导读:本文包含了瘤胃氮代谢论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:早期断奶羔羊,酵母β-葡聚糖,瘤胃氮代谢,血清尿素氮
瘤胃氮代谢论文文献综述
李冲,魏占虎,李发弟,马友记,王维民[1]（2013）在《酵母β-葡聚糖对早期断奶羔羊瘤胃氮代谢的影响》一文中研究指出选用甘肃肉用绵羊新品种选育群初生公羔20只,随机分为5组,观测了饲粮中添加不同剂量(0、37.50、75.00、112.50、150.00 mg/kg)酵母β-葡聚糖对早期断奶羔羊瘤胃氮代谢参数的影响,结果表明,添加酵母β-葡聚糖对日龄82 d的羔羊瘤胃液中总氮、氨氮和蛋白氮含量均没有显着影响(P>0.05),75.00 mg/kg的添加剂量组尿素氮含量有高于对照组的趋势(P=0.091),食前150.00 mg/kg添加剂量组血清尿素氮显着低于对照组(P<0.05)。(本文来源于《甘肃农业科技》期刊2013年10期）
金龙[2]（2011）在《紫色达利菊提取缩合单宁对大肠杆菌和瘤胃氮代谢以及瘤胃微生物的影响》一文中研究指出紫色达利菊(Petalostemun purpureum)是一种适应性极强,适口性较好,并广泛分布于北美草原上的一种豆科植物。紫色达利菊含有较高的缩合单宁并具有极强的抗致病性大肠杆菌的能力。但关于其缩合单宁对大肠杆菌的抑菌活性及可能机制,是否具有保护植物蛋白过瘤胃的作用以及对瘤胃微生物的影响并不清楚。因此,设计叁个实验来研究紫色达利菊缩合单宁对反刍动物的影响:实验一、紫色达利菊所含缩合单宁对肉牛后肠大肠杆菌抑制能力及其作用机理。在致病性大肠杆菌O157:H7的体外培养基中加入十一种不同植物缩合单宁(添加量: 400μg/ml),结果发现仅紫色达利菊所含缩合单宁表现出较强的抗致病性大肠杆菌O157:H7生物活性。同时,在厌氧条件下添加200μg/ml该缩合单宁表现出对大肠杆菌(ATCC 25922)的抑制作用。穿透电子显微镜观察发现大肠杆菌细胞膜在缩合单宁的作用下增厚,扫描电子显微镜观察发现当添加较高浓度缩合单宁时,大肠杆菌菌体表面被一层膜外物质包裹。大肠杆菌细胞膜的通透性在200μg/ml缩合单宁添加量下显着降低。为进一步确定紫色达利菊所含缩合单宁对反刍动物后肠消化及后肠大肠杆菌的影响,分别在2009和2010年进行放牧试验,试验采用随机区组设计,处理为对照组(不含紫色达利菊以雀麦草为主的草地),试验组Ⅰ(以紫色达利菊与雀麦草为主的草地)和试验组Ⅱ(以紫色达利菊与针茅草和雀麦草混合的草地)。于2009和2010年夏季和秋季在试验地采集植物样品和粪样,用于分析植物和粪样的化学成分及粪样中的大肠杆菌数量。缩合单宁含量在试验组Ⅰ和Ⅱ显着高于对照组(P<0.01)。试验组Ⅰ和Ⅱ动物粪样中大肠杆菌的数量在2009年秋季和2010年夏秋季放牧中显着低于对照组(P<0.05)。秋季放牧中,对照组粪样pH、总氮、有机物消化率、氨态氮和挥发性脂肪酸显着高于试验组Ⅰ和Ⅱ而乙酸/丙酸低于对照组(P<0.05)。夏季放牧动物粪样各指标差异不显着。因此,紫色达利菊所含缩合单宁可能通过改变大肠杆菌细胞膜或与细胞膜相互作用来抑制大肠杆菌的生长,从而减少肉牛粪便中的大肠杆菌数量。实验二、紫色达利菊及其与禾本科和豆科牧草混合氮代谢规律的研究。为确定紫色达利菊中缩合单宁的分布和体外瘤胃降解率,分别在营养生长期和盛花期采集整株植物,测定叶、茎和花所占的比例以及总酚,可提取单宁、蛋白结合单宁和纤维结合单宁的含量。花中总缩合单宁的含量显着高于茎和叶的含量(P<0.05)。营养生长期叶中的总酚和总缩合单宁都高于盛花期。紫色达利菊不同部位可提取单宁的量远高于蛋白结合单宁和纤维结合单宁。盛花期整株植物缩合单宁含量高于营养生长期(P<0.001)。体外试验采用2 x 2析因试验设计,将不同草地采集的两期植物放入叁套DAISYII发酵器中,同时每个发酵器中的两个发酵罐添加聚乙二醇(单宁活性抑制剂),分别在0, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48和72 h取样。营养生长期具有较高的真干物质和真氮消化率,同时干物质和氮素中潜在降解部分(b)均高于盛花期。营养生长期干物质中快速降解部分(a)要高于盛花期(P<0.001),而氮素中的快速降解部分却低于盛花期(P<0.01)。添加聚乙二醇后,营养生长期干物质的慢速降解部分速率常数(C)增加(P<0.01)但对盛花期无影响。添加聚乙二醇增加盛花期真氮素潜在降解部分,对营养生长期无影响。两期紫色达利菊体外12h残留饲料δ~(15)N的含量在添加聚乙二醇后显着增加(P<0.01)。这表明紫色达利菊在营养生长期拥有较高的瘤胃消化率而在盛花期其缩合单宁对氮素的消化率有一定影响,同时两期植物所含缩合单宁均在消化过程中对微生物的附着有一定影响。但总的来看,高缩合单宁对紫色达利菊真干物质和真氮的消化率影响不大。为确认紫色达利菊与冷季禾本科植物混合对瘤胃发酵和菌体蛋白合成的影响。测定了紫色达利菊与混合冷季植物样品(冷季植物以雀麦草为主),并用缩合单宁含量在7, 14, 29和42 g /kg DM的样品进行体外发酵试验。试验采用4×2析因试验设计,重复两次。δ~(15)N硫酸氨用来测定菌体蛋白合成效率。添加聚乙二醇并未对最大产气量以及延迟期产生影响,但能够增加产气率(P<0.01)。随着紫色达利菊含量的增加,12和48h体外真干物质消化率均有所提高(P<0.01)但菌体蛋白产量在12h有所下降(P<0.01)。添加聚乙二醇增加12h真干物质消化率(P<0.01)。随着缩合单宁含量的增加,添加聚乙二醇增加氨态氮和支链挥发性脂肪酸的含量并降低菌体蛋白的合成效率(P<0.01)。这表明冷季植物中混合紫色达利菊能够增加瘤胃降解率。含量为4.2%的缩合单宁对干物质降解率无影响但能增加菌体蛋白合成效率。为了确定紫色达利菊所含缩合单宁对保护豆科植物蛋白不被微生物降解成氨态氮的能力,同时确定对甲烷气体产量以及瘤胃微生物的影响。试验采用5×2析因试验设计,用含δ~(15)N标记的苜蓿与紫色达利菊组成五个比例:100:0、75: 0、50:50、25: 75和0:100,同时添加或不添加聚乙二醇,重复叁次。利用Ammoniaδ~(15)N diffusion技术和Real-time PCR测定苜蓿蛋白向氨态氮中的转化效率和微生物的菌体拷贝数。随着紫色达利菊比例的增加,添加聚乙二醇能够显着提高氨态氮和氨态氮中δ~(15)N含量以及苜蓿δ~(15)N向氨态氮的转化效率(P<0.01)。添加聚乙二醇对48h内消耗单位干物质的甲烷气体产量无影响。12h时,叁种纤维降解菌,产琥珀酸丝状杆菌,瘤胃白球菌和瘤胃黄球菌随着紫色达利菊的比例增加而降低但差异不显着。非纤维降解菌中甲烷菌,瘤胃链球菌和嗜淀粉瘤胃杆菌的拷贝数同样随着紫色达利菊的比例增加而降低但差异不显着。这表明,缩合单宁能够减少瘤胃发酵氨态氮的浓度,同时减少混合苜蓿氮向氨态氮的转化,从而保护苜蓿中的氮不以氨态氮的形式损失。实验叁、缩合单宁对主要瘤胃微生物的影响以及微生物对缩合单宁的适应性微生物纯培养试验选用3种纤维降解菌并在含缩合单宁0和25μg/ml培养液中以纤维素为底物,在试验开始前适应21天,然后在含缩合单宁0、75、150、300和450μg/ml中进行滤纸消化试验。同时选用四种非纤维降解菌在含缩合单宁0和50μg/ml中培养并适应15天,然后添加0、100、200、400和600μg/ml缩合单宁并测定生长曲线。当缩合单宁含量为75μg/ml时,降低产琥珀酸丝状杆菌,瘤胃白球菌和瘤胃黄球菌的滤纸消化率(P <0.01)。扫描电镜观察结果发现当缩合单宁含量高于150μg/ml时,纤维降解菌停止生长,纤维表面出现大量絮状物质。而非纤维降解菌中,瘤胃普雷沃氏菌,嗜淀粉瘤胃杆菌以及瘤胃链球菌对缩合单宁比较敏感,在含量为200μg/ml即显着改变其生长曲线,而反刍动物半月形单胞菌在缩合单宁含量为600μg/ml仍能较好的生长。试验选用叁种纤维降解菌和四种非纤维降解菌均未表现出对缩合单宁的适应性。因此,高剂量缩合单宁对瘤胃微生物有抑制作用并影响纤维降解菌的附着。综上所述,紫色达利菊是一种高缩合单宁、高蛋白的豆科植物,其缩合单宁能够通过与细胞膜相互作用抑制大肠杆菌,并能够降低反刍动物后肠大肠杆菌的数量。同时,紫色达利菊与其它冷季草地植物混合后能够提高真干物质消化率。紫色达利菊与苜蓿混合时,其所含缩合单宁具有保护苜蓿蛋白不被瘤胃微生物降解成氨态氮的能力,但低浓度的缩合单宁就可能造成纤维降解菌的纤维附着能力受抑制。(本文来源于《东北农业大学》期刊2011-04-06）
祁茹,林英庭[3]（2010）在《脲酶抑制剂对反刍动物瘤胃氮代谢的调控及应用》一文中研究指出脲酶抑制剂通过抑制脲酶活性有效控制反刍动物瘤胃内氨的爆发式释放,使氨较长时间稳定在一定的浓度范围,有利于微生物的利用,由此提高氨的利用效率、降低氨中毒的危险,提高尿素等非蛋白氮饲料的利用效率和安全性,提高瘤胃中内源尿素的利用效率,降低成本,提高动物生产性能。本文综述了反刍动物脲酶抑制剂对瘤胃氮代谢的调控机理及几种脲酶抑制剂在实际生产中的应用。(本文来源于《中国奶牛》期刊2010年12期）
潘发明,李发弟,郝正里,郑琛,董淑慧[4]（2010）在《茶渣单宁对绵羊养分消化代谢及瘤胃氮代谢的影响》一文中研究指出通过3个试验,对茶渣中单宁含量、茶渣单宁对豆粕体外消化及绵羊养分消化利用和瘤胃氮代谢的影响进行了研究。试验一对绿茶渣(信阳毛尖)、花茶渣和自茶楼、饭馆搜集的混合茶渣中的单宁(单宁酸等值,TAE)、缩合单宁(CT)和粗蛋白质等养分含量进行测定;试验二采用单因子完全随机试验设计,通<正>通过3个试验,对茶渣中单宁含量、茶渣单宁对豆粕体外消化及绵羊养分消化利用和瘤胃氮代谢的影响进行了研究。试验一对绿茶渣(信阳毛尖)、花茶渣和自茶楼、饭馆搜集的混合茶渣中的单宁(单宁酸等值,TAE)、缩合单宁(CT)和粗蛋白质等养分含量进行测定;试验二采用单因子完全随机试验设计,通(本文来源于《第六次全国饲料营养学术研讨会论文集》期刊2010-10-01）
许君[5]（2009）在《不同日粮条件下添加半胱胺对山羊瘤胃氮代谢和挥发性脂肪酸的影响》一文中研究指出本研究包括两个部分：1、不同日粮条件下添加半胱胺对瘤胃氮代谢和挥发性脂肪酸的影响；2、瘤胃内丁酸钠灌注对瘤胃挥发性脂肪酸的影响。试验一不同日粮条件下添加半胱胺对山羊瘤胃氮代谢和挥发性脂肪-酸的影响为了研究半胱胺在不同日粮条件下对山羊瘤胃氮代谢和挥发性脂肪酸的影响,本试验选用8头安装永久瘤胃瘘管的本地山羊(平均体重15.28±0.5kg)进行试验。饲喂实验分为高精料期和低精料期。高精料期：随机分成高精料组(HL,n=4)和高精料+半胱胺组(HL+CS, n=4).每天分四次饲喂精料(共300g)和花生杆(自由采食),自由饮水。HL+CS在精料中拌入半胱胺盐酸盐微胶囊45mg/kg-BW-d(CT2000,含半胱胺盐酸盐成分30%),饲喂20d。低精料期：高精料期采样结束后,进入低精料期。分组同高精料期。每天饲喂精料两次(共50g),添加花生杆四次,自由饮水；低精料+半胱胺组(LL+CS)在精料中拌入CT2000 45mg/kg-BW-d,饲喂20d。每期饲喂实验结束后分别采集样品。结果显示,高精料期瘤胃MCP、NH3-N、尿素氮、TVFA浓度和丙酸比例均高于低精料期,瘤胃pH、乙酸比例和乙／丙值低于低精料期；与HL相比,HL+CS的瘤胃MCP、NH3-N、TVFA浓度进一步提高(P<0.05),瘤胃尿素氮浓度、乙酸比例则降低(P<0.05), HL+CS有增加丙酸比例、瘤胃稀释率和降低乙／丙值的趋势(0.05<P<0.15)；与LL相比,LL+CS的瘤胃MCP、TVFA浓度和乙酸比例显着增加(P<0.05),瘤胃尿素氮浓度显着降低(P<0.05),但NH3-N浓度、丙酸比例和乙／丙值无显着差异。结果表明,高精料条件下,瘤胃MCP显着增加,同时伴有瘤胃NH3-N、尿素氮和TVFA含量的升高,乙／丙值降低。在高精料条件下添加半胱胺进一步增加MCP和TVFA浓度,降低乙酸比例,丙酸比例和瘤胃稀释率有增加的趋势,表明半胱胺对微生物蛋白合成和微生物代谢的促进作用,日粮和半胱胺对瘤胃MCP和发酵类型有协同作用。在低精料条件下添加半胱胺同样增加瘤胃MCP和TVFA浓度,且低精料条件下添加半胱胺与高精料未添加半胱胺的瘤胃MCP和TVFA浓度相近,但瘤胃pH高于高精料未添加半胱胺处理组,表明在低精料条件下半胱胺对微生物蛋白合成和微生物代谢也呈促进作用。试验二瘤胃内丁酸钠灌注对山羊瘤胃挥发性脂肪酸的影响本试验从瘤胃内丁酸钠灌注对山羊瘤胃挥发性脂肪酸和pH的影响入手,初步探讨丁酸钠灌注剂量(0.3g/kg·BW·d)是否为生理剂量。选用6头安装永久瘤胃瘘管的本地山羊,平均体重20.8±1.46kg,分为试验组(n=3)和对照组(n=3)。每天饲喂精料两次,自由采食羊草和饮水。每日早晨喂食1小时后试验组开始灌注丁酸钠(0.3g/kg·BW·d),对照组灌注等量蒸馏水,持续14天。分别于第5,10和14天的灌注前1.5h、0.5h、灌注后0.5h、2h、4h、6h采集瘤胃液(即喂食前0.5h、喂食后0.5h、1.5h、3h、5h、7h)。结果显示,两组pH和VFA浓度均在生理范围内；与灌注前相比,试验组瘤胃内丁酸比例在灌注后2-4h显着增加(p<0.05),TVFA浓度、乙酸和丙酸比例、pH均无显着变化。与对照组相比,试验组仅在灌注的3h内,丁酸比例增加,乙酸比例降低,但pH、TVFA浓度和乙／丙值差异不显着。结果表明,瘤胃内丁酸灌注能短暂性的引起瘤胃内丁酸比例的增加,乙酸比例的降低,且VFA浓度均在生理范围内,对瘤胃pH和瘤胃发酵类型无影响。初步证明本试验使用的丁酸钠灌注剂量(0.3g/kg·BW·d)为生理剂量。(本文来源于《南京农业大学》期刊2009-06-01）
王文娟,汪水平,谭支良[6]（2007）在《反刍动物瘤胃氮代谢研究进展》一文中研究指出瘤胃内氮代谢过程主要包括蛋白质降解和微生物蛋白质合成。蛋白质在瘤胃内的降解由瘤胃微生物来完成,蛋白质的物理和化学特性、瘤胃及其内容物的特性均影响蛋白质降解。碳水化合物和蛋白质是限制瘤胃微生物生长的主要因素。瘤胃微生物蛋白质合成效率能准确地表示微生物对可利用能量的利用率,而瘤胃氮利用率能准确地表示微生物捕获可利用氮的效率,两者互补,可全面显示微生物对养分的利用效率。细菌细胞对氮的分配随发酵速度而变化,故以微生物氨基酸氮的质量作为瘤胃微生物蛋白质合成效率或氮利用率的衡量标准可能较微生物氮更准确。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2007年05期）
郭春燕[7]（2006）在《羊血水解小肽的制备及其对绵羊瘤胃氮代谢的影响》一文中研究指出本论文从肽营养理论的观点出发,首次将羊血水解小肽添加在绵羊日粮中。首先建立羊血水解小肽的制备方法;接着选取5只装有永久性瘤胃瘘管及十二指肠瘘管的绵羊,依次向基础日粮中添加干血粉、酶解血粉和酸解血粉,研究其对绵羊瘤胃氮代谢的影响。实验1结果表明:匀浆后的血液是最佳反应底物;酶解小肽的最佳反应条件为:酸性蛋白酶,pH:3.0,温度:50℃,酶浓度:5%,底物浓度:6%,反应时间:4小时;酸解小肽最佳反应条件为:30%的工业级盐酸,盐酸/全血为1/4,100℃水解2小时。经检测,酶解血粉和酸解血粉的小肽含量均为60%;氨态氮含量分别为0.8%、1%。实验2结果表明:叁组绵羊的干物质采食量分别为1247.54±77.56、1231.93±55.52、202.49±8.43克/天·羊;粗蛋白采食量分别为219.96±14.00、221.64±10.00、1124.93±46.85克/天·羊;瘤胃pH分别为5.80±0.17、6.05±0.38、5.82±0.29;瘤胃氨态氮分别为18.21±5.07、16.46±5.86、23.88±13.24毫克/100毫升;瘤胃中肽含量分别为12.28±1.79、16.00±1.66、12.82±1.15毫克/毫升;十二指肠中氨态氮含量分别为14.80±3.42、12.00±2.53、16.29±4.17毫克/100毫升;十二指肠中肽含量分别为11.94±0.94、14.04±1.34、12.56±0.88毫克/毫升;十二指肠中菌体蛋白含量分别为8.96±1.46、10.33±1.33、9.52±1.15毫克/100克(干物质)。由本实验得出结论:除酸解组的采食量显着降低以外,其他两组之间没有显着差异;酶解组和酸解组的十二指肠菌体蛋白含量分别比对照组高出14%、5%;酶解组和酸解组均没有影响瘤胃中氨态氮的吸收和利用,同时高浓度的氨态氮也没有抑制微生物对小肽的利用;酶解组瘤胃中积累的肽量明显增多。(本文来源于《新疆农业大学》期刊2006-06-01）
孙维斌,王加启,毛玉胜[8]（2004）在《不同饲养水平下西门塔尔杂交阉牛瘤胃氮代谢特征研究》一文中研究指出选用6头装有瘤胃、十二指肠、回肠瘘管的西门塔尔杂交阉牛,对其在高、中、低3种饲养水平下的瘤胃氮代谢规律进行了研究。结果表明,瘤胃氮的代谢随饲养水平的变化呈规律性变化趋势。在高饲养水平下,瘤胃内平均氨浓度显着高于低、中饲养水平(P<0.01);瘤胃内降解氮(RDN)的利用效率与瘤胃氨氮质量浓度呈负相关关系,在高、中、低3种饲养水平下,瘤胃微生物对瘤胃降解氮的利用效率分别为(64±8)%,(52±16)%及(23±3)%;不同饲养水平下,十二脂肠TN(总氮)、NAN(非氨氮)、EN(内源氮)流量达极显着差异(P<0.01),均以高饲养水平下最高;在中等饲养水平下,微生物氮(MN)的产量最高,达(76.02±3.12)g/d。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2004年07期）
程胜利,姚军,梁春年,苗小林,李发弟[9]（2004）在《全饲粮颗粒料对羔羊生产性能及瘤胃氮代谢的影响》一文中研究指出近年来,肉羊生产成为世界养羊业发展的一大热点。许多国家已将肥羔生产作为发展肉羊业的重要产业。在我国,肉羊生产还是以老、弱、病、残的淘汰羊为主,肥羔生产更是处于起步阶段,还没有配套高效的生产措施,难以形成工厂化、专业化和集约化。全饲粮饲养技术便于控制日粮的(本文来源于《中国饲料》期刊2004年10期）
李大刚[10]（2003）在《脲酶抑制剂对山羊瘤胃氮代谢及营养物质消化率的影响》一文中研究指出本研究由4个试验组成，选用安装永久瘘管的6月龄山羊4只，采用4×4拉丁方试验设计，分别饲喂对照组饲粮、乙酰氧肟酸(AHA)25mg／kg饲粮、丝兰皂甙(YU)36mg／kg饲粮、对苯二酚(HQ)40mg／kg饲粮。研究了叁种脲酶抑制剂对瘤胃氮代谢、营养物质在瘤胃消失率、营养物质表观消化率的影响。 试验1．在上述添加量的条件下分别在试羊采食前及采食后的2、4、6、8小时取瘤胃液样品进行分析，瘤胃液pH值的变化趋势是饲喂后各组均降低，饲喂6小时后pH又有所回升。饲喂前及饲喂后2小时HQ组NH_3—N浓度分别降低15.24％、14.32％(p＜0.05)。在两倍上述添加量条件下AHA组、YU组和HQ组瘤胃液NH_3—N浓度在饲喂后2小时与对照组相比分别降低33.21％、24.15％、31.69％(p＜0.05)。各种脲酶抑制剂延缓尿素分解的作用不明显。HQ组与对照组相比乙酸浓度增加了8.66％(P＜0.05)，HQ组与各组相比丙酸浓度有所增加且达到了显着水平(P＜0.05)，瘤胃液中乙酸／丙酸的比例各组之间无显着差异(P＞0.05)。 试验2．用尼龙袋法研究不同脲酶抑制剂对全混合日粮干物质(DM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)瘤胃48小时消失率的影响。结果表明，与对照组相比，AHA组和HQ组DM的消失率分别提高13.87、16.58％(P＜0.05)，AHA组CP的消失率提高6.89％(P＜0.05)，AHA组和HQ组NDF的消失率分别提高9.39％、13.44％(P＜0.05)，HQ组ADF的消失率提高13.67％(P＜0.05)。 试验3．研究不同脲酶抑制剂对饲粮DM、CP、NDF、ADF表观消化率的影响。结果表明，与对照组相比，HQ组DM表观消化率提高12.31％(P＜0.05)，AHA组和HQ组蛋白质表观消化率分别提高6.27％和4.46％(P＜0.05)，NDF的表观消化率与对照组相比：AHA组和HQ组分别提高6.58和5.93％(P＜0.05)，AHA组和HQ组ADF的表观消化率分别提高了7.48％和4.95％(P＜0.05)。 试验4．研究叁种不同脲酶抑制剂在动物饲喂2小时后对瘤胃微生物数量的影响。试验结果表明叁种脲酶抑制剂对瘤胃细菌总数没有影响，但丝兰皂甙组与对照组相比能降低瘤胃原虫数量，差异达到显着水平(P＜0.05)。(本文来源于《东北农业大学》期刊2003-05-01）
瘤胃氮代谢论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
紫色达利菊(Petalostemun purpureum)是一种适应性极强,适口性较好,并广泛分布于北美草原上的一种豆科植物。紫色达利菊含有较高的缩合单宁并具有极强的抗致病性大肠杆菌的能力。但关于其缩合单宁对大肠杆菌的抑菌活性及可能机制,是否具有保护植物蛋白过瘤胃的作用以及对瘤胃微生物的影响并不清楚。因此,设计叁个实验来研究紫色达利菊缩合单宁对反刍动物的影响:实验一、紫色达利菊所含缩合单宁对肉牛后肠大肠杆菌抑制能力及其作用机理。在致病性大肠杆菌O157:H7的体外培养基中加入十一种不同植物缩合单宁(添加量: 400μg/ml),结果发现仅紫色达利菊所含缩合单宁表现出较强的抗致病性大肠杆菌O157:H7生物活性。同时,在厌氧条件下添加200μg/ml该缩合单宁表现出对大肠杆菌(ATCC 25922)的抑制作用。穿透电子显微镜观察发现大肠杆菌细胞膜在缩合单宁的作用下增厚,扫描电子显微镜观察发现当添加较高浓度缩合单宁时,大肠杆菌菌体表面被一层膜外物质包裹。大肠杆菌细胞膜的通透性在200μg/ml缩合单宁添加量下显着降低。为进一步确定紫色达利菊所含缩合单宁对反刍动物后肠消化及后肠大肠杆菌的影响,分别在2009和2010年进行放牧试验,试验采用随机区组设计,处理为对照组(不含紫色达利菊以雀麦草为主的草地),试验组Ⅰ(以紫色达利菊与雀麦草为主的草地)和试验组Ⅱ(以紫色达利菊与针茅草和雀麦草混合的草地)。于2009和2010年夏季和秋季在试验地采集植物样品和粪样,用于分析植物和粪样的化学成分及粪样中的大肠杆菌数量。缩合单宁含量在试验组Ⅰ和Ⅱ显着高于对照组(P<0.01)。试验组Ⅰ和Ⅱ动物粪样中大肠杆菌的数量在2009年秋季和2010年夏秋季放牧中显着低于对照组(P<0.05)。秋季放牧中,对照组粪样pH、总氮、有机物消化率、氨态氮和挥发性脂肪酸显着高于试验组Ⅰ和Ⅱ而乙酸/丙酸低于对照组(P<0.05)。夏季放牧动物粪样各指标差异不显着。因此,紫色达利菊所含缩合单宁可能通过改变大肠杆菌细胞膜或与细胞膜相互作用来抑制大肠杆菌的生长,从而减少肉牛粪便中的大肠杆菌数量。实验二、紫色达利菊及其与禾本科和豆科牧草混合氮代谢规律的研究。为确定紫色达利菊中缩合单宁的分布和体外瘤胃降解率,分别在营养生长期和盛花期采集整株植物,测定叶、茎和花所占的比例以及总酚,可提取单宁、蛋白结合单宁和纤维结合单宁的含量。花中总缩合单宁的含量显着高于茎和叶的含量(P<0.05)。营养生长期叶中的总酚和总缩合单宁都高于盛花期。紫色达利菊不同部位可提取单宁的量远高于蛋白结合单宁和纤维结合单宁。盛花期整株植物缩合单宁含量高于营养生长期(P<0.001)。体外试验采用2 x 2析因试验设计,将不同草地采集的两期植物放入叁套DAISYII发酵器中,同时每个发酵器中的两个发酵罐添加聚乙二醇(单宁活性抑制剂),分别在0, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48和72 h取样。营养生长期具有较高的真干物质和真氮消化率,同时干物质和氮素中潜在降解部分(b)均高于盛花期。营养生长期干物质中快速降解部分(a)要高于盛花期(P<0.001),而氮素中的快速降解部分却低于盛花期(P<0.01)。添加聚乙二醇后,营养生长期干物质的慢速降解部分速率常数(C)增加(P<0.01)但对盛花期无影响。添加聚乙二醇增加盛花期真氮素潜在降解部分,对营养生长期无影响。两期紫色达利菊体外12h残留饲料δ~(15)N的含量在添加聚乙二醇后显着增加(P<0.01)。这表明紫色达利菊在营养生长期拥有较高的瘤胃消化率而在盛花期其缩合单宁对氮素的消化率有一定影响,同时两期植物所含缩合单宁均在消化过程中对微生物的附着有一定影响。但总的来看,高缩合单宁对紫色达利菊真干物质和真氮的消化率影响不大。为确认紫色达利菊与冷季禾本科植物混合对瘤胃发酵和菌体蛋白合成的影响。测定了紫色达利菊与混合冷季植物样品(冷季植物以雀麦草为主),并用缩合单宁含量在7, 14, 29和42 g /kg DM的样品进行体外发酵试验。试验采用4×2析因试验设计,重复两次。δ~(15)N硫酸氨用来测定菌体蛋白合成效率。添加聚乙二醇并未对最大产气量以及延迟期产生影响,但能够增加产气率(P<0.01)。随着紫色达利菊含量的增加,12和48h体外真干物质消化率均有所提高(P<0.01)但菌体蛋白产量在12h有所下降(P<0.01)。添加聚乙二醇增加12h真干物质消化率(P<0.01)。随着缩合单宁含量的增加,添加聚乙二醇增加氨态氮和支链挥发性脂肪酸的含量并降低菌体蛋白的合成效率(P<0.01)。这表明冷季植物中混合紫色达利菊能够增加瘤胃降解率。含量为4.2%的缩合单宁对干物质降解率无影响但能增加菌体蛋白合成效率。为了确定紫色达利菊所含缩合单宁对保护豆科植物蛋白不被微生物降解成氨态氮的能力,同时确定对甲烷气体产量以及瘤胃微生物的影响。试验采用5×2析因试验设计,用含δ~(15)N标记的苜蓿与紫色达利菊组成五个比例:100:0、75: 0、50:50、25: 75和0:100,同时添加或不添加聚乙二醇,重复叁次。利用Ammoniaδ~(15)N diffusion技术和Real-time PCR测定苜蓿蛋白向氨态氮中的转化效率和微生物的菌体拷贝数。随着紫色达利菊比例的增加,添加聚乙二醇能够显着提高氨态氮和氨态氮中δ~(15)N含量以及苜蓿δ~(15)N向氨态氮的转化效率(P<0.01)。添加聚乙二醇对48h内消耗单位干物质的甲烷气体产量无影响。12h时,叁种纤维降解菌,产琥珀酸丝状杆菌,瘤胃白球菌和瘤胃黄球菌随着紫色达利菊的比例增加而降低但差异不显着。非纤维降解菌中甲烷菌,瘤胃链球菌和嗜淀粉瘤胃杆菌的拷贝数同样随着紫色达利菊的比例增加而降低但差异不显着。这表明,缩合单宁能够减少瘤胃发酵氨态氮的浓度,同时减少混合苜蓿氮向氨态氮的转化,从而保护苜蓿中的氮不以氨态氮的形式损失。实验叁、缩合单宁对主要瘤胃微生物的影响以及微生物对缩合单宁的适应性微生物纯培养试验选用3种纤维降解菌并在含缩合单宁0和25μg/ml培养液中以纤维素为底物,在试验开始前适应21天,然后在含缩合单宁0、75、150、300和450μg/ml中进行滤纸消化试验。同时选用四种非纤维降解菌在含缩合单宁0和50μg/ml中培养并适应15天,然后添加0、100、200、400和600μg/ml缩合单宁并测定生长曲线。当缩合单宁含量为75μg/ml时,降低产琥珀酸丝状杆菌,瘤胃白球菌和瘤胃黄球菌的滤纸消化率(P <0.01)。扫描电镜观察结果发现当缩合单宁含量高于150μg/ml时,纤维降解菌停止生长,纤维表面出现大量絮状物质。而非纤维降解菌中,瘤胃普雷沃氏菌,嗜淀粉瘤胃杆菌以及瘤胃链球菌对缩合单宁比较敏感,在含量为200μg/ml即显着改变其生长曲线,而反刍动物半月形单胞菌在缩合单宁含量为600μg/ml仍能较好的生长。试验选用叁种纤维降解菌和四种非纤维降解菌均未表现出对缩合单宁的适应性。因此,高剂量缩合单宁对瘤胃微生物有抑制作用并影响纤维降解菌的附着。综上所述,紫色达利菊是一种高缩合单宁、高蛋白的豆科植物,其缩合单宁能够通过与细胞膜相互作用抑制大肠杆菌,并能够降低反刍动物后肠大肠杆菌的数量。同时,紫色达利菊与其它冷季草地植物混合后能够提高真干物质消化率。紫色达利菊与苜蓿混合时,其所含缩合单宁具有保护苜蓿蛋白不被瘤胃微生物降解成氨态氮的能力,但低浓度的缩合单宁就可能造成纤维降解菌的纤维附着能力受抑制。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
瘤胃氮代谢论文参考文献
[1].李冲,魏占虎,李发弟,马友记,王维民.酵母β-葡聚糖对早期断奶羔羊瘤胃氮代谢的影响[J].甘肃农业科技.2013
[2].金龙.紫色达利菊提取缩合单宁对大肠杆菌和瘤胃氮代谢以及瘤胃微生物的影响[D].东北农业大学.2011
[3].祁茹,林英庭.脲酶抑制剂对反刍动物瘤胃氮代谢的调控及应用[J].中国奶牛.2010
[4].潘发明,李发弟,郝正里,郑琛,董淑慧.茶渣单宁对绵羊养分消化代谢及瘤胃氮代谢的影响[C].第六次全国饲料营养学术研讨会论文集.2010
[5].许君.不同日粮条件下添加半胱胺对山羊瘤胃氮代谢和挥发性脂肪酸的影响[D].南京农业大学.2009
[6].王文娟,汪水平,谭支良.反刍动物瘤胃氮代谢研究进展[J].华中农业大学学报.2007
[7].郭春燕.羊血水解小肽的制备及其对绵羊瘤胃氮代谢的影响[D].新疆农业大学.2006
[8].孙维斌,王加启,毛玉胜.不同饲养水平下西门塔尔杂交阉牛瘤胃氮代谢特征研究[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2004
[9].程胜利,姚军,梁春年,苗小林,李发弟.全饲粮颗粒料对羔羊生产性能及瘤胃氮代谢的影响[J].中国饲料.2004
[10].李大刚.脲酶抑制剂对山羊瘤胃氮代谢及营养物质消化率的影响[D].东北农业大学.2003