导读:本文包含了体外抑制转录活性论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:龟裂链霉菌,氧化应激,转录抑制因子Rex,基因克隆和表达
体外抑制转录活性论文文献综述
沈晶,唐振宇,肖慈英,郭美锦[1]（2012）在《Streptomyces rimosus M4018中氧化应激转录抑制因子Rex的克隆表达及与rex操纵子的体外结合活性》一文中研究指出【目的】为了研究龟裂链霉菌Streptomyces rimosus M4018中的rex基因对自身rex operator(ROP)的调控机制。【方法】根据天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolor A3(2)中rex基因的同源序列设计引物进行PCR,从S.rimosus M4018中获得其rex基因(Sr-rex)。同时,通过染色体步移的方法,获得其上游的ROP序列。采用体外凝胶迁移的方法,分析了Sr-Rex对ROP的调控作用。【结果】获取的Sr-rex基因核苷酸序列长度为846 bp,预测的编码氨基酸序列与S.coelicolor A3(2)中Rex的同源性为84%,获得GenBank登录号:GQ849479。圆二色光谱显示Sr-Rex的结构以α螺旋和β折叠为主,与软件预测相符。凝胶迁移实验表明,Sr-Rex能与S.rimosus M4108中扩增到的ROP片段特异性结合。同时,以Rex:ROP的最小结合序列为基础,设计了一条22 bp的单链DNA片段,和Sr-Rex的最大结合摩尔浓度比约为5:1。高浓度的NADH抑制两者的结合活性,而NAD+对结合没有影响。【结论】在S.rimosus M4108中,Rex是通过响应胞内NAD(H)水平的方式来调控ROP的表达的。(本文来源于《微生物学报》期刊2012年01期）
李欣檑[2]（2006）在《抗癌药物放线菌素D新类似物DNA结合活性及体外转录抑制活性的研究》一文中研究指出为了得到高效低毒的放线菌素D类似物,以放线菌素D和DNA复合物结构及放线菌素D类似物的构效关系为基础,合成了两个放线菌素D类似物([D-Phe~2,L-Me-Leu~5]_2 AMD和[D-Phe~2,D-Me-Leu~5]_2 AMD)以及母体。合成采用液相的方法,所有中间产物用质谱、~1H NMR和[α]_D表征,终产物用高分辨质谱(HR-MS)、~1H NMR和[α]_D表征。 我们已经研究了十四个类似物抗肿瘤活性,为了更加明白类似物抗肿瘤活性产生差异的分子基础,本实验中采用UV-Vis光谱法测定了类似物和小牛胸腺DNA的作用方式和作用强度,用pGEM质粒/T7 RNA聚合酶体外转录系统测定了类似物抑制体外转录活性。 可见光谱显示2位保持不变,延长或者缩短环肽中5位氨基酸侧链的长度,用MeLeu、D-MeLeu、Me-allolle和Sar替换原有的MeVal的类似物与母体作用方式相同,以嵌入作用与DNA结合;2位Phe取代的所有类似物从这种较强作用力变为较弱的侧面结合作用。得到了抑制转录50%的药物浓度(IC(_50)),发现放线菌素D类似物抑制转录活性与DNA结合活性密切相关,相比较于DNA结合活性,体外转录抑制活性与抗肿瘤活性MTT结果的关系更密切。2位保持小变的类似物抑制转录活性优于母体或者与母体相当。环肽2位D-Phe的类似物中,其5位取代为:Sar、D-MeAla、D-MeVal、MeLeu、D-MeLeu、Me-allolle、L-MePhe、D-MePhe、D-Val和D-Phe的类似物,抑制转录活性较母体下降4—7倍,类似物2-D-Phe-5-D-MePhe,2-D-Phe-5-D-Phe,2-D-Phe-5-D-Val抑制转录活性远远不及母体。由合成RNA的电泳图谱我们推测某些类似物不仅抑制DNA模板的表达,而且有明显降解RNA作用。两个活性实验均显示出5位氨基酸的侧链和N-甲基对放线菌素D的DNA结合活性和抑制转录活性有重要影响, 本论文的工作验证并补充了放线菌素D抗肿瘤作用发挥的机制以及构效关系的研究,为今后合理设计类似物,以及筛选类似物实验方法方面提供了有意义的参考数据。(本文来源于《兰州大学》期刊2006-04-01）
体外抑制转录活性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了得到高效低毒的放线菌素D类似物,以放线菌素D和DNA复合物结构及放线菌素D类似物的构效关系为基础,合成了两个放线菌素D类似物([D-Phe~2,L-Me-Leu~5]_2 AMD和[D-Phe~2,D-Me-Leu~5]_2 AMD)以及母体。合成采用液相的方法,所有中间产物用质谱、~1H NMR和[α]_D表征,终产物用高分辨质谱(HR-MS)、~1H NMR和[α]_D表征。 我们已经研究了十四个类似物抗肿瘤活性,为了更加明白类似物抗肿瘤活性产生差异的分子基础,本实验中采用UV-Vis光谱法测定了类似物和小牛胸腺DNA的作用方式和作用强度,用pGEM质粒/T7 RNA聚合酶体外转录系统测定了类似物抑制体外转录活性。 可见光谱显示2位保持不变,延长或者缩短环肽中5位氨基酸侧链的长度,用MeLeu、D-MeLeu、Me-allolle和Sar替换原有的MeVal的类似物与母体作用方式相同,以嵌入作用与DNA结合;2位Phe取代的所有类似物从这种较强作用力变为较弱的侧面结合作用。得到了抑制转录50%的药物浓度(IC(_50)),发现放线菌素D类似物抑制转录活性与DNA结合活性密切相关,相比较于DNA结合活性,体外转录抑制活性与抗肿瘤活性MTT结果的关系更密切。2位保持小变的类似物抑制转录活性优于母体或者与母体相当。环肽2位D-Phe的类似物中,其5位取代为:Sar、D-MeAla、D-MeVal、MeLeu、D-MeLeu、Me-allolle、L-MePhe、D-MePhe、D-Val和D-Phe的类似物,抑制转录活性较母体下降4—7倍,类似物2-D-Phe-5-D-MePhe,2-D-Phe-5-D-Phe,2-D-Phe-5-D-Val抑制转录活性远远不及母体。由合成RNA的电泳图谱我们推测某些类似物不仅抑制DNA模板的表达,而且有明显降解RNA作用。两个活性实验均显示出5位氨基酸的侧链和N-甲基对放线菌素D的DNA结合活性和抑制转录活性有重要影响, 本论文的工作验证并补充了放线菌素D抗肿瘤作用发挥的机制以及构效关系的研究,为今后合理设计类似物,以及筛选类似物实验方法方面提供了有意义的参考数据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外抑制转录活性论文参考文献
[1].沈晶,唐振宇,肖慈英,郭美锦.StreptomycesrimosusM4018中氧化应激转录抑制因子Rex的克隆表达及与rex操纵子的体外结合活性[J].微生物学报.2012
[2].李欣檑.抗癌药物放线菌素D新类似物DNA结合活性及体外转录抑制活性的研究[D].兰州大学.2006