导读:本文包含了定向多样性合成论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:β-D-葡萄糖醛酸苷酶,多样性,基因克隆,甘草酸
定向多样性合成论文文献综述
王小艳[1]（2007）在《β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化多样性及定向合成GAMG的酶基因克隆与表达》一文中研究指出通过筛选和甘草酸转化结果分析,得到了叁种不同转化类型的真菌,利用分子生物学和形态学方法进行了菌株鉴定,并对其进行了催化特性和催化动力学研究,针对定向合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的Penicillium sp. Li-3进行了β-D-葡萄糖醛酸苷酶的克隆与表达,研究结果如下:叁种不同转化类型的真菌经分子生物学和形态学方法鉴定为Penicillium purpurogenum Li-3、Aspergillus terreus Li-20和Aspergillus ustus Li-62,其转化甘草酸的产物分别是GAMG、GAMG与甘草次酸(GA)和GA。叁株菌所表达的β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化特性研究表明,Penicillium purpurogenum Li-3所产β-D-葡萄糖醛酸苷酶的催化反应最适pH为4.2,最适温度为50℃,培养48h后开始产酶;Aspergillus terreus Li-20所产酶的催化反应最适pH为5.8,最适温度为45℃,培养24 h后开始产酶;而Aspergillus ustus Li-62所产酶的催化反应最适pH为6.2,最适温度为55℃,72h后才开始产酶。催化甘草酸的Km分别为0.328μmol·L-1、3.61 mmol·L-1和0.43 mmol·L-1,催化反应的最大速率Vmax分别为0.0035 mmol·L-1·min-1、0.034 mmol·L-1·min-1和0.106 mmol·L-1·min-1。针对定向合成GAMG的Penicillium purpurogenum Li-3生长过程中存在的碳代谢阻遏现象,研究了该菌β-D-葡萄糖醛酸苷酶的高效诱导表达策略。建立了新的诱导产酶方法为,葡萄糖培养基中以32℃摇床(180rpm)培养,在葡萄糖耗尽时加入20%诱导剂(10g/L GL+1.2% Tween80)进行诱导,且每24h添加一次,诱导72h后转入到40℃摇床(180rpm)培养产酶,以该方法诱导产酶表明在5g/L葡萄糖中富集菌体,进行诱导后,酶活性从产酶基础培养基中的646U/mL提高到2356U/mL。利用PCR方法从Penicillium purpurogenum Li-3基因组DNA中成功克隆到编码β-D-葡萄糖醛酸苷酶的基因Pgus,基因全长1815bp,编码604个氨基酸,分子量为67.6KDa。构建了Pgus的原核表达载体pET-28a(+)-Pgus和真核表达载体pPIC9K-Pgus,分别转化E.coli BL21(DE3)和Pichia pastoris GS115,在E.coli BL21(DE3)中诱导表达后形成无酶活性的包涵体,转化Pichia pastoris GS115后已筛选到具有6~10个高拷贝的H is+ M u ts s型毕赤酵母重组菌。(本文来源于《石河子大学》期刊2007-06-01）
聂爱华,肖军海,李松[2]（2004）在《药物发现中的定向多样性合成》一文中研究指出本文介绍了定向多样性合成的概念、在药物发现中的作用及实现分子复杂性和多样性的方法。(本文来源于《中国药物化学杂志》期刊2004年02期）
定向多样性合成论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文介绍了定向多样性合成的概念、在药物发现中的作用及实现分子复杂性和多样性的方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
定向多样性合成论文参考文献
[1].王小艳.β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化多样性及定向合成GAMG的酶基因克隆与表达[D].石河子大学.2007
[2].聂爱华,肖军海,李松.药物发现中的定向多样性合成[J].中国药物化学杂志.2004
标签：β-D-葡萄糖醛酸苷酶; 多样性; 基因克隆; 甘草酸;