导读:本文包含了聚阳离子脂质体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:姜黄素,甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体,Walker256细胞,抗肿瘤作用
聚阳离子脂质体论文文献综述
吴梅梅,李瀚旻,常明向[1]（2019）在《甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对肿瘤Walker256细胞的影响》一文中研究指出目的:研究姜黄素及甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对Walker256细胞的影响。方法:不同浓度姜黄素与甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体处理Walker256细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;用流式细胞仪检测细胞吸收、细胞周期变化情况;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot检测Wnt及β-catenin表达水平。结果:姜黄素和甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对肿瘤细胞Walker256均具有明显的抑制作用。与游离姜黄素相比,甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体明显增强细胞对姜黄素的吸收,显着增强对Walker256细胞的增殖抑制、凋亡、细胞周期G2期的阻滞作用,明显下调Wnt及β-catenin的表达。结论:甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体比游离姜黄素具有更强的抗肿瘤Walker256细胞的作用。(本文来源于《中国医院药学杂志》期刊2019年11期）
王艳冰[2]（2019）在《阳离子脂质体联合转运吉西他滨和Mcl-1 siRNA在胰腺癌干预中的作用研究》一文中研究指出背景:胰腺癌(pancreatic adenocarcinomas)具有临床症状隐匿、易转移和侵袭性强等特点,晚期治疗缺乏有效的手段,致死率高,5年生存率仅为8%。吉西他滨(Gemcitabine,Gem)是胰腺癌治疗的一线化疗药物,它虽然在一定程度上可以改善患者的生存质量,但仍存在单药化疗有效率低于15%等问题。因此,为进一步改善吉西他滨对胰腺癌的治疗效果,迫切需要研究新的治疗策略。近年来,髓细胞白血病-1(Myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)的过度表达已在胰腺癌等多种肿瘤中被证实,更与恶性肿瘤的发生发展密切相关。降低Mcl-1表达水平不仅可以直接促进肿瘤细胞发生凋亡,还可以显着提高肿瘤细胞的化疗敏感性。因此,靶向干预Mcl-1可以大大提高患者的术后生存率。相对于现有Mcl-1的小分子抑制剂药物,小干扰RNA(Small interfering RNA,si RNA)技术因其特异性高和副作用小等特点在基因沉默和药物开发中被广泛关注。然而,si RNA存在透膜能力弱和易降解等缺点。因此,有必要找到一种可靠的载体,用于将si RNA有效地递送至细胞内部,发挥基因沉默作用。目前,已经开发出各种类型的si RNA递送系统,主要分为两类:病毒载体和非病毒载体。虽然病毒载体具有较高的转染效率,但是其存在特异性差、封装能力有限以及生物安全性等问题,限制了其在临床上的应用。而非病毒载体因其具有负载量大、可修饰性强、细胞毒性低和便于保存等优势成为了一种新兴的载体。其中,阳离子脂质体由于其制备简单、可重复转染和易降解等特点而被认为具有潜在的临床应用前景。1,2-二油酰氧丙基-N,N,N-叁甲基溴化铵(1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane,DOTAP)是最广泛使用的阳离子脂质体,它的价格相对便宜,并且在体外和体内应用中都具有良好的效果。目的:本研究中,我们利用DOTAP、胆固醇和鱼精蛋白构建了一种基于阳离子脂质体的基因递送系统(LPs)。DOTAP可通过带正电荷的阳离子头部与带负电荷的si RNA相互结合,将si RNA包封于脂质双分子层中,保护si RNA免受核酸酶降解并促使其顺利释放到细胞质中。胆固醇作为常见的辅助脂类,能够起到稳定脂质双分子层,降低阳离子脂质体毒性的作用。鱼精蛋白可以通过静电相互作用与si RNA结合,本身即可作为一种载体,通过与脂质基因载体配合使用,能够增强脂质基因载体的转染效率。另外,该递送载体还可以同时包载化疗药物。因此,我们利用合成的纳米载体共同递送Gem和Mcl-1 si RNA,形成LP-Gem-si Mcl-1,通过一系列体外和体内实验评价靶向Mcl-1干预对胰腺癌的作用以及Gem和Mcl-1 si RNA的协同抗肿瘤效应。方法:(1)我们利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和免疫印迹(western blot)技术确定了Mcl-1在胰腺癌中的表达情况,并检测了下调Mcl-1表达对Gem化疗敏感性的影响。(2)利用DOTAP、胆固醇和鱼精蛋白制备成纳米载体,包载Gem和Mcl-1si RNA,并对其表征进行检测。通过动态光散射(Dynamic light scattering,DLS)及透射电子显微镜(Transmission electron microscopy,TEM)检测所制备的纳米载体的粒径和电位大小,并观察纳米颗粒的形貌特征;利用超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)和琼脂糖凝胶电泳分别检测了Gem的包载率以及纳米载体对si RNA的吸附能力;共聚焦显微镜和流式细胞仪分析LPs的细胞内摄取以及亚细胞定位;免疫印迹和实时荧光定量PCR检测si RNA对细胞内Mcl-1的干扰效率。(3)在体外实验中,我们通过细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞术分别测定LP-Gem-si Mcl-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。(4)在体内实验中,通过建立小鼠的胰腺癌皮下移植瘤模型,绘制肿瘤生长曲线和组织学实验检测LP-Gem-si Mcl-1的体内抗肿瘤效果,并通过主要脏器的组织病理学分析以及血液生化指标的检测对所构建的纳米载体进行生物安全性评价。结果:(1)我们发现相对于正常组织和细胞,Mcl-1在胰腺癌中是过度表达的,与现有文献报道结果一致。通过瞬时转染si RNA下调Mcl-1的表达后,能够有效抑制胰腺癌细胞PANC-1和Bx PC-3的增殖,并且与Gem联合使用时,增强了Gem对胰腺癌细胞的杀伤效果。(2)纳米粒子的形态学表征:观察到制备的纳米粒子的粒径150-200nm左右,球形且呈单层分散状态;UPLC测得Gem的包载率约为19.3%;琼脂糖凝胶实验证实LPs具有较好的核酸吸附能力;共聚焦显微镜和流式细胞仪检测发现,LPs所包载的Gem和si RNA可以高效地被胰腺癌细胞摄取,并且定位在溶酶体中;进一步测得LP-si Mcl-1(LPs包载Mcl-1 si RNA)能够有效地抑制细胞内Mcl-1的表达。(3)体外实验中证实,与其他处理组相比,LP-Gem-si Mcl-1可以有效地抑制胰腺癌细胞增殖,并促进其凋亡的发生,效果明显高于LP-Gem(LPs包载Gem)和LP-si Mcl-1的单载组。(4)体内实验中,观察到LPs所载运的药物可以被动靶向于肿瘤部位,提高肿瘤部位的药物浓度。LP-Gem-si Mcl-1对肿瘤生长的抑制作用显着高于其他处理组,细胞增殖标志物Ki-67的表达也明显受到了抑制,证实了Gem和Mcl-1si RNA的协同抗肿瘤效应,并且LPs纳米材料无明显毒副作用。结论:综上所述,我们利用基于阳离子脂质体的药物和基因共递送系统成功地将Gem和Mcl-1 si RNA共同递送到胰腺癌细胞中,并证实了降低Mcl-1表达可以增强Gem对胰腺癌细胞的杀伤效果,二者具有协同抗肿瘤的作用。通过该研究,我们明确了靶向Mcl-1干预在胰腺癌治疗中的潜在价值,并利用阳离子脂质体递送系统验证了si RNA和化学治疗药物联合治疗胰腺癌的可行性,为胰腺癌的治疗新策略提供了理论依据和实验室基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
何芳丽,程健琳,李俐娟,李亚林,苏泽红[3]（2019）在《氨基酸类阳离子脂质体在基因转染中的应用》一文中研究指出通过化工程序合成阳离子脂质TMA-C2-Glu-C12,经双蒸水超声分散后制得相应的氨基酸类阳离子脂质体,实验共合成了八种氨基酸类阳离子脂质,经过二次整流后分散成对应的质体。实验结果表明,在HBL100、HT1080和GC-1细胞系中,TMA-C2-Glu-C12的转染效率与Lipofectamine 2000相当,在HEK293、Ges-1、Huvce、HeLa和SW480细胞系中进行结果对比,实验表明TMA-C2-Glu-C12的细胞毒性不强,是一种高效的基因转载体。(本文来源于《化工设计通讯》期刊2019年05期）
刘晶晶[4]（2019）在《培美曲塞二钠阳离子脂质体的制备及体内外评价》一文中研究指出非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌中最普遍的种类,是癌症患者死亡的重要原因。虽然NSCLC的诊疗方式有了很大进步,但是临床治疗现状仍不乐观。培美曲塞二钠(Pemetrexed disodium,PMX)是新型的多靶点抗叶酸药物,能阻碍嘌呤和嘧啶的合成,进而抑制癌症细胞的生长。PMX能明显增长NSCLC患者生存期且耐受性良好。然而,PMX半衰期较短,静脉注射后维持有效药物浓度的时间有限,且该药物本身不具备肺部靶向特性,会导致血液学毒性和肝肾功能障碍等毒副作用。脂质体作为抗癌药物递送系统成为该领域研究的热点,它具有如下优势:(1)在体内可降解,生物相容性良好;(2)可增长药物滞留时间,具有缓释性;(3)具有EPR效应,提高药物在肿瘤部位的聚集;(4)可包封脂溶性和水溶性药物,提高药物生物利用度;(5)表面可被靶向因子修饰,提高靶向效率。阳离子脂质体除了具备上述特点外,还可以增加粘附性,防止纤毛运动与巨噬细胞吞噬,另外还可以利用正负电荷吸引主动靶向到肺部,具有肺靶向特性。为降低不良反应,提高其在肺部的聚集浓度,延长PMX作用时间,本课题以蛋黄卵磷脂和胆固醇为脂质膜材,以硬脂胺(Stearylamine,SA)为调节电荷的阳性成分,采用薄膜分散法制备了培美曲塞二钠阳离子脂质体(SA-PMX-Lips),并进行了体内外的研究。主要内容包括:培美曲塞二钠普通脂质体(PMX-Lips)的制备及表征、培美曲塞二钠阳离子脂质体的制备及表征、体外释放及初步安全性评价、药物动力学以及组织分布研究。1.PMX-Lips的制备及表征采用紫外分光光度法(UV)测定PMX含量,方法学研究显示该方法符合测定要求。采用薄膜分散法制备PMX-Lips,以粒径和包封率为评价指标,采用单因素筛选,筛选出了最优的处方及工艺。然后通过重现性试验,验证最佳处方和工艺的可行性,结果表明,最优处方及工艺稳定性和重现性良好。所制备的脂质体PMX-Lips的平均粒径为(180.4±2.4)nm,电位为(-5.17±0.29)mV,包封率为(58.29±1.24)%,载药量为(7.37±0.36)%,pH值为(6.69±0.17)。透射电子显微镜观察到PMX-Lips呈球形或类球形,分布均匀,无黏连。2.SA-PMX-Lips的制备及表征用SA修饰PMX-Lips,在PMX-Lips的制备处方及工艺的基础上,制备SA-PMX-Lips。以粒径、电位和包封率为筛选指标,确定了最优的SA用量,重现性试验表明该处方工艺稳定可靠。所制备的SA-PMX-Lips呈球形或类球形,分布均匀,无黏连。SA-PMX-Lips平均粒径为(219.7±4.97)nm,电位为(22.2±0.52)mV,包封率为(92.39±1.94)%,载药量为(9.15±0.07)%,PMX-Lips的pH值为(8.65±0.07),能够满足静脉注射要求。3.体外释放及初步安全性评价采用UV检测PMX在释放介质中的含量,方法学验证表明该方法适于测定。采用动态膜透析法进行体外释放实验,在不同时间点测定PMX溶液(PMX-Sol)、PMX-Lips和SA-PMX-Lips的累积释放百分率,绘制释放曲线,然后对叁组制剂药物体外释放情况进行数学模型的拟合。体外释放结果表明,与PMX-Sol相比,PMX-Lips和SA-PMX-Lips释放相对缓慢。PMX-Sol组6小时释放完全,累积释放百分率达到(97.59±1.00)%,PMX-Lips组和SA-PMX-Lips组48小时仅释放78%左右。叁种制剂的体外释放过程均符合Weibull方程。然后对PMX-Lips和SA-PMX-Lips进行了初步安全性评价,通过观察病理组织切片发现,PMX-Lips组和SA-PMX-Lips组的各组织病理切片与生理盐水组相比无明显变化,表明PMX-Lips和SA-PMX-Lips对各组织器官无损伤,初步判定安全性良好。4.药物动力学以及组织分布研究采用高效液相色谱法(HPLC)测定PMX在体内的含量,方法学验证表明该方法符合生物样品的测定要求。以昆明小鼠为动物模型,以PMX-Sol为对照,尾静脉注射PMX-Lips和SA-PMX-Lips,给药后分别于设定时间点每组处死3只小鼠,取血浆、心、肝、脾、肺、肾,测定其中的药物含量。药物动力学结果表明,PMX-Lips组和SA-PMX-Lips组在各个时间点的血药浓度始终高于PMX-Sol组。将PMX包封在脂质体内后,PMX-Lips组和SA-PMX-Lips组的平均滞留时间(MRT)比PMX-Sol组分别增加了 2.29倍和5.14倍,表明将PMX制备成为脂质体后,延长了作用时间。另外PMX-Lips组和SA-PMX-Lips组的药时曲线下面积(AUC)分别是PMX-Sol组的1.71倍和2.91倍,表明将PMX制备成为脂质体后可以提高生物利用度,增强治疗效果,且SA-PMX-Lips的效果优于PMX-Lips(SA-PMX-Lips的生物利用度是PMX-Lips的1.70倍)。组织分布实验结果表明,脂质体的包裹改变了药物的组织分布状况,提高了在脾中的分布,降低了在心脏和肾脏的分布。另外SA-PMX-Lips组在肺中的浓度始终高于PMX-Sol组和PMX-Lips组,SA-PMX-Lips组在肺中的AUC是PMX-Sol的2.47倍,是PMX-Lips的1.94倍,表明脂质体经硬脂胺修饰后可显着增加肺部的靶向效率,对于提高PMX治疗非小细胞肺癌的效果具有重要意义。综上,本课题成功制备了 SA-PMX-Lips,并系统地进行了体内外的评价,研究结果表明所制备的制剂符合实验预期,希望能为PMX的有效递送和NSCLC的治疗提供新的思路。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-20）
邹瑞,彭正松[5]（2019）在《阳离子脂质体递送STAT3 siRNA抑制黑色素肿瘤细胞探究》一文中研究指出利用阳离子脂质体作为载体,用其搭载鱼精蛋白与STAT3 siRNA复合物,通过一系列实验证实该复合体系可显着抑制STAT3基因在黑色素瘤细胞B16中的表达,促进肿瘤细胞的凋亡。首先对载体材料进行了一系列表征测定,检测了不同复合比例下载体和siRNA复合物的粒径和电位。利用载体和siRNA的复合物对B16细胞进行转染并测定转染效率,随后对复合材料的毒性进行了检测。此外还进行了细胞凋亡、平板克隆、荧光定量PCR以及Western Blot等一系列实验来进一步确定载体复合物的有效性。实验结果表明,阳离子脂质体搭载复合了鱼精蛋白的STAT3siRNA表现出了良好的靶向治疗性及优秀的递送效率,且复合体系稳定性良好,毒性低。(本文来源于《西昌学院学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
肖瑶[6]（2019）在《WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体构建及对脑胶质瘤作用评价》一文中研究指出目的:脑胶质瘤一种高度侵袭性的脑肿瘤,对化疗具有较强的抵抗力且复发率高。血脑屏障的阻碍和严重的副作用,使化疗药物的应用受到限制。脂质体已被证明是一种稳定有效的肿瘤药物传递系统。本课题成功构建了WGA(麦胚凝集素)修饰的异长春花碱阳离子脂质体,并研究该脂质体跨过血脑屏障、靶向于脑胶质肿瘤细胞以及抑制胶质瘤细胞转移的作用。材料与方法:星点设计-效应面法筛选脂质体最佳处方,选取对脂质体影响较为显着的3个因素作为考察对象,包封率的结果作为考察指标;葡聚糖凝胶柱分离脂质体已包封的与未包封的药物从而测定脂质体包封率,进而考察脂质体的稳定性;对脂质体的理化性质进行考察:包括透射电镜及原子力扫描探针显微镜测定脂质体的形态,马尔文激光粒度仪测定脂质体的粒径及Zeta电位;通过两种不同透析介质考察脂质体的体外释放率。并以脑胶质瘤细胞C6为研究对象,通过体外细胞模型以及荷瘤小鼠模型,对WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体展开研究。结果:1.通过中心星点设计-效应面法,确定了脂质体的最优处方,依据优选出的最佳处方量来制备WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体,包封率测定结果显示异长春花碱的平均包封率能达到90%以上。2.脂质体的理化表征结果显示,该靶向脂质体具有均一的粒度和圆整的外形,平均粒径为100 nm左右;异长春花碱的包封率均在90%以上;在体外释放介质中48 h内异长春花碱释放度均小于15%。3.WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体可显着抑制脑胶质瘤细胞存活率和诱导细胞凋亡效应,同时显着提高了抗癌药物的靶向性从而增加脑胶质瘤细胞对药物的摄取。4.利用C6细胞建立了体外脑胶质瘤转移模型,发现WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体可显着抑制脑胶质瘤细胞拟态血管形成、肿瘤细胞的迁移以及脑胶质瘤细胞与细胞外基质的粘附从而抑制肿瘤细胞转移;作用机制与抑制肿瘤转移相关蛋白MMP-9、MMP-2、FAK和PI3K的表达有关。5.建立了小鼠的脑胶质瘤动物模型,并发现该WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体可以有效蓄积于脑肿瘤区域;WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体可以显着延长荷瘤小鼠的生存时间,较好的抑制小鼠肿瘤体积增长,且治疗期间具有较好的安全性。结论:本研究构建并表征了一种WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体,并针对脑胶质瘤进行了治疗效应与机制的研究。构建脂质体具有良好理化性质,同时可以显着提高肿瘤细胞对药物的摄取程度。脂质体通过下调肿瘤转移相关蛋白MMP-2、MMP-9、FAK和PI3K来起到抑制肿瘤转移作用。在荷瘤小鼠体内,靶向脂质体可通过EPR效应和受体介导作用提高肿瘤部位的药物蓄积,从而取得明显的肿瘤治疗效果,且该脂质体显着地延长了荷瘤小鼠的生存时间。本研究为脑胶质瘤治疗提供了一种有效的治疗策略,有着重要的科学意义和潜在的临床应用价值。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2019-03-01）
韩飞,沈松,戚雪勇,戈延茹[7]（2019）在《磁性阳离子脂质体的构建及在内毒素清除中的应用》一文中研究指出目的:构建具有Fe_3O_4内核的磁性阳离子脂质体Fe_3O_4-CLs,考察其对内毒素分子(脂多糖LPS)的体外吸附作用,验证其对LPS诱导细胞损伤的保护作用以及内毒素血症小鼠的治疗效果。方法:采用水热法制备Fe_3O_4纳米粒子,通过薄膜分散法制备阳离子脂质体,并在水化过程中包裹Fe_3O_4纳米粒子,最终采用机械挤出法制备Fe_3O_4-CLs纳米载体,并对其形态、粒径及表面性质进行表征;采用鲎试剂法检测Fe_3O_4-CLs对LPS的体外吸附作用,然后探究Fe_3O_4-CLs对LPS诱导的细胞凋亡或细胞内活性氧(ROS)升高的抑制作用,最终构建内毒素血症小鼠模型,研究Fe_3O_4-CLs对内毒素处理的小鼠的体内治疗效果。结果:所构建的Fe_3O_4-CLs纳米载体大小均一,呈核壳型结构,粒径为150 nm。体外吸附实验表明Fe_3O_4-CLs纳米粒子对LPS的吸附率达到63%,能明显降低LPS诱导的细胞死亡率,下调细胞内ROS水平;小鼠实验结果显示Fe_3O_4-CLs能显着降低内毒素血症小鼠血清炎症因子白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,抑制肝、肺组织损伤,可明显抑制LPS所致体温持续下降,最终降低内毒素血症小鼠死亡率,其存活率为75%。结论:以上结果表明,Fe_3O_4-CLs可吸附清除体内外LPS,对内毒素血症小鼠有明显的治疗效果,为体内毒素的直接清除和进一步载药治疗的联合应用做出了初步探索。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2019年03期）
张园,展佳愔,孟柯,孙勇,邢影[8]（2019）在《阳离子脂质体与基因治疗》一文中研究指出阳离子脂质体作为一种非病毒载体,以其制备简单、低毒性、低免疫原性、可生物降解等优点,成为近年来基因治疗中的常用载体,具有良好的应用前景。本文从阳离子脂质体的结构、转移机制着手,对其在基因治疗方面的应用以及尚存在的问题作一综述。(本文来源于《神经损伤与功能重建》期刊2019年01期）
王利媛,林华庆,陈靖文,李浩贤[9]（2018）在《介导基因传递的新型阳离子脂质体的研究》一文中研究指出目的:为加强对新型阳离子脂质体的开发与应用提供参考。方法:以"基因传递""新型阳离子脂质体""阳离子脂质材料""表面修饰""Gene transfer""New cationic liposomes""Cationic lipid material""Surface finish"等为关键词,组合查询2005年1月-2018年3月在中国知网、万方数据、维普网、Pub Med、Science Direct等数据库中相关文献,对介导基因传递的新型阳离子脂质体进行论述。结果与结论:共检索到相关文献429篇,其中有效文献36篇。目前新型阳离子脂质体主要通过采用新型阳离子脂质材料、进行表面修饰和改进制备方法研制得到。近年来主要包括以酒石酸为骨架合成、基于胆固醇和其他新型阳离子脂质材料如寡肽制备的新型阳离子脂质材料。阳离子脂质体结构表面易于修饰,其靶向特异性差导致基因传递率低,因此可使用不同物质如非表面活性剂及聚乙二醇等多聚阳离子和其他物质如聚乙二醇进行表面修饰以提高基因传递率,也可通过对特定部位的抗体和蛋白等偶联进行表面修饰,从而提高靶向传递基因率;且经表面修饰后的阳离子脂质体还可解决对特定部位靶向特异性差的问题。目前阳离子脂质体改进的制备方法包括改进的乙醇注入法、高压均质法、薄膜-冻融法、二氧化碳超临界法、真空干燥-超声法、薄膜-挤出法、薄膜-冻干法和小单室脂质体融合法等,可制备不同粒径阳离子脂质体并应用于工业化生产。目前新型阳离子脂质体制备趋向于多种技术联合,因此如何通过更深入的研究阳离子脂质体基因传递机制和临床治疗要求等方面从而合成新型阳离子脂质体以及怎样进一步用于临床是今后的重点方向。(本文来源于《中国药房》期刊2018年15期）
叶晓莉,王丛瑶,张玲娣,张超,王水霞[10]（2018）在《冰片修饰的丹参酮ⅡA阳离子脂质体的制备及其特性》一文中研究指出目的制备冰片(BO)修饰的丹参酮ⅡA(TA)阳离子脂质体(TA-BCLPs),并考察其理化性质、体外释药特性。方法采用乙醇注入法制备阳离子脂质体,通过正交设计,以粒径、包封率和载药量为评价指标优化处方工艺。结果制备TABCLPs的优化条件:药脂比为1∶10,胆固醇与磷脂的比为1∶3,磷脂质量浓度为30 g·L-1,高压均质时间90 s。按优化条件所制备的TA-BCLPs粒径为(152. 29±9. 59) nm,Zeta电位为(16. 50±0. 93) mV,包封率为(88. 49±1. 09)%,载药量为(4. 12±0. 13)%,药物释放曲线符合Weibull方程模型,BCLPs对人脑微毛细血管内皮细胞无明显的毒性作用。结论采用乙醇注入法成功制备了TA-BCLPs,为TA新剂型的研究开发提供了实验基础。(本文来源于《中国临床药学杂志》期刊2018年04期）
聚阳离子脂质体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:胰腺癌(pancreatic adenocarcinomas)具有临床症状隐匿、易转移和侵袭性强等特点,晚期治疗缺乏有效的手段,致死率高,5年生存率仅为8%。吉西他滨(Gemcitabine,Gem)是胰腺癌治疗的一线化疗药物,它虽然在一定程度上可以改善患者的生存质量,但仍存在单药化疗有效率低于15%等问题。因此,为进一步改善吉西他滨对胰腺癌的治疗效果,迫切需要研究新的治疗策略。近年来,髓细胞白血病-1(Myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)的过度表达已在胰腺癌等多种肿瘤中被证实,更与恶性肿瘤的发生发展密切相关。降低Mcl-1表达水平不仅可以直接促进肿瘤细胞发生凋亡,还可以显着提高肿瘤细胞的化疗敏感性。因此,靶向干预Mcl-1可以大大提高患者的术后生存率。相对于现有Mcl-1的小分子抑制剂药物,小干扰RNA(Small interfering RNA,si RNA)技术因其特异性高和副作用小等特点在基因沉默和药物开发中被广泛关注。然而,si RNA存在透膜能力弱和易降解等缺点。因此,有必要找到一种可靠的载体,用于将si RNA有效地递送至细胞内部,发挥基因沉默作用。目前,已经开发出各种类型的si RNA递送系统,主要分为两类:病毒载体和非病毒载体。虽然病毒载体具有较高的转染效率,但是其存在特异性差、封装能力有限以及生物安全性等问题,限制了其在临床上的应用。而非病毒载体因其具有负载量大、可修饰性强、细胞毒性低和便于保存等优势成为了一种新兴的载体。其中,阳离子脂质体由于其制备简单、可重复转染和易降解等特点而被认为具有潜在的临床应用前景。1,2-二油酰氧丙基-N,N,N-叁甲基溴化铵(1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane,DOTAP)是最广泛使用的阳离子脂质体,它的价格相对便宜,并且在体外和体内应用中都具有良好的效果。目的:本研究中,我们利用DOTAP、胆固醇和鱼精蛋白构建了一种基于阳离子脂质体的基因递送系统(LPs)。DOTAP可通过带正电荷的阳离子头部与带负电荷的si RNA相互结合,将si RNA包封于脂质双分子层中,保护si RNA免受核酸酶降解并促使其顺利释放到细胞质中。胆固醇作为常见的辅助脂类,能够起到稳定脂质双分子层,降低阳离子脂质体毒性的作用。鱼精蛋白可以通过静电相互作用与si RNA结合,本身即可作为一种载体,通过与脂质基因载体配合使用,能够增强脂质基因载体的转染效率。另外,该递送载体还可以同时包载化疗药物。因此,我们利用合成的纳米载体共同递送Gem和Mcl-1 si RNA,形成LP-Gem-si Mcl-1,通过一系列体外和体内实验评价靶向Mcl-1干预对胰腺癌的作用以及Gem和Mcl-1 si RNA的协同抗肿瘤效应。方法:(1)我们利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和免疫印迹(western blot)技术确定了Mcl-1在胰腺癌中的表达情况,并检测了下调Mcl-1表达对Gem化疗敏感性的影响。(2)利用DOTAP、胆固醇和鱼精蛋白制备成纳米载体,包载Gem和Mcl-1si RNA,并对其表征进行检测。通过动态光散射(Dynamic light scattering,DLS)及透射电子显微镜(Transmission electron microscopy,TEM)检测所制备的纳米载体的粒径和电位大小,并观察纳米颗粒的形貌特征;利用超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)和琼脂糖凝胶电泳分别检测了Gem的包载率以及纳米载体对si RNA的吸附能力;共聚焦显微镜和流式细胞仪分析LPs的细胞内摄取以及亚细胞定位;免疫印迹和实时荧光定量PCR检测si RNA对细胞内Mcl-1的干扰效率。(3)在体外实验中,我们通过细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞术分别测定LP-Gem-si Mcl-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。(4)在体内实验中,通过建立小鼠的胰腺癌皮下移植瘤模型,绘制肿瘤生长曲线和组织学实验检测LP-Gem-si Mcl-1的体内抗肿瘤效果,并通过主要脏器的组织病理学分析以及血液生化指标的检测对所构建的纳米载体进行生物安全性评价。结果:(1)我们发现相对于正常组织和细胞,Mcl-1在胰腺癌中是过度表达的,与现有文献报道结果一致。通过瞬时转染si RNA下调Mcl-1的表达后,能够有效抑制胰腺癌细胞PANC-1和Bx PC-3的增殖,并且与Gem联合使用时,增强了Gem对胰腺癌细胞的杀伤效果。(2)纳米粒子的形态学表征:观察到制备的纳米粒子的粒径150-200nm左右,球形且呈单层分散状态;UPLC测得Gem的包载率约为19.3%;琼脂糖凝胶实验证实LPs具有较好的核酸吸附能力;共聚焦显微镜和流式细胞仪检测发现,LPs所包载的Gem和si RNA可以高效地被胰腺癌细胞摄取,并且定位在溶酶体中;进一步测得LP-si Mcl-1(LPs包载Mcl-1 si RNA)能够有效地抑制细胞内Mcl-1的表达。(3)体外实验中证实,与其他处理组相比,LP-Gem-si Mcl-1可以有效地抑制胰腺癌细胞增殖,并促进其凋亡的发生,效果明显高于LP-Gem(LPs包载Gem)和LP-si Mcl-1的单载组。(4)体内实验中,观察到LPs所载运的药物可以被动靶向于肿瘤部位,提高肿瘤部位的药物浓度。LP-Gem-si Mcl-1对肿瘤生长的抑制作用显着高于其他处理组,细胞增殖标志物Ki-67的表达也明显受到了抑制,证实了Gem和Mcl-1si RNA的协同抗肿瘤效应,并且LPs纳米材料无明显毒副作用。结论:综上所述,我们利用基于阳离子脂质体的药物和基因共递送系统成功地将Gem和Mcl-1 si RNA共同递送到胰腺癌细胞中,并证实了降低Mcl-1表达可以增强Gem对胰腺癌细胞的杀伤效果,二者具有协同抗肿瘤的作用。通过该研究,我们明确了靶向Mcl-1干预在胰腺癌治疗中的潜在价值,并利用阳离子脂质体递送系统验证了si RNA和化学治疗药物联合治疗胰腺癌的可行性,为胰腺癌的治疗新策略提供了理论依据和实验室基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
聚阳离子脂质体论文参考文献
[1].吴梅梅,李瀚旻,常明向.甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对肿瘤Walker256细胞的影响[J].中国医院药学杂志.2019
[2].王艳冰.阳离子脂质体联合转运吉西他滨和Mcl-1siRNA在胰腺癌干预中的作用研究[D].吉林大学.2019
[3].何芳丽,程健琳,李俐娟,李亚林,苏泽红.氨基酸类阳离子脂质体在基因转染中的应用[J].化工设计通讯.2019
[4].刘晶晶.培美曲塞二钠阳离子脂质体的制备及体内外评价[D].山东大学.2019
[5].邹瑞,彭正松.阳离子脂质体递送STAT3siRNA抑制黑色素肿瘤细胞探究[J].西昌学院学报(自然科学版).2019
[6].肖瑶.WGA修饰异长春花碱阳离子脂质体构建及对脑胶质瘤作用评价[D].辽宁中医药大学.2019
[7].韩飞,沈松,戚雪勇,戈延茹.磁性阳离子脂质体的构建及在内毒素清除中的应用[J].中国新药杂志.2019
[8].张园,展佳愔,孟柯,孙勇,邢影.阳离子脂质体与基因治疗[J].神经损伤与功能重建.2019
[9].王利媛,林华庆,陈靖文,李浩贤.介导基因传递的新型阳离子脂质体的研究[J].中国药房.2018
[10].叶晓莉,王丛瑶,张玲娣,张超,王水霞.冰片修饰的丹参酮ⅡA阳离子脂质体的制备及其特性[J].中国临床药学杂志.2018
标签：姜黄素; 甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体; Walker256细胞; 抗肿瘤作用;