导读:本文包含了角膜缘干细胞缺损论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:角膜缘干细胞缺损,口腔黏膜上皮细胞,载体,表型特征
角膜缘干细胞缺损论文文献综述
邱吉妮,张朝然[1]（2017）在《口腔黏膜上皮细胞片移植治疗角膜缘干细胞缺损的基础研究及临床应用》一文中研究指出角膜缘干细胞为正常角膜上皮的自我更新提供了来源,在维持眼表稳态中起到了极为重要的作用。近年来,随着对成体干细胞认识的加深以及生物组织工程学的发展,培养的口腔黏膜细胞片移植已成为治疗角膜缘干细胞缺损的方法之一。本文就其培养方法、细胞片表型及临床应用结果的进展进行综述。(本文来源于《中国眼耳鼻喉科杂志》期刊2017年02期）
徐煌[2]（2010）在《组织工程角膜上皮治疗兔角膜缘干细胞缺损模型的实验研究》一文中研究指出采用全板层切除术制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损模型,取对侧眼角膜缘组织进行干细胞培养,并以纤维蛋白为基质网架构建组织工程角膜上皮.将实验动物随机分为实验组和对照组,对照组移植不含干细胞的凝胶膜,术后观察1个月.以角膜上皮染色、角膜混浊及新生血管3项指标进行效果评价.结果显示,实验组角膜上皮是一个逐渐修复的过程,角膜水肿、炎性反应逐渐减轻,新生血管明显减少.由此得出,以纤维凝胶膜为一种新型的组织工程材料制备的组织工程角膜上皮经移植术后证实可修复角膜上皮的损伤.(本文来源于《嘉兴学院学报》期刊2010年06期）
蒋自培,胡赛静,徐建国,孔丽萍,吴文栩[3]（2009）在《人骨髓间充质干细胞在兔角膜缘干细胞缺损动物模型中的分化》一文中研究指出目的探讨人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化为角膜上皮细胞的可塑性及可行性。方法20只日本大耳白兔随机分为对照组和实验组,每组10只,右眼为实验眼。实验组:将人MSCs接种在人羊膜上培养4d后移植到兔角膜缘干细胞缺损的动物模型;对照组:仅采用羊膜移植到兔角膜缘干细胞缺损的动物模型。分别于移植后第1、第2、第3、第4和第6周,摘取各组眼球,分别行HE和PAS染色、单克隆抗体AE1和PCNA染色、透射电镜和扫描电镜检查。结果人MSCs接种到羊膜后能在羊膜上生长,与羊膜共培养4d后,人MSCs贴附羊膜生长迅速,组织学特征无明显改变。羊膜负载人MSCs移植到兔角膜基质表面,角膜表层细胞PAS染色呈阴性,AE1和PCNA染色呈阳性,具有典型的上皮细胞形态;而对照组PAS染色呈阳性,AE1和PCNA染色呈阴性。超微结构观察可见,实验组电镜下可见微绒毛、桥粒和张力丝等典型上皮细胞结构,而对照组未见以上明显特征。结论羊膜负载人MSCs移植到兔眼表角膜基质后,MSCs能存活、增殖并向角膜上皮样细胞分化。(本文来源于《眼视光学杂志》期刊2009年06期）
庆惠玲,王丽娅,赵承彦,杜连心[4]（2007）在《组织工程角膜上皮治疗兔角膜缘干细胞缺损的实验研究》一文中研究指出制作兔眼(右眼为实验眼)角膜缘干细胞完全缺损模型,随机分为实验组和对照组。实验组取对侧眼角膜缘组织,以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体制成组织工程角膜上皮,培养后12 d行角膜缘干细胞羊膜移植术;对照组行单纯羊膜移植术(仅刮除上皮的羊膜)。实验组角膜缘干细胞移植术后,兔角膜上皮逐渐愈合,透明度提高,基质细胞浸润减轻,新生血管减退或消失;印迹细胞学检查显示,移植前角膜上皮细胞PAS(+),而移植后PAS(-)。认为以羊膜为载体培养角膜缘上皮细胞,可于体外重建组织工程角膜上皮组织,移植后可修复角膜缘干细胞缺损。(本文来源于《山东医药》期刊2007年12期）
庆惠玲,王丽娅,赵承彦,杜连心[5]（2007）在《不同移植手术治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究》一文中研究指出目的探讨以人羊膜为载体培养的角膜缘干细胞,自体及异体移植治疗全角膜缘干细胞缺损。方法制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损3个月的模型。实验动物随机分为自体移植组和异体移植组,前者取对侧眼角膜缘组织,后者取异体兔眼角膜缘组织,均以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体,培养12d后行角膜缘干细胞羊膜移植术。术后观察3个月,以角膜上皮染色、角膜浑浊和新生血管3项指标进行临床疗效评定,通过病理检查评估术后角膜上皮修复情况,印迹细胞学检查移植前后角膜上皮的细胞表型。结果体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上粘附生长并增生,体外培养12d可形成复层。自体移植组和部分异体移植组术后角膜上皮逐渐愈合,透明度提高,基质细胞浸润减轻,新生血管减退或消失。印迹细胞学检查显示:移植前角膜上皮细胞PAS阳性,而移植后转为阴性;组织病理学显示:移植前角膜上皮大部分缺损,移植后呈现角膜上皮结构。部分异体移植组术后出现了免疫排斥反应。结论兔自体角膜缘干细胞羊膜移植术可重建眼表;免疫排斥反应仍是异体角膜缘干细胞羊膜移植术失败的主要原因。(本文来源于《眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术)》期刊2007年04期）
吕秀丽[6]（2007）在《人羊膜上皮细胞移植治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究》一文中研究指出目的角膜缘干细胞缺损时,角膜上皮细胞不能自我更新,结膜上皮侵入角膜表面,这种结膜化的过程会使角膜上皮变得异常且不规则,并伴有继发的新生血管化,持续的上皮缺损,基质溃疡,瘢痕化,潜在的穿孔,慢性疼痛及视力丧失。角膜缘干细胞缺损的治疗非常棘手。以抑制炎症反应、防止感染、减少睑球粘连等为目的的保守疗法和传统的穿透或板层角膜移植等手术治疗方法的效果均很差。角膜缘干细胞移植被认为是一种促进角膜损伤愈合,稳定角膜表面,修复角膜上皮糜烂和持续性上皮缺损,减少角膜新生血管侵入,阻止假性胬肉形成,增进视力,提高角膜移植成功率的有效方法。自体角膜缘移植不存在免疫排斥反应,术后效果好,但只适用于单眼角膜缘受损或双眼局限性受损的患者,临床应用有一定的局限性。同种异体角膜缘移植存在免疫排斥反应,常致手术失败。羊膜上皮细胞(Amniotic epithetical cells)是胚胎发育的早期产物,所以其中可能含有多潜能干细胞。保存羊膜的上皮细胞已经死亡,新鲜羊膜的上皮细胞与基底膜结合紧密,两者都不易发挥其干细胞的功能,于是我们将人羊膜上皮细胞分离并于体外进行大量增殖培养,并以去上皮羊膜为载体移植治疗兔角膜碱烧伤所致的角膜缘干细胞缺损,通过与单纯去上皮羊膜移植比较治疗效果,探讨该手术方法的安全性和有效性,为严重角膜缘干细胞缺损的临床治疗提供新的思路。方法碱烧伤模型的制作方法参照Tseng等人建立的方法进行改进,通过板层切除角膜缘联合NaOH烧伤角膜来达到制作目的。羊膜经EDTA处理后去除其上皮细胞。分离,去除残留的绒毛膜,PBS洗尽血迹后用0.125%胰酶(typsine)37℃消化15分钟,重复4次,1000rpm离心6分钟收集羊膜上皮细胞,用PBS洗叁次后接种在含DEME培养皿中,于37℃含5%二氧化碳的培养箱内培养。细胞培养两周后接种于去上皮羊膜上,常规培养两周后行移植手术。将单眼碱烧伤模型兔18只随机分为对照组(control group),单纯羊膜移植组(AM group)和人羊膜上皮细胞羊膜移植组(AM+cell group),每组6只兔6眼,移植手术于烧伤后四周进行,并对治疗后的角膜进行裂隙灯观察,病理学和免疫组化检测。结果消化、分离的HAECs于2-3天内贴壁,15×15cm~2大小的羊膜大约可以收获1×106个细胞。贴壁生长的羊膜上皮细胞一般成簇生长,呈圆形、多角形,核较大,胞浆中含有特征性的空泡状的脂肪滴。2-3周传代一次.人羊膜上皮细胞羊膜移植组治疗后角膜基本保持透明,新生血管细小,未见结膜上皮长入;病理学检查可见与正常角膜类似的复层上皮,未见明显的杯状细胞和新生血管;AE-5染色阳性。单纯去上皮羊膜移植治疗后角膜混浊,结膜上皮长入,新生血管较粗大多见;病理学检查可见排列不规则的复层上皮细胞,夹杂较多杯状细胞,可见炎性细胞,红细胞和新生血管,AE-5染色阴性。对照组大部分角膜上皮脱落,杯状细胞弥漫分布,炎性细胞浸润,大量新生血管向角膜中央生长,AE-5阴性。结论采用消化培养法可获得人羊膜上皮细胞。通过板层切除角膜缘联合氢氧化钠烧伤角膜可以建立角膜缘干细胞缺损的动物模型。本实验发现人羊膜上皮细胞移植术后早期就可恢复角膜上皮的完整性,抑制角膜新生血管形成,为治疗严重角膜缘干细胞缺损眼表疾病提供了新的思路。由此推测可以将人羊膜上皮细胞体外培养增殖,移植进行眼表重建,从而治疗由于各种原因引起的角膜缘干细胞缺损。(本文来源于《大连医科大学》期刊2007-04-01）
卢建民[7]（2007）在《兔骨髓间充质干细胞移植治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究》一文中研究指出目的:探索体外分离培养和扩增兔骨髓间充质干细胞的方法。观察兔骨髓间充质干细胞移植到碱烧伤的兔角膜表面后,细胞的存活、迁移和分化情况,探讨间充质干细胞在体外向角膜上皮细胞横向分化的可能性,为眼科临床治疗角膜上皮细胞和角膜缘干细胞缺损或功能紊乱提供新思路。方法:18只新西兰兔(2.0～2.5kg)麻醉后,每只选左眼无菌条件下用1mol/L NaOH浸透的环型滤纸片与角膜密切接触1min建立角膜碱烧伤动物模型。人羊膜经胰蛋白酶-依地酸处理去除其表层细胞。抽取兔髂骨骨髓,置于等体积的兔单核细胞分离液(密度1.094g/ml)上,2500r/min离心25min,吸取含单个核细胞的乳白色液体层,加入含体积分数为10%胎牛血清的LG-DMEM培养液进行细胞培养,观察并绘制细胞生长曲线。用流式细胞术检测第叁代细胞的CD29、CD45、CD34表达情况。将第叁代细胞接种于铺有羊膜基质的培养皿中进行培养,移植术前48小时将5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)加入到培养基中(终浓度为10μmol/L)。将18只碱烧伤角膜缘干细胞缺损模型兔随机分为对照组、单纯羊膜基质移植组和兔骨髓间充质干细胞移植组,每组6只兔子6只眼。模型建立1个月后行移植手术,并对术后的角膜进行观察。术后4周,取各实验组动物角膜行石蜡切片,苏木精-伊红(HE)染色观察角膜组织结构的变化,并进行BrdU和细胞角蛋白AE5单克隆抗体免疫组化染色以观察兔骨髓间充质干细胞的存活以及向角膜上皮细胞方向分化的情况。结果:由兔单核细胞分离液获取的骨髓单个核细胞,呈圆形,24h大量贴壁,3d后进入快速增殖期,呈梭形并聚集成细胞集落,12d左右融合达80%～90%。流式细胞术检测结果显示,此次培养的第3代细胞高表达CD29,不表达CD34和CD45,符合骨髓间充质干细胞的特性。兔眼经环行滤纸片碱烧伤后,角膜出现混浊、新生血管化和瘢痕化。印迹细胞学检查提示角膜表层结膜化。兔骨髓间充质干细胞移植术后兔角膜基本保持透明,新生血管细小,角膜中央无新生血管;角膜病理学检查可见与正常角膜类似的结构特点,上皮细胞排列整齐,与基质层连接紧密,偶见炎症细胞,未见明显杯状细胞和新生血管;角膜免疫组化染色结果显示:BrdU阳性,AE5阳性。单纯羊膜基质移植术后兔角膜中度混浊,新生血管接近角膜中央;角膜病理学检查可见排列不规则的复层上皮细胞间夹杂少量杯状细胞,角膜基质层可见炎症细胞和少量新生血管;角膜免疫组化染色结果显示:BrdU阴性,AE5阴性。空白对照组兔角膜明显混浊,角膜中央部大量的新生血管;角膜病理学检查可见角膜表层细胞增多、排列不规则,并且可见大量杯状细胞侵入,角膜基质层胶原纤维排列疏松紊乱,有大量炎症细胞和新生血管浸润;角膜免疫组化染色结果显示:BrdU阴性,AE5阴性。结论:采用兔单核细胞分离液密度梯度离心和贴壁筛选相结合的方法可以获取纯度较高的兔骨髓间充质干细胞。通过碱溶液环形滤纸片烧伤的方法可以建立角膜缘干细胞缺损的动物模型。以羊膜基质为载体移植至兔角膜基质层上的兔骨髓间充质干细胞,可存活并增殖分化为角膜上皮细胞或角膜上皮细胞样细胞而发挥功能,在治疗角膜碱烧伤角膜缘干细胞缺损时,疗效明显优于单纯羊膜基质移植。骨髓间充质干细胞移植有望成为治疗角膜缘干细胞缺损的有效方法,值得进一步研究。(本文来源于《大连医科大学》期刊2007-04-01）
金岩,刘源,张超,董蕊,雷娟[8]（2005）在《利用表皮干细胞治疗兔角膜缘干细胞缺损》一文中研究指出目的利用自体表皮干细胞与异体角膜基质细胞在体外构建双层组织工程角膜,并修复兔角膜缘干细胞的缺损。方法建立兔角膜缘干细胞缺损模型,以去细胞猪角膜基质片作为支架材料,以自体表皮干细胞与异体角膜基质细胞作为种子细胞,在体外构建组织工程角膜,并用来修复兔角膜缘干细胞缺损。结果利用自体表皮干细胞与异体角膜基质细胞复合异种去角膜基质片在体外成功构建组织工程角膜;构建的组织工程角膜与正常角膜相似,具有上皮层和基质层;用组织工程角膜修复兔角膜缘干细胞缺损3个月后,损伤角膜透明度恢复良好,组织学结构基本恢复正常。结论成功构建了兔的双层组织工程眼角膜,并修复了兔角膜缘干细胞缺损。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊2005年06期）
陈建苏,陈瑞,徐锦堂,赵松滨,丁勇[9]（2005）在《羊膜培养兔角膜缘上皮细胞及自体移植——角膜缘干细胞缺损的治疗》一文中研究指出目的 探讨以人羊膜为载体培养兔角膜缘上皮细胞及其自体移植治疗全角膜缘干细胞缺损。方法 在8只兔右眼用正庚醇脱上皮和角膜缘环切的方法构建全角膜缘干细胞缺损模型2月。其中6只兔为实验组,活体取左眼角膜缘浅层小块,置羊膜上常规和气_液培养42天后进行自体移植治疗右眼角膜缘干细胞缺损;2只兔为对照组,直接用解冻无细胞人羊膜移植治疗右眼角膜缘干细胞缺损。进行细胞和术眼活体观察、组织学观察和电镜观察。结果 角膜缘上皮细胞在羊膜上生长良好,形成复层,细胞间的联结结构存在,细胞与羊膜组织粘附牢固。实验组移植手术后角膜迅速上皮化,恢复角膜表面光滑和透明,组织学观察和电镜观察呈现生理角膜上皮层的结构特点。但眼睑闭合不全可导致手术失败。对照组术后出现角膜缘干细胞缺损导致的角膜病变。结论 以羊膜为载体培养角膜缘上皮细胞后自体移植可有效地治疗角膜缘干细胞缺损导致的角膜病变。(本文来源于《眼外伤职业眼病杂志.附眼科手术》期刊2005年04期）
支勇平,张哲浩[10]（2004）在《我首次建成人类胎儿胰腺干细胞系》一文中研究指出本报讯（支勇平 张哲浩） 由西北农林科技大学、国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心完成的国家重大科技项目“人胰腺干细胞建系的研究”、“冻存角膜缘干细胞构建角膜上皮及移植的研究”和“表皮干细胞可塑性及其在构建组织工程化角膜移植研究”叁个研究项目，8月(本文来源于《科技日报》期刊2004/08/11）
角膜缘干细胞缺损论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用全板层切除术制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损模型,取对侧眼角膜缘组织进行干细胞培养,并以纤维蛋白为基质网架构建组织工程角膜上皮.将实验动物随机分为实验组和对照组,对照组移植不含干细胞的凝胶膜,术后观察1个月.以角膜上皮染色、角膜混浊及新生血管3项指标进行效果评价.结果显示,实验组角膜上皮是一个逐渐修复的过程,角膜水肿、炎性反应逐渐减轻,新生血管明显减少.由此得出,以纤维凝胶膜为一种新型的组织工程材料制备的组织工程角膜上皮经移植术后证实可修复角膜上皮的损伤.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
角膜缘干细胞缺损论文参考文献
[1].邱吉妮,张朝然.口腔黏膜上皮细胞片移植治疗角膜缘干细胞缺损的基础研究及临床应用[J].中国眼耳鼻喉科杂志.2017
[2].徐煌.组织工程角膜上皮治疗兔角膜缘干细胞缺损模型的实验研究[J].嘉兴学院学报.2010
[3].蒋自培,胡赛静,徐建国,孔丽萍,吴文栩.人骨髓间充质干细胞在兔角膜缘干细胞缺损动物模型中的分化[J].眼视光学杂志.2009
[4].庆惠玲,王丽娅,赵承彦,杜连心.组织工程角膜上皮治疗兔角膜缘干细胞缺损的实验研究[J].山东医药.2007
[5].庆惠玲,王丽娅,赵承彦,杜连心.不同移植手术治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究[J].眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术).2007
[6].吕秀丽.人羊膜上皮细胞移植治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究[D].大连医科大学.2007
[7].卢建民.兔骨髓间充质干细胞移植治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究[D].大连医科大学.2007
[8].金岩,刘源,张超,董蕊,雷娟.利用表皮干细胞治疗兔角膜缘干细胞缺损[J].中国医学科学院学报.2005
[9].陈建苏,陈瑞,徐锦堂,赵松滨,丁勇.羊膜培养兔角膜缘上皮细胞及自体移植——角膜缘干细胞缺损的治疗[J].眼外伤职业眼病杂志.附眼科手术.2005
[10].支勇平,张哲浩.我首次建成人类胎儿胰腺干细胞系[N].科技日报.2004