付大伟:融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析论文

付大伟:融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析论文

本文主要研究内容

作者付大伟,孙莹莹,徐伟(2019)在《融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析》一文中研究指出:人核糖核酸酶抑制因子(human ribonuclease inhibitor,hRI)是一种能够调节核糖核酸酶活性的酸性包浆蛋白。通过构建含SUMO、IF2、GST、NusA、MsyB、Trx和MBP融合标签的重组表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌进行自诱导(auto-induction,AI)表达,从而使hRI的表达量得以提升。利用MagNi磁珠纯化及电泳分析hRI的表达状况,通过RNase/Sepharose亲和层析获得纯度较高的蛋白。纯化后获得的融合蛋白浓度为2 960. 513mg/L,与其它公司的hRI活性进行比较,检测其酶活性约为50U/μl,并使其成功用于RNA的保护,为Nus A-hRI的应用提供理论依据。

Abstract

ren he tang he suan mei yi zhi yin zi (human ribonuclease inhibitor,hRI)shi yi chong neng gou diao jie he tang he suan mei huo xing de suan xing bao jiang dan bai 。tong guo gou jian han SUMO、IF2、GST、NusA、MsyB、Trxhe MBProng ge biao qian de chong zu biao da zai ti ,yi da chang gan jun BL21(DE3)zuo wei su zhu jun jin hang zi you dao (auto-induction,AI)biao da ,cong er shi hRIde biao da liang de yi di sheng 。li yong MagNici zhu chun hua ji dian yong fen xi hRIde biao da zhuang kuang ,tong guo RNase/Sepharoseqin he ceng xi huo de chun du jiao gao de dan bai 。chun hua hou huo de de rong ge dan bai nong du wei 2 960. 513mg/L,yu ji ta gong si de hRIhuo xing jin hang bi jiao ,jian ce ji mei huo xing yao wei 50U/μl,bing shi ji cheng gong yong yu RNAde bao hu ,wei Nus A-hRIde ying yong di gong li lun yi ju 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国生物工程杂志的付大伟,孙莹莹,徐伟,发表于刊物中国生物工程杂志2019年03期论文,是一篇关于人核糖核酸酶抑制因子论文,融合标签论文,诱导表达论文,磁珠纯化论文,亲和层析论文,中国生物工程杂志2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国生物工程杂志2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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