导读:本文包含了荧光双向差异凝胶电泳论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:苹果梨,蛋白质,果实,荧光差异双向凝胶电泳
荧光双向差异凝胶电泳论文文献综述
张微,刘迪,于婷婷,刘晓羽[1]（2019）在《苹果梨芽变果实蛋白质荧光差异双向凝胶电泳体系建立》一文中研究指出本研究以苹果梨芽变果实为试材,通过对上样量,缓冲液等条件下的荧光差异双向电泳图谱的试验,初步建立了适合苹果梨芽变果实蛋白质荧光差异双向电泳体系。采用TCA-丙酮法提取苹果梨果实蛋白质,选用胶条的规格为24 cm,pH值为3～11的线性IPG,蛋白质上样量定为900μg,胶体考染使用考马斯亮蓝G-250,双向电泳及荧光染剂凝胶的结果是蛋白点的图片分辨率较高且背景清晰,通过进一步质谱鉴定共获得2 713个蛋白质点且纹理较少,适用于苹果梨芽变果实蛋白质组学后续分析。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年09期）
刘铁军,李昆珊,刘健,仇永乐,吴景景[2]（2015）在《应用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术筛选口腔扁平苔藓唾液差异蛋白》一文中研究指出目的:应用双向荧光差异凝胶电泳(2-D DIGE)和质谱技术筛选、鉴定与口腔扁平苔藓(OLP)患者唾液有关的差异蛋白。方法:收集3例OLP患者及3例健康人唾液,提取唾液总蛋白采用2-D DIGE技术分离蛋白质,寻找差异蛋白质点应用液相色谱一质谱联用技术(LC-MS)对差异蛋白质点进行质谱鉴定。结果:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示各样品条带清晰,无明显蛋白质丢失,经2-D DIGE分离蛋白质后,蛋白质点重复性较好。OLP患者组和健康对照组唾液差异蛋白质点数平均为(317±71)个,用质谱技术鉴定了重复性较好的4个差异蛋白质点(分泌型IgAl、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白)在OLP患者唾液中表达量均上调。结论:分泌型IgAl、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白在OLP患者唾液中高表达可能参与了OLP的发生、发展。(本文来源于《实用口腔医学杂志》期刊2015年06期）
李昆珊[3]（2014）在《应用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术筛选口腔扁平苔藓唾液差异蛋白》一文中研究指出目的：口腔扁平苔藓（oral lichen planus，OLP）是一种常见的口腔黏膜疾病，病因不明，易反复发作，有一定的癌变倾向，被世界卫生组织（WHO）定义为癌前状态。在我们前期研究中，应用基因芯片技术筛选出142个差异表达基因，而基因是通过指导蛋白质的合成来进行表达。随着人类基因组测序计划的完成，研究重点逐渐转向功能基因组学，然而仅凭基因DNA序列及其表达仍不足以解决基因表达时间及表达量甚至蛋白质的翻译后加工及修饰等情况，因此，这些基因组学不能解决的问题可以在蛋白质组学的研究中找到答案。目前，随着蛋白质组学技术的发展，其研究越来越多地应用到生命科学、医学等各个领域，尤其是在研究疾病的病因及发病机制中发挥着重要作用。以往采用双向凝胶电泳技术研究扁平苔藓差异蛋白的方法误差较大，蛋白定量不准确，而且蛋白质组学对组织和血液研究较多，对唾液的研究较少。而唾液取材的简便、安全、低成本和无创性以及含有许多有助于疾病早期诊断的蛋白质，使得唾液的蛋白质组学研究发展受到人们的关注，但是由于唾液的蛋白质种类较多，蛋白质浓度相差较大，对于唾液蛋白的提取没有统一标准和规范，还需要进一步探索。本研究采用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术筛选、鉴定与口腔扁平苔藓患者唾液有关的差异蛋白，以探讨唾液中某些相关蛋白质表达量的变化与口腔扁平苔藓发生的可能作用机制。方法：1提取唾液蛋白预试验分别采用甲醇/NH4HCO3沉淀法、苯酚抽提法及2-D Clean-Up Kit的方法提取新鲜唾液蛋白，并将苯酚抽提复溶后的蛋白经超声处理50s，通过观察十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白条带，确定提取唾液蛋白的最适方法。2唾液蛋白十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳收集9例口腔扁平苔藓患者及9例正常人唾液，为了减少个体差异对__________________________________________________________________________________________________本研究的影响，分别将每组3例唾液混合，作为一个试验样品。按照2-DClean-Up Kit说明书操作提取唾液总蛋白，Bradford法测定蛋白浓度，通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白条带观察唾液蛋白的提取情况。3双向荧光差异凝胶电泳技术分离蛋白质、质谱技术鉴定差异蛋白采用双向荧光差异凝胶电泳技术分离蛋白质，Typhoon9410扫描获取电泳图谱，DecyderTM2D6.5软件寻找差异蛋白质点，将凝胶进行Deeppurple染色，然后用Ettan Spot Picker将差异蛋白质点从凝胶中切下，胰酶酶解，应用液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）对差异蛋白质点进行分析，将生成的质谱数据用Bio Works3.3.1数据分析软件中的SEQUEST算法进行计算，在NCBI中搜索数据库，鉴定蛋白质。结果：1预试验结果预试验应用甲醇/NH4HCO3沉淀法、苯酚抽提法提取唾液蛋白，用DIGEbuffer复溶后均有粘稠透明胶状物出现，且甲醇/NH4HCO3沉淀法提取蛋白后蛋白有明显的丢失现象，将胶状物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳后出现蛋白条带，说明唾液蛋白复溶时并没有完全溶解到DIGEbuffer中，为了增加唾液蛋白的溶解度，将苯酚抽提蛋白复溶后经超声处理50s，测定蛋白浓度，尽管蛋白浓度有所上升，但仍有胶状物存在，唾液蛋白并没有完全溶解。而经2-D Clean-Up Kit提取蛋白，DIGE buffer复溶蛋白后，没有发现胶状物的存在，进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示各样品条带清晰，无明显蛋白质丢失、降解。2-D Clean-UpKit适合唾液蛋白质的提取。2十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果口腔扁平苔藓患者组和正常人组用2-D Clean-Up Kit提取唾液蛋白，进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白条带清晰，没有明显蛋白丢失和降解。3双向荧光差异凝胶电泳结果双向荧光差异凝胶电泳分离蛋白质后，图像重复性较好、分辨率较高，蛋白质等电点和分子量分布范围较广。DecyderTM2D6.5软件分析扁平苔藓患者组和正常人组唾液差异蛋白质点数平均为317±71个，并用液相色谱-质谱技术鉴定了重复性较好的4个差异蛋白质点，分别为分泌型IgA1、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白，它们在OLP患者唾液中表达量均上调。结论：12-D Clean-Up Kit适合唾液蛋白质的提取。2口腔扁平苔藓患者唾液中存在差异蛋白表达，其中分泌型IgA1、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白在口腔扁平苔藓患者中表达上调，提示它们可能参与了口腔扁平苔藓的发生、发展。(本文来源于《河北医科大学》期刊2014-03-01）
曾艳枫,苏胜,刘平[4]（2013）在《运用双向荧光差异凝胶电泳分析人类年龄相关性核性白内障和正常晶状体核的蛋白质组学差异》一文中研究指出目的鉴定年龄相关性核性白内障(age-related nuclear cataract,ARNC)和正常晶状体核蛋白质组学差异。方法用强解聚试剂分别溶解7只不同程度ARNC晶状体核和7只正常晶状体核,提取总蛋白,Bradford法测定蛋白浓度。通过双向荧光差异凝胶电泳(two-dimensional fluorescence differencein-gel electrophoresis,2-D DIGE)、Decyder6.5软件分析电泳图谱,寻找差异蛋白质点。差异蛋白质点随后用激光辅助解吸/电离飞行时间(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight,MALDI-TOF)质谱仪鉴定。结果 2-DDIGE结果显示,和正常晶状体核样品相比,39个点的蛋白含量在ARNC样品中显着减少(P<0.05)。MALDI-TOF质谱成功鉴定其中36个蛋白质点,它们分属于9个不同的蛋白质,其中6个蛋白(αA-、βA3-、βA4-、βB1-、γD-晶状体蛋白和一个来自CRYGS家族的未知蛋白DKFZp434A0627)的含量随着ARNC程度的增加而逐渐减少;其他3种蛋白(αB-晶状体蛋白、3-磷酸甘油醛脱氢酶和视黄醛脱氢酶1)未呈现这种递减趋势。结论 3-磷酸甘油醛脱氢酶、视黄醛脱氢酶1以及某些晶状体蛋白的减少可能参与ARNC的形成。(本文来源于《眼科新进展》期刊2013年07期）
鲁艳军,田俊,狄勇,宗义强[5]（2012）在《运用双向荧光差异凝胶电泳分析VLDL致THP-1来源泡沫细胞的形成》一文中研究指出目的运用双向荧光差异凝胶电泳结合质谱技术寻找极低密度脂蛋白(VLDL)致诱导分化的THP-1细胞形成泡沫细胞中的关键蛋白质,以期揭示其致泡沫细胞的机制。方法 THP-1细胞经佛波醇脂(PMA)诱导分化为巨噬细胞,以磷酸盐缓冲液(PBS)孵育为空白对照组、VLDL孵育为实验组。提取细胞总蛋白后分别用荧光染料CY3和CY5标记,以所有样本等量混合作为"内标",用CY2标记,然后将实验组、空白对照组及内标混合后进行二维电泳,扫描图像后经分析的差异蛋白做基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-CPR)分析3种蛋白质(脂肪分化相关蛋白、烯醇化酶1、磷酸甘油酸变位酶1)mRNA的变化。结果实验组与空白对照组比较,表达量上调蛋白点在1.2倍以上有34个,表达量下调1.2倍以上有48个。通过软件筛选其中14个有差异的蛋白点做MALDI-TOF-MS,其中脂肪分化相关蛋白、热休克蛋白27、人电子转移味蛋白叁维结构-链A、s100钙结合蛋白、人过氧化物酶-3-异构体c、辅酶-细胞色素C还原酶核心蛋白I、过氧化物酶烯酰辅酶A水合酶样蛋白、富马酸合酶-异构体d表达增高,烯醇化酶1、磷酸甘油酸变位酶1、环孢素A结合双肽甘氨酸-脯氨酸复合物、DMGDH蛋白、核内不均一核糖核蛋白L-异构体a、果糖胺3激酶-异构体b表达降低。脂肪分化相关蛋白mRNA表达明显上调,烯醇化酶1、磷酸甘油酸变位酶1 mRNA表达明显下调,与蛋白水平变化一致。结论荧光差异凝胶电泳能在整体上揭示VLDL在致泡沫细胞形成过程中蛋白质水平的变化,经鉴定的蛋白质可能在VLDL致泡沫细胞的形成中发挥重要的作用,为阐明VLDL作用巨噬细胞形成泡沫细胞的机制奠定了基础。(本文来源于《检验医学》期刊2012年01期）
鲁艳军,田俊,狄勇,孙自镛[6]（2011）在《富含甘油叁酯的泡沫细胞的双向荧光差异凝胶电泳》一文中研究指出目的泡沫细胞形成是动脉粥样硬化早期的重要特征,但其形成机制目前还不清楚。利用蛋白质组学技术探讨泡沫细胞形成中蛋白质水平的变化,有助于对其机制的研究。目前关于富含胆固醇的脂蛋白LDL、OX-LDL作用的巨噬细胞及单核细胞形成泡沫细胞的蛋白组学研究比较深入,但由富含甘油叁酯的脂蛋白VLDL作用而形成泡沫(本文来源于《中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编》期刊2011-05-24）
魏英杰,胡盛寿,黄银霞,黄洁,张晓玲[7]（2008）在《双向荧光差异凝胶电泳技术在心脏病蛋白质组学研究中的应用》一文中研究指出目的:应用双向荧光差异凝胶电泳技术筛选与致心律失常性右心室心肌病引起的与心力衰竭密切相关的蛋白质标志物。方法:从本院的心脏病组织库中挑选6例病理诊断明确和各方面资料比较齐全的致心律失常性右心室心肌病引起心力衰竭的左心室心肌标本(来源于心脏移植的受体),以年龄、性别和种族等因素相匹配的因非心脏病死亡的6例正常心脏的左心室心肌作为本实验的对照,进行比较蛋白质组学研究,筛选在致心律失常性右心室心肌病引起的心力衰竭中差异表达的蛋白质,即蛋白质标志物,并应用免疫组织化学和免疫印迹杂交方法检验差异蛋白质的可靠性。结果:经二次重复实验共筛选出5个差异表达的蛋白质,其中有3个在致心律失常性右心室心肌病引起的心力衰竭中表达升高,而另有2个表达降低。经生物信息学分析,这5个差异蛋白质主要为心肌细胞的骨架蛋白或参与能量代谢和应急保护反应的蛋白质。其中的一个差异表达蛋白质——细胞骨架蛋白 Desmin 经免疫组织化学和免疫印迹杂交方法得到了进一步验证。结论:本研究应用双向荧光差异凝胶电泳技术筛选获得5个与致心律失常性右心室心肌病引起的心力衰竭密切相关的蛋白质标志物,这些标志物可能与心力衰竭发生的分子机制相关,并可能用于疾病的分层、判断预后及指导个性化治疗。(本文来源于《中国循环杂志》期刊2008年04期）
马学玲,刘亢丁,江新梅,文佳媚,李桂玉[8]（2007）在《荧光差异双向凝胶电泳法筛选大鼠脑缺血相关蛋白》一文中研究指出目的鉴定局灶性脑缺血相关蛋白并筛选早期神经保护蛋白。方法应用先进的差异蛋白质组学荧光差异双向凝胶电泳(2D DIGE)技术,比较大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)6h病灶侧大脑皮层和正常大鼠相应部位蛋白质变化;采用DeCyder-DIA软件、单因素方差分析ANO- VA,选择两组间蛋白表达量差异具有统计学意义(P<0.05)且AR>1.4的蛋白点;基质辅助激光解析/电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱鉴定差异蛋白。结果脑缺血6h组与正常对照组比较13个蛋白点符合统计学要求;经质谱分析仅鉴定出一个缺血组明显减少的蛋白点为α-微管蛋白。结论作为结构蛋白之一的α-微管蛋白在脑缺血早期即发生明显变化,是缺血性脑血管病早期相关蛋白。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2007年11期）
荧光双向差异凝胶电泳论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:应用双向荧光差异凝胶电泳(2-D DIGE)和质谱技术筛选、鉴定与口腔扁平苔藓(OLP)患者唾液有关的差异蛋白。方法:收集3例OLP患者及3例健康人唾液,提取唾液总蛋白采用2-D DIGE技术分离蛋白质,寻找差异蛋白质点应用液相色谱一质谱联用技术(LC-MS)对差异蛋白质点进行质谱鉴定。结果:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示各样品条带清晰,无明显蛋白质丢失,经2-D DIGE分离蛋白质后,蛋白质点重复性较好。OLP患者组和健康对照组唾液差异蛋白质点数平均为(317±71)个,用质谱技术鉴定了重复性较好的4个差异蛋白质点(分泌型IgAl、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白)在OLP患者唾液中表达量均上调。结论:分泌型IgAl、锌α-2-糖蛋白、唾液淀粉酶、血清白蛋白在OLP患者唾液中高表达可能参与了OLP的发生、发展。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
荧光双向差异凝胶电泳论文参考文献
[1].张微,刘迪,于婷婷,刘晓羽.苹果梨芽变果实蛋白质荧光差异双向凝胶电泳体系建立[J].分子植物育种.2019
[2].刘铁军,李昆珊,刘健,仇永乐,吴景景.应用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术筛选口腔扁平苔藓唾液差异蛋白[J].实用口腔医学杂志.2015
[3].李昆珊.应用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术筛选口腔扁平苔藓唾液差异蛋白[D].河北医科大学.2014
[4].曾艳枫,苏胜,刘平.运用双向荧光差异凝胶电泳分析人类年龄相关性核性白内障和正常晶状体核的蛋白质组学差异[J].眼科新进展.2013
[5].鲁艳军,田俊,狄勇,宗义强.运用双向荧光差异凝胶电泳分析VLDL致THP-1来源泡沫细胞的形成[J].检验医学.2012
[6].鲁艳军,田俊,狄勇,孙自镛.富含甘油叁酯的泡沫细胞的双向荧光差异凝胶电泳[C].中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编.2011
[7].魏英杰,胡盛寿,黄银霞,黄洁,张晓玲.双向荧光差异凝胶电泳技术在心脏病蛋白质组学研究中的应用[J].中国循环杂志.2008
[8].马学玲,刘亢丁,江新梅,文佳媚,李桂玉.荧光差异双向凝胶电泳法筛选大鼠脑缺血相关蛋白[J].中国老年学杂志.2007
标签：苹果梨; 蛋白质; 果实; 荧光差异双向凝胶电泳;