陈进会:虾肝肠胞虫LAMP检测技术的建立与应用论文

陈进会:虾肝肠胞虫LAMP检测技术的建立与应用论文

本文主要研究内容

作者陈进会,陈珍容,刘国庆,陈洵,段丽萍,谢会,石磊(2019)在《虾肝肠胞虫LAMP检测技术的建立与应用》一文中研究指出:本试验根据虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)18S的保守序列设计4套环介导等温扩增(LAMP)引物,从中筛选出一套引物对LAMP反应体系(Bst DNA聚合酶浓度、内外引物浓度比、dNTP浓度、Mg2+浓度)和反应条件(温度)进行优化。并对优化后的LAMP反应体系和条件进行特异性、灵敏度及精密度验证。特异性试验表明,该方法能特异性检测虾肝肠胞虫,而与其他病害的核酸没有交叉反应;灵敏度试验表明,可检测浓度为10 fg/μL的质粒DNA,制作的标准曲线可对虾肝肠胞虫进行定量分析。重复性试验结果表明,该方法Ct值的变异系数为2.88%~3.02%,具有良好的稳定性。而对于人工侵染的虾肝肠胞虫样品,LAMP方法可检测低至0.44 pg/μL。应用建立的LAMP方法对3个不同地区的120份凡纳滨对虾样品进行检测,检测结果表明,EHP阳性样品数为43,与qPCR检测结果符合率达97%。本试验所建立的LAMP方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,并能在30 min内完成样品的检测,是快速、定量检测虾肝肠胞虫的有效手段。

Abstract

ben shi yan gen ju ha gan chang bao chong (Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)18Sde bao shou xu lie she ji 4tao huan jie dao deng wen kuo zeng (LAMP)yin wu ,cong zhong shai shua chu yi tao yin wu dui LAMPfan ying ti ji (Bst DNAju ge mei nong du 、nei wai yin wu nong du bi 、dNTPnong du 、Mg2+nong du )he fan ying tiao jian (wen du )jin hang you hua 。bing dui you hua hou de LAMPfan ying ti ji he tiao jian jin hang te yi xing 、ling min du ji jing mi du yan zheng 。te yi xing shi yan biao ming ,gai fang fa neng te yi xing jian ce ha gan chang bao chong ,er yu ji ta bing hai de he suan mei you jiao cha fan ying ;ling min du shi yan biao ming ,ke jian ce nong du wei 10 fg/μLde zhi li DNA,zhi zuo de biao zhun qu xian ke dui ha gan chang bao chong jin hang ding liang fen xi 。chong fu xing shi yan jie guo biao ming ,gai fang fa Ctzhi de bian yi ji shu wei 2.88%~3.02%,ju you liang hao de wen ding xing 。er dui yu ren gong qin ran de ha gan chang bao chong yang pin ,LAMPfang fa ke jian ce di zhi 0.44 pg/μL。ying yong jian li de LAMPfang fa dui 3ge bu tong de ou de 120fen fan na bin dui ha yang pin jin hang jian ce ,jian ce jie guo biao ming ,EHPyang xing yang pin shu wei 43,yu qPCRjian ce jie guo fu ge lv da 97%。ben shi yan suo jian li de LAMPfang fa ju you te yi xing hao 、ling min du gao 、chong fu xing hao de te dian ,bing neng zai 30 minnei wan cheng yang pin de jian ce ,shi kuai su 、ding liang jian ce ha gan chang bao chong de you xiao shou duan 。

论文参考文献

  • [1].3种虾肝肠胞虫PCR检测方法的应用比较分析[J]. 叶键,许婷,施礼科,陈凡,王力,陈喆,章秋虎,郭水荣.  水产科学.2019(03)
  • [2].凡纳滨对虾感染虾肝肠胞虫的群体及组织间差异性分析[J]. 程东远,邱亮,宋增磊,万晓媛,董宣,谢国驷,黄倢.  渔业科学进展.2018(04)
  • [3].抗逆快长凡纳滨对虾设计育种与新品种培育技术[J]. 李活,胡超群,刘锦上,任春华,李育仁.  科学养鱼.2019(10)
  • [4].脂钙粉替代豆油鱼油对凡纳滨对虾生长及免疫指标的影响[J]. 曾洪雨,贾高旺.  河北渔业.2019(10)
  • [5].见证凡纳滨对虾良种的诞生和崛起[J]. 廖静.  海洋与渔业.2019(12)
  • [6].凡纳滨对虾“正金阳1号”[J].   海洋与渔业.2018(09)
  • [7].凡纳滨对虾“海兴农2号”引进养殖试验[J]. 郝俊,任涵玮,蔡琰,徐晓丽,丁子元,王彦怀,徐林通.  科学养鱼.2019(06)
  • [8].凡纳滨对虾“正金阳1号”[J].   海洋与渔业.2019(09)
  • [9].凡纳滨对虾肝肠胞虫病的概述[J]. 张铁,邢泽宇,梁艳,曹英昆,高广,王森琪.  科学养鱼.2018(07)
  • [10].天津滨海新区凡纳滨对虾养殖池塘水质变化特征[J]. 郝俊,张振奎,邵蓬,丁子元,蔡琰.  科学养鱼.2017(04)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国兽医杂志的陈进会,陈珍容,刘国庆,陈洵,段丽萍,谢会,石磊,发表于刊物中国兽医杂志2019年07期论文,是一篇关于虾肝肠胞虫论文,环介导等温扩增论文,中国兽医杂志2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国兽医杂志2019年07期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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