连锁群特异克隆论文-李玉玺

连锁群特异克隆论文-李玉玺

导读:本文包含了连锁群特异克隆论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:结球甘蓝-大白菜单体异附加系,25S,rDNA,SSR,FISH

连锁群特异克隆论文文献综述

李玉玺[1](2011)在《大白菜连锁群特异BAC克隆的筛选及结球甘蓝—大白菜1号、4号异附加系FISH分析》一文中研究指出大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)和结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)是十字花科芸薹属重要的蔬菜作物,也是研究芸薹属A、C基因组起源、演化以及亲缘关系的重要材料。由于大白菜和结球甘蓝均属小染色体物种,相邻染色体形态又极为相似,不同染色体的识别存在很大困难。大白菜BAC文库的构建,为利用BAC-FISH技术鉴别结球甘蓝背景中的大白菜染色体提供了平台。基于此,本研究利用大白菜不同连锁群的SSR标记筛选大白菜BAC文库,并用筛选出的部分BAC克隆做探针在大白菜染色体上进行了BAC-FISH技术体系的初步探讨。同时,利用25S rDNA-FISH技术,分析结球甘蓝—大白菜1号、4号单体异附加系染色体上25SrDNA杂交信号分布及其在减数分裂过程中行为,揭示大白菜1号、4号染色体与结球甘蓝染色体的亲缘关系。主要研究结果如下:1.以50个一级混合池为模板,利用大白菜连锁群上特异SSR引物进行PCR扩增,A05、A06、A08、A10连锁群共筛到了18个阳性单克隆。其中,A05引物ENA17筛到了1个单克隆,引物ENA10筛到1个单克隆;A06引物ENA19筛到3个单克隆;A08引物BRMS-033筛到了6个单克隆;A10引物ENA18筛到了1个单克隆,B036L21-2筛到了6个单克隆。2.探讨了FAD的浓度、ssDNA的浓度对BAC-FISH杂交效果的影响,初步认为30%FAD、10%DS、2×SSC、探针1μg、1μg/μL ssDNA,得到的背景非特异性信号较少,其中91M11单克隆获得杂交信号,97D24,91M11克隆混合标记作为探针得到信号,91池M行混合克隆标记作为探针得到信号。3.对结球甘蓝—大白菜1号、4号单体异附加系进行了田间生殖生长时期性状调查。结果表明:与二倍体甘蓝亲本一样,CA1和CA4的生殖生长时期植株长势、分枝能力均非常强,叶片形状均为卵圆形,可育;但二者在植株高度、分枝角度、花蕾和花瓣大小、形状上表现出很大差异,CA4植株稍矮,花蕾为钝圆形,花浅黄色,花瓣平展,侧枝开展角度大;CA1花蕾瘦长、花色黄色,花瓣边缘呈微皱与亲本相同,侧枝开展角度较小,株型紧凑。4. 25S rDNA在CA1有丝分裂中期染色体上检出了5个杂交信号,其中4个信号位于结球甘蓝5号,9号染色体上,1个信号位于附加的1号大白菜染色体上;减数分裂终变期细胞中染色体多以9个二价体和1个单价体的形式存在,中期I大部分细胞中染色体均能正常排列在赤道板上。后期I染色体基本以10/9方式分离,后期Ⅱ基本上以10-9-10-9形式分离,个别细胞中出现后期I染色单体提前解离及后期Ⅱ染色体不同步分离等异常现象。5. 25S rDNA在CA4有丝分裂中期染色体上检出了5个杂交信号,其中4个信号位于结球甘蓝5号,9号染色体上,1个信号位于附加的4号大白菜染色体上;减数分裂终变期染色体的构型表现出多样性,有二价体、叁价体、单价体和拟多价体。中期I单价体和二价体均排列于赤道板上,后期I基本以10-9形式分离,后期Ⅱ基本以10-9-10-9形式分离,杂交信号以3-2-3-2形式分离,个别以9-10-8-11形式分离,有一部分细胞中出现染色体分离不同步或不均衡现象。(本文来源于《河北农业大学》期刊2011-06-04)

关媛,陈琪,潘俊松,李征,何欢乐[2](2008)在《黄瓜(Cucumis sativus L.)BAC文库的构建及连锁群特异克隆的分离》一文中研究指出利用中国华北类型的黄瓜自交系S94构建一个BAC文库,该文库包含约19200个克隆,平均插入片段为105kb,大约覆盖黄瓜基因组的5倍.为了使黄瓜的遗传连锁群锚定其染色体,从黄瓜的7个连锁群共选择了22个标记,其中15个SCAR标记和7个SSR标记.利用这些标记用PCR的方法筛选BAC文库的DNA池,15个标记筛选到至少2个克隆,共筛选到60个BAC克隆,最后确定了22个BAC克隆作为连锁群特异克隆,这个BAC文库的构建为今后黄瓜基因组研究奠定了基础.(本文来源于《自然科学进展》期刊2008年02期)

连锁群特异克隆论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

利用中国华北类型的黄瓜自交系S94构建一个BAC文库,该文库包含约19200个克隆,平均插入片段为105kb,大约覆盖黄瓜基因组的5倍.为了使黄瓜的遗传连锁群锚定其染色体,从黄瓜的7个连锁群共选择了22个标记,其中15个SCAR标记和7个SSR标记.利用这些标记用PCR的方法筛选BAC文库的DNA池,15个标记筛选到至少2个克隆,共筛选到60个BAC克隆,最后确定了22个BAC克隆作为连锁群特异克隆,这个BAC文库的构建为今后黄瓜基因组研究奠定了基础.

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

连锁群特异克隆论文参考文献

[1].李玉玺.大白菜连锁群特异BAC克隆的筛选及结球甘蓝—大白菜1号、4号异附加系FISH分析[D].河北农业大学.2011

[2].关媛,陈琪,潘俊松,李征,何欢乐.黄瓜(CucumissativusL.)BAC文库的构建及连锁群特异克隆的分离[J].自然科学进展.2008

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