在HT组DC中的表达低于健康组;流式细胞术结果则显示HT组DC Galectin-9low比例高于健康组,且其均能较健康组诱导CD8+T细胞产生3种高水平杀伤因子。结论HT患者外周血Galectin-9lowDC可能与HT相关。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2016年02期）
杨舟,王世东,程磊,程莉,陶生策[6]（2015）在《基于凝集素芯片的蛋白质糖基化修饰检测方法》一文中研究指出目的:建立针对组织和血清样本中蛋白质糖基化的凝集素芯片检测方法 ,并结合凝集素印迹法验证,以实现样品间糖基化修饰差异的高通量筛选。方法:采用包含91种凝集素的凝集素芯片,利用生物素标记的组织总蛋白质样品,比较实验的重复性及不同上样量的芯片实验效果。利用生物素标记的去高丰度蛋白质血清和全血清样品,比较两者芯片实验的检出情况及全血清样品不同上样量的芯片实验效果。以最优条件筛选癌组织与癌旁组织样品之间及不同疾病患者血清样品之间的糖基化修饰差异,采用凝集素印迹法验证凝集素芯片实验结果。结果:芯片重复性良好(r>0.94),组织样品在0.625~1.250μg/m L时实验效果较佳;去高丰度蛋白质血清和全血清样品以高浓度上样时(≥20μg/m L),两者检出相近。标记后的全血清样品取2μL稀释至150μL时,实验效果最佳。筛选出检测信号有差异的凝集素经凝集素印迹法验证,结果与芯片检测一致。结论:该凝集素芯片实验体系稳定、可靠,可用于筛选临床样本间的糖基化修饰差异,有助于发现疾病相关的糖蛋白生物标志物。(本文来源于《诊断学理论与实践》期刊2015年05期）
辛爱洁,吴延成,程莉,刁华,顾一骅[7]（2015）在《成年山羊附睾不同区段精子与凝集素芯片结合的差异研究》一文中研究指出目的研究成年山羊精子在附睾成熟过程中与凝集素芯片结合的差异。方法精子分别取自成年山羊附睾头、体、尾部,经2%多聚甲醛/0.2%戊二醛固定后,然后进行碘化丙啶染色标记,再分别与含有91种凝集素的芯片结合。信号经提取后,利用SPSS16.0和R语言对其进行后续分析和比较。结果山羊附睾头、体、尾各部分精子与含各类型糖基特异性的凝集素芯片结合分析后发现,与山羊附睾头部精子结合的凝集素有40种,体部精子结合的有48种,尾部精子结合的有42种。来自附睾不同区段的精子与凝集素结合强度也有显着差异,其中,甘露糖特异性的凝集素与体部精子结合最高,复杂结构特异性的凝集素与附睾头、体、尾各部分精子的结合强度呈梯度下降趋势。结论山羊精子膜表面的糖被,随着精子在附睾中的成熟,也在不断地发生变化的。(本文来源于《中国男科学杂志》期刊2015年05期）
梁少楠,李宇恒,许春丽,姚伟楠,于汉杰[8]（2014）在《应用凝集素芯片检测系统性红斑狼疮红细胞膜表面糖链变化》一文中研究指出应用凝集素芯片检测系统性红斑狼疮患者红细胞膜表面糖链表达类型。分别取患者和健康人血液作为实验组和对照组,用低渗液处理红细胞使其破碎,离心制备血影,利用凝集素芯片特异亲和性捕获血影表面糖链,激光扫描仪检测凝集素信号,根据凝集素特异性得到细胞膜表面糖链表达变化。结果表明实验组在凝集素位点ECA、WFA、SBA、UEA-Ⅰ呈现阳性(p<0.01)且在ConA、PTL-Ⅰ、DBA等凝集素位点信号值上调,在STL、SJA、LCA、GSL-Ⅰ、LEL凝集素位点信号值下调(p<0.05)。根据凝集素亲和特异性显示,系统性红斑狼疮患者红细胞膜表面Gal、GlcNAc、Fuc等糖链结构表达均增加。为系统性红斑狼疮的研究增添理论依据。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年04期）
辛爱洁[9]（2014）在《应用凝集素芯片检测β-防御素126缺失突变对精子糖链的影响》一文中研究指出精子糖被(Glycocalyx)位于精子膜脂双层的最外层,是雄性配子与外界环境相互作用的主要界面,精子糖被的微妙变化对精子生育力具有重大影响。高度糖基化的β-防御素126(DEFB126)是精子糖被的主要糖蛋白成分,约20%的男性,其DEFB126基因编码区发生两个核苷酸缺失的移码突变,发生纯合突变(del/del)的男性其精子与特异性识别O-linked寡(本文来源于《中国中西医结合学会生殖医学分会首届学术年会暨生殖医学专业委员会成立大会论文汇编》期刊2014-06-20）
黄维莉[10]（2014）在《凝集素芯片技术在鉴别胃癌与溃疡的应用研究》一文中研究指出胃癌（carcinoma of stomach）是我国最常见的恶性肿瘤之一，胃癌的死亡率高居各类恶性肿瘤第二位。胃癌被广泛的认为起源于胃壁最表层的粘膜上皮细胞，它常常可以侵犯胃壁的不同广度和深度，临床发现胃癌可发生于胃的各个部位（其中胃窦幽门区最多、胃底贲门区次之、胃体部略少）。早期胃癌是指癌灶仅仅局限在胃部粘膜内或粘膜下层，进展期胃癌是指癌灶侵犯肌层深度，或者有转移到胃以外区域。实际上胃癌有多种的形态和分类，最常见的有溃疡型、浸润型、表浅型、肿块型、溃疡癌（也有观点认为这属于慢性胃溃疡癌变）。通过显微镜观测，从组织学角度也可以将胃癌分为腺鳞癌、鳞状细胞癌、未分化癌、腺癌（占约90%，包括管状腺癌、粘液腺癌、乳头状腺癌、印戒细胞癌）以及类癌。即便显微镜下的组织学形态是一致的，胃癌细胞内部更细微的分子结构也有很多的不同，按照这种分法，还有很多独特的胃癌种类等待研究者们的进一步发现。凝集素是一类糖蛋白，它具有糖的专一性，并可以促进细胞的凝集。凝集素被发现可以可逆的与糖发生专一、非共价结合。动物细胞和植物细胞都可以自主的对凝集素进行合成和分泌，凝集素广泛存在于动物、植物等生物细胞膜、细胞质及细胞外基质中，其在细胞识别和粘着反应中起着重要作用。近年来，如核磁共振（NMR）、FAC、质谱（MS）等许多先进技术的应用使糖组学的研究取得了一定的进展，但是每种技术都有其各自的缺点和优点。事实上，各种技术对于样品准备和结果的分析都需要消耗大量的时间，且需要高昂的费用。而凝集素芯片技术则无需事先对样品的某些糖链进行修饰或移除，耗时短，相对费用也较低，从而能简便、快速、高通量地对蛋白组学及糖组学进行研究。寡糖、糖脂或糖蛋白均可以通过糖芯片固定在支持物上，以用于对蛋白质或者细胞与糖结合活性的检测。目前，各种基于凝集素的特异性的糖组学相关研究技术的高速发展，特别是基因芯片技术的逐步商业化，将有助于推动对糖复合物上的聚糖结构以及功能的研究，从而有助于了解其在生物过程中所扮演的重要角色。方法：本研究收集了来自北华大学附属医院的胃癌及胃溃疡患者活检组织，利用凝集素特异结合糖链的原理，建立了基于凝集素芯片技术检测糖蛋白的模型，分析了胃癌组织与胃溃疡组织中糖蛋白糖链结构的差异，并通过凝集素组织化学方法加以验证。结果：利用凝集素芯片分别对病人胃癌组织和胃溃疡组织的糖蛋白表达进行了检测及分析，结果显示：1.通过凝集素芯片分析发现，胃癌病人癌变组织中糖蛋白的表达种类多于胃溃疡组，且糖链分支数明显增加；2.通过凝集素芯片分析发现，癌变组织糖蛋白中的乙酰氨基半乳糖（GalNAc）较胃溃疡组相比明显增加；3.通过免疫组化研究进一步证实与MPL特异结合的含有GalNAc的糖蛋白，与VVA特异性结合的含有GalNAc和GalNAcα-Ser/Thr（Tn）的糖蛋白在胃癌组织中均高表达；4.与MPL及VVA特异结合的含有GalNAc的糖蛋白主要表达于细胞质，在癌组织中大部分着色为棕黄色和棕褐色，为中度或强染色。5.所有类型的胃癌组织均显示了较强的染色，与胃溃疡相比均有显着差异性。凝集素免疫组化结果与凝集素芯片结果一致。6.在不同类型的胃癌组织中，与MPL特异结合的含有GalNAc的糖蛋白的表达量从高到低依次为：粘膜内癌、印戒细胞癌、腺癌、淋巴转移腺癌、未分化癌、类癌；7.在不同类型的胃癌组织中，与VVA特异性结合的GalNAc和GalNAcα-Ser/Thr（Tn）的糖蛋白的表达量从高到低依次为：粘膜内癌、印戒细胞癌、类癌、未分化癌、腺癌、淋巴转移腺癌；8.凝集素芯片检测糖蛋白技术可为胃癌的早期诊断及治疗提供依据。(本文来源于《吉林大学》期刊2014-03-01）
凝集素芯片论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
糖的合成不依赖于模板,由一系列酶催化形成的糖链其数目、种类、结构各不相同。糖基化修饰的蛋白质被称为糖蛋白,细胞膜和细胞外基质中糖蛋白含量丰富,能够介导细胞正常的生理过程,如细胞的生长、分化,细胞间的识别等。蛋白质糖基化的紊乱可能导致许多病理过程,如自身免疫疾病、癌症甚至不孕不育等。针对糖基化的分析有助于我们更好地了解糖介导的细胞生物学功能,基于质谱、糖芯片以及凝集素的一系列方法被广泛地应用于糖链结构及功能的研究。本课题组开发了植物凝集素芯片,并将其用于不同细胞表面的糖基化分析。但是植物凝集素有时无法满足人体中种类丰富、结构复杂的糖型分析要求。人凝集素和类人凝集素蛋白质既能够与人体中复杂的糖型较好地结合,又可以发挥一系列生物学功能。本研究主要目的是构建人凝集素芯片,并证明芯片上人凝集素和类人凝集素蛋白质的活性。从93种人凝集素和类人凝集素蛋白质编码序列的Entry clone开始,通过Gateway系统构建人凝集素蛋白质的酵母表达系统,最终表达并纯化得到60种人凝集素和类人凝集素蛋白质。通过接触式点样仪和高分子叁维基片点制包含60种人凝集素和类人凝集素蛋白质的芯片。利用细胞裂解液和完整细胞证明芯片上至少有43种重组人凝集素是有生物活性的。本研究用人凝集素芯片分析人精子细胞表面糖基化。芯片分析发现,galectin-1、galectin-7、galectin-8,ERGIC-53以及GalNAc-T6能够跟精子细胞结合,它们识别的糖包括半乳糖苷类、甘露糖以及唾液酸。用流式细胞技术和荧光显微镜证明5种人凝集素跟精子细胞的结合并且结合位置不同。通过galectin-1亲和捕获和质谱研究发现,galectin-1跟精子几种细胞膜蛋白有结合,包括HSP90和HSP70、血管紧张素转化酶、Mucin-6以及Tubulinβ-4B chain。在精子体外获能和顶体反应培养液中加入galectin-8后发现,与对照相比galectin-8能够将精子顶体反应发生率提高22.7%。本课题组在植物凝集素芯片领域的研究已经超过10年,已有的芯片包含94种植物凝集素。我们深知植物凝集素芯片存在的不足,因此从芯片构建和应用流程两个方面对已有的植物凝集素芯片做了进一步的整理和完善。剔除芯片上没有活性以及功能冗余的凝集素,将芯片上的植物凝集素从94种缩减到56种。重新制备的植物凝集素芯片除了可用于细胞类样品的分析外,还可分析简单、复杂的蛋白质类的样品以及有膜结构的小泡,如IgG、卵清蛋白、人转铁蛋白、血清样本以及外泌体。另外发现,一些植物凝集素与组蛋白存在非特异性结合,因此植物凝集素芯片技术无法用来分析组蛋白糖基化。综上,本研究构建了首款人凝集素蛋白质芯片,并证明其上71.7%的人凝集素和类人凝集素蛋白有活性。分析精子细胞表面糖基化发现5种人凝集素能够跟精子结合,说明精子表面主要含末端唾液酸糖基化、半乳糖苷型的糖链以及甘露糖;同时还发现galectin-8在体外能够促进精子的获能和顶体反应。另外,本研究还对植物凝集素芯片的构建进行了进一步的完善,并优化了植物凝集素芯片分析蛋白质类样品的操作步骤。期望能够充分利用人凝集素芯片和植物凝集素芯片优势,与质谱、糖芯片等技术相结合,更好的应用于人源样品的糖组学研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
凝集素芯片论文参考文献
[1].李铸衡,高晶清,简明红,王振新.构建金纳米粒子标记的凝集素芯片应用于抗生素与金黄色葡萄球菌相互作用研究[J].分析化学.2018
[2].孙洋洋.凝集素芯片的构建及应用研究：人凝集芯片的构建及植物凝集素芯片的优化[D].上海交通大学.2017
[3].董晓霞,王莹莹,孟璐,沈力.应用凝集素芯片检测胃癌细胞膜表面糖链表达[J].湖北医药学院学报.2017
[4].杜昊骐.基于凝集素芯片技术分析糖鞘脂糖链谱方法的建立与应用[D].西北大学.2016
[5].袁媛,唐晓磊,张林杰.凝集素芯片法分析桥本氏甲状腺炎患者外周血DC细胞膜糖蛋白的表达[J].安徽医科大学学报.2016
[6].杨舟,王世东,程磊,程莉,陶生策.基于凝集素芯片的蛋白质糖基化修饰检测方法[J].诊断学理论与实践.2015
[7].辛爱洁,吴延成,程莉,刁华,顾一骅.成年山羊附睾不同区段精子与凝集素芯片结合的差异研究[J].中国男科学杂志.2015
[8].梁少楠,李宇恒,许春丽,姚伟楠,于汉杰.应用凝集素芯片检测系统性红斑狼疮红细胞膜表面糖链变化[J].基因组学与应用生物学.2014
[9].辛爱洁.应用凝集素芯片检测β-防御素126缺失突变对精子糖链的影响[C].中国中西医结合学会生殖医学分会首届学术年会暨生殖医学专业委员会成立大会论文汇编.2014
[10].黄维莉.凝集素芯片技术在鉴别胃癌与溃疡的应用研究[D].吉林大学.2014