朱怀娇:Ag(Ⅲ)化学发光法检测吗啡及儿茶酚胺类神经递质论文

朱怀娇:Ag(Ⅲ)化学发光法检测吗啡及儿茶酚胺类神经递质论文

本文主要研究内容

作者朱怀娇(2019)在《Ag(Ⅲ)化学发光法检测吗啡及儿茶酚胺类神经递质》一文中研究指出:毛细管电泳(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术,具有分离速度快、分离效率高、分析成本低、试剂用量少、环境友好等特点,实现了分析分离技术从微升级进入到了纳升级水平,并使得单细胞分析和单分子分析成为了可能,为分离和分析蛋白质等生物大分子提供了新的途径。化学发光(CL)是化学反应过程中伴有的一种光辐射现象。基于化学发光体系中待测物浓度与化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,该方法可用于分析能够直接产生化学发光或影响化学发光信号的物质。化学发光法由于不需要激发光和外加光源,因此避免了瑞利散射和拉曼散射等噪音的影响,是一种高灵敏和简便的痕量分析方法。将毛细管电泳技术与化学发光法检测联用可结合二者的优势,在物质分离分析方面具有很大的应用前景,是一种非常理想的检测手段。近年来,两种技术的联用已在医药检测、临床检测、环境检测、法医毒物检测以及微量物证分析等多个领域有广泛应用。Ag(Ⅲ)配合物[Ag(HIO6)2]5--鲁米诺是一种新型的化学发光体系,在碱性介质中,二者发生氧化还原反应,产生化学发光信号。某些物质对该化学发光信号可产生增强或抑制作用,并且在一定物质浓度范围内,对化学发光信号的增强或抑制作用与物质浓度呈现良好线性关系。根据这一原理,本研究将Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光新体系与毛细管电泳分离技术联用,建立了毛细管电泳-化学发光法检测尿液与血液中吗啡含量和毛细管电泳-化学发光法同时检测尿液中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、3-甲氧基-4-羟基-苯乙二醇(MHPG)、3-甲氧基-4-羟基-苦杏仁酸(香草扁桃酸,VMA)、3-甲氧基-4-羟基乙酸(高香草酸,HVA)的新方法。新方法操作简单、分离效率高、分析时间短、试剂消耗少、对环境友好。第一部分毛细管电泳-化学发光法检测尿液与血液中吗啡含量目的:将Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光新体系与毛细管电泳分离技术联用,建立毛细管电泳-化学发光法检测尿液与血液中吗啡含量的新方法,并成功应用于尿液和血液中吗啡的定性与定量分析。方法:对实验条件进行优化,最佳实验条件为:Ag(Ⅲ)配合物浓度为7.0×10-55 mol/L(其中Ag(Ⅲ)配合物中NaOH浓度为0.04 mol/L、Na2CO3浓度为0.008 mol/L)、鲁米诺浓度2 mmol/L、硼砂浓度5 mmol/L、分离电压15 kV、进样时间12s。采用HLB(200 mg,6cc)固相萃取小柱对尿样和血样进行净化和浓缩,氮气吹干后复溶,在优化的条件下对样品进行检测。在高压直流电场作用下,吗啡与生物样品中其它物质在毛细管中实现分离,到达检测窗口后,与Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光体系作用,影响体系的氧化还原反应,从而影响化学发光信号的大小。基于碱性介质中,吗啡对该反应的化学发光信号起抑制作用,且在一定浓度范围内,抑制作用与吗啡浓度呈现良好线性关系,据此建立标准曲线,测出吗啡含量。结果:最佳检测条件下,方法检出限为0.75μg/mL,在吗啡浓度为230μg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程为ΔI=3.8265c+14.14(R2=0.9998)。取20μg/mL吗啡进行7次平行实验,测得相对标准偏差(RSD)为2.01%。尿液和血液中样品平均加标回收率分别为109.03%和101.28%。结论:建立了毛细管电泳-化学发光法检测尿液与血液中吗啡含量的新方法,并成功用于尿样与血样中吗啡含量的检测。该方法操作简便、分离效果好、样品消耗量少、分析成本低廉、对环境友好,结果令人满意。第二部分毛细管电泳-化学发光法同时检测尿液中肾上腺素、去甲肾上腺素及其代谢产物含量目的:将Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光新体系与毛细管电泳分离技术联用,建立毛细管电泳-Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光法同时检测尿液中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、3-甲氧基-4-羟基-苯乙二醇(MHPG)、3-甲氧基-4-羟基-苦杏仁酸(香草扁桃酸,VMA)、3-甲氧基-4-羟基乙酸(高香草酸,HVA)的新方法,并成功应用于尿液中E、NE、MHPG、VMA和HVA五种物质含量的同时测定。方法:尿样经强酸性阳离子交换树脂和超高速低温离心处理后,经0.22μm滤膜过滤后直接进样检测。在优化的实验条件,即Ag(Ⅲ)配合物浓度为2.0×10-4 mol/L、NaOH浓度为0.05 mol/L、Na2CO3浓度为0.04mol/L、鲁米诺浓度为3 mmol/L、硼砂浓度为5 mmol/L、胆酸钠浓度为3mmol/L、分离电压为15 kV、进样时间为15 s,对样品进行分离检测。五种分析物经毛细管电泳分离后,与Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光体系作用,均能影响发光体系的发光信号。其中,肾上腺素对化学发光起增强作用,去甲肾上腺素、3-甲氧基-4-羟基-苯乙二醇、香草扁桃酸、高香草酸均对化学发光起抑制作用。且在一定物质浓度范围内,增强或抑制作用与物质浓度呈现良好线性关系,据此建立各物质标准曲线,测出各待测物质含量。结果:在优化的检测条件下,肾上腺素、去甲肾上腺素、3-甲氧基-4-羟基-苯乙二醇、香草扁桃酸、高香草酸的线性方程分别为:ΔI=5.8429c+10.833,R2=0.9983;ΔI=5.8534c+52.882;R2=0.9984;ΔI=13.234c+84.315,R2=0.9986;ΔI=2.3409c+19.318,R2=0.9999;ΔI=9.9333c+9.906,R2=0.9994。线性范围分别为:212μg/mL、230μg/mL、220μg/mL、260μg/mL、220μg/mL。对样品进行平行进样7次,得到相对标准偏差分别为:4.50%、4.97%、3.23%、3.36%、3.07%。肾上腺素、去甲肾上腺素、高香草酸三种物质的检出限均为0.50μg/mL、3-甲氧基-4-羟基-苯乙二醇检出限为0.10μg/mL、香草扁桃酸检出限为0.75μg/mL;五种待测物质的平均加标回收率分别为103.96%、101.76%、100.65%、106.48%、102.87%。结论:建立了毛细管电泳-Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光法同时检测尿液中肾上腺素、去甲肾上腺素、3-甲氧基-4-羟基-苯乙二醇、香草扁桃酸、高香草酸的新方法。同时对样品前处理条件进行考察,简化了样品前处理过程。新方法简便灵敏、分析成本低、样品消耗少,结果令人满意。

Abstract

mao xi guan dian yong (CE)shi yi mao xi guan wei fen li tong dao ,yi gao ya zhi liu dian chang wei qu dong li de xin xing ye xiang fen li ji shu ,ju you fen li su du kuai 、fen li xiao lv gao 、fen xi cheng ben di 、shi ji yong liang shao 、huan jing you hao deng te dian ,shi xian le fen xi fen li ji shu cong wei sheng ji jin ru dao le na sheng ji shui ping ,bing shi de chan xi bao fen xi he chan fen zi fen xi cheng wei le ke neng ,wei fen li he fen xi dan bai zhi deng sheng wu da fen zi di gong le xin de tu jing 。hua xue fa guang (CL)shi hua xue fan ying guo cheng zhong ban you de yi chong guang fu she xian xiang 。ji yu hua xue fa guang ti ji zhong dai ce wu nong du yu hua xue fa guang jiang du zai yi ding tiao jian xia cheng xian xing ding liang guan ji de yuan li ,gai fang fa ke yong yu fen xi neng gou zhi jie chan sheng hua xue fa guang huo ying xiang hua xue fa guang xin hao de wu zhi 。hua xue fa guang fa you yu bu xu yao ji fa guang he wai jia guang yuan ,yin ci bi mian le rui li san she he la man san she deng zao yin de ying xiang ,shi yi chong gao ling min he jian bian de hen liang fen xi fang fa 。jiang mao xi guan dian yong ji shu yu hua xue fa guang fa jian ce lian yong ke jie ge er zhe de you shi ,zai wu zhi fen li fen xi fang mian ju you hen da de ying yong qian jing ,shi yi chong fei chang li xiang de jian ce shou duan 。jin nian lai ,liang chong ji shu de lian yong yi zai yi yao jian ce 、lin chuang jian ce 、huan jing jian ce 、fa yi du wu jian ce yi ji wei liang wu zheng fen xi deng duo ge ling yu you an fan ying yong 。Ag(Ⅲ)pei ge wu [Ag(HIO6)2]5--lu mi nuo shi yi chong xin xing de hua xue fa guang ti ji ,zai jian xing jie zhi zhong ,er zhe fa sheng yang hua hai yuan fan ying ,chan sheng hua xue fa guang xin hao 。mou xie wu zhi dui gai hua xue fa guang xin hao ke chan sheng zeng jiang huo yi zhi zuo yong ,bing ju zai yi ding wu zhi nong du fan wei nei ,dui hua xue fa guang xin hao de zeng jiang huo yi zhi zuo yong yu wu zhi nong du cheng xian liang hao xian xing guan ji 。gen ju zhe yi yuan li ,ben yan jiu jiang Ag(Ⅲ)pei ge wu -lu mi nuo hua xue fa guang xin ti ji yu mao xi guan dian yong fen li ji shu lian yong ,jian li le mao xi guan dian yong -hua xue fa guang fa jian ce niao ye yu xie ye zhong ma fei han liang he mao xi guan dian yong -hua xue fa guang fa tong shi jian ce niao ye zhong shen shang xian su (E)、qu jia shen shang xian su (NE)、3-jia yang ji -4-qiang ji -ben yi er chun (MHPG)、3-jia yang ji -4-qiang ji -ku xing ren suan (xiang cao bian tao suan ,VMA)、3-jia yang ji -4-qiang ji yi suan (gao xiang cao suan ,HVA)de xin fang fa 。xin fang fa cao zuo jian chan 、fen li xiao lv gao 、fen xi shi jian duan 、shi ji xiao hao shao 、dui huan jing you hao 。di yi bu fen mao xi guan dian yong -hua xue fa guang fa jian ce niao ye yu xie ye zhong ma fei han liang mu de :jiang Ag(Ⅲ)pei ge wu -lu mi nuo hua xue fa guang xin ti ji yu mao xi guan dian yong fen li ji shu lian yong ,jian li mao xi guan dian yong -hua xue fa guang fa jian ce niao ye yu xie ye zhong ma fei han liang de xin fang fa ,bing cheng gong ying yong yu niao ye he xie ye zhong ma fei de ding xing yu ding liang fen xi 。fang fa :dui shi yan tiao jian jin hang you hua ,zui jia shi yan tiao jian wei :Ag(Ⅲ)pei ge wu nong du wei 7.0×10-55 mol/L(ji zhong Ag(Ⅲ)pei ge wu zhong NaOHnong du wei 0.04 mol/L、Na2CO3nong du wei 0.008 mol/L)、lu mi nuo nong du 2 mmol/L、peng sha nong du 5 mmol/L、fen li dian ya 15 kV、jin yang shi jian 12s。cai yong HLB(200 mg,6cc)gu xiang cui qu xiao zhu dui niao yang he xie yang jin hang jing hua he nong su ,dan qi chui gan hou fu rong ,zai you hua de tiao jian xia dui yang pin jin hang jian ce 。zai gao ya zhi liu dian chang zuo yong xia ,ma fei yu sheng wu yang pin zhong ji ta wu zhi zai mao xi guan zhong shi xian fen li ,dao da jian ce chuang kou hou ,yu Ag(Ⅲ)pei ge wu -lu mi nuo hua xue fa guang ti ji zuo yong ,ying xiang ti ji de yang hua hai yuan fan ying ,cong er ying xiang hua xue fa guang xin hao de da xiao 。ji yu jian xing jie zhi zhong ,ma fei dui gai fan ying de hua xue fa guang xin hao qi yi zhi zuo yong ,ju zai yi ding nong du fan wei nei ,yi zhi zuo yong yu ma fei nong du cheng xian liang hao xian xing guan ji ,ju ci jian li biao zhun qu xian ,ce chu ma fei han liang 。jie guo :zui jia jian ce tiao jian xia ,fang fa jian chu xian wei 0.75μg/mL,zai ma fei nong du wei 230μg/mLnong du fan wei nei xian xing guan ji liang hao ,hui gui fang cheng wei ΔI=3.8265c+14.14(R2=0.9998)。qu 20μg/mLma fei jin hang 7ci ping hang shi yan ,ce de xiang dui biao zhun pian cha (RSD)wei 2.01%。niao ye he xie ye zhong yang pin ping jun jia biao hui shou lv fen bie wei 109.03%he 101.28%。jie lun :jian li le mao xi guan dian yong -hua xue fa guang fa jian ce niao ye yu xie ye zhong ma fei han liang de xin fang fa ,bing cheng gong yong yu niao yang yu xie yang zhong ma fei han liang de jian ce 。gai fang fa cao zuo jian bian 、fen li xiao guo hao 、yang pin xiao hao liang shao 、fen xi cheng ben di lian 、dui huan jing you hao ,jie guo ling ren man yi 。di er bu fen mao xi guan dian yong -hua xue fa guang fa tong shi jian ce niao ye zhong shen shang xian su 、qu jia shen shang xian su ji ji dai xie chan wu han liang mu de :jiang Ag(Ⅲ)pei ge wu -lu mi nuo hua xue fa guang xin ti ji yu mao xi guan dian yong fen li ji shu lian yong ,jian li mao xi guan dian yong -Ag(Ⅲ)pei ge wu -lu mi nuo hua xue fa guang fa tong shi jian ce niao ye zhong shen shang xian su (E)、qu jia shen shang xian su (NE)、3-jia yang ji -4-qiang ji -ben yi er chun (MHPG)、3-jia yang ji -4-qiang ji -ku xing ren suan (xiang cao bian tao suan ,VMA)、3-jia yang ji -4-qiang ji yi suan (gao xiang cao suan ,HVA)de xin fang fa ,bing cheng gong ying yong yu niao ye zhong E、NE、MHPG、VMAhe HVAwu chong wu zhi han liang de tong shi ce ding 。fang fa :niao yang jing jiang suan xing yang li zi jiao huan shu zhi he chao gao su di wen li xin chu li hou ,jing 0.22μmlv mo guo lv hou zhi jie jin yang jian ce 。zai you hua de shi yan tiao jian ,ji Ag(Ⅲ)pei ge wu nong du wei 2.0×10-4 mol/L、NaOHnong du wei 0.05 mol/L、Na2CO3nong du wei 0.04mol/L、lu mi nuo nong du wei 3 mmol/L、peng sha nong du wei 5 mmol/L、dan suan na nong du wei 3mmol/L、fen li dian ya wei 15 kV、jin yang shi jian wei 15 s,dui yang pin jin hang fen li jian ce 。wu chong fen xi wu jing mao xi guan dian yong fen li hou ,yu Ag(Ⅲ)pei ge wu -lu mi nuo hua xue fa guang ti ji zuo yong ,jun neng ying xiang fa guang ti ji de fa guang xin hao 。ji zhong ,shen shang xian su dui hua xue fa guang qi zeng jiang zuo yong ,qu jia shen shang xian su 、3-jia yang ji -4-qiang ji -ben yi er chun 、xiang cao bian tao suan 、gao xiang cao suan jun dui hua xue fa guang qi yi zhi zuo yong 。ju zai yi ding wu zhi nong du fan wei nei ,zeng jiang huo yi zhi zuo yong yu wu zhi nong du cheng xian liang hao xian xing guan ji ,ju ci jian li ge wu zhi biao zhun qu xian ,ce chu ge dai ce wu zhi han liang 。jie guo :zai you hua de jian ce tiao jian xia ,shen shang xian su 、qu jia shen shang xian su 、3-jia yang ji -4-qiang ji -ben yi er chun 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suan 、gao xiang cao suan de xin fang fa 。tong shi dui yang pin qian chu li tiao jian jin hang kao cha ,jian hua le yang pin qian chu li guo cheng 。xin fang fa jian bian ling min 、fen xi cheng ben di 、yang pin xiao hao shao ,jie guo ling ren man yi 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自河北医科大学的朱怀娇,发表于刊物河北医科大学2019-11-15论文,是一篇关于配合物鲁米诺化学发光体系论文,毛细管电泳论文,吗啡论文,神经递质论文,生物样品论文,河北医科大学2019-11-15论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自河北医科大学2019-11-15论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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