导读:本文包含了酶学分析论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Alteromonas,sp.,普鲁兰酶,克隆与表达,酶学性质
酶学分析论文文献综述
魏家强,高志远,陈颢[1]（2019）在《海洋交替单胞菌(Alteromonas sp. Y-389)普鲁兰酶基因的异源表达与酶学性质分析》一文中研究指出以海洋交替单胞菌(Alteromonas sp. Y-389)的基因组为模板,设计普鲁兰酶基因的引物并进行PCR扩增。将目的基因连接到载体pET-28a(+)后进行测序并进行生物信息学分析。结果显示,基因的开放阅读框全长4 347 bp,编码1 449个氨基酸的普鲁兰酶,为Ⅰ型普鲁兰酶,有4个保守的结构域,属于糖苷水解酶家族13;将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),成功诱导出了可溶性的目标蛋白;随后对其酶学性质进行测定与分析,结果表明,该酶的比活力为54.53 U/mg,其最适的反应温度为35℃,最适pH为6.0,Na~+和Mn~(2+)对该酶的活性具有明显的促进作用,而Cu~(2+),Zn~(2+)与Fe~(2+)对其活性的抑制作用比较明显;其酶学参数K_m和V_(max)分别为3.12 mg/mL,228.8 U/mg,将为今后的规模化生产提供数据支持。(本文来源于《海洋科学进展》期刊2019年04期）
姚健,毕文慧,桂伦,马吉平,沈爱喜[2]（2019）在《一个木聚糖降解菌群的分离及木聚糖酶酶学性质分析》一文中研究指出为从环境中分离出能够降解木聚糖的微生物,利用富集培养法从猪粪与甘蔗叶混合发酵堆肥中分离到一个具有木聚糖降解能力,能够利用玉米芯作为惟一碳源的混合菌群。高通量测序分析发现该菌群具有丰富的微生物多样性,其中未知微生物的含量约为50.8%。该菌群发酵液中的木聚糖酶在以AZO-xylan (Birchwood)为底物时,其最适反应温度为55℃,最适反应pH为8.0,在55℃以下能够保持很好的稳定性。重要的是,该菌群的发酵液能够直接水解玉米芯生产木叁糖和木四糖,从而省去了碱处理玉米芯制备木聚糖的步骤,进而降低了环境污染以及生产成本。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2019年04期）
胡晨星,胡彦波,原野[3]（2019）在《一种用于多糖结构分析的半乳聚糖酶的重组表达及酶学性质研究》一文中研究指出酶解法是分析多糖结构的一种重要手段。酶解法可以从糖复合物中切得完整糖链,通过顺序降解阐明一级结构。多种专一性糖苷酶的获得将为酶解法分析多糖结构提供充足有效的工具。本文从草酸青霉(Penicillium oxalicum)中获得一个属于GH43家族的外切β-1,3-半乳聚糖酶基因pogal3,并将目的基因同时在原(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
莫健新,王豪强,黄广燕,蔡更元,吴珍芳[4]（2019）在《微生物源果胶酶在猪PK15细胞中异源表达及其酶学性质分析》一文中研究指出果胶是植物细胞壁组分之一,是畜禽饲料中主要的抗营养因子,影响畜禽对日粮中能量和氮的利用效率。果胶酶在自然界中广泛存在于细菌、酵母和丝状真菌等微生物中,对解除果胶的抗营养作用、提高饲料利用率具有良好的效果。为了探索在猪细胞中表达微生物源果胶酶基因的可行性,本研究通过脂质体转染法将微生物源果胶酶基因pg5a、pgI、pga3A和pgaA导入猪PK15细胞中进行异源表达,利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)法测定这4种基因编码果胶酶的酶活力。结果显示,4种果胶酶基因均能在猪PK15细胞中转录出mRNA,但只有pg5a和pgI适应猪细胞表达系统。其中,果胶酶PG5A的最高酶活为0.95 U/mL,最适作用pH为pH4.0,在pH4.6～6.0范围内维持46%以上的酶活;PGI在pH5.0处获得最高酶活,为0.30 U/mL,在pH4.0～6.0范围内维持35%以上的酶活。消化蛋白酶耐受实验结果显示,PG5A和PGI对胃蛋白酶和胰蛋白酶均有较强的耐受能力,用1mg/mL的猪胃蛋白酶处理2h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为76%和71%;用1 mg/mL的猪胰蛋白酶处理2 h后,PG5A和PGI的剩余酶活分别为44%和93%。综上所述,果胶酶基因pg5a和pgI能在猪细胞中正常表达,其编码的果胶酶对猪消化道pH条件和消化蛋白酶具有较强的耐受能力,可作为制备转果胶酶基因猪的候选基因。(本文来源于《遗传》期刊2019年08期）
刘进杰,吕娟娟,陈国忠,张娟,程仕伟[5]（2019）在《莫海威芽孢杆菌产壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质分析》一文中研究指出纯化从烟台海域沙质土壤分离得到的莫海威芽孢杆菌菌株amyP216来源壳聚糖酶,并对其进行酶学性质分析。以发酵液为原料,依次进行超声波破碎菌体、20%～70%硫酸铵分级盐析、纤维素DE-32阴离子交换层析、葡聚糖凝胶G-75过滤层析,得到壳聚糖酶。采用SDS-PAGE凝胶电泳测定分子量为30 ku,全波段扫描结果显示在324 nm处出现最高峰。然后对壳聚糖酶的酶学性质进行研究。结果表明,最适反应温度为55℃,且在一定范围内温度越低,其热稳定性越高;最适反应pH值为5.5,中性条件下酶活性最稳定;在金属离子中Mn~(2+)对其激活作用最明显,其他金属离子对其有抑制作用;该酶具有相对较好的底物特异性。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年14期）
陈龙,吴兴利,闫晓刚,谷巍,徐海燕[6]（2019）在《贝莱斯芽孢杆菌的内切葡聚糖酶基因的克隆、表达及其酶学性质分析》一文中研究指出本实验利用PCR方法扩增1株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)源的内切葡聚糖酶基因(CMCase),插入到p ET32a(+)中构建重组表达大肠杆菌系统,对重组内切葡聚糖酶基因进行生物信息学分析以及酶学性质研究。结果表明:内切葡聚糖酶由499个氨基酸组成,预测分子量为55.02 ku,最大开放阅读框ORF约为1 500 bp。经诱导表达优化后,培养上清中可检测到内切葡聚糖酶酶活力为5.81 IU/mL,菌体中为1.61 IU/mL,诱导后原菌液直接超声破碎处理可达7.41 IU/mL,其酶活力为野生菌株的2.3倍。重组内切葡聚糖酶具有典型内切纤维素酶的特征,其最适酶反应温度和pH分别为50℃和6,在60℃条件下放置1 h相对剩余酶活力可保持在70%以上,在pH 6～10范围内可保持90%以上。Na~+、Mg~(2+)可以促进重组内切葡聚糖酶酶活力,而Co~(2+)、Hg~(2+)、Fe~(2+)等金属离子以及表面活性剂SDS则具有较强的抑制作用。由此可见,本实验在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了内切葡聚糖酶,且该酶主要进行分泌表达,具有一定的耐热性和良好的pH稳定性。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2019年09期）
尹春筱,李江,徐玲玲[7]（2019）在《一株产高温蛋白酶嗜热菌A-2的筛选鉴定及酶学特性分析》一文中研究指出本研究为从云南腾冲热泉中分离纯化得到一株产高温蛋白酶的菌株并对其进行驯化培养,用以探究该菌株的生长条件及酶学特性,通过选择培养基筛选能够分解脱脂奶粉产蛋白酶的菌株,应用常规方法液体培养菌体,探究温度、pH、碳源、氮源对菌株生长情况的影响,并采用福林酚法测蛋白酶活性。并提取蛋白酶液对酶的最适pH、温度以及热稳定性、pH稳定性进行研究。结果发现通过含脱脂奶粉的固体培养基筛选得到一株产蛋白酶菌株A-2,经过生理生化试验和16S rDNA鉴定知该菌种属于Aneurinibacillus属。酵母粉、葡萄糖、55℃、pH值7.5分别为菌株生长的最适氮源、碳源、温度和pH。此外该菌株所产的蛋白酶最适温度为60℃,在pH值7～9具有较好的酶活性。因此,该菌株为嗜热芽孢杆菌,所产的碱性蛋白酶具有较高的耐受温度和pH稳定性,为进一步开发利用提供参考的价值。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年07期）
梁燕媚,黄伟健,高飞云[8]（2019）在《脂肪肝患者血脂、血糖和肝功酶学指标变化的检测分析》一文中研究指出目的研究脂肪肝患者血脂、血糖和肝功酶学指标变化的检测意义。方法抽取2015年1月1日～2018年1月1日在我院检查出患有脂肪肝的80例患者作为研究组,选择同期的80例健康体检者作为对照组,观察两组的血脂、血糖和肝功酶学指标变化,比较不同程度脂肪肝患者的血脂情况。结果研究组的天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组的叁酰甘油(TG)、血清总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)水平均高于对照组,但高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。中度以上脂肪肝患者的TG、TC、LDL-c水平高于轻至中度脂肪肝、轻度脂肪肝患者,而中度以上脂肪肝患者的HDL-c水平低于轻至中度脂肪肝、轻度脂肪肝患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血脂、血糖和肝功酶学指标检测可及时判断脂肪肝患者,而血脂能够直接区分患者脂肪肝程度,为患者诊断提供重要参考,对后期治疗与预防具有积极影响,有利于患者的治疗,改善患者预后,值得临床应用。(本文来源于《中国当代医药》期刊2019年18期）
王鑫[9]（2019）在《醛酮还原酶AKR1C亚型在肝癌细胞中的表达差异及酶学分析》一文中研究指出人源醛酮还原酶AKR1C存四种亚型,有研究表明这四种酶与癌症发生发展有关,近年关于AKR1C是否为肿瘤标志物、抑制剂在辅助抗癌及逆转耐受肿瘤的作用等成为生物学、临床医学、药学等行业专家学者研究热点。由于AKR1C四种酶仅在肝组织内同时表达,故本文选取了肝癌细胞HepG2以及对应的正常肝细胞HL-7702作为研究对象,利用Real time-PCR以及Western-blot技术在mRNA和蛋白表达水平上研究了这四种酶在不同细胞中的表达差异;体外重组表达这四种酶,进行了酶学分析;利用AutoDockTools分子对接软件筛选广泛抑制四种酶的小分子抑制剂。研究结果包括以下几个方面:1)mRNA转录水平研究发现,HepG2中AKR1C1的表达量是HL-7702的3.01倍(*P<0.05),HepG2中AKR1C2的表达量是HL-7702的2.83倍(*P<0.05),HepG2中AKR1C3的表达量是HL-7702的3.27倍(*P<0.05),HepG2中AKR1C4的表达量是HL-7702的1.04倍(*P<0.05)。2)蛋白表达水平研究发现,HepG2中AKR1C1的表达量是HL-7702的1.51倍(*P<0.05),HepG2中AKR1C2的表达量是HL-7702的1.54倍(*P<0.05),HepG2中AKR1C3的表达量是HL-7702的1.56倍(*P<0.05),HepG2中AKR1C4的表达量是HL-7702的0.49倍(*P<0.05)。3)成功构建四种酶原核表达载体,纯化后四种酶的比活分别是AKR1C1:95659U/mg;AKR1C1:61495U/mg;AKR1C3:66720U/mg;AKR1C4:51045U/mg。4)以DL-甘油醛为底物对四种酶活测定最适条件是pH7.0,37℃,DL-甘油醛浓度5mM,NAPDH浓度0.35mM。5)计算生物学AutoDockTools软件分析,针对10种抑制剂:醋酸甲羟孕酮,熊去氧胆酸,2'-羟基黄酮,茉莉酸甲酯,吲哚美辛,氟芬那酸,甲芬那酸,舒林酸,甲氯灭酸,甲氧萘丙酸的分子结构对接得出结论:醋酸甲羟孕酮是普遍对AKR1C四种酶的有效抑制剂;随后测定了AKR1C四种酶的抑制剂IC50值,符合以上的预测。本实验结果为AKR1C四种酶与肝癌细胞发生发展的深层次机理研究提供实验基础,以及为筛选AKR1C四种酶的小分子抑制剂作为治疗药物提供理论依据和可能的作用机理。(本文来源于《长春理工大学》期刊2019-06-01）
赵彤彤[10]（2019）在《植物乳杆菌p-8羟基脂肪酸脱氢酶的原核异源表达与生物信息学分析及其酶学性质研究》一文中研究指出共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是具有共轭双键的十八碳二烯酸,具有抗癌、抗动脉粥样硬化和降脂等生理功效。植物乳杆菌可以转化亚油酸(Linoleic acid,LA)生成CLA,此过程需要脂肪酸水合酶(Fatty acid hydratase,CLA-HY)、羟基脂肪酸脱氢酶(Hydroxy fatty acid dehydrogenase,CLA-DH)和乙酰乙酸脱羧酶(Acetoacetate decarboxylase,CLA-DC)共同参与。所以,CLA-DH 是酶法生产 CLA的瓶颈之一。本实验对植物乳杆菌p-8的CLA-DH进行了基因克隆、原核表达、生物信息学分析和酶学性质研究,得到以下结果:(1)以植物乳杆菌p-8的基因组为模板扩增出CLA-DH,构建pET-28a-CLA-DH,转化入E.col Trans1-T1,经菌落PCR、酶切和序列分析说明原核表达载体构建成功。(2)通过对CLA-DH的生物信息学分析发现,CLA-DH为同亚基六聚体,属于典型的SDR超家族成员,具有Rossman折迭的典型保守结构,其N端存在辅酶结合位点的特征序列G-x-x-x-G-x-G,在140～160位氨基酸残基之间存在保守的催化活性位点的特征序列S-xn-Y-x-x-x-K。CLA-DH含286个氨基酸,是稳定的水溶性的胞质蛋白,无跨膜区和信号肽。其分子质量为32.0918 kDa,等电点为5.15,不稳定指数为25.53,平均亲水性(GRAVY)为-0.179。(3)将pET-28a-CLA-DH转化入E.coli Transetta(DE3),经IPTG诱导表达,Western Blot证明重组酶CLA-DH成功表达。(4)为提高可溶性CLA-DH的表达量,研究了诱导温度、诱导剂浓度和诱导时间对可溶性CLA-DH的表达量的影响,结果表明在诱导温度为16℃,IPTG终浓度为0.5 mmol/L,诱导时间为12 h的条件下可溶性CLA-DH的表达量最高。(5)对CLA-DH进行纯化浓缩,得到电泳均一性和含量较高的CLA-DH。以蓖麻油酸为底物对其酶学性质进行研究,发现CLA-DH最适温度为45℃,在20℃能保持一定的稳定性。最适pH为6～7,在此范围内稳定性较好。Mg2+、Mn2+、Fe3+可以提高酶活力,Cu2+、Zn2+、Fe2+会抑制酶活力,Vmax是1.04μmol/L·min,Km值是6.72 mmol/L,kcat 值是 3.3 6 min-1。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2019-06-01）
酶学分析论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为从环境中分离出能够降解木聚糖的微生物,利用富集培养法从猪粪与甘蔗叶混合发酵堆肥中分离到一个具有木聚糖降解能力,能够利用玉米芯作为惟一碳源的混合菌群。高通量测序分析发现该菌群具有丰富的微生物多样性,其中未知微生物的含量约为50.8%。该菌群发酵液中的木聚糖酶在以AZO-xylan (Birchwood)为底物时,其最适反应温度为55℃,最适反应pH为8.0,在55℃以下能够保持很好的稳定性。重要的是,该菌群的发酵液能够直接水解玉米芯生产木叁糖和木四糖,从而省去了碱处理玉米芯制备木聚糖的步骤,进而降低了环境污染以及生产成本。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶学分析论文参考文献
[1].魏家强,高志远,陈颢.海洋交替单胞菌(Alteromonassp.Y-389)普鲁兰酶基因的异源表达与酶学性质分析[J].海洋科学进展.2019
[2].姚健,毕文慧,桂伦,马吉平,沈爱喜.一个木聚糖降解菌群的分离及木聚糖酶酶学性质分析[J].微生物学杂志.2019
[3].胡晨星,胡彦波,原野.一种用于多糖结构分析的半乳聚糖酶的重组表达及酶学性质研究[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[4].莫健新,王豪强,黄广燕,蔡更元,吴珍芳.微生物源果胶酶在猪PK15细胞中异源表达及其酶学性质分析[J].遗传.2019
[5].刘进杰,吕娟娟,陈国忠,张娟,程仕伟.莫海威芽孢杆菌产壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质分析[J].江苏农业科学.2019
[6].陈龙,吴兴利,闫晓刚,谷巍,徐海燕.贝莱斯芽孢杆菌的内切葡聚糖酶基因的克隆、表达及其酶学性质分析[J].中国畜牧杂志.2019
[7].尹春筱,李江,徐玲玲.一株产高温蛋白酶嗜热菌A-2的筛选鉴定及酶学特性分析[J].基因组学与应用生物学.2019
[8].梁燕媚,黄伟健,高飞云.脂肪肝患者血脂、血糖和肝功酶学指标变化的检测分析[J].中国当代医药.2019
[9].王鑫.醛酮还原酶AKR1C亚型在肝癌细胞中的表达差异及酶学分析[D].长春理工大学.2019
[10].赵彤彤.植物乳杆菌p-8羟基脂肪酸脱氢酶的原核异源表达与生物信息学分析及其酶学性质研究[D].内蒙古农业大学.2019
标签：Alteromonas; sp.; 普鲁兰酶; 克隆与表达; 酶学性质;