导读:本文包含了麦芽糖转糖基酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:麦芽糖转糖基酶,环糊精,合成,转化率
麦芽糖转糖基酶论文文献综述
刘书磊,黄永忠,黄虹,杨成,王水兴[1]（2013）在《麦芽糖转糖基酶产环糊精性质的研究》一文中研究指出通过β-淀粉酶对未环化的直链淀粉进行降解,采用DNS法对反应体系中还原糖进行测定,依据环化反应前后还原糖的变化来计算环糊精的产率,研究底物浓度、酶量、温度、pH、麦芽糖、乙醇、二甲基亚砜对转化率的影响。结果表明,直链淀粉终浓度为0.1～0.125%时转化率最高,而酶用量对最终转化率影响不大,最适转化pH值和温度分别是6.5和40℃,麦芽糖对转化率起抑制作用,乙醇和二甲基亚砜则能够提高转化率。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2013年01期）
朱国强[2]（2011）在《麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中的表达及活性分析》一文中研究指出麦芽糖转糖基酶是一种4-α-葡聚糖转移酶,能催化直链淀粉环化生成大环糊精。大环糊精具有筒状疏水内腔和亲水外表结构,可以广泛应用于食品、医药、化工等行业。麦芽糖转糖基酶在生物(包括微生物)体内含量很低,不能满足制备大环糊精和科研的需要。本文从E.coli BL21(DE3)plysS中扩增得到麦芽糖转糖基酶基因(MalQ),构建了表达载体pPIC9K-MalQ,SalI线性化,电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115感受态细胞中,成功构建了一株基因工程菌pPIC9K-MalQ/GS115。利用0.8%甲醇诱导表达,表达上清进行转糖基活性分析,TLC结果显示表达上清液具有糖基转移酶作用,证实麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中成功表达。表达产生的麦芽糖转糖基酶和直链淀粉反应,制备得到一系列大环糊精的混合物。本文主要结论如下：(1)PCR扩增得到的MalQ基因,构建了表达载体pPIC9K-MalQ。对其进行酶切和测序分析。测序结果经BLAST比对,与GenBank中报道的E. coli BL21(DE3)MalQ基因的同源性为100%。(2)表达载体用SalⅠ线性化,电击转化入毕赤酵母GS115感受态细胞中,构建了基因工程菌pPIC9K-MalQ/GS115。0.8%甲醇进行诱导表达。表达上清液与麦芽糖溶液反应,TLC结果显示：上清液具有糖基转移酶活性。SDS-PAGE电泳显示,上清液在78.5 kDa位置处有明显条带,与麦芽糖转糖基酶的理论分子量相符。葡萄糖氧化酶法测得表达上清液酶活118 U。证实麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中成功表达。确定了该酶的最适反应温度为30℃,最适反应pH为6.0。(3)基因工程菌pPIC9K-MalQ/GS115的表达上清液与直链淀粉反应,葡萄糖淀粉酶初步纯化,TLC结果显示：有聚合度大于9的一系列环状糊精生成。证实麦芽糖转糖基酶能催化淀粉生成大环糊精。(本文来源于《南昌大学》期刊2011-06-12）
朱国强,王水兴,黄兰,朱石龙[3]（2010）在《麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中的表达及活性分析》一文中研究指出用PCR方法从E.coliBL21(DE3)中获得麦芽糖转糖基酶基因,将该基因插入到酵母表达载体pPIC9K的α分泌信号开放阅读框的下游,对重组质粒pPIC9K-MalQ所含的外源片段进行双向测序。将测序正确的重组质粒用内切酶SalⅠ线性化,电穿孔转化到GS115感受态细胞中,G418梯度筛选高拷贝转化菌及PCR鉴定目的基因的整合,1%甲醇诱导表达。经薄层色谱分析粗酶液处理的麦芽二糖溶液,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基酶活性。(本文来源于《食品科学》期刊2010年23期）
甄晨[4]（2010）在《链霉菌麦芽糖转糖基酶基因的克隆、原核表达及其产酶研究》一文中研究指出环状糊精是淀粉经酶降解环化而成的具有筒状疏水内腔的产物,合成大环糊精的酶有麦芽糖转糖基酶。由于其在生物体内的含量很低,无论作为研究来源还是用于制备大环糊精,都不能满足实际需求。本文从Streptomyces ssp. ST66中扩增到麦芽糖转糖基酶(Mal Q)基因,构建了一株基因工程菌E.coli BL21/ pET-GST-Mal Q,并成功得到表达。对表达产物进行了初步分离纯化,并催化直链淀粉合成大环糊精。研究了影响基因工程菌发酵产酶相关因素,主要结论如下:(1)用PCR方法扩增Streptomyces ssp. ST66 Mal Q基因,将该基因插入原核表达载体pET-GST中,测序后发现开放阅读框(ORF)全长2133 bp,编码711个氨基酸,分子量为76.56 kDa。在GenBank中经BLAST比对,与报道的Streptomyces coelicolor Mal Q基因同源性高达97%。重组质粒转化E.coli BL21,构建基因工程菌E.coli BL21/pET-GST-Mal Q,经IPTG诱导表达目的蛋白。离心收集离心收集并利用超声波破碎细胞,将细胞破碎液进行SDS-PAGE电泳,结果表明Mal Q基因成功得到表达,且表达产物属于胞内酶；将粗酶液作用于麦芽二糖,反应液经薄层色谱分析,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基活性。(2)通过亲和色谱,纯化得到目标蛋白。使用人鼻病毒14亚型3C蛋白酶切割融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯化蛋白在约76 kDa处有一明显条带。以粗酶液处理直链淀粉,并采用淀粉酶水解上述反应液,发现反应液中含有较高的抗葡萄糖淀粉酶水解的淀粉。经TLC检测,证实了诱导表达的粗酶液能够催化直链淀粉环化成大环糊精。(3)优化了E.coli BL21/pET-GST-Mal Q的产酶工艺条件。最佳诱导条件为诱导时间5 hr,诱导温度35℃,初始细胞量(OD6000.8),诱导剂IPTG终浓度0.9mmol/L,转速150 rpm。在最佳诱导条件下,基因工程菌的酶活达2.84 U,而Streptomyces ssp. ST66的酶活仅为0.31 U,基因工程菌产酶的酶活提高了9.16倍。(本文来源于《南昌大学》期刊2010-06-12）
王水兴,龚珩,郭勇,夏慧玲,吴凌伟[5]（2007）在《来自基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ的麦芽糖转糖基酶的分离纯化及酶学性质研究》一文中研究指出通过6-His的分离标签,联合采取硫酸铵沉淀,生物半透膜透析和亲和层析等方法,纯化了目标酶。通过使用凝血酶切割DsbA-MalQ融合蛋白,证明酶切后酶蛋白仍具有麦芽糖转糖基酶活性。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.5。当处理温度小于40℃时,酶的活力基本保持在最高活性的80%以上,相对稳定;在酶的pH耐受方面,在pH5.5～8.0范围内较稳定。金属离子和EDTA对酶活性的影响实验表明,EDTA对酶活的影响不大,但Zn2+、Cu2+、Hg2+、Ag+对酶蛋白有较强的抑制作用,而Ca2+、Mg2+、Mn2+等对表达的酶有一定的激活作用。在37℃,pH6.5时以麦芽叁糖为底物测得酶促反应的Km值为0.378mmol/L,Vmax值为1.979mmol/(L·min)。(本文来源于《食品科学》期刊2007年12期）
王水兴,李燕萍,许杨,夏慧玲,吴凌伟[6]（2007）在《基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产麦芽糖转糖基酶的研究》一文中研究指出为了获得最佳的基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产酶条件,通过进行诱导时间﹑诱导温度﹑IPTG的浓度﹑诱导前菌液浓度(OD600)等因素梯度实验,研究各因素对发酵产酶的影响。实验结果表明,基因工程菌的最佳诱导条件分别为:诱导时间为2.5h,诱导温度为30℃,IPTG浓度为0.5mmol/L,诱导前OD600值为0.5。在最佳工艺条件下,粗酶液的酶活为130U,相当于出发菌产酶效率的135倍。(本文来源于《食品科学》期刊2007年08期）
麦芽糖转糖基酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
麦芽糖转糖基酶是一种4-α-葡聚糖转移酶,能催化直链淀粉环化生成大环糊精。大环糊精具有筒状疏水内腔和亲水外表结构,可以广泛应用于食品、医药、化工等行业。麦芽糖转糖基酶在生物(包括微生物)体内含量很低,不能满足制备大环糊精和科研的需要。本文从E.coli BL21(DE3)plysS中扩增得到麦芽糖转糖基酶基因(MalQ),构建了表达载体pPIC9K-MalQ,SalI线性化,电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115感受态细胞中,成功构建了一株基因工程菌pPIC9K-MalQ/GS115。利用0.8%甲醇诱导表达,表达上清进行转糖基活性分析,TLC结果显示表达上清液具有糖基转移酶作用,证实麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中成功表达。表达产生的麦芽糖转糖基酶和直链淀粉反应,制备得到一系列大环糊精的混合物。本文主要结论如下：(1)PCR扩增得到的MalQ基因,构建了表达载体pPIC9K-MalQ。对其进行酶切和测序分析。测序结果经BLAST比对,与GenBank中报道的E. coli BL21(DE3)MalQ基因的同源性为100%。(2)表达载体用SalⅠ线性化,电击转化入毕赤酵母GS115感受态细胞中,构建了基因工程菌pPIC9K-MalQ/GS115。0.8%甲醇进行诱导表达。表达上清液与麦芽糖溶液反应,TLC结果显示：上清液具有糖基转移酶活性。SDS-PAGE电泳显示,上清液在78.5 kDa位置处有明显条带,与麦芽糖转糖基酶的理论分子量相符。葡萄糖氧化酶法测得表达上清液酶活118 U。证实麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中成功表达。确定了该酶的最适反应温度为30℃,最适反应pH为6.0。(3)基因工程菌pPIC9K-MalQ/GS115的表达上清液与直链淀粉反应,葡萄糖淀粉酶初步纯化,TLC结果显示：有聚合度大于9的一系列环状糊精生成。证实麦芽糖转糖基酶能催化淀粉生成大环糊精。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
麦芽糖转糖基酶论文参考文献
[1].刘书磊,黄永忠,黄虹,杨成,王水兴.麦芽糖转糖基酶产环糊精性质的研究[J].食品与发酵工业.2013
[2].朱国强.麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中的表达及活性分析[D].南昌大学.2011
[3].朱国强,王水兴,黄兰,朱石龙.麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中的表达及活性分析[J].食品科学.2010
[4].甄晨.链霉菌麦芽糖转糖基酶基因的克隆、原核表达及其产酶研究[D].南昌大学.2010
[5].王水兴,龚珩,郭勇,夏慧玲,吴凌伟.来自基因工程菌E.coliBL21/pET-DsbA-MalQ的麦芽糖转糖基酶的分离纯化及酶学性质研究[J].食品科学.2007
[6].王水兴,李燕萍,许杨,夏慧玲,吴凌伟.基因工程菌E.coliBL21/pET-DsbA-MalQ发酵产麦芽糖转糖基酶的研究[J].食品科学.2007