炭疽新疫苗论文-卢锦标

炭疽新疫苗论文-卢锦标

导读:本文包含了炭疽新疫苗论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:炭疽杆菌,保护性抗原,疏水层析,一步纯化

炭疽新疫苗论文文献综述

卢锦标[1](2010)在《炭疽新疫苗研究》一文中研究指出炭疽是一种古老的疾病,它的致病菌,炭疽芽孢杆菌也是细菌学中发现最早的病原菌之一。炭疽杆菌是革兰氏阳性杆状菌,生命周期中能形成孢子。炭疽杆菌的主要毒力因子是一个叁组分的毒素,包括叁种蛋白:保护性抗原PA,致死因子LF,水肿因子EF。叁个蛋白由毒力质粒pXO1编码,单独存在时没有毒性。叁个蛋白两两结合后可形成两种炭疽毒素,即致死毒素(PA+LF)和水肿毒素(PA+EF)。几乎所有的真核细胞表面都有PA的受体,因此,一旦进入体内,PA就可结合在细胞表面受体,然后在类furin蛋白酶的作用下,在PA保守序列164RKKR167处水解成一个氨基端片段PA20(分子量20kDa)和一个羧基端片段PA63(分子量63kDa)。PA20游离出去,PA63可自我组装成一个环状的七聚体,插入细胞膜形成一个孔道。然后,EF和/或LF与PA63七聚体结合,被转运到胞内,发挥细胞毒效应。叁种蛋白(EF, LF和PA)中,只有PA诱导的抗体具有保护性,因此PA也是炭疽疫苗的一个主要免疫原,PA的制备早期从炭疽杆菌培养物中获取,安全性难以保证。现在的主流是从大肠杆菌中制备重组PA。在我们的研究中,使用一种新的表达系统,大肠杆菌株Rosetta 2(DE3),高效表达重组PA蛋白,克服了PA基因含有66个大肠杆菌稀少密码子(占PA基因共773个密码子的9.0%)而带来的低表达问题,无需重新优化密码子合成PA基因。rPA在Rosetta 2(DE3)表达后,形成的包涵体经过Triton X-100和2M尿素洗涤,5M尿素溶解,透析,以及60%硫酸铵沉淀,最终在AKTA Purifier 10,使用Phenyl Sepharose High Performance介质,一步疏水层析纯化到无标签的重组PA。SDS-PAGE分析纯度大于99%。得率为每升培养物约13 mg。该rPA具有和天然PA相同的生物活性,体外可与rLF结合,杀伤巨噬细胞。在以rPA作为组分的炭疽疫苗中,用不同处理方式的芽孢或者菌体与之配伍,肌内免疫BALB/c小鼠,初步研究了不同组分疫苗的药理学机制。实验结果表明:(1)未匀浆芽孢,即甲醛灭活芽孢,免疫后的IgG效价,脾淋巴细胞增殖的刺激指数和ELISPOT阳转率均要优于高压芽孢和Co60芽孢;(2)rPA+铝佐剂免疫小鼠后,诱导B细胞分泌rPA抗体到血液中发挥功能,但不能促进T细胞增殖和分泌IFN-γ。这说明rPA°单组分主要发挥的是体液免疫而不是细胞免疫,通过血清中的高滴度rPA抗体中和毒素起到保护作用;(3)不同处理方式的芽孢或者菌体与rPA联合免疫后,芽孢或者菌体的体液免疫和细胞免疫都很强烈,都可促进rPA的细胞免疫功能,产生rPA抗原特异性T淋巴细胞,但rPA抗体水平还不太稳定;(4)小鼠腹腔攻毒炭疽弱毒株A16R的试验中,含有rPA组分的疫苗都能产生保护力。单纯的芽孢组分也能对小鼠产生保护作用,无需rPA的参与,单纯的菌体保护力很弱,对两倍最少致死量的腹腔攻毒剂量没有保护力。这表明,芽孢中的某些抗原成分参与了炭疽免疫保护,提高了疫苗的保护效率。而菌体,虽然与芽孢有交叉抗原,但这种交叉抗原和菌体特异性的抗原都不能提供很好的保护力。因此,rPA配伍芽孢作为目前较为理想的疫苗组分,为我们提供了一种炭疽新疫苗研究的可行思路。(本文来源于《武汉大学》期刊2010-05-01)

毛磊[2](2002)在《美研制炭疽新疫苗》一文中研究指出新华社华盛顿电(毛磊)美国卫生与公众服务部已与美、英两家私营公司正式签署合同,决定开发新一代炭疽疫苗。由于采用了基因工程技术,新疫苗接种所需的注射剂量和副作用都有望比现有疫苗更小。(本文来源于《新华每日电讯》期刊2002-10-15)

东辰[3](2002)在《美专家预测炭疽菌新疫苗五到十年可问世》一文中研究指出一名美国生化武器专家近日说,美国政府正在研究新一代预防炭疽菌疫苗,估计可在五到十年内(本文来源于《中国高新技术产业导报》期刊2002-03-20)

炭疽新疫苗论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

新华社华盛顿电(毛磊)美国卫生与公众服务部已与美、英两家私营公司正式签署合同,决定开发新一代炭疽疫苗。由于采用了基因工程技术,新疫苗接种所需的注射剂量和副作用都有望比现有疫苗更小。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

炭疽新疫苗论文参考文献

[1].卢锦标.炭疽新疫苗研究[D].武汉大学.2010

[2].毛磊.美研制炭疽新疫苗[N].新华每日电讯.2002

[3].东辰.美专家预测炭疽菌新疫苗五到十年可问世[N].中国高新技术产业导报.2002

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