本文主要研究内容
作者王孜恒,周敬伟,侯筱宇（2019）在《Bax、Bad基因真核表达质粒构建及转染人胚肾细胞后的翻译水平观察》一文中研究指出：目的构建Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Bcl-2相关细胞死亡因子（Bad）基因真核表达质粒pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad,并观察两质粒转染至人胚肾293（HEK293）细胞后Bax、Bad的表达。方法采用TRIzol试剂提取大鼠脑组织总RNA,利用反转录—聚合酶链反应（RT-PCR）扩增Bax和Bad的互补DNA（cDNA）序列,将cDNA分别克隆至pcDNA3.1载体上。采用脂质体转染法将序列正确的pcDNA3.1-Bax和pcDNA3.1-Bad真核表达质粒分别转染至HEK293细胞,免疫印迹法鉴定Bax、Bad在细胞中的表达。结果双酶切和DNA测序分析显示Bax和Bad基因片段成功插入pcDNA3.1载体中,并且与其cDNA（Genbank:NM017059.2和AF031227.1）序列完全一致。免疫印迹显示pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad真核表达质粒能够在HEK293细胞中高效表达。结论 pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad真核表达质粒构建成功,Bax、Bad在HEK293细胞中成功过表达。
Abstract
mu de gou jian Bcl-2xiang guan Xdan bai （Bax）、Bcl-2xiang guan xi bao si wang yin zi （Bad）ji yin zhen he biao da zhi li pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad,bing guan cha liang zhi li zhuai ran zhi ren pei shen 293（HEK293）xi bao hou Bax、Badde biao da 。fang fa cai yong TRIzolshi ji di qu da shu nao zu zhi zong RNA,li yong fan zhuai lu —ju ge mei lian fan ying （RT-PCR）kuo zeng Baxhe Badde hu bu DNA（cDNA）xu lie ,jiang cDNAfen bie ke long zhi pcDNA3.1zai ti shang 。cai yong zhi zhi ti zhuai ran fa jiang xu lie zheng que de pcDNA3.1-Baxhe pcDNA3.1-Badzhen he biao da zhi li fen bie zhuai ran zhi HEK293xi bao ,mian yi yin ji fa jian ding Bax、Badzai xi bao zhong de biao da 。jie guo shuang mei qie he DNAce xu fen xi xian shi Baxhe Badji yin pian duan cheng gong cha ru pcDNA3.1zai ti zhong ,bing ju yu ji cDNA（Genbank:NM017059.2he AF031227.1）xu lie wan quan yi zhi 。mian yi yin ji xian shi pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Badzhen he biao da zhi li neng gou zai HEK293xi bao zhong gao xiao biao da 。jie lun pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Badzhen he biao da zhi li gou jian cheng gong ,Bax、Badzai HEK293xi bao zhong cheng gong guo biao da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山东医药的王孜恒,周敬伟,侯筱宇，发表于刊物山东医药2019年30期论文，是一篇关于相关蛋白论文,相关细胞死亡因子论文,真核表达质粒论文,人胚肾细胞论文,山东医药2019年30期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自山东医药2019年30期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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